Name: laminotomy for lumbar dorsal root ganglion access and injection in swine
Uploaded: 2017-10-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine at JoVE.com

O estudo foi realizado com o apoio pela Fundação da família de Schulze (para A.S.B.).

todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo cuidado institucional do Animal e Comissão de utilização (IACUC) da clínica Mayo.
 1. pré-requisitos de Rigor e reprodutibilidade <ol><li>para garantir o rigor do desenho, siga os padrões nacionais de laboratório boa práticas estão em todos os momentos e obterem aprovação interna por IACUC (ou comitê semelhante) antes de qualquer animal envolvimento em experiências. 
	Nota: Este protocolo foi projetado para manter uma a...

<ol>
	<li>Millan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+induction+of+pain:+An+integrative+review.">The induction of pain: An integrative review.</a> Prog Neurobiol. 57 (1), 1-164 (1999).</li><li>Burma, N. E., Leduc-Pessah, H., Fan, C. Y., Trang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+chronic+pain:+Advances+and+challenges+for+clinical+translation.">Animal models of chronic pain: Advances and challenges for clinical translation.</a> J Neurosci Res. , (2016).</li><li>Pleticha, J., Maus, T. P., Beutler, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Future+directions+in+pain+management:+integrating+anatomically+selective+delivery+techniques+with+novel+molecularly+selective+agents.">Future directions in pain management: integrating anatomically selective delivery techniques with novel molecularly selective agents.</a> Mayo Clin Proc. 91 (4), 522-533 (2016).</li><li>Standring, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The anatomical basis of clinical practice. , (2005).</li><li>Fischer, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+injection+into+the+dorsal+root+ganglion:+technical,+behavioral,+and+histological+observations.">Direct injection into the dorsal root ganglion: technical, behavioral, and histological observations.</a> J Neurosci Methods. 199 (1), 43-55 (2011).</li><li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+long+noncoding+RNA+contributes+to+neuropathic+pain+by+silencing+Kcna2+in+primary+afferent+neurons.">A long noncoding RNA contributes to neuropathic pain by silencing Kcna2 in primary afferent neurons.</a> Nat Neurosci. 16 (8), 1024-1031 (2013).</li><li>Xu, Y., Gu, Y., Wu, P., Li, G. W., Huang, L. Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficiencies+of+transgene+expression+in+nociceptive+neurons+through+different+routes+of+delivery+of+adeno-associated+viral+vectors.">Efficiencies of transgene expression in nociceptive neurons through different routes of delivery of adeno-associated viral vectors.</a> Hum Gene Ther. 14 (9), 897-906 (2003).</li><li>Puljak, L., Kojundzic, S. L., Hogan, Q. H., Sapunar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+delivery+of+pharmacological+agents+into+rat+dorsal+root+ganglion.">Targeted delivery of pharmacological agents into rat dorsal root ganglion.</a> J Neurosci Methods. 177 (2), 397-402 (2009).</li><li>Mason, M. R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+AAV+serotypes+for+gene+delivery+to+dorsal+root+ganglion+neurons.">Comparison of AAV serotypes for gene delivery to dorsal root ganglion neurons.</a> Mol Ther. 18 (4), 715-724 (2010).</li><li>Jelicic Kadic, A., Boric, M., Kostic, S., Sapunar, D., Puljak, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+intraganglionic+injection+of+calcium/calmodulin-dependent+protein+kinase+II+inhibitors+on+pain-related+behavior+in+diabetic+neuropathy.">The effects of intraganglionic injection of calcium/calmodulin-dependent protein kinase II inhibitors on pain-related behavior in diabetic neuropathy.</a> Neurosci. 256, 302-308 (2014).</li><li>Greenberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of neurosurgery. , (2010).</li><li>Yu, H., Fischer, G., Hogan, Q. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAV-mediated+gene+transfer+to+dorsal+root+ganglion.">AAV-mediated gene transfer to dorsal root ganglion.</a> Methods Mol Biol. 1382, 251 (2016).</li><li>Yaksh, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacology+and+toxicology+of+chronically+infused+epidural+clonidine+HCL+in+dogs.">Pharmacology and toxicology of chronically infused epidural clonidine HCL in dogs.</a> Toxicol Sci. 23 (3), 319-335 (1994).</li><li>Federici, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+for+spinal+cord+delivery+of+therapies:+demonstration+of+procedure+in+gottingen+minipigs.">Surgical technique for spinal cord delivery of therapies: demonstration of procedure in gottingen minipigs.</a> J Vis Exp. (70), e4371 (2012).</li><li>Lee, J. H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+porcine+model+of+traumatic+thoracic+spinal+cord+injury.">A novel porcine model of traumatic thoracic spinal cord injury.</a> J Neurotrauma. 30 (3), 142-159 (2013).</li><li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy:+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs.">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36 (3), e164 (2011).</li><li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+stem+cell+transplantation+in+amyotrophic+lateral+sclerosis:+A+phase+I+safety+trial,+technical+note,+and+lumbar+safety+outcomes.">Intraspinal stem cell transplantation in amyotrophic lateral sclerosis: A phase I safety trial, technical note, and lumbar safety outcomes.</a> Neurosurg. 71 (2), 405-416 (2012).</li><li>Olmarker, K., Holm, S., Rosenqvist, A., Rydevik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+nerve+root+compression.++A+model+of+acute,+graded+compression+of+the+porcine+cauda+equina+and+an+analysis+of+neural+and+vascular+anatomy.">Experimental nerve root compression. A model of acute, graded compression of the porcine cauda equina and an analysis of neural and vascular anatomy.</a> Spine. 16 (1), 61-69 (1991).</li><li>Bobo, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convection-enhanced+delivery+of+macromolecules+in+the+brain.">Convection-enhanced delivery of macromolecules in the brain.</a> Proc Natl Acad Sci U.S.A. 91 (6), 2076-2080 (1994).</li><li>Lonser, R. R., Sarntinoranont, M., Morrison, P. F., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convection-enhanced+delivery+to+the+central+nervous+system.">Convection-enhanced delivery to the central nervous system.</a> J Neurosurg. 122 (3), 697-706 (2015).</li><li>Shen, J., Wang, H. Y., Chen, J. Y., Liang, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphologic+analysis+of+normal+human+lumbar+dorsal+root+ganglion+by+3D+MR+imaging.">Morphologic analysis of normal human lumbar dorsal root ganglion by 3D MR imaging.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 27 (0195–6108 (Print)), 2098-2103 (2006).</li><li>Pleticha, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+convection-enhanced+delivery+of+biologics+into+dorsal+root+ganglia:+validation+in+the+pig+model+and+prospective+modeling+in+humans.">Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans.</a> J Neurosurg. 121 (4), 851-858 (2014).</li></ol>

