Name: assay development for high content quantification of sod1 mutant protein aggregate formation in living cells
Uploaded: 2017-10-04T12:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells at JoVE.com

Detta arbete stöds av ett bidrag som finansieras av den koreanska regeringen (MSIP) (NRF-2014K1A4A7A01074642), och National Research Foundation i Korea (NRF) enskilda forskare stöd programmet (NRF-2013M3A9B5076486/NRF-2015R1D1A1A09057239).

1. lentivirus produktion Obs: produktion och manipulation av lentiviral vektorer genomfördes enligt National Institutes of Health (NIH) riktlinjerna för forskning som involverar rekombinant DNA. Plasmid kodning av vildtyp och A4V-muterat SOD1 märkta med förbättrad YFP (SOD1WT-YFP och SOD1A4V-YFP) beskrivs i Kim et al. 11 båda genprodukter fusion var förstärkt med hjälp av PCR-primer paret 5 &#8242; - ATCGTCTAGACACCATGGCGACGAAGGTCGTGTGC - 3 &#8242; och...

<ol>
	<li>Schulte, J., Sepp, K. J., Wu, C., Hong, P., Littleton, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-content+chemical+and+rnai+screens+for+suppressors+of+neurotoxicity+in+a+huntington's+disease+model.">High-content chemical and rnai screens for suppressors of neurotoxicity in a huntington's disease model.</a> PLoS ONE. 6 (8), e23841 (2011).</li><li>Honarnejad, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+implementation+of+a+high-throughput+compound+screening+assay+for+targeting+disrupted+ER+calcium+homeostasis+in+Alzheimer's+disease.">Development and implementation of a high-throughput compound screening assay for targeting disrupted ER calcium homeostasis in Alzheimer's disease.</a> PLoS ONE. 8 (11), 1-12 (2013).</li><li>Burkhardt, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cellular+model+for+sporadic+ALS+using+patient-derived+induced+pluripotent+stem+cells.">A cellular model for sporadic ALS using patient-derived induced pluripotent stem cells.</a> Mol Cell Neurosci. 56, 355-364 (2013).</li><li>Mattiazzi, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Content+Screening+for+Quantitative+Cell+Biology.">High-Content Screening for Quantitative Cell Biology.</a> Trends Cell Biol. 26 (8), 598-611 (2016).</li><li>Kato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyotrophic+lateral+sclerosis+models+and+human+neuropathology:+Similarities+and+differences.">Amyotrophic lateral sclerosis models and human neuropathology: Similarities and differences.</a> Acta Neuropathologica. 115 (1), 97-114 (2008).</li><li>Strong, M. J., Kesavapany, S., Pant, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathobiology+of+amyotrophic+lateral+sclerosis:+a+proteinopathy?.">The pathobiology of amyotrophic lateral sclerosis: a proteinopathy?.</a> J neuropathol exp neurol. 64 (8), 649-664 (2005).</li><li>Cleveland, D. W., Rothstein, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Charcot+to+Lou+Gehrig:+deciphering+selective+motor+neuron+death+in+ALS.">From Charcot to Lou Gehrig: deciphering selective motor neuron death in ALS.</a> Nat rev Neurosci. 2 (11), 806-819 (2001).</li><li>Bruijn, L. I., Miller, T. M., Cleveland, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unraveling+the+Mechanisms+Involved+in+Motor+Neuron+Degeneration+in+Als.">Unraveling the Mechanisms Involved in Motor Neuron Degeneration in Als.</a> Annu Rev Neurosci. 27 (1), 723-749 (2004).</li><li>Vassall, K. a., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+stability+and+increased+formation+of+soluble+aggregates+by+immature+superoxide+dismutase+do+not+account+for+disease+severity+in+ALS.">Decreased stability and increased formation of soluble aggregates by immature superoxide dismutase do not account for disease severity in ALS.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 108 (6), 2210-2215 (2011).</li><li>Hwang, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonamyloid+aggregates+arising+from+mature+copper/zinc+superoxide+dismutases+resemble+those+observed+in+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Nonamyloid aggregates arising from mature copper/zinc superoxide dismutases resemble those observed in amyotrophic lateral sclerosis.</a> J Biol Chem. 285 (53), 41701-41711 (2010).</li><li>Kim, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimerization,+Oligomerization,+and+Aggregation+of+Human+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis+Copper/Zinc+Superoxide+Dismutase+1+Protein+Mutant+Forms+in+Live+Cells.">Dimerization, Oligomerization, and Aggregation of Human Amyotrophic Lateral Sclerosis Copper/Zinc Superoxide Dismutase 1 Protein Mutant Forms in Live Cells.</a> J Biol Chem. 289 (21), 15094-15103 (2014).</li><li>Shaw, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detergent-insoluble+aggregates+associated+with+amyotrophic+lateral+sclerosis+in+transgenic+mice+contain+primarily+full-length,+unmodified+superoxide+dismutase-1.">Detergent-insoluble aggregates associated with amyotrophic lateral sclerosis in transgenic mice contain primarily full-length, unmodified superoxide dismutase-1.