Name: cystometric and external urethral sphincter measurements in awake rats with implanted catheter and electrodes allowing for repeated measurements
Uploaded: 2018-01-30T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements at JoVE.com

Forfatterne har ikke nogen anerkendelser.

Alle procedurer, der beskrives her blev godkendt af den østrigske statslige etiske komité for dyreforsøg (yder støtten Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b) og var i overensstemmelse med Foreningen for vurdering af laboratorium Dyrs pleje retningslinjer for brug af dyr. Rotter anvendes for denne fremgangsmåde var kvindelige, 12-uge-forhenværende Lewis rotter. Brug sterile instrumenter overalt i protokollen.
1. materielle forberedelse
<ol><li>
<stron...

<ol>
	<li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+urodynamic+investigation.">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li><li>Schneider, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+urodynamic+model+for+lower+urinary+tract+assessment+in+awake+rats.">A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats.</a> BJU Int. 115, 8-15 (2015).</li><li>Cruz, C. D., Cruz, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury+and+bladder+dysfunction:+new+ideas+about+an+old+problem.">Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem.</a> Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).</li><li>de Groat, W. C., Yoshimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+in+reflex+pathways+to+the+lower+urinary+tract+following+spinal+cord+injury.">Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).</li><li>Matsuura, S., Downie, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anesthetics+on+reflex+micturition+in+the+chronic+cannula-implanted+rat.">Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat.</a> Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).</li><li>Cannon, T. W., Damaser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anesthesia+on+cystometry+and+leak+point+pressure+of+the+female+rat.">Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat.</a> Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).</li><li>Patra, P. B., Thorneloe, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+sensitivity+to+afferent+stimulation+and+impact+of+overactive+bladder+therapies+in+the+conscious,+spontaneously+hypertensive+rat.">Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat.</a> J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).</li><li>Herrera, G. M., Meredith, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diurnal+variation+in+urodynamics+of+rat.">Diurnal variation in urodynamics of rat.</a> PloS One. 5, e12298 (2010).</li><li>Chang, H. Y., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+urethane+and+isoflurane+on+external+urethral+sphincter+electromyography+and+cystometry+in+rats.">Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).</li><li>Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micturition+in+rats:+a+chronic+model+for+study+of+bladder+function+and+effect+of+anesthetics.">Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics.</a> Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).</li></ol>

Denne protokol beskriver den kirurgiske procedure af en permanent kateter og urethrae sphincter elektroder implantation og cystometric optagelse teknik i vågen, let behersket rotter, herunder både den samtidige analyse af urinblæren og eksterne urethrae sphincter.
Kritiske trin under kirurgi er omhyggelig implantation af blæren kateter, undgå lækage og omfattende manipulation. Desuden er en præcis implantation af elektroder bilaterale til urethral eksterne sphincter afgørende for en so...

For at analysere urin opbevaring og tømme funktion og dysfunktion, har de fleste undersøgelser brugt gnavere modeller. Gennem fortløbende aktivering af reflekser, er vandladning produceret. Koordinering af disse reflekser er afgørende for effektiv tømme1. Cystometric optagelse teknikker give værdifulde redskaber til at analysere funktionen urinblæren under sin neurale kontrol1.
De fleste konventionelle cystometries hos rotter er udført som en enkelt afsluttende analyse i anæstesi, hovedsagelig urethan2, og fokusere på urinblæren udelukkende. Men i nogle patologier ligesom neurogen nedre urinveje dysfunktion (NLUTD), urinblæren, men også blære outlet, ydre urethrae sphincter, er dysfunktionel3,4. Dette gør NLUTD vanskelig at opfølgning, hvis det kun blæren er undersøgt i et enkelt cystometric måling. For at få pålidelige resultater, der er sammenlignelige med mennesker, er det nødvendigt at præcist at måle både urinblæren og eksterne urethrae sphincter funktion og dets samspil2. Derudover er det afgørende at udføre funktionelle analyser i vågen rotter som anæstesi er meget sandsynligt, at ændre blære funktion2,5,6. En god cystometric optagelse i vågen dyr er grundlaget for identifikation af blære funktion og fejl7.
De små dyr cystometry station bruges (fxCatamount cystometry station (CCS)) er en enhed til at udføre cystometric analyser i vågen smådyr8. Ved hjælp af en permanent blære kateter og implanteret eksterne urethrae sphincter elektroder, kan gentagne målinger foretages over en længere tid perioder2. Således CCS giver et værdifuldt redskab for ikke-neurogen og NLUTD evalueringer i de gnaver model, hvor patomekanismer kan ændre i løbet af kort eller mellemlang sigt opfølgning. Denne metode indeholder desuden en artefakt-reduceret cystometric analyse ved hjælp af en Tilbageholderen for at gennemføre blære målinger i vågen rotter.
I dette papir beskriver vi de kirurgiske tilgang til permanent implantat en blære kateter og eksterne urethrae sphincter elektroder, sammen med cystometric målinger i vågen rotter.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polyethylene tubing PE 50</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>427411</td>
			<td>Catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7403H</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teflon coated steel wire</td>
			<td>Cooner wire</td>
			<td>AS631</td>
			<td>Electrode material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire 0.250 mm</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>AGW1030</td>
			<td>Electrode material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotilabo - PVC tube</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>97241</td>
			<td>Harness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V4940H</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick Connect Single Harness</td>
			<td>SAI Infusion Technologies</td>
			<td>QCH-23CW</td>
			<td>Harness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shrinking tubes</td>
			<td>ChiliTec</td>
			<td>17894</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soldering wire Pb60 Sn40</td>
			<td>Stannol</td>
			<td>LD0029</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluxing agent 157</td>
			<td>Castolin Eutectin</td>
			<td>157 0150</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box</td>
			<td>Preci-dip</td>
			<td>801-87-050-10-001101</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box</td>
			<td>Preci-dip</td>
			<td>890-18-003-10-001101</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis)</td>
			<td>Catamount Research and Development Inc.</td>
			<td>CAT-CYT-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential amplifier with active headstage</td>
			<td>AD instruments</td>
			<td>DP-311</td>
			<td>EMG amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer Medium size for rats 200-300 g</td>
			<td>emka Technologies</td>
			<td>HLD-RM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uro Dyn Software</td>
			<td>Z&#252;rich of University</td>
			<td></td>
			<td>MTA-based</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age</td>
			<td>Charles River, Sulzfeld, Germany</td>
			<td></td>
			<td>animals</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cystometric and external urethral sphincter measurements in awake rats with implanted catheter and electrodes allowing for repeated measurements

