Name: an efficient and simple method to establish nk and t cell lines from patients with chronic active epstein-barr virus infection
Uploaded: 2018-03-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Efficient and Simple Method to Establish NK and T Cell Lines from Patients with Chronic Active Epstein-Barr Virus Infection at JoVE.com

هذا العمل كان يؤيد مشاريع مفتاح من الأكاديمية الصينية للعلوم (كفزد-سويسري-205)، "الاستراتيجية البيولوجية موارد تكنولوجيا نظام الدعم للأكاديمية الصينية" للعلوم (كزبزكس-1 وزسب-004)، والمنح من "مؤسسة العلوم الوطنية في الصين" ( 81401640) وشنغهاي صندوق العلوم الطبيعية (14ZR1434800).

وأقر هذه الدراسة لجنة الأخلاقيات التابعة لمعهد علم الوراثة وعلم الأحياء التنموي، الأكاديمية الصينية للعلوم، والبروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية المؤسسية لرفاهية الإنسان.
ملاحظة: انظر الشكل 1 لتخطيطي لسير العمل.
1-عزل ببمك من المرضى كايبف
<ol>...

<ol>
	<li>Cohen, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epstein-Barr+virus+infection.">Epstein-Barr virus infection.</a> N Engl J Med. 343 (7), 481-492 (2000).</li><li>Cohen, J. I., Kimura, H., Nakamura, S., Ko, Y. H., Jaffe, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epstein-Barr+virus-associated+lymphoproliferative+disease+in+non-immunocompromised+hosts:+a+status+report+and+summary+of+an+international+meeting,+8-9+September+2008.">Epstein-Barr virus-associated lymphoproliferative disease in non-immunocompromised hosts: a status report and summary of an international meeting, 8-9 September 2008.</a> Ann Oncol. 20 (9), 1472-1482 (2009).</li><li>Oshimi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+understanding+and+managing+natural+killer-cell+malignancies.">Progress in understanding and managing natural killer-cell malignancies.</a> Br J Haematol. 139 (4), 532-544 (2007).</li><li>Kawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+allergy+and+Epstein-Barr+virus-associated+T/natural+killer-cell+lymphoproliferative+disease.">Mosquito allergy and Epstein-Barr virus-associated T/natural killer-cell lymphoproliferative disease.</a> Blood. 98 (10), 3173-3174 (2001).</li><li>Kimura, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+chronic+active+Epstein-Barr+virus+infection:+is+this+an+infectious+disease,+lymphoproliferative+disorder,+or+immunodeficiency?.">Pathogenesis of chronic active Epstein-Barr virus infection: is this an infectious disease, lymphoproliferative disorder, or immunodeficiency?.</a> Rev Med Virol. 16 (4), 251-261 (2006).</li><li>Kimura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+virologic+characteristics+of+chronic+active+Epstein-Barr+virus+infection.">Clinical and virologic characteristics of chronic active Epstein-Barr virus infection.</a> Blood. 98 (2), 280-286 (2001).</li><li>Ohshima, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proposed+categorization+of+pathological+states+of+EBV-associated+T/natural+killer-cell+lymphoproliferative+disorder+(LPD)+in+children+and+young+adults:+overlap+with+chronic+active+EBV+infection+and+infantile+fulminant+EBV+T-LPD.">Proposed categorization of pathological states of EBV-associated T/natural killer-cell lymphoproliferative disorder (LPD) in children and young adults: overlap with chronic active EBV infection and infantile fulminant EBV T-LPD.</a> Pathol Int. 58 (4), 209-217 (2008).</li><li>Okano, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+and+problematic+standpoints+of+severe+chronic+active+Epstein-Barr+virus+infection+syndrome.">Overview and problematic standpoints of severe chronic active Epstein-Barr virus infection syndrome.</a> Crit Rev Oncol Hematol. 44 (3), 273-282 (2002).</li><li>Straus, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chronic+mononucleosis+syndrome.">The chronic mononucleosis syndrome.</a> J Infect Dis. 157 (3), 405-412 (1988).</li><li>Jones, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+lymphomas+containing+Epstein-Barr+viral+DNA+in+patients+with+chronic+Epstein-Barr+virus+infections.">T-cell lymphomas containing Epstein-Barr viral DNA in patients with chronic Epstein-Barr virus infections.</a> N Engl J Med. 318 (12), 733-741 (1988).</li><li>Kikuta, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epstein-Barr+virus+genome-positive+T+lymphocytes+in+a+boy+with+chronic+active+EBV+infection+associated+with+Kawasaki-like+disease.">Epstein-Barr virus genome-positive T lymphocytes in a boy with chronic active EBV infection associated with Kawasaki-like disease.</a> Nature. 333 (6172), 455-457 (1988).