Name: basic research in plasma medicine - a throughput approach from liquids to cells
Uploaded: 2017-11-17T12:30:00
Duration: 7 min 37 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Basic Research in Plasma Medicine - A Throughput Approach from Liquids to Cells at JoVE.com

Финансирование от немецкого федерального министерства образования и научных исследований (BMBF предоставлять номера 03Z22DN11 и 03Z22DN12) с благодарностью.

1. плазмы видов мониторинга и лечения установки
<ol><li>
Плазмы видов мониторинга
	<ol>
<li>Использование плазменной струи атмосферное давление и максимум два стандартных литров в минуту, канал потока газа.</li>
		<li>Перпендикулярно к оси шлейфа, положение струи перед спектрофотометр оптического излучения, и записи фотоэмиссионный и волны (200-1000 Нм) с помощью посвятил программного обеспечения.</li>
		<li>Перемешайте 0,5% азота и кислорода к сухой или увлажненный подачи газа (5%).</li>
		<li>Повторите для каждого газа условия Оптическая эмиссионная спектроскопия.</li>
		<li>Анализ программного обеспечения для графического отображения данных.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Плазменная обработка установки
	<ol>
<li>Исправьте струи в Компьютерные xyz-таблицу.</li>
		<li>Определить положение скважин и создания сценария компьютер для перемещения струи, присоединился к таблице, с надлежащего лечения раз выше в центре каждой скважины.</li>
		<li>Добавить 104 любого типа адэрентных клеток млекопитающих в 100 мкл полного клетки культуры среднего (RPMI1640 с 10% FCS, глютамин 2% и 1% пенициллина/стрептомицина) в нескольких скважин под капотом ламинарного потока.</li>
		<li>Разрешать клеточной адгезии к происходят в одночасье при 37 ° C в атмосфере увлажненный с 5% углекислого газа.</li>
		<li>Лечить клетки с плазмой для 20 s на разных высотах (ось z) интервалами 250 мкм.</li>
		<li>Добавьте 25 мкл пропидий йодидом в среде культуры клеток в каждой скважины.</li>
		<li>Изображение клетки под микроскопом для определения конкретной высоты, не вызывают некроз клеток из-за канала газ толкает питательной среды на верхней стороне клетки. Примечание: Для длительного лечения раз, идентифицировать жидкие испарения в этой конкретной высоты, в плазме и выключать режим, путем взвешивания пластины до и после лечения плазмы, чтобы определить количество микролитров doubledistilled воды необходимо восстановить осмотического гомеостаза в обрабатываемой скважины.</li>
		<li>Подготовить заключительный протокол для xyz таблицы с соответствующим лечения раз (здесь: 20 сек, 40 s, 60 s плазмы и 60 s газового контроля) и хорошо позиции, и готовы многоканальные пипетки и резервуаров для жидкого обработки 96-луночных пластин в последующих анализов.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. анализ основных реактивных компонентов в плазме лечение жидкости
<ol><li>
Анализ обработанных плазмы пероксида водорода
	<ol>
<li>Лечить 100 мкл фосфат амортизированное saline (PBS) с плазмой в трех экземплярах с плоским дном 96-луночных пластины.</li>
		<li>Подготовка мастер смесь путем загрузки 100 мкл PBS с 10 U пероксидаза и 5 мкм реагента обнаружения перекиси водорода (достаточно для одного хорошо; масштабирование соответственно).</li>
		<li>Мкл 95 мастер смеси для каждой скважины. Примечание: Предыдущий шаг следует выполнять под чистой скамейке или в комнате отдельно от плазменного источника как окружающего воздуха озона может уменьшить чувствительность assay.</li>
