Name: chip-based three-dimensional cell culture in perfused micro-bioreactors
Uploaded: 2008-05-21T20:23:00
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<p>我々は優秀な技術支援のためにMechthildハーシュバックとアンケDechに感謝します。 </p>

<p class="jove_content">本論文では、細胞株と同様に初代培養細胞の三次元培養のためのチップベースのプラットフォーム（図1）の使用方法について説明します。多くの細胞が唯一の3D -環境の明示器官の機能を行うので、我々は細胞がすべての空間方向に付着することができるの足場を提供するポリマーチップを開発し、流体の流れを制御するためのバイオリアクターのハウジングにマウントできることを、実験?...

<ol>
	<li>Berry, M. N., Friend, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-yield+preparation+of+isolated+rat+liver+parenchymal+cells:+A+biochemical+and+fine+structural+study.">High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: A biochemical and fine structural study.</a> <em style='font-style: italic'>J. Cell Biol</em>. <b>53</b>, 506-520 (1969).</li><li>Seglen, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+liver+cells.+3.+Enzymatic+requirements+for+tissue+dispersion.">Preparation of rat liver cells. 3. Enzymatic requirements for tissue dispersion.</a> <em style='font-style: italic'>Exp. Cell Res</em>. <b>82</b>, 391-398 (1973).</li><li>Giselbrecht, S., Gietzelt, T., Gottwald, E., Trautmann, C., Truckenmueller, R., Weibezahn, K. F., Welle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+tissue+culture+substrates+produced+by+microthermoforming+of+pre-processed+polymer+films.">3D tissue culture substrates produced by microthermoforming of pre-processed polymer films.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed. Microdev</em>. <b>8</b>, 191-199 (2006).</li><li>Welle, A., Gottwald, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=UV-based+patterning+of+polymeric+substrates+for+cell+culture+applications.">UV-based patterning of polymeric substrates for cell culture applications.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed. Microdev</em>. <b>4</b>, 33-41 (2002).</li><li>Gottwald, E., Giselbrecht, S., Augspurger, C., Lahni, B., Dambrowsky, N., Truckenmueller, R., Piotter, V., Gietzelt, T., Wendt, O., Pfleging, W., Welle, A., Rolletschek, A., Wobus, A. M., Weibezahn, K. -. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chip-based+platform+for+the+in+vitro+generation+of+tissues+in+three-dimensional+organization.">A chip-based platform for the in vitro generation of tissues in three-dimensional organization.</a> <em style='font-style: italic'>Lab Chip</em>. <b>7</b>, 777-785 (2007).</li><li>Eschbach, E., Chatterjee, S. S., Noldner, M., Gottwald, E., Dertinger, H., Weibezahn, K. -. F., Knedlitschek, G., G,  <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructured+scaffolds+for+liver+tissue+with+high+density:+Morphological+and+biochemical+characterization+of+tissue+aggregates.">Microstructured scaffolds for liver tissue with high density: Morphological and biochemical characterization of tissue aggregates.</a> <em style='font-style: italic'>J. Cell. Biochem</em>. <b>95</b>, 243-255 (2005).</li></ol>

<p>我々は積極的に灌流マイクロバイオリアクターにおける細胞の三次元培養のためのチップベースのプラットフォームを開発しました。チップは、マイクロ射出成形、ホットエンボス加工と同様のマイクロ熱成形技術<sup>3</sup>による生分解性ポリマーの非生分解性からだけでなく、製造することができる。実験のデザインに応じて、ポリマーの表面は、UV -照射<sup>4</sup>で修正することができます。式のいくつ...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Cells</td>
<td>Other</td>
<td>ATCC</td>
<td>HB-8065</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagen I from rat tail</td>
<td>Reagent</td>
<td>Roche Diagnostics</td>
<td>11 179 179 001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PARIS kit</td>
<td>Reagent</td>
<td>Ambion Inc.</td>
<td>AM1921</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Syto16</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>S7578</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>anti cytokeratin 18</td>
<td>Antibody</td>
<td>Abcam plc</td>
<td>ab668</td>
<td>Primary Ab, Mouse monoclonal, used 1/100 in PBS</td>
</tr>
<tr>
<td>Anti E-cadherin</td>
<td>Antibody</td>
<td>Abcam plc</td>
<td>ab1416</td>
<td>Primary Ab, Mouse monoclonal, used 1/50 in PBS.</td>
</tr>
<tr>
<td>Goat anti-albumin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Bethyl Laboratories</td>
<td>E80-129</td>
<td>Primary Ab, goat anti-human Albumin, used 1/200 in PBS</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit anti-mouse IgG1</td>
<td>Antibody</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A11059</td>
<td>Secondary Ab, Alexa Flour 488 conjugated, used 1/100 in PBS + 0.5 % BSA</td>
</tr>
<tr>
<td>Cy3 anti-goat IgG</td>
<td>Reagent</td>
<td>Jackson ImmunoResearch Lab</td>
<td>705-165-003</td>
<td>Cy3 AffiniPure donkey a-goat IgG Ab, used 1/700 in PBS + 0.5% BSA</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

