Name: cystometric and external urethral sphincter measurements in awake rats with implanted catheter and electrodes allowing for repeated measurements
Uploaded: 2018-01-30T13:30:00
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ここで説明したすべての手順は、動物研究のためオーストリア政府倫理委員会で承認された (同毛皮学問、上海虹橋と付き、WF/V/3b) 研究評価会を遵守していたと動物用動物のガイドラインです。ラットのこのアプローチの使用は女性、12 週齢のルイス ・ ラット.プロトコルを通して滅菌器具を使用します。
1 材料の準備
<ol><li>
カテーテルの製造
	<ol>
<li>動物...

<ol>
	<li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+urodynamic+investigation.">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li><li>Schneider, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+urodynamic+model+for+lower+urinary+tract+assessment+in+awake+rats.">A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats.</a> BJU Int. 115, 8-15 (2015).</li><li>Cruz, C. D., Cruz, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury+and+bladder+dysfunction:+new+ideas+about+an+old+problem.">Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem.</a> Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).</li><li>de Groat, W. C., Yoshimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+in+reflex+pathways+to+the+lower+urinary+tract+following+spinal+cord+injury.">Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).</li><li>Matsuura, S., Downie, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anesthetics+on+reflex+micturition+in+the+chronic+cannula-implanted+rat.">Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat.</a> Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).</li><li>Cannon, T. W., Damaser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anesthesia+on+cystometry+and+leak+point+pressure+of+the+female+rat.">Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat.</a> Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).</li><li>Patra, P. B., Thorneloe, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+sensitivity+to+afferent+stimulation+and+impact+of+overactive+bladder+therapies+in+the+conscious,+spontaneously+hypertensive+rat.">Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat.</a> J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).</li><li>Herrera, G. M., Meredith, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diurnal+variation+in+urodynamics+of+rat.">Diurnal variation in urodynamics of rat.</a> PloS One. 5, e12298 (2010).</li><li>Chang, H. Y., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+urethane+and+isoflurane+on+external+urethral+sphincter+electromyography+and+cystometry+in+rats.">Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).</li><li>Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micturition+in+rats:+a+chronic+model+for+study+of+bladder+function+and+effect+of+anesthetics.">Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics.</a> Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).</li></ol>

このプロトコルを記述する永続的なカテーテルと尿道括約筋を電極と膀胱内圧測定記録し、目を覚まし、軽く拘束されたラットの膀胱の両方同時分析を含む技術の手術と外尿道括約筋。
外科の中に重要なステップは、漏れや広範な操作を避け、膀胱カテーテルの注意注入です。さらに、尿道括約筋に両側の電極の精密な注入は外尿道括約筋の音響計測に不可欠です。注?...

ほとんどの研究は、尿・排尿機能と機能障害を分析するには、齧歯動物モデルを使用しています。反射神経を順次活性化、排尿が生成されます。これらの反射の調整は、効率的な排尿1に不可欠です。膀胱内圧測定記録技術は、そのニューラル制御1の下で, 膀胱機能解析のための貴重なツールを提供します。
ラットのほとんどの従来の cystometries として主にウレタン2麻酔の 1 つ、最終的な分析と膀胱にのみ焦点を当てます。しかし、神経因性排尿障害 (NLUTD) のようないくつかの疾患、膀胱だけでなく、膀胱の出口、尿道括約筋は機能不全の3、4です。これにより、単一内圧測定、膀胱が調べられ、のみ場合、NLUTD がフォロー アップすることは困難になります。人間に匹敵する信頼性の高い結果を得るためそれは膀胱と外尿道括約筋の機能との相互作用2の両方を正確に測定することが欠かせません。さらに、麻酔は非常に膀胱機能2,5,6を変更する可能性があると覚醒ラットで機能解析を実行することが重要です。目がさめている動物の記録良い膀胱内圧測定は膀胱機能や誤動作7の同定のための基礎です。
(例えば、キャタ マウント膀胱内圧測定駅 (CCS)) 小動物の膀胱内圧測定駅使用は小さな目を覚まし動物8膀胱内圧測定解析を実行するユニットです。恒久的な膀胱カテーテルと注入された外尿道括約筋電極、長い時間の期間2以上繰り返し測定を実行できます。したがって、CCS のための貴重なツールを提供します非神経因性と短期または中期的フォロー アップの中に、病因を変更できます、齧歯動物モデルにおける NLUTD 評価。さらに、このメソッドには覚醒ラットで膀胱の測定に、落を用いたアーチファクト低減膀胱内圧測定分析が含まれます。
完全に膀胱カテーテルと覚醒ラットで膀胱内圧測定の測定と共に、外尿道括約筋電極を移植する外科的アプローチについて述べる。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polyethylene tubing PE 50</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>427411</td>
			<td>Catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7403H</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teflon coated steel wire</td>
			<td>Cooner wire</td>
			<td>AS631</td>
			<td>Electrode material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire 0.250 mm</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>AGW1030</td>
			<td>Electrode material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotilabo - PVC tube</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>97241</td>
			<td>Harness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V4940H</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick Connect Single Harness</td>
			<td>SAI Infusion Technologies</td>
			<td>QCH-23CW</td>
			<td>Harness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shrinking tubes</td>
			<td>ChiliTec</td>
			<td>17894</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soldering wire Pb60 Sn40</td>
			<td>Stannol</td>
			<td>LD0029</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluxing agent 157</td>
			<td>Castolin Eutectin</td>
			<td>157 0150</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box</td>
			<td>Preci-dip</td>
			<td>801-87-050-10-001101</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box</td>
			<td>Preci-dip</td>
			<td>890-18-003-10-001101</td>
			<td>Electrode soldering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis)</td>
			<td>Catamount Research and Development Inc.</td>
			<td>CAT-CYT-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential amplifier with active headstage</td>
			<td>AD instruments</td>
			<td>DP-311</td>
			<td>EMG amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer Medium size for rats 200-300 g</td>
			<td>emka Technologies</td>
			<td>HLD-RM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uro Dyn Software</td>
			<td>Z&#252;rich of University</td>
			<td></td>
			<td>MTA-based</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age</td>
			<td>Charles River, Sulzfeld, Germany</td>
			<td></td>
			<td>animals</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cystometric and external urethral sphincter measurements in awake rats with implanted catheter and electrodes allowing for repeated measurements