</li><li>Nagata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+novel+natural+killer+(NK)-cell+and+gammadelta+T-cell+lines+established+from+primary+lesions+of+nasal+T/NK-cell+lymphomas+associated+with+the+Epstein-Barr+virus.">Characterization of novel natural killer (NK)-cell and gammadelta T-cell lines established from primary lesions of nasal T/NK-cell lymphomas associated with the Epstein-Barr virus.</a> Blood. 97 (3), 708-713 (2001).</li><li>Nagata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presence+of+natural+killer-cell+clones+with+variable+proliferative+capacity+in+chronic+active+Epstein-Barr+virus+infection.">Presence of natural killer-cell clones with variable proliferative capacity in chronic active Epstein-Barr virus infection.</a> Pathol Int. 51 (10), 778-785 (2001).</li><li>Tabata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydroa+vacciniforme-like+lymphomatoid+papulosis+in+a+Japanese+child:+a+new+subset.">Hydroa vacciniforme-like lymphomatoid papulosis in a Japanese child: a new subset.</a> J Am Acad Dermatol. 32 (2 Pt 2), 378-381 (1995).</li><li>Tsuchiyama, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+novel+human+natural+killer-cell+line+(NK-YS)+established+from+natural+killer+cell+lymphoma/leukemia+associated+with+Epstein-Barr+virus+infection.">Characterization of a novel human natural killer-cell line (NK-YS) established from natural killer cell lymphoma/leukemia associated with Epstein-Barr virus infection.</a> Blood. 92 (4), 1374-1383 (1998).</li><li>Tsuge, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Epstein-Barr+virus+(EBV)-infected+natural+killer+(NK)+cell+proliferation+in+patients+with+severe+mosquito+allergy;+establishment+of+an+IL-2-dependent+NK-like+cell+line.">Characterization of Epstein-Barr virus (EBV)-infected natural killer (NK) cell proliferation in patients with severe mosquito allergy; establishment of an IL-2-dependent NK-like cell line.</a> Clin Exp Immunol. 115 (3), 385-392 (1999).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+cytological+and+cytogenetic+features+of+Epstein-Barr+virus+(EBV)-positive+natural+killer+(NK)+cells+and+cell+lines+derived+from+patients+with+nasal+T/NK-cell+lymphomas,+chronic+active+EBV+infection+and+hydroa+vacciniforme-like+eruptions.">Common cytological and cytogenetic features of Epstein-Barr virus (EBV)-positive natural killer (NK) cells and cell lines derived from patients with nasal T/NK-cell lymphomas, chronic active EBV infection and hydroa vacciniforme-like eruptions.</a> Br J Haematol. 121 (5), 805-814 (2003).</li><li>Oyoshi, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preferential+expansion+of+Vgamma9-JgammaP/Vdelta2-Jdelta3+gammadelta+T+cells+in+nasal+T-cell+lymphoma+and+chronic+active+Epstein-Barr+virus+infection.">Preferential expansion of Vgamma9-JgammaP/Vdelta2-Jdelta3 gammadelta T cells in nasal T-cell lymphoma and chronic active Epstein-Barr virus infection.</a> Am J Pathol. 162 (5), 1629-1638 (2003).</li><li>Imadome, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+mouse+xenograft+models+reveal+a+critical+role+of+CD4++T+cells+in+the+proliferation+of+EBV-infected+T+and+NK+cells.">Novel mouse xenograft models reveal a critical role of CD4+ T cells in the proliferation of EBV-infected T and NK cells.</a> PLoS Pathog. 7 (10), e1002326 (2011).</li><li>Shibuya, A., Nagayoshi, K., Nakamura, K., Nakauchi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphokine+requirement+for+the+generation+of+natural+killer+cells+from+CD34++hematopoietic+progenitor+cells.">Lymphokine requirement for the generation of natural killer cells from CD34+ hematopoietic progenitor cells.</a> Blood. 85 (12), 3538-3546 (1995).</li><li>Spits, H., Yssel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+of+Human+T+and+Natural+Killer+Cells.">Cloning of Human T and Natural Killer Cells.</a> Methods. 9 (3), 416-421 (1996).</li><li>Liu, X., Xu, C., Duan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Red+Blood+Cell+Lysis+Method+for+the+Establishment+of+B+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines.</a> J Vis Exp. (119), (2017).</li><li>Kawabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+flow+cytometric+in+situ+hybridization+assay+to+Epstein-Barr+virus-associated+T/natural+killer+cell+lymphoproliferative+diseases.">Application of flow cytometric in situ hybridization assay to Epstein-Barr virus-associated T/natural killer cell lymphoproliferative diseases.</a> Cancer Sci. 103 (8), 1481-1488 (2012).</li></ol>