chip-based three-dimensional cell culture in perfused micro-bioreactors

<p class="jove_content">我々は、細胞の三次元培養のためのチップベースの細胞培養システムを開発した。チップは通常、マイクロ射出成形、マイクロホットエンボス加工または熱成形マイクロによって、非生分解性ポリマー、例えば、ポリカーボネートやポリメチルメタクリレートから製造されています。しかし、それはまた、生分解性ポリマーから製造することができる。その全体的な寸法は0.7 × 1 20 × 20 ​​× 0.7 1ミリメートル（hxwxl）です。使用するチップの主な特徴は、どちら1156立方マイクロコンテナ（CF -チップ）までのグリッドであり、それぞれ120から300までの大きさ× 300 × 300μ（hxwxl）または300μの直径を有する円形凹部と深さの300μ（R -チップ）。足場は、10美緒を収容することができる。三次元構成で細胞。最適な栄養とガス供給の場合、チップは、バイオリアクターのハウジングに挿入されます。バイオリアクターは、最も単純な構成で、additionalyローラーポンプとガスの供給を持つ媒体タンクから構成され、閉じた滅菌の循環ループの一部です。バイオリアクター、灌流、灌流、あるいは混合操作モードで実行することができます。私たちは正常細胞株と同様に数週間の期間にわたって主要な細胞を栽培している。ラット初代肝細胞のために我々は2週間以上器官の機能の保全を示すことができた。肝細胞癌細胞株のために我々はされていないか、ほんの少しだけ標準的な単層培養で発現する肝臓特異的遺伝子の誘導を示すことができた。幹細胞株との最初の分化実験では有望されて以来、システムはまた、幹細胞の培養系として有用かもしれません。 </p>

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Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

<p class="jove_content">我々は、マイクロバイオリアクターにおける細胞の三次元培養のためのチップベースのプラットフォームについて説明します。一つのチップは10ミオまで収容することができる。流体の流れに関しては正確に定義された条件下で培養することができる細胞、滅菌、閉鎖循環ループ内の酸素分圧など。</p>

灌流マイクロバイオリアクターのチップベースの三次元細胞培養

We have developed a chip-based cell culture system for the three-dimensional cultivation of cells. The chip is typically manufactured from ...

Research

JoVE Journal

Biology

Microfabrication of Chip-sized Scaffolds for Three-dimensional Cell cultivation

三次元細胞培養用チップサイズの足場の微細加工

Using microfabrication technologies is a prerequisite to create scaffolds of reproducible geometry and constant quality for three-dimensional cell ...

Hi-C: A Method to Study the Three-dimensional Architecture of Genomes.

ハイC：ゲノムの三次元構造を研究する方法。

The three-dimensional folding of chromosomes compartmentalizes the genome and and can bring distant functional elements, such as promoters and enhancers, ...

Isolation of Mammary Epithelial Cells from Three-dimensional Mixed-cell Spheroid Co-culture

三次元混合細胞スフェロイド共培養から乳腺上皮細胞の分離

While enormous efforts have gone into identifying signaling pathways and molecules involved in normal and malignant cell behaviors1-2, much of this work ...

Two- and Three-Dimensional Live Cell Imaging of DNA Damage Response Proteins

DNA損傷応答タンパク質の2次元および3次元生細胞イメージング

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Mouse Fetal Whole Intestine Culture System for <em>Ex Vivo</em> Manipulation of Signaling Pathways and Three-dimensional Live Imaging of Villus Development

Mouse Fetal Whole Intestine Culture System for Ex Vivo Manipulation of Signaling Pathways and Three-dimensional Live Imaging of Villus Development

マウス胎児腸全体培養システム<em&gt;生体外</em&gt;シグナル伝達経路の操作と絨毛開発の3次元ライブイメージング

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三次元ハイドロゲルでイメージングをFRET

Imaging of F&#246;rster resonance energy transfer (FRET)&#160;is a powerful tool for examining cell biology in real-time. Studies utilizing FRET commonly ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

マウス単離された灌流腎臓テクニック

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

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受動的な明快さクリア マウス卵巣の血管の 3次元再構築

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Single-Cell Resolution Three-Dimensional Imaging of Intact Organoids

インタクトオルガノイドの単一細胞分解能3次元イメージング

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Evaluating the Angiogenetic Properties of Ovarian Cancer Stem-Like Cells using the Three-Dimensional Co-Culture System, NICO-1

3次元共培養システムNICO-1を用いた卵巣癌幹細胞様細胞の血管遺伝学的特性の評価

Cancer stem cells (CSCs) reside in a supportive niche, constituting a microenvironment comprised of adjacent stromal cells, vessels, and extracellular ...