Name: improved method for the establishment of an in vitro blood-brain barrier model based on porcine brain endothelial cells
Uploaded: 2017-09-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells at JoVE.com

Forfatterne vil gerne anerkende Elisabeth Helena Bruun, Sarah Christine Christensen og Niels M. Kristiansen for teknisk bistand, og Lundbeckfonden giver nummer R155-2013-14113.

svin hjerner blev fremstillet som biprodukter af den danske fødevareindustri. Danske slagterier er under streng kontrol og observation af danske Ministeriet for miljø og fødevarer.
 rotter bruges til isolering af astrocytter blev avlet og opstaldes i den lokale Dyrefacilitet ved en omgivende temperatur på 22 ° C - 23 ° C og på en 12/12 h mørk/lys cyklus under inspektion af en dyrlæge og efter dansk regler for lab dyr. Rotterne blev aflivet før de blev ofret i overensstemmelse med in...

Rensning og spredning af pBEC
Under proceduren rensning omfatter kritiske trin hurtig og effektiv fjernelse af meninges og adskillelsen af hvide og grå sagen, hvilket er vigtigt for rensning udbytte og renhed og ordentlig etableringen af modellen. Præsenteres i vitro BBB model ved hjælp af pBECs, har vi forbedret og forenklet en rensning procedure baseret på mekanisk homogenisering af isolerede grå materie, størrelse-selektiv filtrering til isolation af microvessels, fordøjelsen m...

