Name: processing of human cardiac tissue toward extracellular matrix self-assembling hydrogel for in vitro and in vivo applications
Uploaded: 2017-12-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications at JoVE.com

פרוטוקול המחקר תואמת עקרונות אתיים שמתואר את הצהרת הלסינקי. חולים שסופקו מדעת לשימוש של הרקמה למטרות מחקר, התהליך של איסוף רקמת אושרה על ידי הועד המוסדי יו ר ועדת האתיקה של צ'אריטה - Universitätsmedizin ברלין (EA4/028/12).

פרוטוקול המחקר תואמת עקרונות אתיים שמתואר את הצהרת הלסינקי, שאושר על ידי סקירה מוסדיים המנהלים ואתיקה ועדת צ'אריטה הרפואי האוניברסיטאי. כל המטופלים סיפק נכתב, הסכמה מדעת לשימוש של רקמת הלב ללימודי ניסיוני.
1. הכנה של שריר הלב האנושי חלוקתה
<ol><li>להשיג את שריר הלב הימני חדרית ...

<ol>
	<li>Elliott, R., Hoehn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Commercial+Porcine+Skin+for+Wound+Dressings.">Use of Commercial Porcine Skin for Wound Dressings.</a> Plastic and reconstructive surgery. 52 (4), 401-405 (1973).</li><li>Rienks, M., Papageorgiou, A. -. P., Frangogiannis, N. G., Heymans, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+Extracellular+Matrix:+An+Ever-Changing+and+Diverse+Entity.">Myocardial Extracellular Matrix: An Ever-Changing and Diverse Entity.</a> Circulation Research. 114 (5), 872-888 (2014).</li><li>Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Biological+Basis+for+Cardiac+Repair+After+Myocardial+Infarction.">The Biological Basis for Cardiac Repair After Myocardial Infarction.</a> Circulation Research. 119 (1), 91-112 (2016).</li><li>Boopathy, A. V., Martinez, M. D., Smith, A. W., Brown, M. E., Garcia, A. J., Davis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramyocardial+Delivery+of+Notch+Ligand-Containing+Hydrogels+Improves+Cardiac+Function+and+Angiogenesis+Following+Infarction.">Intramyocardial Delivery of Notch Ligand-Containing Hydrogels Improves Cardiac Function and Angiogenesis Following Infarction.</a> Tissue Eng Part A. 21 (17-18), 2315-2322 (2015).</li><li>Gaetani, R., Yin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+derived+extracellular+matrix+enhances+cardiogenic+properties+of+human+cardiac+progenitor+cells.">Cardiac derived extracellular matrix enhances cardiogenic properties of human cardiac progenitor cells.</a> Cell Transplant. , (2015).</li><li>Kraehenbuehl, T. P., Ferreira, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+microvascular+grafts+for+cardiac+tissue+preservation+after+myocardial+infarction.">Human embryonic stem cell-derived microvascular grafts for cardiac tissue preservation after myocardial infarction.</a> Biomaterials. 32 (4), 1102-1109 (2011).</li><li>Zhang, J., Klos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+promotes+highly+efficient+cardiac+differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells:+The+matrix+sandwich+method.">Extracellular matrix promotes highly efficient cardiac differentiation of human pluripotent stem cells: The matrix sandwich method.</a> Circulation Research. 111 (9), 1125-1136 (2012).</li><li>Fong, A. H., Romero-L&#243;pez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-Dimensional+Adult+Cardiac+Extracellular+Matrix+Promotes+Maturation+of+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cell-Derived+Cardiomyocytes.">Three-Dimensional Adult Cardiac Extracellular Matrix Promotes Maturation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes.</a> Tissue Engineering Part A. 22 (15-16), 1016-1025 (2016).</li><li>DeQuach, J. A., Mezzano, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+High+Yielding+Method+for+Preparing+Tissue+Specific+Extracellular+Matrix+Coatings+for+Cell+Culture.">Simple and High Yielding Method for Preparing Tissue Specific Extracellular Matrix Coatings for Cell Culture.</a> PLoS ONE. 5 (9), e13039 (2010).</li><li>Saldin, L. T., Cramer, M. C., Velankar, S. S., White, L. J., Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+hydrogels+from+decellularized+tissues:+Structure+and+function.">Extracellular matrix hydrogels from decellularized tissues: Structure and function.</a> Acta Biomaterialia. 49, 1-15 (2017).</li><li>Tukmachev, D., Forostyak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injectable+extracellular+matrix+hydrogels+as+scaffolds+for+spinal+cord+injury+repair.">Injectable extracellular matrix hydrogels as scaffolds for spinal cord injury repair.</a> Tissue Eng Part A. , (2016).