Name: overexpression and purification of human cis-prenyltransferase in escherichia coli
Uploaded: 2017-08-03T15:00:00
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इस काम को इजरायल साइंस फाउंडेशन के सेंटर फॉर रिसर्च एक्सलेंस (आई-कोर) स्ट्रक्चरल सेल बायोलॉजी (1775/12) में और ईसाई साइंस फाउंडेशन ने 1721/16 और 2338/16 (वाईएच), और 825/14 (डीके) को अनुदान दिया था। )। फील्ड्स एस्टेट फाउंडेशन डीके की सहायता की अत्यधिक सराहना की गई है। यह काम इलान एडीरी ​​और माइकल गोल्डनबर्ग द्वारा किया गया था जिसमें मेकडीन के स्केकलर फैकल्टी ऑफ़ तेल अवीव विश्वविद्यालय की एमडी थीसिस आवश्यकताओं की आंशिक पूर्ति हुई थी।

1 ई। कोलाई में ओवरेक्प्रेसियन के लिए सीआईएस- पीटी के क्लोनिंग <ol><li> पीएटी -32 बी एक्सप्रेशन वेक्टर को प्राप्त करें, जो क्लोनिंग और प्रोटीन अनुक्रमों की उच्च-स्तरीय अभिव्यक्ति के लिए तैयार की गई है ज...