Cellulære struktur og funktion af blod - hjerne barrieren
På grænsefladen af kredsløbssygdomme og centrale nervesystem (CNS) fungerer BBB som et centralt regulerende site for homoeostatic kontrol af CNS mikromiljø, der er afgørende for korrekt funktion og beskyttelsen af nervesystemet. Webstedet for BBB er i endothelial celler foring blodkar lumen. I hjernen kapillærerne, endotelceller danner komplekse intercellulære stramme kryds og stærkt polariseret udtryk mønstre af særlig tilstrømning og efflux transportvirksomheder sikre meget specifikke molekylære transport mellem blod og hjerne 1. De strukturelle komponenter af stram vejkryds komplekser omfatter proteiner fra occludin og claudin familie, zonula occludens (ZO) proteiner, cingulin og tilknyttede junctional adhæsionsmolekyler (syltetøj). Claudin 5 er særlig vigtigt i paracellular junctional begrænsning. Induktion og vedligeholdelse af denne karakteristiske BBB endotel fænotype inddrage dynamiske interaktioner med omkringliggende celler, herunder pericytes, astrocytter, neuroner og kælderen membraner, der sammen med hjernen endothelial celler form de neurovaskulære enhed (NVU)2,3. De mekanismer, der er involveret i disse interaktioner er endnu ikke fuldt forstået, men omfatter udveksling af kemiske signaler mellem cellerne, som gør det muligt for graduering af BBB permeabilitet i kortsigtet og inducerer langsigtede BBB funktioner4. Astrocytter især er kendt for at bidrage til hjernen endotel celle fænotype og er en kilde til regulerende faktorer såsom glial-afledte neurotrope faktor (påvirker intracellulære cAMP)5, basic fibroblast vækstfaktor6, hydrocortison7, og omdanne vækst faktor β (TGF-β)8. Effekten af TGF-β, har imidlertid været debatteret9.
Fra In Vivo til In vitro- BBB
In vivo undersøgelser fortsat at give værdifulde oplysninger om BBB biologi. Dog kan celle kultur modeller give yderligere indsigt og udgør nyttige værktøjer for at forstå detaljeret molekylær og funktionelle aspekter af BBB i både sundhed og sygdom. Selv om det komplekse samspil mellem celletyper og bestanddele af BBB er vanskeligt at opnå fuldt i in vitro- modeller, har der været, siden den første oprensning i endothelial hjerneceller og anvendelsen af disse i mono-kultur 10 , 11 , 12, omfattende udvikling af rensning procedurer og vækstbetingelser for BBB celle kultur modeller, resulterer i større lighed i vivo barriere. De almindeligt anvendte in vitro- BBB modeller er baseret på primærelementer gnaver, svin og kvæg, og udødeliggjort cellelinjer. Hver model har forskellige fordele og ulemper. Til sammenligning og model valg, er validering markører som udtryk for BBB enzymer, transportører, receptorer og strukturelle proteiner brugt til at oprette oversigter over de aktuelle etablerede modeller1.
Formålet med protokollen
Et vigtigt element i BBB barriere tæthed og høj TEER, endnu et stort antal af de tilgængelige modeller afspejler ikke godt in vivo -niveauer. Indarbejde udvikling og optimering bidrag fra flere laboratorier, er formålet med denne protokol at præsentere en metode til fastlæggelse af en høj TEER i vitro BBB model baseret på primær pBECs i MC med eller uden ACM eller i NCC med primær astrocytter rotte eller svinecellekulturer. De anvendte procedurer og etableringen af model omfatter bestræbelser på at fjerne forurenende celler og forbedre differentiering af pBECs i en BBB fænotype. Dette arbejde har resulteret i oprettelsen af pålidelige, høj TEER modeller med lav paracellular permeabilitet og gode funktionelle udtryk for centrale stramme junctional proteiner, transportvirksomheder og receptorer. Men som astrocytter er en medvirkende faktor til hjernen endotel celle fænotype, de tre forskellige betingelser for kultur repræsenterer tre forskellige fænotyper i endothelial hjerneceller. NCC model er specielt nyttigt for studier af visse specialiserede mekanismer involveret i drug discovery, transport studier og intracellulære handel, samt for undersøgelsen af celle-celle interaktioner hvor maksimal udtryk for BBB funktioner er fordelagtig.
Oprindelse og historie af protokollen
PBEC model beskrevet her er stort set baseret på svin model udviklet på Eisai laboratorier (London) af Dr. Louise Morgan og kolleger, Religious baseret på en vellykket tidligere bovin hjernen endotel celle model13. Den oprindelige metode til celle forberedelse var en to-trins filtrering ved hjælp af nylon masker for at fange microvessels, efterfulgt af en podning skridt til at forbedre renhed. I den tidligere udvikling af metoden, optimal BBB fænotype og barriere trykken blev opnået ved vækst i suppleres med medium, herunder ACM. Yderligere ændringer af metoden, der blev foretaget af R. Skinner i Prof N. Rothwell lab i Manchester UK14,15. Metoden blev vedtaget af Abbott laboratorium, KCL London, hvor Patabendige gjort det betydeligt enklere at forberede ved at undgå brug af astrocytter eller ACM og ved at fjerne forurenende celler som pericytes med puromycin. De første aviser bekræftet at MC model bevaret flere vigtige funktioner i vivo BBB, herunder effektiv stramme kryds, membran transportsystemer og receptor-medieret transcytosis16,17 , 18 , 19 , 20. senere S. Yusof igen testet astrocyte Co kultur og fundet det væsentligt forbedret TEER, så dette er den foretrukne variant i øjeblikket anvendes i Abbott lab21. Modellen er nu blevet overført til M. Nielsen lab i Århus, hvor yderligere ændringer er blevet indført (denne protokol), herunder forenkling grå sagen udvinding, ved hjælp af kun én maske filtrering skridt og et enkelt filter belægning skridt kombinere kollagen og fibronektin. Den anvendte procedure for isolation af svin astrocytter (denne protokol) var baseret på protokoller udviklet af T. Moos laboratoriet i Aalborg, beskrevet af Thomsen mfl22. TEER og andre egenskaber for den model, der er genereret i London og Aarhus er lignende, som giver tillid til forestillingen om, at modellen overføres let mellem labs og reagerer godt på omhyggelig observation og rationalisering af metode trin. Faktisk, S. Yusof har nu etableret MC model i et tropisk land (Malaysia)23, som involverede yderligere tilpasning til lokale forhold og væv kilder.
Fordele over Alternative metoder og i øjeblikket etableret modeller
I forhold til hjerne endotelceller af kvæg og gnaver oprindelse, giver pBECs fordelen at have en lavere sats for tab af den i vivo BBB fænotype efter isolation24. PBECs er desuden i stand til at danne relativt stram endotel barrierer, selv når der dyrkes i MC (800 Ω cm2)16 i forhold til de almindeligt rapporterede niveauer for encellelag af cellelinjer som bEND.5 og bEND.3 (50 Ω cm2) 25 , 26 , 27, cenden (300-800 Ω cm2)28,29,30, og cerebEND (500 Ω cm2)29,31,32og primære hjerne endotelceller mus (100-300 Ω cm2)SS = "xref" > 33,34,35,36 og rotte (100-300 Ω cm2)37,38. TEER har imidlertid vist afhængighed på procedurerne for rensning og kultur. I de fleste tilfælde viser tilføjelsen af ACM eller fælles kultur med astrocytter differentiering effekter på i endothelial celler og en stigning i trykken i endothelial lag1. Ikke desto mindre med bestræbelser på at optimere dyrkningsbaserede betingelser, kun kvæg-baserede modeller har vist TEER værdier sammenlignes med de svin-baserede modeller (gennemsnit af 800 Ω cm2 i MC, op til 2500 Ω cm2 i astrocyte fælles kultur)13 ,39,40,41,42,43,44,45. Som modeller baseret på primære bovine hjernen har endotelceller vist store variationer, både mellem og inden for laboratorier14,45,46,47,48, reproducerbarhed kunne være et problem. I den pBEC model rapporteret her, har de medvirkende laboratorier opnået meget lignende TEER og paracellular permeabilitet værdier med lav variabilitet, både i og mellem laboratorier. Derfor bør det være muligt for andre laboratorier til at etablere en robust model med lav variabilitet ved hjælp af den metode, der præsenteres her. Ud over danner stramme endotel lag, har udtryk for tight junction proteiner, funktionelle BBB transportvirksomheder, receptorer og enzymer og demonstreret egnethed til en række undersøgelser15 tidligere valideret modeller med pBECs , 16 , 17 , 19 , 20 , 22 , 49 , 50 , 51 , 52 , 53 , 54 , 55 , 56 , 57 , 58 , 59. Desuden upublicerede transkriptom data på fælles kulturer af pBECs viser en forventet profil af BBB transportvirksomheder og receptorer (ikke-offentliggjorte resultater, Nielsen et al.).