		<li>В отдельную тарелку Подготовьте серию два раза разрежения перекиси водорода в PBS с верхней концентрации 100 мкм в 100 мкл PBS.</li>
		<li>Мкл 5 образцов или перекисью водорода стандартов для скважин, содержащие обнаружения реагента.</li>
		<li>Включать скважин, содержащие реагент обнаружения только для вычитание фона после считывания.</li>
		<li>Инкубируйте пластину в темноте за 15 мин при комнатной температуре.</li>
		<li>Место пластину в Считыватель микропланшетов измерения флуоресценции в λex 535 Нм и λет 590 нм. Примечание: Если ожидается, что высокие концентрации перекиси в образцах, разбавления образца должна быть увеличена или чтения должны быть сделано с короче время инкубации, чтобы избежать насыщения assay.</li>
		<li>Вычитание пустых значений из всех образцов, вычислить перекиси калибровочной кривой и количественно неизвестный образец перекиси концентрации от этой базовой кривой.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Анализ нитрит плазмы лечение
	<ol>
<li>Лечить 100 мкл PBS с плазмой в трех экземплярах обладает 96well пластины.</li>
		<li>Подготовка мастер смесь раствора нитрита обнаружения, добавив 1 мкл Реагента количественная оценка 99 мкл doubledistilled воды (достаточно для одного хорошо; масштабирование соответственно).</li>
		<li>Добавьте 100 мкл на хорошо ясно, обладает 96well плиту. Масштабирование для числа скважин.</li>
		<li>Подготовьте серию разрежения нитрита стандартов в doubledistilled воде.</li>
		<li>Добавьте 10 мкл стандартов или образцов в мастер смесь в 96well пластины.</li>
		<li>Инкубируйте пластину в темноте за 10 мин при комнатной температуре.</li>
		<li>Добавьте 5 мкл раствора нитрита количественной разработчик в каждой скважине.</li>
		<li>Читать флуоресценции в Считыватель микропланшетов λex 365 Нм и λет 450 Нм.</li>
		<li>Вычитание пустых значений из всех образцов, вычислить нитрита калибровочной кривой и количественного определения концентрации нитрита неизвестный образец из этой базовой кривой.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Анализ плазмы лечение супероксид
	<ol>
<li>Сделать мастер смесь окисленных Тситохром (1 мг/мл) и каталазы (20 мкг/мл) в PBS.</li>
		<li>Добавьте 100 мкл мастер смеси к добрам плиты 96-ну ясно, с плоским дном.</li>
		<li>Лечить мастер смесь с плазмой в трех экземплярах на лечение условие.</li>
		<li>Читайте поглощения на 550 Нм, используя Считыватель микропланшетов; граф данных.</li>
		<li>Рассчитайте количество супероксида с помощью коэффициент молярной вымирания цитохрома C и длина пути света жидкости в скважину.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3 биологической реакции клеток подвергается плазмы
<ol><li>
Многомерные считывания клеток плазмы лечение: метаболической активности
	<ol>
<li>Использование Ламинарный шкаф для всех следующих процедур.</li>
		<li>Семян 104 клетки (мышиных меланомы В16) в 100 мкл полностью дополняют клетки культуры среднего за хорошо в 96-луночных пластины с плоским дном.</li>
		<li>Разрешать клеточной адгезии на ночь при 37 ° C в увлажненные атмосфере инкубатора с 5% углекислого газа.</li>
		<li>Используя таблицу xyz, лечить скважин с плазмы или газ только по заранее схеме и добавьте клетки обратно в инкубатор для 20 h. Примечание: При желании снять supernatants после 20 h анализировать внеклеточных продуктов; потом добавьте 100 мкл свежей среды.</li>
		<li>Для каждой скважины добавьте 25 мкл среды культуры клеток, содержащих 500 мкм резазурина (конечная концентрация 100 мкм); подготовка трех скважин, содержащие резазурина только в среде культуры клеток без клетки для вычитание фона.</li>