<ol>
	<li>Grabinska, K. A., Park, E. J., Sessa, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cis-Prenyltransferase:+New+Insights+into+Protein+Glycosylation,+Rubber+Synthesis,+and+Human+Diseases.">cis-Prenyltransferase: New Insights into Protein Glycosylation, Rubber Synthesis, and Human Diseases.</a> J Biol Chem. 291 (35), 18582-18590 (2016).</li><li>Ogura, K., Koyama, T., Sagami, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyprenyl+diphosphate+synthases.">Polyprenyl diphosphate synthases.</a> Subcell Biochem. 28, 57-87 (1997).</li><li>Ogura, K., Koyama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enzymatic+Aspects+of+Isoprenoid+Chain+Elongation.">Enzymatic Aspects of Isoprenoid Chain Elongation.</a> Chem Rev. 98 (4), 1263-1276 (1998).</li><li>Imperiali, B., O'Connor, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+N-linked+glycosylation+on+glycopeptide+and+glycoprotein+structure.">Effect of N-linked glycosylation on glycopeptide and glycoprotein structure.</a> Curr Opin Chem Biol. 3 (6), 643-649 (1999).</li><li>Bukhtiyarov, Y. E., Shabalin, Y. A., Kulaev, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solubilization+and+characterization+of+dehydrodolichyl+diphosphate+synthase+from+the+yeast+Saccharomyces+carlsbergensis.">Solubilization and characterization of dehydrodolichyl diphosphate synthase from the yeast Saccharomyces carlsbergensis.</a> J Biochem. 113 (6), 721-728 (1993).</li><li>Adair, W. L., Cafmeyer, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Saccharomyces+cerevisiae+cis-prenyltransferase+required+for+dolichyl+phosphate+biosynthesis.">Characterization of the Saccharomyces cerevisiae cis-prenyltransferase required for dolichyl phosphate biosynthesis.</a> Arch Biochem Biophys. 259 (2), 589-596 (1987).</li><li>Zelinger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+missense+mutation+in+DHDDS,+encoding+dehydrodolichyl+diphosphate+synthase,+is+associated+with+autosomal-recessive+retinitis+pigmentosa+in+Ashkenazi+Jews.">A missense mutation in DHDDS, encoding dehydrodolichyl diphosphate synthase, is associated with autosomal-recessive retinitis pigmentosa in Ashkenazi Jews.</a> Am J Hum Genet. 88 (2), 207-215 (2011).</li><li>Zuchner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-exome+sequencing+links+a+variant+in+DHDDS+to+retinitis+pigmentosa.">Whole-exome sequencing links a variant in DHDDS to retinitis pigmentosa.</a> Am J Hum Genet. 88 (2), 201-206 (2011).</li><li>Tropea, J. E., Cherry, S., Waugh, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+and+purification+of+soluble+His(6)-tagged+TEV+protease.">Expression and purification of soluble His(6)-tagged TEV protease.</a> Methods Mol Biol. 498, 297-307 (2009).</li><li>Crouse, G. F., Frischauf, A., Lehrach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+and+simplified+approach+to+cloning+into+plasmids+and+single-stranded+phages.">An integrated and simplified approach to cloning into plasmids and single-stranded phages.</a> Methods Enzymol. 101, 78-89 (1983).</li><li>Middelberg, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process-scale+disruption+of+microorganisms.">Process-scale disruption of microorganisms.</a> Biotechnol Adv. 13 (3), 491-551 (1995).</li><li>Block, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immobilized-metal+affinity+chromatography+(IMAC):+a+review.">Immobilized-metal affinity chromatography (IMAC): a review.</a> Methods Enzymol. 463, 439-473 (2009).</li><li>Sachyani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+basis+of+a+Kv7.1+potassium+channel+gating+module:+studies+of+the+intracellular+c-terminal+domain+in+complex+with+calmodulin.">Structural basis of a Kv7.1 potassium channel gating module: studies of the intracellular c-terminal domain in complex with calmodulin.</a> Structure. 22 (11), 1582-1594 (2014).</li><li>Shuart, N. G., Haitin, Y., Camp, S. S., Black, K. D., Zagotta, W. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanism+for+3:1+subunit+stoichiometry+of+rod+cyclic+nucleotide-gated+ion+channels.">Molecular mechanism for 3:1 subunit stoichiometry of rod cyclic nucleotide-gated ion channels.</a> Nat Commun. 2, 457 (2011).</li><li>Chang, S. Y., Tsai, P. C., Tseng, C. S., Liang, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refolding+and+characterization+of+a+yeast+dehydrodolichyl+diphosphate+synthase+overexpressed+in+Escherichia+coli.">Refolding and characterization of a yeast dehydrodolichyl diphosphate synthase overexpressed in Escherichia coli.</a> Protein Expr Purif. 23 (3), 432-439 (2001).</li><li>Chang, S. Y., Ko, T. P., Liang, P. H., Wang, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+mechanism+revealed+by+the+crystal+structure+of+undecaprenyl+pyrophosphate+synthase+in+complex+with+sulfate,+magnesium,+and+triton.">Catalytic mechanism revealed by the crystal structure of undecaprenyl pyrophosphate synthase in complex with sulfate, magnesium, and triton.</a> J Biol Chem. 278 (31), 29298-29307 (2003).</li><li>Guo, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crystal+structures+of+undecaprenyl+pyrophosphate+synthase+in+complex+with+magnesium,+isopentenyl+pyrophosphate,+and+farnesyl+thiopyrophosphate:+roles+of+the+metal+ion+and+conserved+residues+in+catalysis.">Crystal structures of undecaprenyl pyrophosphate synthase in complex with magnesium, isopentenyl pyrophosphate, and farnesyl thiopyrophosphate: roles of the metal ion and conserved residues in catalysis.</a> J Biol Chem. 280 (21), 20762-20774 (2005).</li><li>Collins, F. S., Green, E. D., Guttmacher, A. E., Guyer, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+vision+for+the+future+of+genomics+research.">A vision for the future of genomics research.</a> Nature. 422 (6934), 835-847 (2003).</li><li>Freeze, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+human+glycosylation+disorders:+biochemistry+leads+the+charge.">Understanding human glycosylation disorders: biochemistry leads the charge.</a> J Biol Chem. 288 (10), 6936-6945 (2013).</li><li>LaVallie, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thioredoxin+gene+fusion+expression+system+that+circumvents+inclusion+body+formation+in+the+E.+coli+cytoplasm.">A thioredoxin gene fusion expression system that circumvents inclusion body formation in the E. coli cytoplasm.</a> Biotechnology (N Y). 11 (2), 187-193 (1993).</li><li>Elena, C., Ravasi, P., Castelli, M. E., Peiru, S., Menzella, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+codon+optimized+genes+in+microbial+systems:+current+industrial+applications+and+perspectives.">Expression of codon optimized genes in microbial systems: current industrial applications and perspectives.</a> Front Microbiol. 5, 21 (2014).</li><li>Vincentelli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+protein+expression+screening+and+purification+in+Escherichia+coli.">High-throughput protein expression screening and purification in Escherichia coli.</a> Methods. 55 (1), 65-72 (2011).</li></ol>

ई। कोलाई कोशिकाओं में कार्यात्मक मानव डीएचडीडी के शुद्धिकरण के लिए यहां वर्णित प्रोटोकॉल सरल और कुशल है, एक को एक अतिरंजित करने और 3-4 दिनों में प्रोटीन को शुद्ध करने के लिए उपयुक्त निर्माण उपलब्ध ह?...