وقد وضعت في هذا البروتوكول، تقنية جديدة لإنشاء خطوط الخلايا ناغورني كاراباخ للطن من الدم كله من المرضى كايبف. بالمقارنة مع الأساليب القائمة، والميزة الرئيسية لهذا الأسلوب هو بساطته ومتطلباتها فقط كمية صغيرة من الدم، في حين أنه يسلك بمعدل نجاح مرتفع وظروف جيدة لبقاء الخلية. وعلاوة على ذلك...

فيروس ابشتاين-بار (EBV) في كل مكان ويصيب ليس فقط خلايا ب، ولكن أيضا تي والطبيعية الخلايا (ناغورني كاراباخ) القاتل، الذي يسبب عددا من الأمراض المرتبطة EBV ناغورني كاراباخ/تي ليمفاوية (LPD) وسرطان الغدد الليمفاوية/اللوكيميا، مثل هيموفاجوسيتيك EBV المرتبطة ليمفوهيستيوسيتوسيس و extranodal ناغورني كاراباخ/تي خلية سرطان الغدد الليمفاوية، ونوع الآنف وهيدرا فاكسينيفورمي مثل الأورام اللمفاوية العدوانية ناغورني-كاراباخ خلية اللوكيميا1،،من23. ومن بين هذه هو حادة نشطة EBV (سكايبف) الأمراض المزمنة، وهو الحادث أساسا في شرق آسيا، والذي يعتبر الآن LPD الناجم عن التوسع في الاستنساخ من المصابين EBV T أو ناغورني كاراباخ الخلايا4،5،6، 7، لكن من دون نقص المناعة الظاهر موجودة في كثرة الوحيدات العدوائيه (IM)-مثل الأعراض بما في ذلك الحمى وضخامة وتضخم العقد اللمفية والخلل في الكبد مستمر أو متكرر، فضلا عن ارتفاع EBV-الحمض النووي تحميل في الدم المحيطي8،9. المرضى الذين يعانون من كايبف سوء تشخيص10،11، والمرضية، ودور EBV غير واضح. ولذلك، الخلية الخطوط المشتقة من الأمراض المرتبطة EBV ناغورني كاراباخ/تي ليمفاوية والأورام الليمفاوية مفيدة جداً كنماذج الخلية لتوضيح إليه EBV الناجم عن انتشار الخلايا T أو ناغورني كاراباخ وعلاقتها مع ارتفاع عدد حالات سرطان الدم أو سرطان الغدد الليمفاوية.
وحتى الآن، تم إنشاء العديد من خطوط الخلايا مع تقنيات مختلفة12،،من1314،،من1516. خط خلية بشرية ناغورني-كاراباخ، ناغورني كاراباخ-يس، أنشأت من ناغورني كاراباخ الخلية اللمفاوية/اللوكيميا، استزراع يشترك مع خط خلية stromal ماوس كالتغذية، وحضور رحيل-2 بتركيز 20U كل مل15. KAI3 وكان آخر خط الخلية ناغورني كاراباخ المنشأة من سكايبف مع خط الخلية ليمفوبلاستويد الذاتي (LCL)، أو المرضى الذين يعانون من حساسية شديدة البعوض من الخلايا ب غيرت EBV، كالخلايا المغذية وإضافة لرحيل-2 في 100U/مل16. SNK6 و SNT8 مستمدة من أنسجة الورم الأنفي ناغورني كاراباخ/تي خلية سرطان الغدد الليمفاوية المرضى عن طريق إضافة جرعة عالية من رحيل-2 (700U/mL)12. مع تقنية مماثلة، وكانت الخلية SNK-1 من المرضى كايبف، مثقف من ببمك عن طريق إزالة خلايا تي ومشيراً إلى 700U/مل من رحيل-213،17. وأنشئت عن طريق إزالة خلايا CD4 + و CD8 + الخلايا18SNT13 و SNT15. حتى الآن، الأخرى خطوط الخلية خلية تي وناغورني كاراباخ من المرضى LPD EBV ناغورني كاراباخ/تي كل ما وضعت مع هذا الأسلوب19.
عيوب الأساليب القائمة المذكورة أعلاه تتضمن توظيف الخلايا المغذية، واشتراط جرعة عالية من إيل-2، والاستفادة من قدر 10 مل كل الدم، أو تنقية الخلايا NK/T، والتي صعبة للغاية في العيادة المقرر أن ضرورة التحقق من أي نوع من أنواع الخلايا أن EBV خفية يصيب قبل بداية للثقافة. كما كايبف يحدث أساسا في الأطفال في آسيا، 10 مل الدم لا يسهل الحصول عليها في جميع المناطق. في هذه الدراسة، قمنا بتطوير طريقة بسيطة جديدة مع نسبة نجاح عالية إنشاء خطوط ناغورني كاراباخ و/أو خلية T باستزراع ببمك من كايبف من المرضى باستخدام جرعة منخفضة من rhIL2 ووحدة تخزين 2 مل من الدم كله دون تغذية الخلايا. وقد أثبتت نتائج هذه الطريقة كفاءة عالية وتوفير الوقت.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Hu HLA-DR FITC</td>