		<li>Инкубируйте 3 h в инкубаторе.</li>
		<li>Читать флуоресценции в λex 535 Нм иет 590 нм λ в Считыватель микропланшетов.</li>
		<li>Вычитание фона флуоресценции от всех образцов и нормализации данных для значений элементов управления.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Многомерные считывания клеток плазмы лечение: анализ изображений
	<ol>
<li>Использование хорошо пластина из 3.1.7 и удалить супернатант.</li>
		<li>100 мкл свежие клетки питательной среды, содержащие 1 мкг/мл пропидий йодидом.</li>
		<li>Положите пластину под микроскопом с моторизованного столика для изображения каждой скважины. Примечание: Изображения детали зависят от экспериментальных вопрос; Здесь 20 X цель был использован в высоким содержанием тепловизионных устройств для чтения полей зрения 3 x 3 в каждую лунку в светлые области канала, цифровой фазе контраст канал и флуоресценции (пропидий йодидом) канал, используя соответствующие возбуждения свет и выбросов фильтры.</li>
		<li>Программное обеспечение для анализа использования количественных изображения для определения общей цитозольной области цифровой фазе контрастность изображения всех полей зрения отображаемого в каждой скважине. Примечание: Проанализируйте дальнейшие параметры по желанию, например, количество жизнеспособных и/или мертвые клетки или митохондриальной активности с использованием выделенных пятна. При использовании других пятен, чем описано в этой работе, убедитесь, что пятна флуоресценции для микроскопии спектрально не пересекаются с флуорохромов, используется в последующих поток цитометрии экспериментов.</li>
		<li>Граф данных и при желании, тест для корреляции с значения, полученные для метаболической активности.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Многомерные считывания клеток плазмы лечение: проточная цитометрия
	<ol>
<li>Для этого анализа используйте хорошо пластину из шага 3.2.5.</li>
		<li>Отменить супернатант и мыть дважды с 200 мкл PBS, содержащих кальций и магний (0,9 мм и 0,5 мм, соответственно). Примечание: Исправить или разрушения клеток для дальнейшего биологических показаний, не охваченные в этот вклад, как окрашивание внутриклеточных антиген или клеточного цикла анализа на данном этапе.</li>
		<li>Для каждой скважины добавьте 50 мкл PBS с кальция и магния, содержащих 50 нг/мл calreticulin анти мыши моноклональные антитела.</li>
		<li>Инкубируйте 15 мин в инкубаторе.</li>
		<li>Мыть дважды с 200 мкл полностью дополняют клетки культуры среднего и отбросить жидкости в пластине.</li>
		<li>100 мкл клеток отряд решения для каждой скважины и проинкубируйте втечение 20 мин в инкубаторе.</li>
		<li>Используйте другой набор неокрашенных B16 клеток в суспензии для настройки потока гранулярных приобретение протокол, стробирование стратегии и прибыли и напряжений фотоприемников.</li>
		<li>Загрузите пластину в проточный цитометр оснащены Автоматический пробоотборник для 96-луночных планшетов.</li>
		<li>Приобрести не менее 1000 ячеек в вперед и стороны точечной населения обычно ассоциируется с жизнеспособных клеток.</li>
		<li>Использование программного обеспечения, предназначенные для анализа проточной цитометрии, .fcs файлы для ворот населения интерес и определить интенсивность средняя флуоресценции calreticulin.</li>
		<li>Граф данных и при желании, тест для корреляции с значения, полученные для метаболической активности, изображений и/или окислителя осаждения.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