</li><li>Freytes, D. O., Martin, J., Velankar, S. S., Lee, A. S., Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+rheological+characterization+of+a+gel+form+of+the+porcine+urinary+bladder+matrix.">Preparation and rheological characterization of a gel form of the porcine urinary bladder matrix.</a> Biomaterials. 29 (11), 1630-1637 (2008).</li><li>Singelyn, J. M., Sundaramurthy, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-deliverable+hydrogel+derived+from+decellularized+ventricular+extracellular+matrix+increases+endogenous+cardiomyocytes+and+preserves+cardiac+function+post-myocardial+infarction.">Catheter-deliverable hydrogel derived from decellularized ventricular extracellular matrix increases endogenous cardiomyocytes and preserves cardiac function post-myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 59 (8), 751-763 (2012).</li><li>Wainwright, J. M., Czajka, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+cardiac+extracellular+matrix+from+an+intact+porcine+heart.">Preparation of cardiac extracellular matrix from an intact porcine heart.</a> Tissue Eng Part C Methods. 16 (3), 525-532 (2010).</li><li>Ott, H. C., Matthiesen, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfusion-decellularized+matrix:+using+nature's+platform+to+engineer+a+bioartificial+heart.">Perfusion-decellularized matrix: using nature's platform to engineer a bioartificial heart.</a> Nature Medicine. 14, 213-221 (2008).</li><li>Oberwallner, B., Anic, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cardiac+extracellular+matrix+supports+myocardial+lineage+commitment+of+pluripotent+stem+cells.">Human cardiac extracellular matrix supports myocardial lineage commitment of pluripotent stem cells.</a> Eur J Cardiothorac Surg. 47, 416-425 (2015).</li><li>Oberwallner, B., Brodarac, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+cardiac+extracellular+matrix+scaffolds+by+decellularization+of+human+myocardium.">Preparation of cardiac extracellular matrix scaffolds by decellularization of human myocardium.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 102 (9), 3263-3272 (2014).</li><li>Kappler, B., Anic, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cytoprotective+capacity+of+processed+human+cardiac+extracellular+matrix.">The cytoprotective capacity of processed human cardiac extracellular matrix.</a> Journal of Materials Science: Materials in Medicine. , (2016).</li><li>Bashey, R. I., Martinez-Hernandez, A., Jimenez, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+characterization,+and+localization+of+cardiac+collagen+type+VI.+Associations+with+other+extracellular+matrix+components.">Isolation, characterization, and localization of cardiac collagen type VI. Associations with other extracellular matrix components.</a> Circulation Research. 70 (5), (1992).</li><li>Wu, J., Ravikumar, P., Nguyen, K. T., Hsia, C. C. W., Hong, Y., Gorler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+protection+by+inhalation+of+exogenous+solubilized+extracellular+matrix.">Lung protection by inhalation of exogenous solubilized extracellular matrix.</a> PLOS ONE. 12 (2), e0171165 (2017).</li><li>Chen, W. C. W., Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+zebrafish+cardiac+extracellular+matrix+induces+mammalian+heart+regeneration.">Decellularized zebrafish cardiac extracellular matrix induces mammalian heart regeneration.</a> Science Advances. 2 (11), e1600844 (2016).</li><li>Godier-Furn&#233;mont, A. F. G., Martens, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Composite+scaffold+provides+a+cell+delivery+platform+for+cardiovascular+repair.">Composite scaffold provides a cell delivery platform for cardiovascular repair.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (19), 7974-7979 (2011).</li><li>Sarig, U., Sarig, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+myocardial+ECM+patch+drives+cardiac+progenitor+based+restoration+even+after+scarring.">Natural myocardial ECM patch drives cardiac progenitor based restoration even after scarring.</a> Acta Biomaterialia. 44, 209-220 (2016).</li><li>Singelyn, J. M., DeQuach, J. A., Seif-Naraghi, S. B., Littlefield, R. B., Schup-Magoffin, P. J., Christman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naturally+derived+myocardial+matrix+as+an+injectable+scaffold+for+cardiac+tissue+engineering.">Naturally derived myocardial matrix as an injectable scaffold for cardiac tissue engineering.</a> Biomaterials. 30 (29), 5409-5416 (2009).</li></ol>