			<td>BD</td>
			<td>560944</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hu CD4 FITC</td>
			<td>BD</td>
			<td>555346</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hu/NHP CD8 PE</td>
			<td>BD</td>
			<td>557086</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hu CD3 PE</td>
			<td>BD</td>
			<td>555340</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hu CD16 FITC 3G8</td>
			<td>BD</td>
			<td>555406</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hu/NHP CD56 PE MY31</td>
			<td>BD</td>
			<td>556647</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hu/CD19 PE-Cy7</td>
			<td>BD</td>
			<td>560728</td>
			<td>antibody for FACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>human IL-2</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11147528001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>human serum</td>
			<td>MRC</td>
			<td>CCC118-125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator</td>
			<td>SANYO</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Techcomp</td>
			<td>CT6T</td>
			<td>Centrifugation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscope</td>
			<td>OLYMPUS CKX53</td>
			<td>CKX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated Cell Counter</td>
			<td>Countstar</td>
			<td>IC 1000</td>
			<td>For cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well cell culture cluster</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>3524</td>
			<td>Polystyrene plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25cm2 cell culture flask</td>
			<td>Nest</td>
			<td>707001</td>
			<td>Polystyrene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270</td>
			<td>Component of cell medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI Medium 1640</td>
			<td>life</td>
			<td>22400089</td>
			<td>For cell medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>374</td>
			<td>Component of cell medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x streptomycin penicillin solution BioRoYeeBRY-2309</td>
			<td>BioRoYee</td>
			<td>BRY-2309</td>
			<td>Component of cell medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll paque plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-1440-03</td>
			<td>For in vitro isolation of lymphocyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650</td>
			<td>For freezing cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>flow cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td>BD FACSAria II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>soft ware</td>
			<td>BD</td>
			<td>BD FACSDiva soft ware</td>
			<td>FACS analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an efficient and simple method to establish nk and t cell lines from patients with chronic active epstein-barr virus infection