Авторы не имеют ничего сообщать.

Фундаментальные исследования имеет основополагающее значение для понимания эффективности и механизмы, лежащие в основе плазмы медицины в доклинических и клинических исследований. Фундаментальные исследования также способствует расследование новых приложений для лечения. Хотя хорошо известно, что плазм посредником их биологические эффекты через поколение активных форм кислорода и азота видов19, есть еще три основные задачи в поле. Во-первых какие виды важны? Это может частично ответил, модулируя корма газовый состав плазмы с оптической диагностики и биологических отсчетов. 20 во-вторых, какие последствия можно увидеть в биологических объектов, например клетки? Это по крайней мере частично, рассматриваются с помощью экспериментов культуры клеток и количество анализов. В эукариотических клетках эффекты плейотропный включая клеточный цикл арест21, апоптоз22, некроз23и кожи клетки стимуляции24,25,26, а также поддержки или уменьшить ячейки подвижность или метаболической активности27,,2829. Третья проблема, связанные с этими Плейотропный эффект, является определить ключевые молекулы, которые определяют клеточный ответ оксидантов плазмы производные объяснить различные эффекты, часто встречается в различных типов клеток. Это может быть сделано омику методы30,,3132 и/или вверх или Даунрегуляция целевых генов, с помощью малых интерферирующих РНК (редокс) сигнализации ингибиторы, антиоксидантов и антиоксидантных ферментов, а также модуляции Plasma реактивных видов производства. 33 , 34 , 35 таким образом, обтекаемый пробирного протоколы необходимы для проверки больших комплектов образцов с большим числом итераций.
Это исследование является примером эффективного экспериментального рабочего процесса, от физики, биологии, плазмы медицинских исследований в отношении вышеуказанных проблем. Подробная информация о инженерные аспекты источник плазмы и плазмы поколения было описано ранее. 36 , 37 , 38 все эти анализы выполняются в 96well пластины, которые имеет ряд преимуществ. Например образцы таких supernatants культуры клеток можно легко переносить из пробирного в коллекции пластины для расследования, например, концентрации белка через фермента---assay иммуносорбента. Если доступен научного оборудования, способного чтения непосредственно из скважин-96, такой подход минимизирует расходы на образцы и handsontime и увеличивает результаты, мультиплексирование различных анализов из той же пробы. Использование многоканальные пипетки дополнительно ускоряет обработку образца. В принципе пробирного, описанные здесь может также осуществляться с использованием форматов также пластины с больших диаметров хорошо, хотя это потребует дополнительных шагов дозирования в другие трубы и судов для вниз по течению анализов. Меньшие пластины типов, таких как 384well пластин, однако, не представляют геометрии для биомедицинских плазмы исследований с использованием самолетов с большой подачи газа потоков. В частности не может быть гарантировано, что только один, но не рядом скважин страдают во время лечения.
Анализ жидкости имеет важное значение для расследования видов осаждения в плазме. В экспертных анализов параллельной установки различных анализов можно характеризовать plasmatreated жидкости в отношении различных окислителей в то же время. Этот мультиплексирования позволяет разрабатывать дифференцированные картину plasmaderived видов. Описанный подход весьма чувствителен к расследованию концентрации пероксида водорода39, который часто является необходимым, но не всегда достаточно, чтобы объяснить плазменные эффекты. 40 , 41 , 42 биологически соответствующих эффектов может также оцениваться в жидкости с глутатион assay, здесь не включены. 43 конкретные нитрита assay настоятельно рекомендуется над обычными Griess-анализов из-за 10fold выше анализа чувствительности (данные не показаны). Plasmatreated жидкости также могут расследоваться для формирования хлорноватистая кислота с помощью DTNB-Assay. Тем не менее результаты предыдущего не указывают формирования этого вида с нашими источник плазмы. 19 , 39 , 44 после завершения лечения плазмы, видов ухудшения проходит со временем. Нитриты реагирует нитрата; Кроме того пероксид потребляется с течением времени. Однако эти процессы занять несколько часов. 35 c тситохрома поглощения является стабильным в течение нескольких часов также. Поэтому если после лечения в течение первых 30 мин происходят процессы, изменения концентраций долгоживущих видов, описанные здесь являются незначительными. Однако необходимо проявлять осторожность, когда расследование некоторых видов средств массовой информации (например, Дульбекко изменение средних орла) как ингредиенты можно очистить вверх до 90% перекись водорода в течение 1 ч (данные не показаны) ведет к недооценке плазмы пероксида осаждения в жидкости.
Мультиплекс пробирного представлен которых колеблется от расследования метаболической активности клеток площади (морфология) клеток поверхности маркер выражения. Сочетание этих анализов может выявить интересные результаты. Например мы ранее показали в THP1 моноцитов, что метаболической активности и клеток обвинения не уменьшается в линейной моде, после воздействия плазмы. А 45 , с увеличением времени лечения плазмы, клетки были замечены, были увеличены в размерах и был выше митохондриальной массы, привело к повышению метаболических ставок на percell основе. По существу комбинация многодисковое читатель, микроскопии и проточной цитометрии мультиплексов информацию о клеточных реакций после плазменной обработки. В клетки меланомы мы здесь сосредоточена на цитотоксических эффектов и их иммуногенности опосредовано calreticulin. 46 в принципе, многие другие вопросы могут быть решены с этим подходом, связывание метаболической активности с цитометрии результаты томографии и потока. К примеру дифференцировки клеток (например , поляризация макрофагов), митохондриальных мембранного потенциала, анализ клеточного цикла, подвижности клеток, биомеханики или микроядро формирование для анализа генотоксичности также могут быть исследованы в лечить плазмы клетки. Многоцветная проточной цитометрии позволяет ещё больше приложений в различных клеточных популяций в то же время. Это включает, например, дан анализ состояния фосфорилирование сигнализации белки такие факторы транскрипции, мРНК количественной оценки, измерения внутриклеточных цитокинов, и/или оценки общего снижения тиолы на уровне одной ячейки. Биологически соответствующую дополнительную информацию, которая доступна для каждого образца СПИДа в дальнейшем развитии картина плазмы редокс эффекты лучше понять плазмы текущих и будущих приложений.

