Name: methods for analyzing the impacts of natural uranium on in vitro osteoclastogenesis
Uploaded: 2018-01-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Analyzing the Impacts of Natural Uranium on In Vitro Osteoclastogenesis at JoVE.com

המחברים רוצה להודות קרו שנטל לסיוע טכני מועיל. מחקר זה מומן על ידי מענקים "במשרד à l'Energie Atomique et aux אנרגיות חלופות" (URANOs - תוכנית ואלכסוני דה Toxicologie du CEA ו- CEA CPRR-AREVA), וממנו ANR (רעילות של אורניום: רב ברמת הגישה של ביומינרליזציה תהליך בתוך עצם, ANR-16-CE34-0003.) עבודה זו גם נתמך על ידי אוניברסיטת סופיה נחמד-אנטיפוליס ואת ה-CNRS.

1. הכנת Uranyl אצטט פתרון
<ol><li>כדי להכין 2 מ ל 100 מ מ uranyl אצטט פתרון, להוסיף 85 מ"ג של uranyl אצטט (אז פרט להתמחות2(OCOCH3)2, 2 H2O; M = 424 g.mol-1) במצב מוצק צינור פלסטיק מ ל.</li>
	<li>להוסיף 2 מ ל מים מזוקקים צינור פלסטיק ולהתאים אותו עם פקק מפלסטיק.</li>
	<li>לנער את הצינור נמרצות עד התפרקות מו...