قد وصفت عددا من الأساليب إنشاء خطوط الخلايا ناغورني كاراباخ للطن من المرضى الذين يعانون من مرض سرطان الغدد الليمفاوية أو ليمفاوية. هذه الأساليب تستخدم الخلايا المغذية، وتنقية الخلايا T أو ناغورني كاراباخ مع قدر من 10 مل دم، أو جرعة عالية من إيل-2. هذه الدراسة ويعرض طريقة جديدة مع استراتيجية قوية وبسيطة لإنشاء خطوط ناغورني-كاراباخ وخلية T باستزراع الطرفية الدم الخلايا وحيدات النوى (PBMC) مع إضافة إيل-2 البشري الماشوب (رحيل-2)، ويستخدم أقل من 2 مل دم الكامل. الخلايا يمكن أن تنتشر بسرعة في غضون أسبوعين، ويستمر لمدة أكثر من 3 أشهر. مع هذا الأسلوب، أنشئت خطوط ناغورني كاراباخ أو خلية تي 7 مع نسبة نجاح عالية. هذا الأسلوب بسيطة وموثوق بها، وينطبق على إنشاء خطوط الخلايا من المزيد من حالات سرطان الغدد الليمفاوية الخلية كايبف أو ناغورني كاراباخ/تي.

بعد 3 أيام الثقافة أثناء إنشاء خطوط الخلايا والخلايا متعددة الأشكال تبدأ في الظهور (الشكل 2). بعد 7 أيام، خلايا تنمو بسرعة، كما يتم زيادة عدد وصلاحية الخلايا بمعدل مرتفع (الشكل 3). مجموعات صغيرة من الخلايا تكون واضحة للعيان بعد 10-14 يوما وتنمو،...

Watch this Scientific Journal Video about An Efficient and Simple Method to Establish NK and T Cell Lines from Patients with Chronic Active Epstein-Barr Virus Infection at JoVE.com

An Efficient and Simple Method to Establish NK and T Cell Lines from Patients with Chronic Active Epstein-Barr Virus Infection

تم تطوير طريقة بسيطة للحصول على استنساخ ناغورني-كاراباخ وخلية T من المرضى كايبف بكفاءة عالية وكمية صغيرة من الدم المحيطي، وجرعة منخفضة من إيل-2.

طريقة فعالة وبسيطة وضع ناغورني كاراباخ وخطوط الخلايا T من المرضى المصابين بالعدوى المزمنة النشطة فيروس ابشتاين-بار

A number of methods have been described to establish NK/T cell lines from patients with lymphoma or lymphoproliferative syndrome. These methods employed ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Derivation of Thymic Lymphoma T-cell Lines from Atm-/- and p53-/- Mice

Derivation of Thymic Lymphoma T-cell Lines from Atm-/- and p53-/- Mice

اشتقاق خطوط التوتة تي خلية سرطان الغدد الليمفاوية من أجهزة الصراف الآلي -- / --</sup و البروتين p53 -- / --</sup الفئران

Established cell lines are a critical research tool that can reduce the use of laboratory animals in research. Certain strains of genetically modified ...

A Simple and Efficient Method to Isolate Macrophages from Mixed Primary Cultures of Adult Liver Cells

وهناك طريقة بسيطة وفعالة لعزل تقوم البلاعم من الثقافات الابتدائية المختلطة من خلايا الكبد الكبار

Kupffer cells are liver-specific resident macrophages and play an important role in the physiological and pathological functions of the liver1-3. Although ...

Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines

إنشاء فيروس ابشتاين بار النمو وتحولت خطوط الخليوي Lymphoblastoid

Infection of B cells with Epstein-Barr virus (EBV) leads to proliferation and subsequent immortalization, resulting in establishment of lymphoblastoid ...

Expanding Cytotoxic T Lymphocytes from Umbilical Cord Blood that Target Cytomegalovirus, Epstein-Barr Virus, and Adenovirus

توسيع الخلايا اللمفاوية T السامة للخلايا من دم الحبل السري أن الفيروس المضخم للخلايا الهدف، فيروس ابشتاين بار، واتش

Virus infections after stem cell transplantation are among the most common causes of death, especially after cord blood (CB) transplantation (CBT) where ...

A Simple and Efficient Method to Detect Nuclear Factor Activation in Human Neutrophils by Flow Cytometry

طريقة بسيطة وفعالة لكشف النووية في تفعيل عامل العدلات الإنسان من قياس التدفق الخلوي

Neutrophils  are the most abundant leukocytes in peripheral blood. These cells are the first  to appear at sites of inflammation and infection, thus ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

في الجسم الحي أسلوب التصوير لتميز الالتهاب الحاد والمزمن

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

An Efficient and High Yield Method for Isolation of Mouse Dendritic Cell Subsets

على طريقة العائد فعالة وعالية لعزل مجموعات فرعية خلية الفأر الجذعية

Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells primarily responsible for acquiring, processing and presenting antigens on antigen ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

عزل وتحليل العدلة لتحديد ما دورها في الغدد اللمفاوية حساسية الخلية وكلاء العلاجية

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Phenotypic and Functional Analysis of Activated Regulatory T Cells Isolated from Chronic Lymphocytic Choriomeningitis Virus-infected Mice

المظهرية والتحليل الوظيفي من المنشط خلايا تنظيم تي المعزولة من الفئران المصابة بفيروس المزمنة الليمفاوي المشيمي

Regulatory T (Treg) cells, which express Foxp3 as a transcription factor, are subsets of CD4+ T cells. Treg cells play crucial roles in immune tolerance ...