בעת הכנת ECM שריר הלב האנושי, המטרה היא להשיג את הדברים הבאים: הסרת חומרים רלוונטיים הסלולר immunogenic, שמירה על שלמות ECM ו אתריים, עקרות, אי רעילות של המוצר הסופי, תאימות GMP-תהליך, ו התאמת המוצר עבור יישום נתון במונחים של טיפול. על ידי שילוב פרוטוקול 3-צעד decellularization שלנו עם עיבוד נוסף לתוך microparticles או...

מטריצות (ECM) מספק לא רק מבנה תומך אבל חשוב גם עבור תא ביולוגי, רקמות לתפקד1. בלב, ECM משתתף בוויסות תגובות pathophysiologic כגון פיברוזיס, דלקת, אנגיוגנזה, הפונקציה כויץ cardiomyocyte ואת הכדאיות קדמון תושב גורל. בנוסף מרכיביו העיקריים - סיבי glycoproteins, glycosaminoglycans ו proteoglycans - הוא מכיל שורה של גורמי גדילה מופרשים ציטוקינים, עלי הלוואי קרומיים שלפוחית המכילה2,של חומצות גרעין וחלבונים -3.
זה הפך לאחרונה כי ההכנות ECM acellular הן לא רק שלא יסולא בפז ללמוד אינטראקציות סלולרי-מטריקס, אלא גם עבור יישומים פוטנציאליים מבוססת תא טיפולית. החשיבות של מתן סביבה נאותה התא טיפולית מוצרים או רקמות מהונדסים כעת ידוע נרחב. נעשים ניסיונות לשלב תא המתלים או חומרים פעילים עם מוגדר hydrogels biopolymeric4,5,6 או עם קוקטיילים חלבון מופרש על ידי תאי מאתר סרקומה (קרי, Matrigel, Geltrex) 7. עם זאת, לשעבר מוגבלת אתריים האחרונים הם בעייתיים בתהליכים GMP-כיתה, שניהם חסרים את אתריים רקמות ספציפיות של הלב ECM (cECM)8,9,10, 11,12,13.
Decellularization של שריר הלב בעבר בוצעה על ידי זלוף בלב שלם באמצעות ה-14,להערכת כלילית15. אמנם זה אפשרי בלבבות בעלי חיים, לבבות אדם שלם זמינים רק לעתים רחוקות. לפיכך, תהליך טבילה המאפשר טיפול דגימות רקמה שהושג בחדר הניתוח היה המועדף. פרוטוקול "3-צעד" שלנו מכיל 3 נפרד הדגירה שלבים כלומר פירוק, solubilization, והסרת ה-DNA. זה מניב ECM שריר הלב האנושי עם משומר בעיקר חלבון, גליקוזאמינוגליקן קומפוזיציה16,17. פרוסות cECM אלה מאפשרים מחקרים במבחנה של התא-מטריקס אינטראקציות אבל מתאים היטב עבור יישומים פוטנציאליים בקנה מידה האדם טיפולית. תהליך הייצור הוארך אז כדי לייצר lyophilized cECM microparticles או של הידרוג cECM18.
פרוטוקול זה מאפשר decellularization של שריר הלב האנושי המתקבל דגימות כירורגי, שמירה על המרכיבים העיקריים של מטריצה חוץ-תאית שריר הלב (ECM) ופעילותם וחיסונים. פרוטוקול זה מומלץ כאשר ECM הלב האנושי עם אתריים רקמות ספציפיות שהשתמרו נדרשת ללימודים ניסיוני של אינטראקציות סלולרי-מטריקס, או כאשר סביבה מתאימה יש צורך גישות מבוססות תא התחדשות שריר הלב. בעקרון, זה גם אפשרי להתאים פרוטוקול זה בתנאי GMP-כיתה, כך השימוש cECM מעובד צריך להיות ריאלי יישומים טיפוליים בעתיד.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>DR Precisa, Dietikon, Switzerland</td>
			<td>Precisa XR 205SM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blades Nr.10 Skalpell Nr.3</td>
			<td>InstrumenteNRW, Erftstadt, Germany</td>
			<td>SK-10-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates (6-well)</td>
			<td>Greiner, Frickenhausen, Germany</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat CM</td>
			<td>Leica, Wetzlar, Germany</td>
			<td>3050S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>8043.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf reaction tubes (1.5 or 2 ml)</td>
			<td>Greiner, Frickenhausen, Germany</td>
			<td>616201, 623201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 15ml, 50ml</td>
			<td>Greiner, Frickenhausen, Germany</td>
			<td>188271, 227270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Biochrome, Berlin, Germany</td>
			<td>S 0115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freeze Dry System</td>
			<td>Labconco, Kansas City, USA</td>
			<td>7670520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer (-80&#176;C)</td>
			<td>Thermo Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>Forma 900 Series</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>281.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome Blades Type 819</td>
			<td>Leica, Wetzlar, Germany</td>
			<td>14035838925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minilys Homogeniser</td>
			<td>PEQLAB Biotechnologie GmbH, Erlangen, Germany</td>
			<td>91-PCSM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>K021.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin</td>
			<td>PAN Biotech, Aidenbach, Germany</td>
			<td>P06-07800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Thermo Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin</td>
			<td>Life Technologies, Darmstadt, Germany</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pepsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany</td>
			<td>P6887-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precellys Keramik-Kit 1.4 mm</td>
			<td>Peqlab Biotechnolgie, Erlangen, Germany</td>
			<td>91-PCS-CK14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotamax 120 Plate shaker</td>
			<td>Heidolph, Schwabach, Germany</td>
			<td>544-41200-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>CN30.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Leica, Wetzlar, Germany</td>
			<td>M125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip-GP, 0,22 &#181;m</td>
			<td>Merck Millipore, Darmstadt, Germany</td>
			<td>SCGP00525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stuart analogue rocker &#38; roller mixers</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany</td>
			<td>Z675113-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Tek O.C.T compound</td>
			<td>Hartenstein, Wurzburg, Germany</td>
			<td>TTEK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfusion set 200&#181;m</td>
			<td>Sarstedt, N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td>798.200.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIS</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>5429.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vedena Skalpellgriff Fig. 3, Standard, 125 mm</td>
			<td>Medical Highlights, Rohrdorf, Germany</td>
			<td>CV102-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex-Genie2</td>
			<td>Scientific Industry, New York, USA</td>
			<td>SI-0256</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