下部尿路機能は、齧歯動物の膀胱内圧測定膀胱機能解析による主に評価されます。従来の cystometries は通常、ウレタン麻酔下ターミナル分析として実行されます。麻酔薬が膀胱機能に影響を与えることが知られています。したがって、このテクニックのねらいは軽く拘束された覚醒ラットで膀胱と外尿道括約筋の内圧測定を行うことです。このため、膀胱カテーテルが膀胱ドームの中に注入します。その後、2 つの電極は, 外尿道括約筋に二国間で注入され、接地電極は非応答性骨格筋に縫合します。膀胱カテーテルそして 3 つの電極は最後に、頚部に皮下トンネルし、ハーネスに貼付。この手法では、下部尿路機能を評価するために同じ動物の複数の時点で下部尿路を測定できます。この技術の主要なアプリケーションは、同時の膀胱と外尿道括約筋機能覚醒健康なラットに、病気やけがの誘導後のフォロー アップです。さらに、後続の下部尿路監視は、病気や怪我の治療の有効性を監視するための評価中に実行できます。

目を覚まし内圧測定のプロセスを示す回路図は、図 1に示したが、膀胱カテーテル留置の内部解剖学は図 2に示します。手術は約 2 h. 術後鎮痛と抗生物質、前述のプロトコルでは、カバー痛みと感染症手術後 5 日間。のどの痛みの兆候は見られなかったその後。腹部、腹部の縫合と首の縫合の 1 日 2 回の綿密な検査は動物の...

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Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

このプロトコルは最初外尿道括約筋電極と第二に、膀胱と尿道の外部関数の測定と組み合わせて膀胱カテーテルの永久的な注入の手術を記述します。注入の目がさめている動物で括約筋。

注入カテーテル電極の繰り返し測定を可能にすると目がさめているラットの膀胱内圧測定と外部尿道括約筋の測定

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

気道抵抗測定とマウスにおける気管支肺胞洗浄液のサンプリングのためのリバーシブル、非侵襲的方法

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Application of MassSQUIRM for Quantitative Measurements of Lysine Demethylase Activity

リジン脱メチル化酵素活性の定量測定のためのMassSQUIRMのアプリケーション

Recently, epigenetic regulators have been discovered as key players in many different diseases 1-3. As a result, these enzymes are prime targets for small ...

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

カルシウムの同時測定のための人間の心房筋細胞の分離<sup&gt; 2 +</sup&gt;過渡と膜電流

The study of  electrophysiological properties of cardiac ion channels with the patch-clamp  technique and the exploration of cardiac cellular Ca2+ ...

Cytosolic Calcium Measurements in Renal Epithelial Cells by Flow Cytometry

フローサイトメトリーによる腎上皮細胞における細胞質ゾルカルシウム測定

A variety of cellular processes, both physiological and pathophysiological, require or are governed by calcium, including exocytosis, mitochondrial ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

精製された野生型および変異型CFTRタンパク質の機能的再構成とチャネル活性の測定

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

細胞内カルシウムと新鮮な分離とそのままマウス脳血管内皮細胞の膜電位の同時計測

Cerebral arteries and their respective microcirculation deliver oxygen and nutrients to the brain via blood flow regulation. Endothelial cells line the ...

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

エレガンスにおける生理的ストレス応答の測定

Organisms are often exposed to fluctuating environments and changes in intracellular homeostasis, which can have detrimental effects on their proteome and ...

Preparation of Rat Skeletal Muscle Homogenates for Nitrate and Nitrite Measurements

硝酸塩および亜硝酸塩測定のためのラット骨格筋ホモジネートの調製

Nitrate ions (NO3-) were once thought to be inert end products of nitric oxide (NO) metabolism. However, previous studies demonstrated that nitrate ions ...

Operation of Laboratory Photobioreactors with Online Growth Measurements and Customizable Light Regimes

オンライン成長測定とカスタマイズ可能な光レジームを備えた実験室用フォトバイオリアクターの操作

The laboratory study of microalgae can be experimentally challenging. In addition to the cultivation requirements of non-photosynthetic microorganisms, ...

Terminal H-reflex Measurements in Mice

マウスにおける終末H反射測定

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...