Реактивных видов являются важными редокс регуляторы в болезни, включая аномальные ранозаживляющее1 и рак. 2 главное, эти виды участвуют в патологии, а также его терапевтические резолюции. 3 , 4 физические плазмы это ионизированный газ, который выгоняет реактивных видов многих видов. 5 с появлением так называемой холодной плазмы, которые действуют на тело температура6, холодной плазмы может применяться для клеток и тканей без тепловых повреждений. Демонстрируя эффективность и безопасное применение плазменных устройств в доклинических и клинических наблюдений, три получили аккредитацию медицинских приборов в Германии. 7 особенно в том, что касается безопасности генотоксичность, некоторые исследования показали отсутствие мутагенными свойствами событий, используя первое устройство, атмосферное давление струи плазмы аргона. 8 , 9 , 10 другие два устройства являются так называемые диэлектрического барьера сбросов (ДБД), которые действуют через другой принцип чем плазменной струи. Специально Джетс позволяют скальпель как обработки поверхностей и полостей тогда как DBD плазм являются эффективными в лечении большего, но довольно плоский ткани областях. Использование клеточных окислительно сигналы11, техника направлена использовать сгенерированный плазмы реактивных видов для биомедицинских приложений. 12 особенно перспективно применение клинических плазменной терапии является поддержка заживления ран. 13 , 14 , 15 Кроме того, плазма было показано, что противораковые эффекты в животных моделях. 16 , 17 , 18
Перед проверкой эффективность и безопасность применения плазмы в животных моделях, или даже людей, стандартизированы в vitro исследования необходимо проводить с плазменных устройств. Эти эксперименты имеют важное значение для изучения плазмы приложения и определить механизмы на работе. Кроме того базовые исследования необходимо понимать влияние состава реактивных видов и последующие биологические эффекты. Это исследование показывает, как плазмы могут быть интегрированы в биомедицинские исследования, чтобы лучше понять и контролировать его воздействия на клетки. Он описывает, тюнинг корма газовый состав, мониторинг реактивных видов производства, применения плазмы жидкостей, клетки, ткани и полученные результаты химических и биологических. Кроме того приводятся примеры которого инструктировать по стандартизации плазменной обработки и ниже по течению биологических анализов, с акцентом на медицинские исследования плазмы в 96-луночных пластины. Этот подход имеет свои преимущества: i) минимизации числа клеток, необходимое условие, реагент расходы и практический время за образец; II) пособие большей точности результатов, как двойные или тройные лечения можно настроить с легкостью; и iii) содействия бесшовных течению опробование в 96-луночных формат пластины читателя, визуализации и потока цитометрии экспериментов.