Svin-baserede BBB model har en yderligere fordel som genom, anatomi, fysiologi og sygdomsprogression grisen afspejler den menneskelige biologi i højere grad end andre etablerede modeller60, som er gunstige egenskaber for den lægemiddelindustrien. Som svin hjerner er en fælles biprodukt af kødindustrien, udgør de en let tilgængelig kilde til hjernen endotelceller, minimere antallet af dyr behov for eksperimenter, og leverer en høj rensning udbytte fra et svin hjernen. Selv om rensning og dyrkning af primærelementer er lidt tidskrævende og kræver ekspertise for standardisering i opsætning af modellen, generere primærelementer de mest pålidelige BBB modeller. Udødeliggjort cellelinjer kan ikke være en erstatning, som vigtige egenskaber såsom barriere trykken, transporter udtryk profiler og mikromiljø forordning ikke afspejler eksperimentelle resultater i vivo61, 62. in vitro modeller giver fordel af live-celle imaging med højere opløsning, hvilket gør visualisering af intracellulære processer mulige ved at tillade en tæt på tilgang til stikprøven eller observerede cellerne, ved hjælp af mål med højere forstørrelse og bedre optisk kvalitet63. Dette gælder ikke for anvendelse af to-foton mikroskopi i levende dyr. Derudover giver in vitro- modeller evnen til at transfect celler, giver mulighed for visualisering af mærket proteiner og undersøgelse af deres handel.
Anvendelser af modellen
Funktionen af BBB er ikke faste og kan moduleres dynamisk i både fysiologi og patologi. I mange neurologiske sygdomme, herunder neurodegenerative, er inflammatoriske og smitsomme sygdomme, forstyrrelser og øget gennemtrængelighed af BBB observeret64,65,66,67 . For at mindske og forhindre sygdomsprogression og efterfølgende skader, er identifikation og karakterisering af de molekylære mekanismer, der ligger til grund for gradueringen af BBB af stor betydning. I denne forbindelse pålideligt in vitro- modeller er i høj efterspørgsel af den farmaceutiske industri, og desuden spille en vigtig rolle i at forudsige BBB permeabilitet af narkotika til CNS. Enhver i vitro model tjener som en permeabilitet skærm skal vise en restriktiv paracellular pathway, en fysiologisk realistisk celle arkitektur og funktionelle udtryk for transporter mekanismer68. Demonstreret i tidligere undersøgelser16,17,57, og af paracellular permeabilitet og udtryk for TJ og AJ proteiner her, præsenteres modellen opfylder alle disse kriterier og er velegnet til en vifte af BBB studier i både normal fysiologi og patologi. Styrkerne ved den præsenterede rensning og dyrkning metode omfatter en kombination af enkelhed og reproducerbarhed og evnen til at omfatte astrocytic indflydelse med en deraf følgende robust og pålidelig høj TEER i vitro BBB model. Til dette formål, astrocytter af svin og rotte oprindelse har vist sig at forøge BBB Fænotypen af pBECs i en lignende måde22.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Fibronectin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F1141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen IV</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE12-719F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/Low Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D6046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>15140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma derived serum (PDS)</td>
			<td>First Link UK Ltd.</td>
			<td>60-00-89</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>10-270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>15090-046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puromycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8833</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-CPT-cAMP</td>
			<td>Biolog</td>
			<td>C010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RO 20-1724</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B8279</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin Sulfate</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-518Z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34896</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20,824,296</td>
			<td>Mix the 70 % solution from the 96 % EtOH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse 1</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D4513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase CLS2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ddH2O</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Made with Elga System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flasks</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>156499</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Costar Transwell inserts (Cell permeable membrane inserts)</td>
			<td>Costar</td>
			<td>CLS3401</td>
			<td>12-well plate, 12 mm diameter, 0.4 &#956;m polycarbonate membrane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml centrifuge tubes</td>
			<td>Cellstar</td>
			<td>188271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml centrifuge tubes</td>
			<td>Cellstar</td>
			<td>227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>150350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryo vials</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>377224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 ml bottle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>159910/159920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpels</td>
			<td>Swann-Morten</td>
			<td>REF0211</td>
			<td>Type 24</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue homogenizer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>140 &#956;m filters</td>
			<td>MERCK</td>
			<td>NY4H04700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#956;m filters</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EndOhm chamber system</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>ENDOHM-12</td>
			<td>EndOhm chamber for 12mm Culture Cups</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOM2 electrode system</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>300523+STX100C</td>
			<td>TEER measurement system with rigid STX-100C electrode pair</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Long needle</td>
			<td>Sigma</td>
			<td></td>
			<td>Attach to a syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine-tip curved forceps</td>
			<td>KLS Martin</td>
			<td>12-409-12-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Broad tip forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-390</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter holder</td>
			<td>MERCK Milipore</td>
			<td>Swinnex-47</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml syringe</td>
			<td>Braun</td>
			<td>4617509F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SSt20ESI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Occludin antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab31721</td>
			<td>1:100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-p120 Catenin antibody</td>
			<td>BD Transduction laboratories</td>
			<td>610133</td>
			<td>1:200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-ZO-1 antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>61-7300</td>
			<td>1:200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Claudin 5 antibody</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SAB4502981</td>
			<td>1:100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti rabbit IgG conjugated with Alexa Flour 568</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A10042</td>
			<td>1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti mouse IgG conjugated with Alexa Flour 488</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A21202</td>
			<td>1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>NEC100X250UC</td>
			<td>0.15&#181;l/ml final working conc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lucifer Yellow</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L0144</td>
			<td>10 &#181;g/ml final working conc</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved method for the establishment of an in vitro blood-brain barrier model based on porcine brain endothelial cells