Procuramos descrever um método de exposição cirúrgica de DRG através de laminotomy e injeção de intraganglionic em uma espécie animal saudável, especificamente, a suína. Em roedores, um método semelhante foi detalhada 12 e usado para entregar agentes farmacológicos convencionais 8,10 e vetores virais 6,7,9,<sup clas...

Gânglios da raiz dorsal (DRG) são coleções anatomicamente discretas, neuronais, localizadas ao longo da coluna vertebral. Cada DRG contém os neurônios sensoriais primários que codificam e transmitir estímulos periféricos ao sistema nervoso central (SNC) de regiões específicas do corpo. Por exemplo, a dor da osteoartrite começa quando os receptores de dor localizados sobre uma articulação percebem estímulos nocivos. Este processo é denominado de nocicepção. Consciência a longo prazo dos estímulos nocivos leva à dor crônica 1.
Dor crônica é um tema frequente de estudo pré-clínicos 2 onde um dos objetivos é desenvolver métodos úteis para entrega alvo de analgésicos a DRG, tais como a injeção de intraganglionic 3. No entanto, DRG são difíceis de acesso porque eles residem dentro dos limites magrela do Forame intervertebral 4. Vários grupos superaram com êxito este obstáculo através do uso de cirurgia da coluna vertebral em roedores 5,6,7,8,9,10.
Na clínica, laminectomia é uma operação comum da coluna vertebral e refere-se a remoção cirúrgica da lâmina vertebral, desse modo unroofing o canal vertebral 11. Incorporação de técnicas cirúrgicas para permitir acesso direto de DRG tem sido bem sucedida em roedores 5,12, no entanto, a tradução pode ser irrealistas considerando diferenças no tamanho das estruturas relevantes e como isso influencia farmacocinética ou viabilidade técnica 13,14. Por exemplo, um estudo determinou o diâmetro transversal da medula espinhal em T10 ser 3.0, 7.0 e 8,2 mm para humanos, respectivamente, 15, porco e rato. Assim, o animal grande modelos melhor humanas aproximadas de estruturas nervosas.
Em suínos, et al . Raore usado laminectomia multi-nível para obter acesso à medula espinhal cervical por múltiplas injeções intraspinal 16. O procedimento foi bem tolerado e levou a uma fase I ensaio clínico onde os resultados cirúrgicos comparáveis foram documentados 17. Estes resultados encorajam uso continuado de modelos pré-clínicos de animais grandes como preditores de viabilidade técnica e de segurança em humanos.
Até à data, nenhuma metodologia detalhada existe para acesso cirúrgico e injeção de DRG em uma espécie animal. Para diminuir esse fosso translacional, relatamos um protocolo para exposição DRG e injeção através de laminotomy em suínos. Materiais, instrumentos e técnicas neurocirúrgicas padrão foram utilizados e o método foi projetado para imitar a prática cirúrgica moderna. Demonstramos a injeção intraganglionic utilizando uma solução aquosa de DRG lombar e confirmar entrega bem sucedida através de histologia após dia pós-operatório 21.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1311">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Large humane animal sling</td>
			<td style="width:167px;">Britz &#38; Company</td>
			<td style="width:119px;">002539</td>
			<td style="width:484px;">Modified to include abdominal aperture</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Adhesive patient return electrode - 9 inch</td>
			<td style="width:167px;">Medtronic</td>
			<td style="width:119px;">E7506</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Ranger blood &#38; fluid warming system</td>
			<td style="width:167px;">3M</td>
			<td style="width:119px;">24500</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Lactated Ringer&#39;s fluid</td>
			<td style="width:167px;">Hospira</td>
			<td style="width:119px;">0409-7953-09</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Force air warming device</td>
			<td style="width:167px;">3M</td>
			<td style="width:119px;">77500</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:543px;">Duraprep solution with applicator, 26 ml (0.7% iodine povacrylex, 74% isopropyl alcohol</td>
			<td style="width:167px;">3M</td>
			<td style="width:119px;">8630</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Sterile disposable surgical towels</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDT2168286</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Ioban 2 incise drape</td>
			<td style="width:167px;">3M</td>
			<td style="width:119px;">6651EZSB</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Disposable suction canister and tubing</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">DYND44703H</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Button switch electrosurgical monopolar pencil</td>
			<td style="width:167px;">Medtronic</td>
			<td style="width:119px;">E2450H</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Fine smooth straight bipolar electrosurgical forceps, 4 1/2 inch</td>
			<td style="width:167px;">Bovie</td>
			<td style="width:119px;">A826</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">#15 blade</td>