</a> J Biol Chem. 283 (13), 8340-8350 (2008).</li><li>Banci, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOD1+and+amyotrophic+lateral+sclerosis:+Mutations+and+oligomerization.">SOD1 and amyotrophic lateral sclerosis: Mutations and oligomerization.</a> PLoS ONE. 3 (2), 1-8 (2008).</li><li>Johnston, J. a., Dalton, M. J., Gurney, M. E., Kopito, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+high+molecular+weight+complexes+of+mutant+Cu,+Zn-superoxide+dismutase+in+a+mouse+model+for+familial+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Formation of high molecular weight complexes of mutant Cu, Zn-superoxide dismutase in a mouse model for familial amyotrophic lateral sclerosis.</a> Proc Natl Acad Sci. 97 (23), 12571-12576 (2000).</li><li>Niwa, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disulfide+bond+mediates+aggregation,+toxicity,+and+ubiquitylation+of+familial+amyotrophic+lateral+sclerosis-linked+mutant+SOD1.">Disulfide bond mediates aggregation, toxicity, and ubiquitylation of familial amyotrophic lateral sclerosis-linked mutant SOD1.</a> J Biol Chem. 282 (38), 28087-28095 (2007).</li><li>Juneja, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognosis+in+familial+amyotrophic+lateral+sclerosis:+progression+and+survival+in+patients+with+glu100gly+and+ala4val+mutations+in+Cu,Zn+superoxide+dismutase.">Prognosis in familial amyotrophic lateral sclerosis: progression and survival in patients with glu100gly and ala4val mutations in Cu,Zn superoxide dismutase.</a> Neurology. 48 (1), 55-57 (1997).</li><li>Kaur, S. J., McKeown, S. R., Rashid, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutant+SOD1+mediated+pathogenesis+of+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis.">Mutant SOD1 mediated pathogenesis of Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> Gene. 577 (2), 109-118 (2016).</li><li>de Bruyns, A., Geiling, B., Dankort, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Construction+of+Modular+Lentiviral+Vectors+for+Effective+Gene+Expression+and+Knockdown.">Construction of Modular Lentiviral Vectors for Effective Gene Expression and Knockdown.</a> Methods Mol Biol. 1448, 3-21 (2016).</li><li>Sirven, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Transgene+Expression+in+Cord+Blood+CD34+-Derived+Hematopoietic+Cells,+Including+Developing+T+Cells+and+NOD/SCID+Mouse+Repopulating+Cells,+Following+Transduction+with+Modified+TRIP+Lentiviral+Vectors.">Enhanced Transgene Expression in Cord Blood CD34+-Derived Hematopoietic Cells, Including Developing T Cells and NOD/SCID Mouse Repopulating Cells, Following Transduction with Modified TRIP Lentiviral Vectors.</a> Mol Ther. 3 (4), 438-448 (2001).</li><li>Wu, C., Lu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-titre+retroviral+vector+system+for+efficient+gene+delivery+into+human+and+mouse+cells+of+haematopoietic+and+lymphocytic+lineages.">High-titre retroviral vector system for efficient gene delivery into human and mouse cells of haematopoietic and lymphocytic lineages.</a> J gen virol. 91 (Pt 8), 1909-1918 (2010).</li><li>Irshad, H., Veillard, A., Roux, L., Racoceanu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+nuclei+detection,+segmentation,+and+classification+in+digital+histopathology:+A+review-current+status+and+future+potential.">Methods for nuclei detection, segmentation, and classification in digital histopathology: A review-current status and future potential.</a> IEEE Rev Biomed Eng. 7, 97-114 (2014).</li><li>Purschke, M., Rubio, N., Held, K. D., Redmond, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototoxicity+of+Hoechst+33342+in+time-lapse+fluorescence+microscopy.">Phototoxicity of Hoechst 33342 in time-lapse fluorescence microscopy.</a> Photochem Photobiol Sci. 9 (12), 1634-1639 (2010).</li><li>Jaskova, K., Pavlovicova, M., Jurkovicova, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+transporters+and+their+role+in+the+development+of+neuronal+disease+and+neuronal+damage.">Calcium transporters and their role in the development of neuronal disease and neuronal damage.</a> Gen physiol biophys. 31 (4), 375-382 (2012).</li><li>Kieran, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+with+arimoclomol,+a+coinducer+of+heat+shock+proteins,+delays+disease+progression+in+ALS+mice.">Treatment with arimoclomol, a coinducer of heat shock proteins, delays disease progression in ALS mice.</a> Nat Med. 10 (4), 402-405 (2004).</li></ol>

Det finns två huvudsakliga metoder för att generera stabil cellinjer. Först tar flera veckor och kräver övergående transfection och motstånd urval av genomisk integrerad plasmid DNA vektorer. Andra tar några timmar med hjälp av lentivirus, att göra detta protokoll kan bli föremål för effektiva uttrycket av målproteinet i flera cellinjer med begränsad ansträngning. RESA-CMV vektor19 var en ihållande vektor att använda, med bevarade transduktion effektivitet och stabil transgenens ...

