Name: long-term live imaging device for improved experimental manipulation of zebrafish larvae
Uploaded: 2017-10-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-term Live Imaging Device for Improved Experimental Manipulation of Zebrafish Larvae at JoVE.com

Die Autoren möchte anerkennen, primäre Projektförderung vom Morgridge Institute für Forschung und Labor für optische und Computational Instrumentierung. Wir anerkennen auch Finanzierung von NIH # R01GM102924 (AH und KWE). KH, JMS, RS, AH und KWE konzipiert und gestaltet die Studie. KH und JMS führten alle Experimente mit Unterstützung von DL, KP und RS. KH, JS, RS, AH und KWE trugen zu dem Schreiben des Manuskripts.

Hinweis: das base zWEDGI Design für Zebrafischlarven, die 2 bis 4 Tage nach Befruchtung (Dpf) und befolgen Sie die Richtlinien der Universität von Wisconsin-Madison Forschung Tiere Resource Center formuliert wurde.
 1. Design und 3D Druck von Formen <ol><li>Modell der PDMS-Komponente des Gerätes mit gewünschten Geometrien und Attribute in einem 3D modeling Software 5. Erstellen Sie eine Assembly eine leere Form und der PDMS-Teil und generieren Sie eine Negativfo...

<ol>
	<li>Yoo, S. K., Freisinger, C. M., LeBert, D. C., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+redox,+Src+family+kinase,+and+calcium+signaling+integrate+wound+responses+and+tissue+regeneration+in+zebrafish.">Early redox, Src family kinase, and calcium signaling integrate wound responses and tissue regeneration in zebrafish.</a> J. Cell Biology. 199 (2), 225-234 (2012).</li><li>Kawakami, A., Fukazawa, T., Takeda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+fin+primordia+of+zebrafish+larvae+regenerate+by+a+similar+growth+control+mechanism+with+adult+regeneration.">Early fin primordia of zebrafish larvae regenerate by a similar growth control mechanism with adult regeneration.</a> Dev. Dynam. 231 (4), 693-699 (2004).</li><li>Konantz, J., Antos, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reverse+genetic+morpholino+approach+using+cardiac+ventricular+injection+to+transfect+multiple+difficult-to-target+tissues+in+the+zebrafish+larva.">Reverse genetic morpholino approach using cardiac ventricular injection to transfect multiple difficult-to-target tissues in the zebrafish larva.</a> JoVE. (88), (2014).</li><li>Hall, C., Flores, M. F., Kamei, M., Crosier, K., Crosier, P., Sampath, K., Roy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+Innate+Immune+Cell+Behavior+During+Normal+Development,+Wound+Healing+and+Infection.">Live Imaging Innate Immune Cell Behavior During Normal Development, Wound Healing and Infection.</a> Live Imaging in Zebrafish: Insights into Development and Disease. , (2010).</li><li>Huemer, K., Squirrell, J. M., Swader, R., LeBert, D. C., Huttenlocher, A., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=zWEDGI:+Wounding+and+Entrapment+Device+for+Imaging+Live+Zebrafish+Larvae.">zWEDGI: Wounding and Entrapment Device for Imaging Live Zebrafish Larvae.</a> Zebrafish. , (2016).</li><li>Lisse, T. S., Brochu, E. A., Rieger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capturing+tissue+repair+in+zebrafish+larvae+with+time-lapse+brightfield+stereomicroscopy.">Capturing tissue repair in zebrafish larvae with time-lapse brightfield stereomicroscopy.</a> JoVE. (95), (2015).</li><li>Kamei, M., Isogai, S., Pan, W., Weinstein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+blood+vessels+in+the+zebrafish.">Imaging blood vessels in the zebrafish.</a> Methods Cell Biol. 100, 27-54 (2010).</li><li>Graeden, E., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+imaging+of+the+zebrafish+embryonic+brain+by+confocal+microscopy.">Live imaging of the zebrafish embryonic brain by confocal microscopy.</a> JoVE. (26), (2009).</li><li>Petzold, A. M., Bedell, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SCORE+imaging:+specimen+in+a+corrected+optical+rotational+enclosure.">SCORE imaging: specimen in a corrected optical rotational enclosure.</a> Zebrafish. 7 (2), 149-154 (2010).</li><li>Macdonald, N. P., Zhu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+biocompatibility+of+3D+printed+photopolymers+using+zebrafish+embryo+toxicity+assays.">Assessment of biocompatibility of 3D printed photopolymers using zebrafish embryo toxicity assays.</a> Lab Chip. 16 (2), 291-297 (2016).</li><li>LeBert, D. C., Squirrell, J. M., Huttenlocher, A., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Second+harmonic+generation+microscopy+in+zebrafish.">Second harmonic generation microscopy in zebrafish.</a> Methods Cell Biol. 133, 55-68 (2016).</li><li>White, R. M., Sessa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transparent+Adult+Zebrafish+as+a+Tool+for+In+Vivo+Transplantation+Analysis.">Transparent Adult Zebrafish as a Tool for In Vivo Transplantation Analysis.</a> Cell Stem Cell. 2 (2), 183-189 (2008).</li><li>LeBert, D. C., Squirrell, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+metalloproteinase+9+modulates+collagen+matrices+and+wound+repair.">Matrix metalloproteinase 9 modulates collagen matrices and wound repair.</a> Development. 142 (12), 2136-2146 (2015).</li><li>Campagnola, P. J., Millard, A. C., Terasaki, M., Hoppe, P. E., Malone, C. J., Mohler, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+high-resolution+second-harmonic+generation+imaging+of+endogenous+structural+proteins+in+biological+tissues.">Three-dimensional high-resolution second-harmonic generation imaging of endogenous structural proteins in biological tissues.</a> Biophys. J. 82 (1 Pt 1), 493-508 (2002).</li><li>Schindelin, J., Arganda-Carreras, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat. Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li></ol>

