Name: saturated fatty acids induce ceramide-associated macrophage cell death
Uploaded: 2017-10-31T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Saturated Fatty Acids Induce Ceramide-associated Macrophage Cell Death at JoVE.com

بتأييد هذا العمل جزئيا بأموال بدء جامعة لويزفيل، ويمنح المعهد الوطني للسرطان (بيثيسدا، ماريلاند) R01CA177679، R01CA180986.

وأقر البروتوكول "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من جامعة لويزفيل.
 1-"الماوس نخاع العظام المستمدة الضامة" (بمدمس) <ol><li>يوثانيزي CO 2 باستخدام ماوس نوع البرية 6-8 أسبوع وصحية. دبوس وصولاً إلى لوحة رغوة والرش مع الإيثانول 70% حتى يتم استيعابه. إزالة عظام السا...

<ol>
	<li>Martins de Lima, T., Cury-Boaventura, M. F., Giannocco, G., Nunes, M. T., Curi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+toxicity+of+fatty+acids+on+a+macrophage+cell+line+(J774).">Comparative toxicity of fatty acids on a macrophage cell line (J774).</a> Clin Sci (Lond). 111 (5), 307-317 (2006).</li><li>Simard, J. R., Zunszain, P. A., Hamilton, J. A., Curry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Location+of+high+and+low+affinity+fatty+acid+binding+sites+on+human+serum+albumin+revealed+by+NMR+drug-competition+analysis.">Location of high and low affinity fatty acid binding sites on human serum albumin revealed by NMR drug-competition analysis.</a> J Mol Biol. 361 (2), 336-351 (2006).</li><li>Penn, A. H., Dubick, M. A., Torres Filho, I. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+Acid+Saturation+of+Albumin+Used+in+Resuscitation+Fluids+Modulates+Cell+Damage+in+Shock:+In+Vitro+Results+Using+a+Novel+Technique+to+Measure+Fatty+Acid+Binding+Capacity.">Fatty Acid Saturation of Albumin Used in Resuscitation Fluids Modulates Cell Damage in Shock: In Vitro Results Using a Novel Technique to Measure Fatty Acid Binding Capacity.</a> Shock. , (2017).</li><li>Vusse, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Albumin+as+fatty+acid+transporter.">Albumin as fatty acid transporter.</a> Drug Metab Pharmacokinet. 24 (4), 300-307 (2009).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+Fatty+Acid+Binding+Protein+Promotes+Saturated+Fatty+Acid-Induced+Macrophage+Cell+Death+through+Enhancing+Ceramide+Production.">Adipose Fatty Acid Binding Protein Promotes Saturated Fatty Acid-Induced Macrophage Cell Death through Enhancing Ceramide Production.</a> J Immunol. 198 (2), 798-807 (2017).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+Fatty+Acid+binding+protein+promotes+skin+inflammation+induced+by+high-fat+diet.">Epidermal Fatty Acid binding protein promotes skin inflammation induced by high-fat diet.</a> Immunity. 42 (5), 953-964 (2015).</li><li>Wen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid-induced+NLRP3-ASC+inflammasome+activation+interferes+with+insulin+signaling.">Fatty acid-induced NLRP3-ASC inflammasome activation interferes with insulin signaling.</a> Nat Immunol. 12 (5), 408-415 (2011).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid-binding+protein+E-FABP+restricts+tumor+growth+by+promoting+IFN-beta+responses+in+tumor-associated+macrophages.">Fatty acid-binding protein E-FABP restricts tumor growth by promoting IFN-beta responses in tumor-associated macrophages.</a> Cancer Res. 74 (11), 2986-2998 (2014).</li><li>Ulloth, J. E., Casiano, C. A., De Leon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Palmitic+and+stearic+fatty+acids+induce+caspase-dependent+and+-independent+cell+death+in+nerve+growth+factor+differentiated+PC12+cells.">Palmitic and stearic fatty acids induce caspase-dependent and -independent cell death in nerve growth factor differentiated PC12 cells.</a> J Neurochem. 84 (4), 655-668 (2003).</li><li>Weischenfeldt, J., Porse, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+Marrow-Derived+Macrophages+(BMM):+Isolation+and+Applications.">Bone Marrow-Derived Macrophages (BMM): Isolation and Applications.</a> CSH Protoc. , (2008).</li><li>Dansen, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-affinity+binding+of+very-long-chain+fatty+acyl-CoA+esters+to+the+peroxisomal+non-specific+lipid-transfer+protein+(sterol+carrier+protein-2).">High-affinity binding of very-long-chain fatty acyl-CoA esters to the peroxisomal non-specific lipid-transfer protein (sterol carrier protein-2).</a> Biochem J. 339 (Pt 1), 193-199 (1999).</li><li>Ulloth, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+methyl-beta-cyclodextrin+toxicity+in+NGF-differentiated+PC12+cell+death.">Characterization of methyl-beta-cyclodextrin toxicity in NGF-differentiated PC12 cell death.</a> Neurotoxicology. 28 (3), 613-621 (2007).</li></ol>