Formålet med denne protokol præsenterer en optimeret procedure for rensning og dyrkning af pBECs og at etablere in vitro- blod - hjerne barrieren (BBB) modeller baseret på pBECs i mono-kultur (MC), MC med astrocyte-aircondition medium (ACM), og ikke-kontakt Co kultur (NCC) med astrocytter af svin eller rotte oprindelse. pBECs blev isoleret og kulturperler fra fragmenter af kapillærer fra hjernens cortex af tamsvin 5-6 måneder gamle. Disse fragmenter blev renset ved omhyggelig fjernelse af meninges, isolation og homogenisering af grå materie, filtrering, enzymatisk fordøjelse og centrifugering. Du kan yderligere fjerne forurenende celler, kapillær fragmenter blev kulturperler med puromycin-holdige medium. Når 60-95% sammenflydende, pBECs vokser fra de kapillære fragmenter blev passaged til permeabel membranfilter indsætter og etableret i modellerne. For at øge trykken for barriere og BBB karakteristiske Fænotypen af pBECs, cellerne blev behandlet med følgende differentiering faktorer: membran permeant 8-CPT-cAMP (her forkortet cAMP), hydrocortison og en phosphodiesterase inhibitor, RO-20-1724 (RO). Proceduren blev udført over en periode på 9-11 dage, og ved fastsættelsen af NCC model, astrocytter var kulturperler 2-8 uger på forhånd. Overholdelse af de beskrevne procedurer i protokollen har tilladt oprettelsen i endothelial lag med meget begrænset paracellular permeabilitet, med NCC model viser en gennemsnitlig transendothelial elektrisk modstand (TEER) i 1249 ± 80 Ω cm 2, og paracellular permeabilitet (Papp) for Lucifer gule af 0,90 10-6 ± 0,13 10-6 cm sek-1 (betyde ± SEM, n = 55). Yderligere evaluering af denne pBEC fænotype viste godt udtryk for den stramme junctional proteiner claudin 5, ZO-1, occludin og adherens krydset protein p120 catenin. Modellen præsenteres kan bruges til en række undersøgelser af BBB i sundhed og sygdom, og med yderst restriktive paracellular permeabilitet, denne model er velegnet til studier af transport og intracellulære handel.