Protein är en biologisk process som felveckning proteiner gruppen upp och kan fungera som smittämnen vid neurodegenerativa sjukdomar (amyloidos). Karaktärisera protein aggregering är viktigt för att förstå rollen av aggregat i cellulär dysfunktion såväl som att underlätta upptäckten av nya faktorer som påverkar uppkomsten av patologin. Visualisering av fluorescens-märkta proteiner i levande celler är en kraftfull metod som kan bidra till utvecklingen av testmetoder för hög halt screening (HCS)1,2,3,4.
Amyotrofisk lateralskleros (ALS) betraktas som en proteopathic sjukdom som orsakas av närvaron av felveckning proteiner med benägenheten att aggregera och ackumuleras i motoriska nervceller i både familjär ALS (fALS) och sporadisk ALS (sALS)5,6 . En delmängd av ~ 20% av fALS fall är associerade med dominerande mutationer i den gen som kodar för enzymet cytosoliska antioxidant koppar-zink superoxid dismutase typ 1 (SOD1)7,8. Flera möjliga orsaker till denna genetiskt härledda dysfunktion har föreslagits, inklusive ändringar i struktur och funktion av SOD1 varianter, såsom avvikande stabilitet, ökad utspelas ränta och benägenhet att aggregera9, 10. Framför allt, den enda verifierade och potentiellt giftiga egendom delas av båda ALS-länkade SOD1-varianter och vildtyp (WT) SOD1 är en ökad benägenhet att bilda konkurrensbetingat protein aggregat eller proteinhaltiga inneslutningar11,12 . Felveckning muterat SOD1, är ständigt polyubiquitinated och förstörd av den ubiquitin-proteasomsystemet. Som ett resultat, leder en låg nivå av hämning av proteasom aktivitet till ansamling av muterade SOD1 aggregerar13,14, som bilda amorfa strukturer består av lösliga komponenter som kan byta med lösliga muterat SOD1 i cytosolen15. I synnerhet SOD1 mutant A4V (alanin vid kodon 4 ändras till valin) är den vanligaste ALS-orsakar mutationen, och leder till snabb neurodegeneration med en genomsnittlig överlevnadstid på mindre än 2 år efter sjukdom debut16. Biokemiskt, har SOD1 A4V en ökad tendens till monomerize, aggregera och bilda amyloid porer; dess por-liknande aggregat är liknande i andra sjukdom-länkade muterade former, såsom α-synuclein och β-amyloid protein17amyloid porer. För att studera dynamiken i SOD1-aggregat ackumulering, återstår metoder för övervakning av lösliga och olösliga SOD1 sammansatta former utvecklas.
Vi har tidigare visat, med hjälp av live-cell imaging och HEK-293 celler transfekterade normalnivå med fluorescerande protein-taggade SOD1, att ALS-mutationer försämra SOD1 dimerization och aggregering11. Även om övergående uttryck system kan ge användbar information om biologiska resultatet av kortsiktiga gen överuttryck, kan metoder som stabil integrering av önskad gener vara att föredra för assay utveckling. Som sådan, erbjuder lentiviral vektorer möjligheten att ge långsiktiga och reglerat genuttryck på däggdjursceller 18. I denna studie fokuserade vi på generering av stabil cellinjer sensorik med rekombinant lentivirus bär WT och muterat SOD1 märkta med gula fluorescerande protein (YFP). Använda live-cell imaging mikroskopi och automatiserade kvantifiering av SOD1 aggregering, vi utlöses och kvantifierade SOD1 aggregering händelser vid hämning av proteasomen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ALLN (C20H37N3O4)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>208719</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MG132 (C26H41N3O5)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C2211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoxomicin (C28H50N4O7)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E3652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>H-3570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opera</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>OP-QEHS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opera EvoShell software</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Ver 1.8.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operetta</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>OPRT1288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harmony Imaging software</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Ver 3.0.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Columbus Image analysis software</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Ver 2.3.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CyBi Hummingwell liquid handling</td>
			<td>CyBio AG</td>
			<td>OL 3387 3 0110</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assay development for high content quantification of sod1 mutant protein aggregate formation in living cells