إعداد الأحماض الدهنية الحل السليم ذات أهمية حاسمة لدراسة الوظيفة البيولوجية للأحماض الدهنية. تحييد الأحماض الدهنية يزيد ذوبانه في محلول مائي. ومع ذلك، أملاح الصوديوم للأحماض الدهنية، وخاصة الأحماض الدهنية المشبعة، لا تزال منخفضة القابلية للذوبان في الماء أو في برنامج تلفزيوني كما لاحظ?...

الأحماض الدهنية تلعب دوراً حاسما في استقلاب الطاقة وفي تركيب غشاء فوسفوليبيدات في أنواع مختلفة من الخلايا. وقد الأحماض الدهنية انخفاض معدلي الذوبان مائي. إعداد مناسبة من الأحماض الدهنية ذات أهمية حاسمة لدراسة الوظائف البيولوجية للأحماض الدهنية في خلايا الثدييات. عندما يتم إعداد الأحماض الدهنية مع الإيثانول، الأحماض الدهنية عديدة قد تظهر آثارها السمية الصابون (المنظفات) على غشاء الخلية، حتى في تركيزات منخفضة نسبيا1. كالناقل الطبيعي، الرئيسية للأحماض الدهنية الحرة في المصل، يعتبر الزلال ناقل جيدة للأحماض الدهنية التسليم في المختبر للأحماض الدهنية الدالة فحوصات2،،من34. ومع ذلك، تفاصيل إعداد المتقارن الأحماض الدهنية والزلال عادة لا تتوفر حتى ولو تم نشر العديد من الأوراق البحثية باستخدام الأحماض الدهنية.
أعرب الضامة عالية البروتين ملزمة الأحماض الدهنية البشرة والدهنية الأحماض الدهنية ملزمة البروتين5،6،،من78. أنها نشاط امتصاص المشبعة والأحماض الدهنية غير المشبعة التي قد تنظم على وظائف المناعة. لدراسة تأثير الأحماض الدهنية في الضامة، والخلايا الأخرى، كانت أساليب مختلفة لإعداد الأحماض الدهنية التطبيقية1،،من79. استخدام الأحماض الدهنية مستعدة على نحو ملائم/مصل الزلال يصرف للتحقيق في تأثير الأحماض الدهنية في الدالة بلعم ذا أهمية حاسمة في الحصول على بيانات ذات مغزى بيولوجيا. يمكن أن توفر دراسات بشأن تأثير الأحماض الدهنية في بلعم الدالة المعرفة الأساسية والأهداف العلاجية المحتملة المتعلقة بالأيض الأحماض الدهنية في أمراض تشترك بلعم.