Prenyltransferases एंजाइमों का एक समूह है जो कई संक्षेपण प्रतिक्रियाओं 1 , 2 के माध्यम से आइसोपेंटेनिइल डिफोस्फेट (आईपीपी) का उपयोग करते हुए एलिलिसीक डीफोसफेट की श्रृंखला बढ़ाव उत्प्रेरित करता है। Z- प्रकार एंजाइम कंडेनसेशन प्रतिक्रिया से सीआईएस डबल बॉन्ड के गठन को उत्प्रेरित करते हैं, जबकि ई-टाइप एंजाइम ट्रांस डबल बांड गठन 3 उत्प्रेरित करते हैं। सीआईएस -पीनिल ट्रांस्फेरेसेस ( सीआईएस- पीटी, जेड-टाइप एंजाइम) को वर्गीकृत अपने उत्पाद श्रृंखला लंबाई के अनुसार शॉर्ट-चेन (सी 15 ), मध्यम-श्रृंखला (सी 50-55 ), और लंबी श्रृंखला (सी 70-120 4 ) डीएचडीडीएस (डीहाइड्रोडोलिचिल डिफोसफेट सिन्थेस) एक यूकेरियोटिक लंबे-सीन सीआईएस -पीटी है जो एनोपेंटेनिइल डिफोस्फेट (आईपीपी) 1 के साथ कई कंडेनसेज के माध्यम से फेर्नसील डिफोस्फेट (एफपीपी, एक एलिलिसीक डीफोहोसेट) की चेन बढ़ाव को उत्प्रेरित करता है, 5 , 6 इसका परिणाम डीहाइड्रोडोलिचिल डिफोसाइट के गठन में होता है, एक सी 55-100 पॉलीपेरेन डाइफोसाफेट, डोलिचिलप्रोफॉस्फेट के लिए अग्रदूत के रूप में सेवा कर रहा है, एन-लिंक्ड प्रोटीन ग्लाइकोसिलेशन 1 में शामिल ग्लाइकोसिल वाहक अणु। एश्केनाज़ी यहूदियों के बीच, डीएचडीडीएस के परिणाम में गैर-रूढ़िवादी उत्परिवर्तन (के 42 ई) के परिणामस्वरूप आटोसॉमल अपैसिव रेटिनिटिस पगमेंटोसा 7 , 8 में परिणाम होता है। इसलिए, यांत्रिक प्रोटोकॉल विकसित करने के लिए विकसित किया गया था ताकि उचित डीएचडीडी को यांत्रिक अध्ययनों के लिए उपयुक्त बनाया जा सके। Escherichia कोलाई पुनः संयोजक प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए सबसे सुविधाजनक और लागत प्रभावी मेजबान माना जाता है, और इसलिए यह सबसे अधिक बार इस्तेमाल किया मेजबान है। हालांकि, जब ई। कोलाई में अतिरंजित रूप से अतिप्रभावी प्रोटीन का प्रयास करता है, प्रोटीन-विशिष्ट विचार किया जाना चाहिए। ठीक से मुड़ा हुआ, सक्रियई । कोलाई से पुनः संयोजक प्रोटीन, विभिन्न प्रोटीनों के विशिष्ट गुणों के कारण एक साधारण मामला नहीं है। इन बाधाओं पर काबू पाने के लिए कई दृष्टिकोण विकसित किए गए हैं यहां, ई। कोलाई में कार्यात्मक रूप से सक्रिय मानव डीएचडीडीएस के अतिवृद्धि और शुद्धि की अनुमति देने के लिए प्रोटीन संलयन, अनुकूलित संस्कृति परिस्थितियों और कोडोन-अनुकूलन का उपयोग किया गया था। नोट, डिटर्जेंट 12 की उपस्थिति में भी अस्थिरता को पूरा करने के कारण प्रोटीन संलयन के बिना खमीर सीआईएस- पीटी के अति पिछड़ने की कोशिश में असफल रहा। वर्णित प्रोटोकॉल सरल, लागत प्रभावी, समय बख़्तरबंद है और एक को तंत्रिकी अध्ययन के लिए उपयुक्त DHDDS की तैयारी प्राप्त करने की अनुमति देता है। विभिन्न प्रजातियों में सीआईएस- पीटी के अनुरूपता को देखते हुए, हम सुझाव देते हैं कि इस प्रोटोकॉल को अन्य यूकेरियोटिक सीआईएस- पीटी के लिए भी लागू किया जा सकता है।