Das zWEDGI-Gerät soll 3D Zeitraffer imaging zu stabilisieren und den Fisch in kleine Arbeitsabstand von einem hochauflösenden Mikroskop Ziel orientieren zu erfassen. Während diese Designspezifikationen erfüllt, ist es auch eine Verbesserung gegenüber traditionellen Agar-Basis Vorbereitung für live Imaging. Es gibt drei wichtige Schritte (siehe unten) bei der Herstellung von zWEDGI, die, wenn man nicht richtig Defekte Geräte führen kann:
PDMS-Vorbereitung (Abb. 5A</...

Die Regenerationsfähigkeit der Zebrafischlarven Danio Rerio machen sie eine ideale Modellorganismus für Wunde Reaktion sowie Heilung und nachwachsen1,2,3,4zu prüfen. Zugriff auf ein Array von transgenen Zebrafisch Linien und Zebrafisch anatomische Transparenz weiter erhöhen ihre Nützlichkeit für in Vivo Studien der Wunde Antwort Veranstaltungen sowie längerfristige Regenerationsprozesse4. Studie dieser biologischen Prozesse mit Hilfe hochauflösender Zeitraffer Fluoreszenzmikroskopie daher verlangt ein live imaging Zebrafisch-Gerät, das ermöglicht eine hohe Stabilität und nur minimale Bewegungen von Zebrafisch-Larven unter Beibehaltung der Lebensfähigkeit. Es ist wichtig, dass das Gerät ermöglicht eine effektive Verwundung und Heilung und Regeneration stattfinden unberührt vom Gerät.
Die standard live imaging Stabilisierungsmethode der Einbettung der Larve in Agarose während der live Aufnahme schränkt Wachstum und Regeneration5 gewickelt und Sterberaten erhöhen kann, da Larven beginnen, um Zeichen der kardiale Stress und Gewebe Nekrose nach vier Stunden-4. Daher entfernen von Agarose aus Regionen von Interesse ist oft notwendig um normale Entwicklung zu ermöglichen und Regeneration6, Freilegung der Larven, um mögliche Schäden als die Agarose wird weggeschnitten. Darüber hinaus muss die Agarose Einbettung Technik, der Benutzer orientieren die Larven in der kurzen Zeit bevor die Agarose5,6,7erstarrt. Schnell manipulieren die Larve erfordert nicht nur Geschick des Benutzers, damit riskiert auch Schäden an der Larve. Obwohl Methoden zur Stabilisierung der Larve für live Imaging beschrieben worden sind, um diese Nachteile, wie z. B. geriffelte Agar Brunnen3 oder Unebenheiten8, umgehen die Verwendung von Silikon Vakuum einfetten erstelle ich eine bildgebende Kammer mit PVC-Rohre oder andere Materialien6und rotatorischen Schlauch9, viele dieser Methoden sind intensive, unordentlich, oft Einweg-labor und Umwelt Manipulation ermöglichen nicht (medikamentöse Behandlungen, verwunden etc..) nach der Montage der Fische.
Deshalb wurde das zWEDGI-Gerät (Abbildung 1) entworfen, um einige der Nachteile des Nährbodens für langfristige live Aufnahmen von Zebrafischlarven während der Manipulation der Probe bei schönem Montage zu überwinden. Die zWEDGI besteht aus drei halboffene unterteilte Kammern (Abbildung 1A) erlauben zum Laden, Zurückhaltung, Verwundung und Bildgebung von 2 bis 4 Tage nach Befruchtung Zebrafisch-Larven. Das Gerät ist hergestellt aus Polydimethylsiloxan (PDMS) und auf das Deckglas ein 60 mm unten bildgebenden Glasschale gelegt. Der hier vorgestellte Entwurf für heilende Wunde Studien bestimmt war, jedoch die Verwendung eines modularen Design und standard Fertigungstechnologien machen das zWEDGI Design veränderbar und offen für eine Vielzahl von experimentellen Verfahren, vor allem für Verfahren, die erfordert minimale Zurückhaltung mit experimentelle Manipulation und langfristige Bildgebung.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="920">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:421px;">Fabricate molds</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Solidworks Professional Accedemic Research 3D modeling software</td>
			<td>Dassault Systemes</td>
			<td>SPX0117-01</td>
			<td>Fisher Unitech</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Viper Si2 SLA 3D printer</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
			<td>23200-902</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Accura 60 photopolymer resin</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
			<td>24075-902</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">denatured alcohol</td>
			<td>Sunnyside</td>
			<td>5613735</td>
			<td>Menards</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">UV post cure apparatus</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
			<td>23363-101-00</td>
			<td>3D Systems Inc.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TouchNTuff nitrile gloves</td>
			<td>Ansell</td>
			<td>92-600</td>