processing of human cardiac tissue toward extracellular matrix self-assembling hydrogel for in vitro and in vivo applications

מטריצה חוץ-תאית acellular ההכנות שימושיים עבור לימוד אינטראקציות סלולרי-מטריקס ולהקל תא משובי טיפול יישומים. מספר מוצרים מסחריים מטריצה חוץ-תאית זמינים כמו hydrogels או ממברנות, אך אלה לא ניחנת פעילות ביולוגית רקמות ספציפיות. כי זלוף decellularization בדרך כלל לא אפשרי עם רקמת הלב האנושי, פיתחנו תהליך decellularization 3-צעד טבילה. פרוסות שריר הלב האנושי רכש במהלך הניתוח הראשון שטופלו hyperosmolar דטרגנט ללא פירוק מאגר, ואחריו הדגירה עם יונית דטרגנט, dodecyl סולפט נתרן, ואת התהליך הושלם על ידי ניצול הפעילות DNase מהותי של סרום שור בעובר. טכניקה זו התוצאה ללא תא גיליונות של מטריצה חוץ-תאית לב עם נשמר בעיקר סיבי רקמת ביופולימרים ואדריכלות הרכב, אשר הוצגו לספק רמזים סביבתיים מסוימים כדי אוכלוסיות הלב תא גזע pluripotent תאים. מטריצה חוץ-תאית לב גליונות שניתן ואז עוד יותר מעובד לאבקה microparticle ללא שינוי כימי נוסף או, באמצעות עיכול פפסין לטווח קצר, לתוך הידרוג מטריצה חוץ-תאית לב וההספק עצמית עם משומר אתריים.