<ol>
	<li>Keith, S., Faroon, O., Roney, N., Scinicariello, F., Wilbur, S., Ingerman, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicological+profile+for+uranium.">Toxicological profile for uranium.</a> Agency for Toxic Substances and Disease Registry. , (2013).</li><li>Ballou, J. E., Gies, R. A., Case, A. C., Haggard, D. L., Buschbom, R. L., Ryan, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deposition+and+early+disposition+of+inhaled+233UO2(NO3)2+and+232UO2(NO3)2+in+the+rat.">Deposition and early disposition of inhaled 233UO2(NO3)2 and 232UO2(NO3)2 in the rat.</a> Health Phys. 51 (6), 755-771 (1986).</li><li>Kathren, R. L., McInroy, J. F., Moore, R. H., Dietert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uranium+in+the+tissues+of+an+occupationally+exposed+individual.">Uranium in the tissues of an occupationally exposed individual.</a> Health Phys. 57 (1), 17-21 (1989).</li><li>Kurttio, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+of+uranium+in+drinking+water.">Renal effects of uranium in drinking water.</a> Environ.Health Perspect. 110 (4), 337-342 (2002).</li><li>Leggett, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basis+for+the+ICRP's+age-specific+biokinetic+model+for+uranium.">Basis for the ICRP's age-specific biokinetic model for uranium.</a> Health Phys. 67 (6), 589-610 (1994).</li><li>Vidaud, C., Bourgeois, D., Meyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+as+target+organ+for+metals:+the+case+of+f-elements.">Bone as target organ for metals: the case of f-elements.</a> Chem. Res. Toxicol. 25 (6), 1161-1175 (2012).</li><li>Arzuaga, X., Gehlhaus, M., Strong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modes+of+action+associated+with+uranium+induced+adverse+effects+in+bone+function+and+development.">Modes of action associated with uranium induced adverse effects in bone function and development.</a> Toxicol. Lett. 236 (2), 123-130 (2015).</li><li>Ikeda, K., Takeshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+osteoclast+differentiation+and+function+in+skeletal+homeostasis.">The role of osteoclast differentiation and function in skeletal homeostasis.</a> J. Biochem. 159 (1), 1-8 (2016).</li><li>Teiltelbaum, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+osteoclast+and+its+unique+cytoskeleton.">The osteoclast and its unique cytoskeleton.</a> Ann N Y Acad Sci. 1240, 14-17 (2011).</li><li>Nesbitt, S. A., Horton, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trafficking+of+matrix+collagens+through+bone-resorbing+osteoclasts.">Trafficking of matrix collagens through bone-resorbing osteoclasts.</a> Science. 276 (5310), 266-269 (1997).</li><li>Salo, J., Lehenkari, P., Mulari, M., Metsikko, K., Vaananen, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removal+of+osteoclast+bone+resorption+products+by+transcytosis.">Removal of osteoclast bone resorption products by transcytosis.</a> Science. 276 (5310), 270-273 (1997).</li><li>Pierrefite-Carle, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+natural+uranium+on+the+UMR-106+osteoblastic+cell+line:+impairment+of+the+autophagic+process+as+an+underlying+mechanism+of+uranium+toxicity.">Effect of natural uranium on the UMR-106 osteoblastic cell line: impairment of the autophagic process as an underlying mechanism of uranium toxicity.</a> Arch. Toxicol. 91 (4), 1903-1914 (2017).</li><li>Ubios, A. M., Guglielmotti, M. B., Steimetz, T., Cabrini, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uranium+inhibits+bone+formation+in+physiologic+alveolar+bone+modeling+and+remodeling.">Uranium inhibits bone formation in physiologic alveolar bone modeling and remodeling.</a> Environ. Res. 54 (1), 17-23 (1991).</li><li>Bozal, C. B., Martinez, A. B., Cabrini, R. L., Ubios, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ethane-1-+hydroxy-1,1-bisphosphonate+(EHBP)+on+endochondral+ossification+lesions+induced+by+a+lethal+oral+dose+of+uranyl+nitrate.">Effect of ethane-1- hydroxy-1,1-bisphosphonate (EHBP) on endochondral ossification lesions induced by a lethal oral dose of uranyl nitrate.</a> Arch. Toxicol. 79 (8), 475-481 (2005).</li><li>Kurttio, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+as+a+possible+target+of+chemical+toxicity+of+natural+uranium+in+drinking+water.">Bone as a possible target of chemical toxicity of natural uranium in drinking water.</a> Environ. Health Perspect. 113 (1), 68-72 (2005).</li><li>Collin-Osdoby, P., Osdoby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RANKL-mediated+osteoclast+formation+from+murine+RAW+264.7+cells.">RANKL-mediated osteoclast formation from murine RAW 264.7 cells.</a> Methods Mol. Biol. 816, 187-202 (2012).</li><li>Beranger, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+binding+of+poly(ADP-Ribose)+polymerase-1+and+JunD/Fra2+accounts+for+RANKL-induced+Tcirg1+gene+expression+during+osteoclastogenesis.">Differential binding of poly(ADP-Ribose) polymerase-1 and JunD/Fra2 accounts for RANKL-induced Tcirg1 gene expression during osteoclastogenesis.</a> J. Bone Miner. Res. 22 (7), 975-983 (2007).</li><li>Mirto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+uranium(VI)+speciation+for+the+evaluation+of+in+vitro+uranium+cytotoxicity+on+LLC-PK1+cells.">Influence of uranium(VI) speciation for the evaluation of in vitro uranium cytotoxicity on LLC-PK1 cells.</a> Hum. Exp. Toxicol. 18 (3), 180-187 (1999).</li><li>Carri&#232;re, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+uranium+speciation+on+normal+rat+kidney+(NRK-52E)+proximal+cell+cytotoxicity.">Influence of uranium speciation on normal rat kidney (NRK-52E) proximal cell cytotoxicity.</a> Chem. Res. Toxicol. 17 (3), 446-452 (2004).</li><li>Milgram, S., Carri&#232;re, M., Malaval, L., Gouget, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+accumulation+and+distribution+of+uranium+and+lead+in+osteoblastic+cells+as+a+function+of+their+speciation.">Cellular accumulation and distribution of uranium and lead in osteoblastic cells as a function of their speciation.</a> Toxicology. 252 (1-3), 26-32 (2008).</li><li>Milgram, S., Carri&#232;re, M., Thiebault, C., Malaval, L., Gouget, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxic+and+phenotypic+effects+of+uranium+and+lead+on+osteoblastic+cells+are+highly+dependent+on+metal+speciation.">Cytotoxic and phenotypic effects of uranium and lead on osteoblastic cells are highly dependent on metal speciation.</a> Toxicology. 250 (1), 62-69 (2008).</li><li>Studzinski, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell Growth, Differentiation and Senescence A Practical Approach. , (1999).</li><li>Gritsaenko, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+uranium+impairs+the+differentiation+and+the+resorbing+function+of+osteoclasts.">Natural uranium impairs the differentiation and the resorbing function of osteoclasts.</a> Biochim Biophys Acta. 1861 (4), 715-726 (2017).</li><li>Motiur Rahman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferation-coupled+osteoclast+differentiation+by+RANKL:+Cell+density+as+a+determinant+of+osteoclast+formation.">Proliferation-coupled osteoclast differentiation by RANKL: Cell density as a determinant of osteoclast formation.</a> Bone. 81, 392-399 (2015).</li></ol>