			<td>McMaster Carr</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">220B, 400B, 600 grit T414 blue-bak sandpaper&#160;</td>
			<td>Norton</td>
			<td>66261139359, 54, 52</td>
			<td>MSC</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">borosilicate glass disc, 2&#34; diameter</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>MIL-G-47033</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ultrasonicator cleaner</td>
			<td>Branson</td>
			<td>1510R-MTH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">isopropyl rubbing alcohol 70%</td>
			<td>Hydrox</td>
			<td>54845T43</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10oz clear plastic cup</td>
			<td>WNA Masterpiece</td>
			<td>557405</td>
			<td>Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">6&#34;craft stick</td>
			<td>Perfect Stix</td>
			<td>Craft WTD-500</td>
			<td>Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fabricate zWEDGI PDMS device</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sylgard 184 silicon elastomeric kit&#160;</td>
			<td>Dow-Corning</td>
			<td>4019862</td>
			<td>Ellworth Adhesives&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>Vitality Medical Inc</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">desiccator</td>
			<td>Bel-Art Scienceware</td>
			<td>F42027-0000</td>
			<td>Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">4 in ratcheting bar clamp</td>
			<td>Pittsburgh</td>
			<td>68974</td>
			<td>Harbor Freight</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">lab oven</td>
			<td>Quincy Lab Inc.</td>
			<td>20GC</td>
			<td>Global Industrial</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">tweezer set</td>
			<td>Aven</td>
			<td>549825</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">compressed air filtered nozzle</td>
			<td>Innotech</td>
			<td>TA-N2-2000FT</td>
			<td>Cleanroom Supply</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">vacuum bench vise</td>
			<td>Wilton Tool Group</td>
			<td>63500</td>
			<td>MSC Industrial</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">55mm glass bottom dish; 30mm micro-well #1.5 cover glass</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>D60-30-1.5-N</td>
			<td>Cellvis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plasma cleaner</td>
			<td>Harrick Plasma</td>
			<td>PDC-001</td>
			<td>Harrick Plasma</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Loading Larvae</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pipetteman, P200</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">100% ethanol (diluted to 70% with water prior to use)</td>
			<td>Pharmco-aaper</td>
			<td>111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Transfer pipette</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>13-711-5A</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">powdered skim milk</td>
			<td></td>
			<td>2902887</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">double distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">N-phenylthiorurea</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7629</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">tricaine (ethyl 3-aminobenzoate)</td>
			<td></td>
			<td>C-FINQ-UE</td>
			<td>Western Chemical</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">low melting point agarose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A0701</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">heat block (dry bath incubator)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11-718-2</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">E3 buffer&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">large orifice pipette tip, 200 uL</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>02-707-134</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">General purpose pipette tip, 200 uL</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>21-197-8E</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">#15 scalpel blade&#160;</td>
			<td>Feather</td>
			<td>2976</td>
			<td>Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">25G syringe needle</td>
			<td>BD&#160;</td>
			<td>BD305122</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">inverted microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Imaris imaging software</td>
			<td>Bitplane</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term live imaging device for improved experimental manipulation of zebrafish larvae