Amyotrofisk lateralskleros (ALS) är en dödlig neurodegenerativ sjukdom som kan orsakas av ärftliga mutationer i den gen kodning koppar-zink superoxid dismutase 1 (SOD1). Strukturella instabiliteten i SOD1 och upptäckt av SOD1-positiv införanden i familjär-ALS-patienter stöder en potentiell kausal roll för felveckning och/eller aggregerade SOD1 i ALS patologi. I denna studie beskriver vi utvecklingen av en cell-baserad analys för att kvantifiera dynamiken i SOD1 aggregation i levande celler av hög halt screening metoder. Använder lentiviral vektorer, genererade vi stabila cellinjer som uttrycker vildtyp och muterade A4V SOD1 märkta med gula fluorescerande protein och fann att båda proteiner uttrycktes i cytosolen utan några tecken på aggregering. Intressant, endast SOD1 A4V uttryckt stabilt i HEK-293, men i U2OS eller SH-SY5Y cellinjer, bildas inte aggregat vid proteasom-hämmare behandling. Vi visar att det är möjligt att kvantifiera aggregering baserat på dos-respons analys av olika proteasomhämmare, och spåra aggregat-formation kinetik av time-lapse mikroskopi. Vår metod införs möjligheten att kvantifiera effekten av ALS mutationer på rollen av SOD1 i sammanlagda formation samt screening för små molekyler som hindrar SOD1 A4V aggregation.

Genererar stabil cellinje med lentivirus: Den övergripande strategin för övervakning av SOD1 protein aggregat illustreras i figur 1. I ett första steg genererade vi en lentiviral uttryck vektor för SOD1 stabil gen leverans i cellinjer (steg 1). Två lentiviral vektorer kodning YFP-taggade SOD1 WT och SOD1 A4V (SOD1WT-YFP och SOD1A4V-YFP, respektive) med packning och kuvert plasmider utarbetades (figur 2A). V...

Watch this Scientific Journal Video about Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells at JoVE.com

Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells

Vi beskriver en metod för att kvantifiera sammanläggning av felveckning proteiner. Våra protokolldetaljer lentiviral inducerad stabil cell linje generation, automatiserade confocal bildbehandling och bildanalys av protein aggregat. Som ett belysande program studerat vi effekten av små molekyler att främja SOD1 aggregation i en tid - och dosberoende sätt.

Assay utveckling för hög innehåll kvantifiering av Sod1 Mutant Protein sammanlagda bildandet i levande celler

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that can be caused by inherited mutations in the gene encoding copper-zinc ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High Sensitivity 5-hydroxymethylcytosine Detection in Balb/C Brain Tissue

Hög känslighet 5-hydroxymethylcytosine Påvisande i BALB / C hjärnvävnad

DNA hydroxymethylation is a long known modification of DNA, but has recently become a focus in epigenetic research.   Mammalian DNA is enzymatically ...

Preparation of Living Isolated Vertebrate Photoreceptor Cells for Fluorescence Imaging

Beredning av Living Isolerade Vertebrate ljusmätare celler för fluorescens avbildning

In the vertebrate retina, phototransduction, the conversion of light to an electrical signal, is carried out by the rod and cone photoreceptor cells1-4.  ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sekventiell fotoblekningsreaktion att avgränsa Single Schwann celler vid den neuromuskulära förbindelsen

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

A Quantitative Cell Migration Assay for Murine Enteric Neural Progenitors

En kvantitativ cellmigrationsassay för Murina Enter Neural stamfäder

Neural crest cells (NCC) are a transient and multipotent cell population that originates from the dorsal neural tube and migrates extensively throughout ...

A High Content Imaging Assay for Identification of Botulinum Neurotoxin Inhibitors

En hög halt Imaging analys för Identifiering av botulinneurotoxin hämmare

Synaptosomal-associated protein-25 (SNAP-25) is a component of the soluble NSF attachment protein receptor (SNARE) complex that is essential for synaptic ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Enkel analys för kvantifiering av social Undvikande i<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Högupplöst Kvantifiering av Lukt styrd Beteende i<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Använda<em&gt; Flywalk</em&gt; Paradigm

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay

High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay

Hög genomströmning analys av rörelseapparaten beteende i Drosophila ön analysen

Advances in next-generation sequencing technologies contribute to the identification of (candidate) disease genes for movement disorders and other ...

High-resolution Confocal Imaging of the Blood-brain Barrier: Imaging, 3D Reconstruction, and Quantification of Transcytosis

Högupplösta Confocal avbildning av den Blood - brain barriären: bildbehandling, 3D rekonstruktion och kvantifiering av transcytos

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic multicellular interface that regulates the transport of molecules between the circulation and the brain. ...

A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae

A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae

En temperaturgradient analysen att bestämma termisk preferenser av Drosophila larver

Many animals, including the fruit fly, Drosophila melanogaster, are capable of discriminating minute differences in&#160;environmental temperature, which ...