עד כמה שידוע לנו, זו הפעם הראשונה המתואר הליך מפורט במטרה לחקור את ההשפעה של אורניום טבעי על עצם resorbing תאים. גישה זו יהיה שימושי להשיג הבנה טובה יותר של אורניום השפעה על עצם פיזיולוגיה, עשוי לספק כלי חדש מעניין להקרנה של אורניום chelators. יתר על כן, אנו מאמינים כי יכול להיות מיושם הפרוטוקול המתו?...

אורניום הוא יסוד רדיואקטיבי טבעי נוכח קרקעות, אוויר ומים; ככזה, בבעלי חיים ובבני אדם חשופים אורניום טבעי בדיאטה שלהם. בנוסף למקורות טבעיים, אורניום מקורו של פעילויות אנתרופוגניים, אשר יגבירו את השפע שלה בסביבה. אורניום מהווה סיכונים כימיים והן רדיולוגית. עם זאת, מכיוון אורניום טבעי (אשר הוא איזוטרופי תערובת המכילה 99.27% 238U, 0.72% 235U, ו 0.006% 234U) יש פעילות ספציפית נמוכה (25.103 Bq.g-1), שלה השפעות על בריאות מיוחסות שלה כמות רעילה.
מה תוואי כניסה (שאיפה, בליעה או חשיפה עורי), רובם של אורניום הנכנסים לגוף חוסלה עם צואה ומגיע רק חלק קטן של מחזור מערכתי. כ- 67% אורניום בדם בתורו מסוננת על-ידי הכליות, עוזבת את הגוף בשתן בתוך 24 שעות1. השארית מופקד בעיקר כליות, עצמות, את שני איברי המטרה העיקרית של אורניום רעילות2,3,4. כי השלד זוהה כאתר העיקרי של אורניום לטווח ארוך שמירה2,3,4,5,6, מספר מחקרים נערכו על מנת לחקור ההשפעה של אורניום על עצם פיזיולוגיה7.
העצם היא רקמה mineralized זה הוא השתקם באופן רציף לאורך כל תקופת חייו. שיפוץ העצם הוא תהליך מורכב זה תלוי סוגי תאים מיוחדים והיא מורכבת בעיקר בשני שלבים: ספיגת המטריקס ישן הקיימת מראש על ידי osteoclasts ואחריו de novo עצם הבנייה על ידי תאי העצם. Osteoclasts הם תאים גדולים multinuclear הנובע הפיוז'ן של תאים קודמן ממוצא hematopoietic נודדים לאתרים resorption שבו הם לצרף העצם8. ההחזקה שלהם מתרחשת בו זמנית עם רה-ארגון נרחב של שלד התא שלהם9. הארגון מחדש נדרש להקמת תא מבודד בין התא לבין השטח העצם אשר לתוכו אוסטאוקלסט מפריש פרוטונים, שמוביל פירוק היידרוקסיאפטיט, פרוטאזות מעורב מהשפלת מטריקס אורגני. המוצרים השפלה וכתוצאה מכך endocytosed, מועבר דרך התא אל אזור ממברנה מול פני העצם, מופרש, תהליך הנקרא transcytosis10,11.
תוצאות ממחקרים ב- vivo ו- in vitro לקשרי מצביעים על כך אורניום מעכב היווצרות העצם הפיצולים המספר וכן את פעילותם של תאי העצם7,12. לעומת זאת, ההשפעות של אורניום על ספיגת עצם של osteoclasts נחקרו בצורה גרועה מספר ויוו מחקרים דיווחו על שיפור של ספיגת עצם לאחר מתן של חנקת uranyl13,של עכברים או חולדות-14. יתר על כן, חקירה אפידמיולוגיים הציע כי הגדלת צריכת אורניום באמצעות שתיית מים נטו להיות מזוהה עם עלייה ברמת סרום של סמן ספיגת עצם גברים15. יחדיו, ממצאים אלה הובילו למסקנה כי אורניום, אשר צוברת בתוך עצם יכולים לקדם את ספיגת עצם. עם זאת, המנגנונים התאיים מעורב הזה אפקט פוטנציאליים האורניום של עדיין שאלה פתוחה. מסיבה זו, החלטנו לבחון את ההשפעה של אורניום על אופן הפעולה של resorbing תאים עצם.
כאן, אנו מתארים את פרוטוקול הקמנו כדי לאפיין ולכמת את ההשפעה של אורניום טבעי על הכדאיות osteoclasts מראש ועל בידול osteoclasts ופעילות resorptive. הניסויים המתוארים בזאת נעשו עם קו תא מקרופאג טרנספורמציה מאתר 264.7 גולמי, אשר בקלות יכולים להתמיין osteoclasts כאשר תרבותי בנוכחות ציטוקין רנקל 4 או 5 ימים, והוא אשר משמש בסגנון קלאסי ללמוד אוסטאוקלסט בידול ותפקוד16. ההליכים פיתח אמין, נותן תוצאות מאוד לשחזור והם החלים לחלוטין osteoclasts העיקרי. מכל הסיבות האלה, אנו מאמינים כי מתודולוגיה זו שימושית לקבלת הבנה טובה יותר של המנגנונים המולקולריים המעורבים אורניום רעילות בתוך עצם. יתר על כן, אנחנו חושבים כי גישה זו יכול להיות מותאם ככלי מיון לזיהוי אורניום חדש chelating סוכנים.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE12-604F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-MEM</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE12-169F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMEM without phenol red</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>12-668E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water for cell culture</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE17-724F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;L-Glutamine solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Solution 0.4%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HyClone fetal bovine serum</td>
			<td>GE Life Sciences</td>
			<td>SH30071.03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7.5% sodium bicarbonate aqueous solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acid Phosphatase, Lekocyte (TRAP) kit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>387A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (MTT) powder</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M5655</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D5879</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alizarin Red S sodium salt, 1% w/v aq. sol.</td>
			<td>Alfa Aeros</td>
			<td>42746</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osteoassay bone resorption plates, 24 well plates</td>
			<td>Corning Life Sciences</td>
			<td>3987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwell 24 well plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm2</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Conical Tubes 50 ml</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell scrapers 30 cm</td>
			<td>TPP</td>
			<td>90003</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for analyzing the impacts of natural uranium on in vitro osteoclastogenesis