<table width="751">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">pET-32b</td>
			<td style="width:100px;">Novagen</td>
			<td style="width:119px;">69016-3</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">T7 Express&#160;lysY&#160;Competent&#160;E. coli&#160;(High Efficiency)</td>
			<td style="width:100px;">NEB</td>
			<td>C3010I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:365px;height:42px;">cOmplete, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail</td>
			<td style="width:100px;">Roche</td>
			<td style="width:119px;">11873580001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">TALON-superflow resin</td>
			<td style="width:100px;">GE Healthcare</td>
			<td>28-9574-99</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">HiPrep 26/10 desalting column&#160;</td>
			<td style="width:100px;">GE Healthcare</td>
			<td>17508701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">HiLoad 16/60 superdex-200&#160;</td>
			<td style="width:100px;">GE Healthcare</td>
			<td>28989335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">superdex-200 increase 5/150 GL&#160;</td>
			<td style="width:100px;">GE Healthcare</td>
			<td>28990945</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">14C-Isopentenyl pyrophosphate</td>
			<td style="width:100px;">Perkin-Elmer</td>
			<td>NEC773050UC&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">trans,trans-Farnesyl pyrophosphate</td>
			<td style="width:100px;">Sigma</td>
			<td>44270-10MG</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

overexpression and purification of human cis-prenyltransferase in escherichia coli

Prenyltransferases (पीटी) एंजाइमों का एक समूह है जो कई संक्षेपण प्रतिक्रियाओं के माध्यम से आईओपेंटेनिऑल डिफोस्फेट (आईपीपी) का उपयोग करते हुए एलिलिसीक डीफोसफेट की श्रृंखला बढ़ाव उत्प्रेरित करता है। डीएचडीडीएस (डीहाइड्रोडोलिचिल डीफोसफेट सिंथेस) एक यूकेरियोटिक लंबे-सीन सीआईएस -पीटी (संघनन प्रतिक्रिया से सीआईएस डबल बॉन्ड बनाने) है जो कि आईओपेंटेनिइल डिफोस्फेट (आईपीपी) के साथ कई संघनन के माध्यम से फेर्नसील डिफोफेट (एफपीपी, एक एलिलिसीक डीफोसफेट) की चेन बढ़ाव को उत्प्रेरित करता है। डीएचडीडीएस बायोमेडिकल महत्व का है, जैसे गैर-रूढ़िवादी उत्परिवर्तन (के 42 ई) में रेटिनाइटिस पगमेन्टोसा में एंजाइम के परिणाम, अंततः अंधापन हो जाता है। इसलिए, यांत्रिक प्रोटोकॉल विकसित करने के लिए विकसित किया गया था ताकि बड़े पैमाने पर शुद्ध डीएचडीडी प्राप्त हो सके, जो यांत्रिक अध्ययनों के लिए उपयुक्त हो। यहां, प्रोटीन संलयन, अनुकूलित संस्कृति परिस्थितियों और कोडोन-अनुकूलन के उपयोग को कार्यात्मक रूप से सक्रिय मानव डीएचडीडीएस में अत्यधिक विषमता और शुद्धि की अनुमति देने के लिए उपयोग किया गया था <eमीटर&gt; ई। कोली वर्णित प्रोटोकॉल सरल, लागत प्रभावी और समय बख्शते है। विभिन्न प्रजातियों के बीच सीआईएस- पीटी के समरूपता से पता चलता है कि इस प्रोटोकॉल को अन्य यूकेरियोटिक सीआईएस- पीटी के लिए भी लागू किया जा सकता है, जैसे प्राकृतिक रबर संश्लेषण में शामिल लोगों के रूप में।

यहां इस्तेमाल किए गए निर्माण का सामान्य अवलोकन और शुद्धि प्रक्रिया चित्रा 1 में दिखाया गया है। प्रत्येक शुद्धि चरण में प्राप्त नमूने चित्रा 2 में दिखाए गए हैं। यह एस?...