			<td style="width:167px;">Miltex</td>
			<td style="width:119px;">4-315</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">#11 blade</td>
			<td style="width:167px;">Miltex</td>
			<td style="width:119px;">4-311</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">4x4 surgical gauze</td>
			<td style="width:167px;">Dynarex</td>
			<td style="width:119px;">3262</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Weitlaner self-retaining retractor, 8 inch</td>
			<td style="width:167px;">Miltex</td>
			<td style="width:119px;">11-618</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Meyerding self-retaining retractor, 1x2 3/8 inch</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">42-2078</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Gelpi self-retaining retractor, 7 inch</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">60-6570</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Freer elevator, 5 mm</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDS4641518F</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Bone wax</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">W31G</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Spurling intervertebral disc rongeur, 3 mm</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">42-2852</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Spurling 45-degree, up-biting Kerrison rongeur, 2 mm</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDS4052802</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Leksell angled rongeur, 2 mm</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">40-4097</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Gelfoam, size 50</td>
			<td style="width:167px;">Pfizer</td>
			<td style="width:119px;">AZL32301</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Cottonoid patty</td>
			<td style="width:167px;">Medtronic</td>
			<td style="width:119px;">8004007</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Frazier suction tip, 6 Fr</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">50-2006</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Frazier suction tip, 10 Fr</td>
			<td style="width:167px;">Sklar</td>
			<td style="width:119px;">50-2010</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Dandy blunt right angle nerve hook</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDS4005220</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Nylon suture, 6-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">697G</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Castroviejo smooth micro needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDG2428614</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">22 gauge Quinke point spinal needle</td>
			<td style="width:167px;">Halyard Health</td>
			<td style="width:119px;">18397</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:543px;">32 gauge CED needle with locking Luer hub</td>
			<td style="width:167px;">See comments</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:484px;">As in: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. Technical note. J Neurosurg. 121(4), 851-8 (2014).</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Polyethylene tubing, 5 feet</td>
			<td style="width:167px;">Scientific Commodities</td>
			<td style="width:119px;">BB31695-PE/05</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Monoject syringe, 3 ml</td>
			<td style="width:167px;">Kendall</td>
			<td style="width:119px;">SY15352</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">NanoJet syringe pump</td>
			<td style="width:167px;">Chemyx</td>
			<td style="width:119px;">10050</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">DAPI</td>
			<td style="width:167px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D9542</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Fast Green FCF</td>
			<td style="width:167px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">F7252</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Bulb irrigation syringe</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">DYND20125</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Fine-toothed Adson forceps</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDS1000212</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Vicryl suture, 0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">J603H</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Vicryl suture, 2-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">J317H</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Needle counter</td>
			<td style="width:167px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">NC20FBRGS</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:543px;">Steri-strip skin closure, 1/2x4 inch</td>
			<td style="width:167px;">3M</td>
			<td style="width:119px;">R1547</td>
			<td style="width:484px;">-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laminotomy for lumbar dorsal root ganglion access and injection in swine