אורניום הוכח להתערב עם עצם פיזיולוגיה, היא מבוססת היטב כי המתכת שמצטבר העצם. עם זאת, מעט מאוד ידוע על ההשפעה של אורניום טבעי על ההתנהגות של תאי עצם. בפרט, ההשפעה של אורניום על osteoclasts, האחראי ספיגת המטריקס העצם, התאים לא מתועדים. לחקור בנושא, הקמנו פרוטוקול חדש באמצעות uranyl אצטט כמו מקור של אורניום טבעי לבין הקו תא 264.7 גלם מאתר כמודל של אוסטאוקלסט סימנים מקדימים. במסמך זה, אנחנו מפורט כל מבחני נדרש לבחון את האורניום cytotoxicity על סימנים מקדימים אוסטאוקלסט וכדי להעריך את ההשפעה שלו על osteoclastogenesis ועל הפונקציה resorbing של osteoclasts בוגרת. התנאים פיתחנו, בפרט עבור הכנת המכילות uranyl תרבות המדיה, זריעה של RAW 264.7 תאים לאפשר להשיג תוצאות הרבייה מאוד ואמין. יתר על כן, לנו יש אופטימיזציה השימוש של כלי תוכנה כדי להקל על הניתוח של פרמטרים שונים כגון הגודל של osteoclasts או האחוז של מטריקס resorbed.