Etablering af BBB In Vitro modeller
I metoden præsenteret, optimeret gennemført dyrkning af pBECs og oprettelse af permeabel membran Indsæt system med MC eller uden ACM eller NCC med astrocytter (figur 1) i en periode på 9-11 dage (figur 2). For udvalg i endothelial celler, en indledende kultur af renset kapillær fragmenter blev kombineret med puromycin behan...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells at JoVE.com

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Forbedret metode til etablering af et In Vitro blod - hjerne barrieren Model baseret på svin hjernen Endothelial Cells

Formålet med protokollen er at præsentere en optimeret procedure for etableringen af et in vitro- blod - hjerne barrieren (BBB) model baseret på primær svin hjernen endothelial celler (pBECs). Modellen viser høj reproducerbarhed, høj tæthed, og er velegnet til studier af transport og intracellulære menneskehandel drug discovery.

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MR-guided Forstyrrelse af blod-hjerne barrieren ved hjælp af Transcranial fokuseret ultralyd i en rottemodel

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Rottemodel af blod-hjerne barrieren Disruption at muliggøre målrettede neurovaskulær Therapeutics

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells (cEND) as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells cEND as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stræk i Brain mikrovaskulære endotelceller (cEND) som et<em&gt; In Vitro</em&gt; Traumatisk Hjerneskade Model af blod-hjerne barrieren

Due to the high mortality incident brought about by traumatic brain injury (TBI), methods that would enable one to better understand the underlying ...

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier (BBB): A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier BBB: A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

Etablering af en<em&gt; In Vitro</em&gt; Model of Rat blod-hjerne barrieren (BBB): Fokus på BBB Uigennemtrængelighed og receptor-medieret transport

The blood brain barrier (BBB) specifically regulates molecular and cellular flux between the blood and the nervous tissue. Our aim was to develop and ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoksiske Stimulering af Brain Microslices som en<em&gt; In vitro</em&gt; Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Ilt-Glucose afsavn og reoxygenering som en<em&gt; In vitro</em&gt; Iskæmireperfusion Skade Model for studere blod-hjerne barrieren dysfunktion

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

En forbedret fremgangsmåde til hurtig intubation af trachea i mus

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

An Anesthesia, Surgery, and Harvest Method for the Evaluation of Transpedicular Screws Using an In Vivo Porcine Lumbar Spine Model

An Anesthesia, Surgery, and Harvest Method for the Evaluation of Transpedicular Screws Using an In Vivo Porcine Lumbar Spine Model

En bedøvelses-, kirurgisk og høstmetode til evaluering af transpedikulære skruer ved anvendelse af en<em&gt; In vivo</em&gt; Porcine Lumbar Spine Model

Pedicle screw fixation is the gold standard for the treatment of spinal diseases. However, many studies have reported the issue of loosening pedicle ...

In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption

In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption

I Vitro Assays at vurdere blod-hjerne barriere mesh-lignende fartøj dannelse og afbrydelse

Blood-brain barrier (BBB) coverage plays a central role in the homeostasis of the central nervous system (CNS). The BBB is dynamically maintained by ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En Ornesen Endothelial organ kultur model ved hjælp af Split cornea-knapper

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...