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Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Overexpression और कोडोन अनुकूलित, मानव सिस -prenyltransferase की शुद्धि के लिए एक सरल प्रोटोकॉल, गैर denaturing शर्तों के तहत, Escherichia से कोली , एक एंजाइमेटिक गतिविधि परख के साथ, वर्णित है। इस प्रोटोकॉल को अन्य सीआईएस- पे्रेनिल्रांसफेरेज प्रोटीन के उत्पादन के लिए सामान्यीकृत किया जा सकता है, जो यांत्रिक अध्ययनों के लिए उपयुक्त मात्रा और गुणवत्ता में है।

ओवेरेक्स्पेशन एंड हेरिंग ऑफ ह्यूमन<em&gt; सीआईएस</em&gt; -प्रेनिलट्रांसफ़्रेज़ इन<em&gt; एस्चेरिचिया कोली</em

Prenyltransferases (PT) are a group of enzymes that catalyze chain elongation of allylic diphosphate using isopentenyl diphosphate (IPP) via multiple ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

विस्तार, शोधन, और मानव परिधीय रक्त एन.के. कोशिकाओं के कार्यात्मक मूल्यांकन

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

सेल भाग्य का पालन<em&gt; ई. कोलाई</em&gt; फेज Lambda द्वारा संक्रमण के बाद

The system comprising bacteriophage (phage) lambda and the bacterium E. coli has long served as a paradigm for cell-fate determination1,2. Following the ...

Assessing Somatic Hypermutation in Ramos B Cells after Overexpression or Knockdown of Specific Genes

रामोस बी कक्ष में या विशिष्ट जीन की Overexpression नॉकडाउन के बाद दैहिक Hypermutation मूल्यांकन

B cells start their life with low affinity antibodies generated by V(D)J recombination.  However, upon detecting a pathogen, the variable (V) region of an ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

प्राथमिक मानव टी कोशिकाओं की piggyBac Transposon सिस्टम संशोधन

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Neuropathogenic की गैर इनवेसिव मॉडल<em&gt; Escherichia कोलाई</em&gt; नवजात चूहे में संक्रमण

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

One-step Negative Chromatographic Purification of Helicobacter pylori Neutrophil-activating Protein Overexpressed in Escherichia coli in Batch Mode

One-step Negative Chromatographic Purification of Helicobacter pylori Neutrophil-activating Protein Overexpressed in Escherichia coli in Batch Mode

एक कदम की नकारात्मक Chromatographic शोधन<em&gt; हेलिकोबेक्टर</em&gt; न्युट्रोफिल सक्रिय प्रोटीन में overexpressed<em&gt; कोलाई</em&gt; बैच मोड में

Helicobacter pylori neutrophil-activating protein (HP-NAP) is a major virulence factor of Helicobacter pylori (H. pylori). It plays a critical role in H. ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

मानव पूरे रक्त में प्राकृतिक हत्यारा सेल Lytic गतिविधि का प्रवाह cytometric विश्लेषण

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

Vivo Bioluminescence System में गैर-इनवेसिव द्वारा Murine होस्ट में Enterohemorrhagic ई कोलाई औपनिवेशीकरण का पता लगाना

Enterohemorrhagic E. coli (EHEC) O157:H7, which is a foodborne pathogen that causesdiarrhea, hemorrhagic colitis (HS), and hemolytic uremic syndrome ...

Creation of a Dense Transposon Insertion Library Using Bacterial Conjugation in Enterobacterial Strains Such As Escherichia Coli or Shigella flexneri

Creation of a Dense Transposon Insertion Library Using Bacterial Conjugation in Enterobacterial Strains Such As Escherichia Coli or Shigella flexneri

ऐसे ई कोलाई या शिगेला flexneri के रूप में Enterobacterial उपभेदों में बैक्टीरियल विकार का उपयोग कर एक घने Transposon प्रविष्टि पुस्तकालय का निर्माण

Transposon mutagenesis is a method that allows gene disruption via the random genomic insertion of a piece of DNA called a transposon. The protocol below ...

A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli

A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli

साइट उत्पंन करने के लिए एक सतही प्रोटोकॉल-विशेष रूप से ई कोलाई में Acetylated प्रोटीन

Post-translational modifications that occur at specific positions of proteins have been shown to play important roles in a variety of cellular processes. ...