<table width="828">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:357px;height:20px;">CPX Ultrasonic Bath&#160;</td>
			<td style="width:208px;">Bransonic</td>
			<td style="width:153px;">Model 2800</td>
			<td style="width:111px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sodium palmitate (PA)</td>
			<td>Nu-Chek Prep, Inc.</td>
			<td>S-1109</td>
			<td>M.W. 278</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sodium stearate (SA)</td>
			<td>Nu-Chek Prep, Inc.</td>
			<td>S-1111</td>
			<td>M.W. 306</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bovine serum albumin (BSA), fatty acid-free</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>9048-46-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Mouse macrophage colony stimulating factor (mM-CSF)&#160;</td>
			<td>Cell Signaling Technology,&#160; Inc.</td>
			<td>5228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RPMI 1640</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>71002-878</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Annexin V, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A13201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">7-AAD</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>559925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Monoclonal anti-ceramide antibody (mouse IgM)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8104-50TST</td>
			<td>Clone: MID 15B4</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Goat Anti-Mouse IgM Antibody, &#181; chain, FITC conjugate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>AP128F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fixation buffer</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>420801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Permeabilization buffer</td>
			<td>Ebioscience</td>
			<td>4307693</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Red Blood Cell Lysis Buffer&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>11814389001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Annexin V Binding Buffer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>556454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L929 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Corning&#160;Cell Lifter&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>07-200-364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:357px;height:21px;">Note: M.W. is for molecular weight.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

saturated fatty acids induce ceramide-associated macrophage cell death

أعرب الضامة عالية البروتين ملزمة الأحماض الدهنية البشرة والدهنية الأحماض الدهنية ملزمة البروتين. أنها نشاط امتصاص المشبعة والأحماض الدهنية غير المشبعة، والتي قد تلعب دوراً حاسما في تنظيم وظائفهم المناعية. وأظهرت العديد من الدراسات أن الأحماض الدهنية المختلفة، المشبعة أو غير المشبعة، قد تمتلك تأثيرات مختلفة على نمو الخلايا ووظيفتها. ومع ذلك، تختلف النهج المستخدمة لإعداد الأحماض الدهنية، التي قد تؤدي إلى نتائج غير الفسيولوجية. ألبومين المصل، ناقل طبيعي للأحماض الدهنية في الدم المحيطي الثدييات، يوصي بتشكيل المتقارن معقدة مع ملح الصوديوم للأحماض الدهنية دراسة وظيفة الأحماض الدهنية في خلايا الثدييات، وبالتالي تقليل سمية الصابون الأحماض الدهنية. وهكذا، بسيطة وسريعة نسبيا التدفئة وسونيكاتينج أسلوب تطوير والمقدمة هنا لتشكيل المتقارنة الأحماض الدهنية جيش صرب البوسنة. يمكننا وصف بروتوكول باستخدام الأحماض الدهنية المشبعة، لا سيما دهني الأحماض للحث على موت الخلايا الشديدة في الماوس نخاع العظام المستمدة الضامة. كذلك ندلل على أن موت الخلايا المستحثة بالأحماض الدهنية المشبعة يرتبط ارتباطاً إيجابيا بمستويات السيراميد الخلوية المتراكمة. ويمكن تمديد هذا الأسلوب للدراسات المتعلقة بتأثير الأحماض الدهنية في خلايا الثدييات الأخرى.

السمنة زيادة تركيزات الأحماض الدهنية الحرة في مصل الدم. البالعات المهنية، الضامة نشاط تناول الأحماض الدهنية للحفاظ على التوازن المضيف. خلال هذه العمليات، قد حمل الدهون محمل بشكل زائد بلعم موت الخلية. وتحقيقا لهذه الغاية، نحن مثقف بمدمس في المختبر مع مستويات البدان?...

Watch this Scientific Journal Video about Saturated Fatty Acids Induce Ceramide-associated Macrophage Cell Death at JoVE.com

Saturated Fatty Acids Induce Ceramide-associated Macrophage Cell Death

نحن توضيح طريقة مستقيم إلى الأمام لاشتقاق مورين الضامة الأولية من خلايا نخاع العظام ويرتبط طريقة بسيطة لتحضير الأحماض الدهنية جيش صرب البوسنة. ثم نظهر أن الأحماض الدهنية المشبعة يمكن أن يستحث موت الخلايا بلعم، ومثل موت الخلايا يرتبط إيجابيا مع تراكم مستويات السيراميد الخلوية.