Gânglios da raiz dorsal (DRG) são estruturas anatomicamente bem definidas que contêm todos os neurônios sensoriais primários abaixo da cabeça. Este fato faz DRG alvos atraentes para injeção da novela terapêutica visa tratamento de dor crônica. Em modelos animais pequenos, laminectomia tem sido usada para facilitar injeção DRG porque envolve a remoção cirúrgica do osso vertebral cercam cada DRG. Vamos demonstrar uma técnica para injeção intraganglionic de DRG lombar em uma espécie de animal grande, ou seja, a suína. Laminotomy é executada para permitir acesso direto a DRG utilizando materiais, instrumentos e técnicas neurocirúrgicas padrão. Comparado com a remoção de osso mais extensa através de laminectomia, implementamos laminotomy para conservar a anatomia da coluna vertebral ao conseguir acesso suficiente DRG. Progresso no intra-operatório de injeção DRG é monitorado usando uma tinta atóxica. Após eutanásia no pós-operatório dia 21, o sucesso da injeção é determinado pela histologia para distribuição intraganglionic de 4' 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). Injetamos uma solução biologicamente inativa para demonstrar o protocolo. Esse método pode ser aplicada no futuro pré-clínicos estudos para soluções terapêuticas alvo de DRG. Nossa metodologia deve facilitar a Traduzibilidade dos paradigmas animais pequenas intraganglionic próprios de teste em uma espécie animal. Além disso, este protocolo pode servir como um recurso fundamental para os estudos pré-clínicos de injeção DRG em suínos de planejamento.

Avaliação histológica de propagação injectate Sucesso na entrega de injectate de DRG é determinado pela avaliação histológica de DAPI se espalhou. A técnica envolve o posicionamento da ponta da agulha no centro tridimensional da RDG. Portanto, entrega bem sucedida é determinada pela avaliação da extensão da DAPI coloração de secções histológicas ambos perto (seções DRG centrais) e distante (seções DRG periféricas) para a ponta da agulha. Figura 1A ...

Watch this Scientific Journal Video about Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine at JoVE.com

Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine

Nós descrevemos um método para laminotomy em suínos que fornece acesso aos gânglios lombares raiz dorsal (DRG) para injeção intraganglionic. Progresso de injeção é monitorado no intraoperatório e histologicamente confirmado acima de 21 dias após a cirurgia. Este protocolo pode ser usado para futuros estudos pré-clínicos envolvendo injeção DRG.

Laminotomy para acesso de gânglio lombar Dorsal raiz e injeção em suínos

Dorsal root ganglia (DRG) are anatomically well defined structures that contain all primary sensory neurons below the head. This fact makes DRG attractive ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Cromatina imunoprecipitação de Tissue Dorsal Root Gânglios seguintes Lesão Axonal

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Neurociência

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

Estudo genético da regeneração do axônio com cultivadas Adulto neurônios do gânglio da raiz dorsal

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Medindo Spinal pré-sináptica Inibição em Ratos por raiz dorsal Gravação Potencial<em&gt; In Vivo</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

In Vitro Modelagem de Cancerous Neural Invasion: o gânglio Modelo de raiz dorsal

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These ...

An Approach to Enhance Alignment and Myelination of Dorsal Root Ganglion Neurons

Uma abordagem para reforçar Alinhamento e mielinização do gânglio de raiz dorsal neurônios

Axon regeneration is a chaotic process due largely to unorganized axon alignment. Therefore, in order for a sufficient number of regenerated axons to ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

Dorsal Root Injection gânglio da raiz dorsal e lesão por esmagamento como um modelo para Sensorial Axon Regeneração

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Analysis of Immune Cells in Single Sciatic Nerves and Dorsal Root Ganglion from a Single Mouse Using Flow Cytometry

Análise de células do sistema imunológico em único nervos ciático e gânglio da raiz Dorsal de um único rato usando citometria de fluxo

Nerve-resident immune cells in the peripheral nervous system (PNS) are essential to maintaining neuronal integrity in a healthy nerve. The immune cells of ...

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Investigação regeneração do axônio mamíferos: In Vivo Electroporation do gânglio de raiz Dorsal do rato adulto

Electroporation is an essential non-viral gene transfection approach to introduce DNA plasmids or small RNA molecules into cells. A sensory neuron in the ...

Use of In Vivo Single-fiber Recording and Intact Dorsal Root Ganglion with Attached Sciatic Nerve to Examine the Mechanism of Conduction Failure

Uso da gravação in vivo da único-fibra e do gânglio dorsal intacto da raiz com nervo sciatic Unido para examinar o mecanismo da falha da condução

Single-fiber recording has been a classical and effective electrophysiological technique over the last few decades because of its specific application for ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Isolação rápida de macrófagos dorsal do gânglio da raiz

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...