עמידים tartrate פוספטאז חומצה מכתים שימש כדי להמחיש osteoclasts כתאי סגול גדול יש 3 או יותר גרעינים. להחליפן בתמונות של osteoclasts מתקבל מתאי 264.7 גלם תרבותי בנוכחות רנקל, uranyl יונים מוצגים באיור1. שינוי המספר והגודל של osteoclasts בתגובה אורניום גלויים בקלות תמונות ללא הפרדות ...

Watch this Scientific Journal Video about Methods for Analyzing the Impacts of Natural Uranium on In Vitro Osteoclastogenesis at JoVE.com

Methods for Analyzing the Impacts of Natural Uranium on In Vitro Osteoclastogenesis

אורניום ידוע להשפיע על מטבוליזם העצם. כאן, אנו מציגים פרוטוקול שמטרתו לחקור את ההשפעה של חשיפה אורניום טבעי על הכדאיות את הבידול, את הפונקציה של osteoclasts, התאים האחראי על ספיגת עצם.

שיטות ניתוח ההשפעות של אורניום טבעי על במבחנה Osteoclastogenesis

Uranium has been shown to interfere with bone physiology and it is well established that this metal accumulates in bone. However, little is known about ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Methods for Analyzing the Impacts of Natural Uranium on In Vitro Osteoclastogenesis

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

ייצור ושימוש בLentivirus לתאי סלקטיבי transduce הראשי oligodendrocyte מבשר ל<em&gt; במבחנה</em&gt; מבחני myelination

Myelination is a complex process that involves both neurons and the myelin forming glial cells, oligodendrocytes in the central nervous system (CNS) and ...

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

אפיון של הרתי יישוב אבות בעובר העכבר באמצעות<em&gt; In vivo</em&gt; ו<em&gt; במבחנה</em&gt; מבחני

Characterizing thymic settling progenitors is important to understand the pre-thymic stages of T cell development, essential to devise strategies for T ...

Alginate Encapsulation of Pluripotent Stem Cells Using a Co-axial Nozzle

Encapsulation אלגינט של תאי גזע pluripotent שימוש נחיר Co-הצירית

Pluripotent stem cells (PS cells) are the focus of intense research due to their role in regenerative medicine and drug screening.  However, the ...

Protocols for Analyzing the Role of Paneth Cells in Regenerating the Murine Intestine using Conditional Cre-lox Mouse Models

Protocols for Analyzing the Role of Paneth Cells in Regenerating the Murine Intestine using Conditional Cre-lox Mouse Models

פרוטוקולים לניתוח תפקידם של תאי פנט התחדשות Murine המעי באמצעות מותנה<em&gt; Cre-לקס</em&gt; מודלי עכבר

The epithelial surface of the mammalian intestine is a dynamic tissue that renews every 3 - 7 days. Understanding this renewal process identified a ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

שיטות לבדיקת בלוטת לימפה hemocytes ב<em&gt; תסיסנית</em&gt; זחלים

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

היישום של RNAi חום-הלם-induced בביטוי פקטור שעתוק כדי לתכנת בתאי הנבט את הנוירונים C . elegans

Studying the cell biological processes during converting the identities of specific cell types provides important insights into mechanism that maintain ...

Methods for the Study of Regeneration in Stentor

Methods for the Study of Regeneration in Stentor

שיטות המחקר של התחדשות ב- Stentor

Cells need to be able to regenerate their parts to recover from external perturbations. The unicellular ciliate Stentor coeruleus is an excellent model ...

HUVEC Tube-formation Assay to Evaluate the Impact of Natural Products on Angiogenesis

מערכת שפופרת HUVEC להערכת השפעת מוצרים טבעיים על אנגיוגנזה

Angiogenesis is a phenomenon that includes different processes, such as endothelial cell proliferation, differentiation, and migration, that lead to the ...

Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster

Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster

שיטות לבדיקת הפרעה אנדוקרינית בדרוזופילה מלאנוסטר

In recent years there has been growing evidence that all organisms and the environment are exposed to hormone-like chemicals, known as endocrine disruptor ...

Isolation of Rat Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cells for Differentiation into Insulin-producing Cells

בידוד של תאי גזע מזנכימליים של רקמת שומן חולדה לצורך התמיינות לתאים המייצרים אינסולין

Mesenchymal stem cells (MSCs)-especially those isolated from adipose tissue (Ad-MSCs)-have gained special attention as a renewable, abundant source of ...