Der Zebrafisch-Larven ist ein wichtiger Modellorganismus für Entwicklungsbiologie und Wundheilung. Darüber hinaus ist der Zebrafisch-Larven ein wertvolles System für live hochauflösende mikroskopische Aufnahmen von dynamischen biologischen Phänomene in Raum und Zeit mit zellulären Auflösung. Jedoch kann die traditionelle Methode der Agarose Kapselung für live Imaging Larvalentwicklung und Gewebe nachwachsen behindern. Daher beschreibt die Handschrift der zWEDGI (Zebrafisch daraus und verlockende Falle Gerät für Wachstum und Imaging), die wurde entworfen und hergestellt als funktional unterteilte Gerät Larven für hochauflösende Mikroskopie und erlaubt zu orientieren Schwanzflosse Durchtrennung im Gerät und anschließende hemmungslos Schweif Entwicklung und nachwachsen. Dieses Gerät ermöglicht eine Verwundung und langfristige Bildgebung unter Beibehaltung der Lebensfähigkeit. Angesichts der Tatsache, dass die zWEDGI Form 3D gedruckt, die Anpassbarkeit der Geometrien machen es leicht modifiziert für diverse Zebrafisch-imaging-Anwendungen. Darüber hinaus bietet die zWEDGI zahlreiche Vorteile, wie z. B. Zugriff auf die Larve während Experimente für verletzte oder für die Anwendung von Reagenzien, Ausrichtung der mehrere Larven für optimierte Bildgebung und Wiederverwendbarkeit des Geräts parallel geschaltet.

Die zWEDGI PDMS mikrofluidischen Gerät ist funktionell unterteilte entwickelt, um vier Hauptfunktionen (siehe unten) verbunden mit live-Bildgebung der Schwanzflosse Verwundung heilen und nachwachsen im Zebrafischlarven aufnehmen. PDMS wurde für die Fertigung von zWEDGI gewählt, weil es nicht nur leicht zugänglich ist und eine Industrie-standard für Biokompatibilität, sondern auch in Formen gut funktioniert. Darüber hinaus macht PDMS das Gerät wieder verwendbare und leer von harten...