<table style="border-collapse:collapse;width:756pt" width="1008">
	<colgroup>
		<col style="width:385pt" width="513" />
		<col style="width:99pt" width="132" />
		<col style="width:120pt" width="160" />
		<col style="width:152pt" width="203" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">accutase</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">BioLegend</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">423201</td>
			<td class="xl21" style="width:152pt" width="203"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">amplex Ultra Red detection kit (includes horse-radish peroxidase and H2O2)</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Thermo</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">A36006</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">argon gas</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Air Liquide</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">N50</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">B16F10 murine melanoma cells</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">ATCC</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">CRL-6475</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">catalase</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Sigma</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">C30</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">cell culture incubator</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Binder</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">CB210</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">cell culture plastic</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">NUNC</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">156545</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">cytochrome c, oxidized</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Sigma</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">C2037</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">data analysis</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">GraphPad software</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">prism 7.03</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">fetal bovine serum</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Sigma</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160"></td>
			<td class="xl21">batch-tested</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">fine scale</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132"></td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160"></td>
			<td class="xl21">any with resolution of 0.01mg</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">flow cytometer</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Beckman-Coulter</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">CytoFlex S</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">flow cytometry data analysis</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Beckman-Coulter</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">Kaluza 1.5a</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">Glutamine</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Sigma</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">G7513</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">imaging quantification software</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">PerkinElmer</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">Harmony 4.5</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">laminar flow hood</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Thermo</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">Maxisafe 2020</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">mass flow controller</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">MKS</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">G-series</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">Measure-iT nitrite detection kit</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Thermo</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">M36051</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">microscope</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">PerkinElmer</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">Operetta CLS</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl17" height="42" style="width:385pt;height:31.5pt" width="513">optical emssion spectroscopy</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Avantes</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">AvaSpec-DDDD-2-USB2</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">penicilin/streptomycin</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Thermo</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">15140122</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">pipettes</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Eppendorf/Brand</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">single/multi chanel</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">plate reader</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">Tecan</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">M200pro</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">propidium iodide</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">BioLegend</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">421301</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">resazurin</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">VWR</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">B21187.06</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">RPMI1640 cell culture media</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">PanbioTech</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">P04-16500</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:385pt;height:15.75pt" width="513">xyz table</td>
			<td class="xl20" style="width:99pt" width="132">CNC step</td>
			<td class="xl20" style="width:120pt" width="160">HIGH-Z S-400/T&#160;</td>
			<td class="xl21"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

basic research in plasma medicine - a throughput approach from liquids to cells

В медицине плазмы ионизированные газы с температурой близка к системы позвоночных применяются для клеток и тканей. Холодной плазмы генерации реактивной видов известных редокс регулировать биологические процессы в здоровье и болезни. Доклинических и клинических доказательств указывает на благотворное влияние плазмы лечения в лечении хронической язвы кожи. Другие новые темы, такие как лечение рака плазмы, получают все большее внимание. Медицинские исследования плазмы требует междисциплинарного опыта в физике, химии и биологии. Одной из целей исследования плазмы является характеризуют клетки плазмы лечение в различных конкретных приложений. Это включает, например, клеток и жизнеспособности, сотовой окисления, митохондриальной активности, цитотоксичность и режим смерти клетки, анализ клеточного цикла, клеточной поверхности маркер выражения и релиз цитокинов. Это исследование описывает основное оборудование и процессы, необходимые для таких исследований в биомедицине плазмы. Она описывает надлежащего функционирования атмосферное давление аргон плазменной струи, специально мониторинг ее основных выбросов спектры и подачи газа параметров для модуляции реактивных видов производства. С помощью высокоточных xyz таблицы и компьютерного программного обеспечения, струи завис в миллисекунду точность над полости 96-луночных пластин в микрометр точности для максимальной воспроизводимость. Показано ниже по течению анализов для анализа жидкой редокс активных молекул, и целевые клетки плазмы лечение. В частности, анализируются клетки меланомы в эффективной последовательности различных последовательных анализов, но с использованием тех же ячейках: измерение метаболической активности, ячейке области и поверхности маркер выражения calreticulin, молекулы, важных для иммуногенность клеток смерть раковых клеток. Эти анализы получить содержани-богатые люди биологическая информация о воздействии плазмы из одной пластине. Вообще это исследование описывает основные шаги и протоколы для медицинских исследований плазмы.