الأحماض الدهنية المشبعة الحث على موت الخلايا المرتبطة السيراميد بلعم

Macrophages highly express epidermal fatty acid-binding protein and adipose fatty acid-binding protein. They actively uptake saturated and unsaturated ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Methods to Assess Beta Cell Death Mediated by Cytotoxic T Lymphocytes

طرق لتقييم موت الخلايا بيتا وساطة من قبل الخلايا اللمفاوية التائية السامة

Type 1 diabetes (T1D) is a T cell mediated autoimmune disease.  During the pathogenesis, patients become progressively more insulinopenic as 
insulin ...

Investigation of Macrophage Polarization Using Bone Marrow Derived Macrophages

التحقيق في الاستقطاب البلاعم عن طريق نخاع العظم الضامة المشتقة

The article describes a readily easy adaptive in vitro model to investigate macrophage polarization. In the presence of GM-CSF/M-CSF, hematopoietic ...

Determination of Tolerable Fatty Acids and Cholera Toxin Concentrations Using Human Intestinal Epithelial Cells and BALB/c Mouse Macrophages

تقرير من الأحماض الدهنية المسموح وتركيزات ذيفان الكوليرا عن طريق خلايا الإنسان الظهارية في الأمعاء وBALB / ج الضامة ماوس

The positive role of fatty acids in the prevention and alleviation of non-human and  human diseases have been and continue to be extensively documented. ...

Bone Marrow-derived Macrophage Production

نخاع العظام المستمدة من بلعم الإنتاج

Macrophages are critical components of the innate and adaptive immune responses, and they are the first line of defense against foreign invaders because ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

تصور بلعم الفخاخ خارج الخلية باستخدام المجهر [كنفوكل]

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Detection of Inflammasome Activation and Pyroptotic Cell Death in Murine Bone Marrow-derived Macrophages

الكشف عن التنشيط إينفلاماسومي وموت الخلايا بيروبتوتيك في مورين الضامة المشتقة من نخاع العظام

Inflammasomes are innate immune signaling platforms that are required for the successful control of many pathogenic organisms, but also promote ...

An Immunohistopathologic Study to Profile the Folate Receptor Beta Macrophage and Vascular Immune Microenvironment in Giant Cell Arteritis

دراسة إيمونوهيستوباثولوجيك الشخصية بلعم بيتا مستقبلات حمض الفوليك والأوعية الدموية المكروية محصنة في الخلية العملاقة الدموية

Giant cell arteritis (GCA) is a chronic immune-mediated disease of medium-to-large sized arteries that affects older adults. GCA manifests with arthritis ...

Processing of Bronchoalveolar Lavage Fluid and Matched Blood for Alveolar Macrophage and CD4+ T-cell Immunophenotyping and HIV Reservoir Assessment

Processing of Bronchoalveolar Lavage Fluid and Matched Blood for Alveolar Macrophage and CD4+ T-cell Immunophenotyping and HIV Reservoir Assessment

معالجة سائل غسل القصبات الهوائية والدم المتطابق لماكروفاج النفيل وCD4+ النمط المناعي للخلايا T وتقييم خزان فيروس نقص المناعة البشرية

Bronchoscopy is a medical procedure whereby normal saline is injected into the lungs via a bronchoscope and then suction is applied, removing ...

Visualization of Macrophage Lytic Cell Death During Mycobacterial Infection in Zebrafish Embryos via Intravital Microscopy

التصور للموت الخلية الليتيك الضامة اثناء العدوى المتفطرات في الاجنه Zebrafish عن طريق المجهر الانترافيتال

Zebrafish is an excellent model organism for studying innate immune cell behavior due to its transparent nature and reliance solely on its innate immune ...