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Long-term Live Imaging Device for Improved Experimental Manipulation of Zebrafish Larvae

Dieses Manuskript beschreibt die zWEDGI (Zebrafisch daraus und verlockende Falle Gerät für Wachstum und Imaging), die ist ein unterteilte Gerät zu orientieren und zurückhalten Zebrafischlarven. Das Design erlaubt Schweif Durchtrennung und langfristige Sammlung von hochauflösender Fluoreszenz-Mikroskopie-Bildern der Wundheilung und Regeneration.

Langfristige Live Imaging-Gerät für verbesserte experimentelle Manipulation von Zebrafischlarven

The zebrafish larva is an important model organism for both developmental biology and wound healing. Further, the zebrafish larva is a valuable system for ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Time-lapse Fluorescence Imaging of Arabidopsis Root Growth with Rapid Manipulation of The Root Environment Using The RootChip

Zeitraffer-Fluoreszenz-Imaging von Arabidopsis Wurzelwachstum mit Rapid Manipulation der Root-Umgebung mit dem RootChip

The root functions as the physical anchor of the plant and is the organ responsible for uptake of water and mineral nutrients such as nitrogen, ...

Forschung

Biotechnik

Using Microfluidics Chips for Live Imaging and Study of Injury Responses in Drosophila Larvae

Using Microfluidics Chips for Live Imaging and Study of Injury Responses in Drosophila Larvae

Mit Mikrofluidik-Chips für Live-Imaging-und Studienverletzungs Antworten in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

Live imaging is an important technique for studying cell biological processes, however this can be challenging in live animals. The translucent cuticle of ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

Langzeit-Intravitalimmunfluoreszenz-Imaging von Gewebematrix Bestandteile mit Epifluoreszenz und Zwei-Photonen-Mikroskopie

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

High-resolution Spatiotemporal Analysis of Receptor Dynamics by Single-molecule Fluorescence Microscopy

Hochauflösende Räumlich-zeitliche Analyse der Rezeptordynamik von Einzelmolekül-Fluoreszenzmikroskopie

Single-molecule microscopy is emerging as a powerful approach to analyze the behavior of signaling molecules, in particular concerning those aspect (e.g., ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Die Multi-Organ Chip - Ein Mikrofluidik-Plattform für langfristige Multi-Gewebe Cokultur

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

Live Cell Imaging during Mechanical Stretch

Live Cell Imaging bei Mechanical Stretch

There is currently a significant interest in understanding how cells and tissues respond to mechanical stimuli, but current approaches are limited in ...

Hybrid &#181;CT-FMT imaging and image analysis

Hybrid Ãƒâ€šÃ‚ÂµCT-FMT imaging and image analysis

Hybrid μCT-FMT-Bildgebung und Bildanalyse

Fluorescence-mediated tomography (FMT) enables longitudinal and quantitative determination of the fluorescence distribution in vivo and can be used to ...

High-resolution Imaging of Nuclear Dynamics in Live Cells under Uniaxial Tensile Strain

Hochauflösende Bildgebung von Kerndynamik in Live-Zellen unter Uniaxialer Tensile-Straße

Extracellular mechanical strain is known to elicit cell phenotypic responses and has physiological relevance in several tissue systems. To capture the ...

Targeting the Rat's Small Bowel: Long-Term Infusion into the Superior Mesenteric Artery

Den Dünndarm der Ratte ins Visier nehmen: Langzeitinfusion in die Arteria mesenterica superior

The superior mesenteric artery can be cannulated in humans through minimally invasive radiological catheterization of the femoral or axillary artery. SMA ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

Erweiterte 3D-Lebermodelle für In-vitro-Genotoxizitätstests nach langfristiger Nanomaterial-Exposition

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...