Lavere urinvejsinfektion funktion vurderes primært ved cystometric blære funktion analyse i gnavere. Konventionelle cystometries er normalt udføres som terminal analyse under urethan anæstesi. Det er velkendt, at bedøvende medicin kan påvirke blærefunktion. Derfor, formålet med denne teknik er at udføre cystometric målinger af urinblæren og eksterne urethrae sphincter i let behersket vågen rotter. Til dette formål, er en blære kateter implanteret i blæren dome. Efterfølgende to elektroder er implanteret bilaterale til eksterne urethrae sphincter og en jorden elektrode er syet til en ikke-responderende skeletmuskulatur. Blæren kateter og tre elektroderne er endelig tunnelforbindelsen subkutant til halsregionen og fastgjort til en sele. Med denne teknik, kan de nedre urinveje måles på flere tidspunkter i den samme dyr at vurdere nedre urinveje funktion. Den vigtigste anvendelse af denne teknik er opfølgningen af samtidige urinblæren og eksterne urethrae sphincter funktion i vågen sund rotter og efter induktion af en sygdom eller skade. Desuden kan efterfølgende nedre urinveje overvågning udføres under evaluering af sygdom/skade og til at overvåge behandlingen effektivitet.

En skematisk viser processen med vågen cystometric målinger er præsenteret i figur 1 og den indre anatomi til blæren kateter implantation er vist i figur 2. Operationen tager ca 2 h. Postoperative analgesi og antibiotika, som beskrevet i protokollen, omfatter smerte og infektioner over fem dage efter operationen. Ingen tegn på nogen smerte blev bemærket, derefter. To gange daglig omhyggelig inspektion af maven, abdominal su...

Watch this Scientific Journal Video about Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements at JoVE.com

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

Denne protokol først beskrives den kirurgiske procedure af permanent implantation af en urinblæren kateter kombineret med eksterne urethrae sphincter elektroder, og andet, måling af urinblæren og eksterne urethral funktion lukkemuskel i implanterede vågen dyr.

Cystometric og ekstern urethrae Sphincter målinger i vågen rotter med indopereret kateter og elektroder giver mulighed for gentagne målinger

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Application of MassSQUIRM for Quantitative Measurements of Lysine Demethylase Activity

Anvendelse af MassSQUIRM for kvantitative målinger af Lysin demetylase aktivitet

Recently, epigenetic regulators have been discovered as key players in many different diseases 1-3. As a result, these enzymes are prime targets for small ...

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

Isolering af Humane Atrielle Myocytter til samtidige målinger af Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Transienter og membranstrømme

The study of  electrophysiological properties of cardiac ion channels with the patch-clamp  technique and the exploration of cardiac cellular Ca2+ ...

Cytosolic Calcium Measurements in Renal Epithelial Cells by Flow Cytometry

Cytosoliske Calcium Målinger i Nyrer epitelceller ved flowcytometri

A variety of cellular processes, both physiological and pathophysiological, require or are governed by calcium, including exocytosis, mitochondrial ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

Funktionel Opløsning og kanalaktivitet Målinger af renset Vildtype og Mutant CFTR Protein

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

Samtidige målinger af intracellulære Calcium og membran potentiale i frisk isoleret og intakt mus Cerebral endotelet

Cerebral arteries and their respective microcirculation deliver oxygen and nutrients to the brain via blood flow regulation. Endothelial cells line the ...

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Målinger af fysiologiske stressreaktioner i C. Elegans

Organisms are often exposed to fluctuating environments and changes in intracellular homeostasis, which can have detrimental effects on their proteome and ...

Preparation of Rat Skeletal Muscle Homogenates for Nitrate and Nitrite Measurements

Forberedelse af rotteskeletmuskelhomogenater til nitrat- og nitritemålinger

Nitrate ions (NO3-) were once thought to be inert end products of nitric oxide (NO) metabolism. However, previous studies demonstrated that nitrate ions ...

Operation of Laboratory Photobioreactors with Online Growth Measurements and Customizable Light Regimes

Drift af laboratoriefotobioreaktorer med online vækstmålinger og tilpassede lysregimer

The laboratory study of microalgae can be experimentally challenging. In addition to the cultivation requirements of non-photosynthetic microorganisms, ...

Terminal H-reflex Measurements in Mice

Terminal H-refleksmålinger hos mus

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...