Watch this Scientific Journal Video about Basic Research in Plasma Medicine - A Throughput Approach from Liquids to Cells at JoVE.com

Basic Research in Plasma Medicine - A Throughput Approach from Liquids to Cells

Показано протокол лечения физических плазмы высокой пропускной способности жидкости и клетки. Это предполагает создание композиции различных подачи газа для зажигания плазмы, измерения спектров плазмы выбросов и последующего анализа жидкостей и клеточной активности после плазменной обработки.

Фундаментальные исследования в медицине плазмы - пропускная способность подход от жидкости для клеток

In plasma medicine, ionized gases with temperatures close to that of vertebrate systems are applied to cells and tissues. Cold plasmas generate reactive ...

Research

JoVE Journal

Environment

Waste Water Derived Electroactive Microbial Biofilms: Growth, Maintenance, and Basic Characterization

The growth of anodic electroactive microbial biofilms from waste water inocula in a fed-batch reactor is demonstrated using a three-electrode setup ...

Design and Construction of an Urban Runoff Research Facility

Дизайн и Строительство городских стоков исследовательского фонда

As the urban population increases, so does the area of irrigated urban landscape. Summer water use in urban areas can be 2-3x winter base line water use ...

A Whole Cell Bioreporter Approach to Assess Transport and Bioavailability of Organic Contaminants in Water Unsaturated Systems

Всего сотовый Bioreporter подход к оценке переноса и биодоступности органических загрязнителей в ненасыщенных систем водоснабжения

Bioavailability of contaminants is a prerequisite for their effective biodegradation in soil. The average bulk concentration of a contaminant, however, is ...

A Technical Perspective in Modern Tree-ring Research - How to Overcome Dendroecological and Wood Anatomical Challenges

Технической точки зрения в современной годичных колец исследований - Как преодолеть Dendroecological и дерева Анатомические вызовы

Dendroecological research uses information stored in tree rings to understand how single trees and even entire forest ecosystems responded to ...

Semi-High Throughput Screening for Potential Drought-tolerance in Lettuce (Lactuca sativa) Germplasm Collections

Semi-High Throughput Screening for Potential Drought-tolerance in Lettuce Lactuca sativa Germplasm Collections

Полу-высокопроизводительного скрининга для потенциальных засухой толерантности в салат (<em&gt; Lactuca посевная</em&gt;) зародышевой плазмы Коллекции

This protocol describes a method by which a large collection of the leafy green vegetable lettuce (Lactuca sativa L.) germplasm was screened for likely ...

Automated Gel Size Selection to Improve the Quality of Next-generation Sequencing Libraries Prepared from Environmental Water Samples

Выбор размера Автоматизированная гель для улучшения качества секвенирования библиотек следующего поколения, полученного из окружающей среды проб воды

Next-generation sequencing of environmental samples can be challenging because of the variable DNA quantity and quality in these samples. High quality DNA ...

An Aquatic Microbial Metaproteomics Workflow: From Cells to Tryptic Peptides Suitable for Tandem Mass Spectrometry-based Analysis

Водной Микробная Metaproteomics рабочего процесса: от клеток до триптической пептидов Подходит для тандемной масс-спектрометрии на основе анализа

Meta-omic technologies such as metagenomics, metatranscriptomics and metaproteomics can aid in the understanding of microbial community structure and ...

Administering and Detecting Protein Marks on Arthropods for Dispersal Research

Администрирование и обнаружения меток белка на членистоногих для разгона исследований

Monitoring arthropod movement is often required to better understand associated population dynamics, dispersal patterns, host plant preferences, and other ...

Pretreatment of Lignocellulosic Biomass with Low-cost Ionic Liquids

Предварительная обработка биомассы лигноцеллюлозы с недорогими Ионные жидкости

A number of ionic liquids (ILs) with economically attractive production costs have recently received growing interest as media for the delignification of ...

A Simple Approach to Manipulate Dissolved Oxygen for Animal Behavior Observations

Простой подход к Манипулирование растворенным кислородом для Поведение животных Наблюдения

The ability to manipulate dissolved oxygen (DO) in a laboratory setting has significant application to investigate a number of ecological and organismal ...