פרוטוקול 3-צעד עבור decellularization של שריר הלב האנושי המובאת כאן תוצאות כמעט מוחלטת הסרת חומר הסלולר, תוך שימור המרכיבים ECM העיקריים של המבנה fibrillar של ECM. לאחר decellularization, הסרת תאים מן הרקמה ברוטו הוא ברור על-ידי שינוי צבע (איור 1 א'). ניתוח היסטולוגית עם כתמי H & E ו- Tric...

Watch this Scientific Journal Video about Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications at JoVE.com

Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications

פרוטוקול זה מתאר את decellularization מלא של שריר הלב האנושי תוך שמירה על מרכיביו מטריצה חוץ-תאית. עיבוד נוסף של התוצאות מטריצה חוץ-תאית בייצור של microparticles ו הידרוג וההספק עצמית של cytoprotective.

עיבוד של רקמת הלב האנושי כלפי עצמי בהרכבת הידרוג במבחנה ויישומים In Vivo מטריצה חוץ-תאית

Acellular extracellular matrix preparations are useful for studying cell-matrix interactions and facilitate regenerative cell therapy applications. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

אפיון של הרתי יישוב אבות בעובר העכבר באמצעות<em&gt; In vivo</em&gt; ו<em&gt; במבחנה</em&gt; מבחני

Characterizing thymic settling progenitors is important to understand the pre-thymic stages of T cell development, essential to devise strategies for T ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

ניתוח של יושרה שריר שלד דג הזברה זחלים עם אוונס הכחול צבע

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation of Perivascular Multipotent Precursor Cell Populations from Human Cardiac Tissue

בידוד של אוכלוסיות תאי perivascular מולטיפוטנטיים המבשרים מרקמות אדם לב

Multipotent mesenchymal stem/stromal cells (MSC) were conventionally isolated, through their plastic adherence, from primary tissue digests whilst their ...

Directed Differentiation of Primitive and Definitive Hematopoietic Progenitors from Human Pluripotent Stem Cells

ביים הבידול של אבות Hematopoietic פרימיטיבי, מהווים הסופית מתאי גזע Pluripotent אנושי

One of the major goals for regenerative medicine is the generation and maintenance of hematopoietic stem cells (HSCs) derived from human pluripotent stem ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

הדמיה חיה של עכבר משניים פיוז &#39;ן

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

חיסונית-פלורסנט תיוג של Microtubules וחלבונים Centrosomal Vivo לשעבר רקמת המעי ו 3D במבחנה Organoids מעיים

The advent of 3D in vitro organoids that mimic the in vivo tissue architecture and morphogenesis has greatly advanced the ability to study key biological ...

Cell Aggregation Assays to Evaluate the Binding of the Drosophila Notch with Trans-Ligands and its Inhibition by Cis-Ligands

Cell Aggregation Assays to Evaluate the Binding of the Drosophila Notch with Trans-Ligands and its Inhibition by Cis-Ligands

תא מבחני צבירה כדי להעריך את הכריכה של החריץ דרוזופילה עם טרנס-ליגנדים וניגוד שלה על ידי חבר העמים-ליגנדים

Notch signaling is an evolutionarily conserved cell-cell communication system used broadly in animal development and adult maintenance. Interaction of the ...

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

לבידוד של תאי סטרומה רירית הרחם אדם במבחנה Decidualization

The differentiation of human endometrial stromal cells (HESC) from fibroblast-like appearance into secretory decidua is a transformation required for ...

Isolation of Rat Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cells for Differentiation into Insulin-producing Cells

בידוד של תאי גזע מזנכימליים של רקמת שומן חולדה לצורך התמיינות לתאים המייצרים אינסולין

Mesenchymal stem cells (MSCs)-especially those isolated from adipose tissue (Ad-MSCs)-have gained special attention as a renewable, abundant source of ...

Development of Organoids from Mouse Pituitary as In Vitro Model to Explore Pituitary Stem Cell Biology

Development of Organoids from Mouse Pituitary as In Vitro Model to Explore Pituitary Stem Cell Biology

פיתוח של Organoids מן בלוטת יותרת המוח עכבר כמו מודל במבחנה כדי לחקור ביולוגיה של תאי גזע בלוטת יותרת המוח

The pituitary is the master endocrine gland regulating key physiological processes, including body growth, metabolism, sexual maturation, reproduction, ...