Name: a computerized test battery to study pharmacodynamic effects on the central nervous system of cholinergic drugs in early phase drug development
Uploaded: 2019-02-11T13:40:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Computerized Test Battery to Study Pharmacodynamic Effects on the Central Nervous System of Cholinergic Drugs in Early Phase Drug Development at JoVE.com

Los autores no tienen ninguna agradecimientos.

Cada estudio independiente con esta batería de pruebas fue aprobado por los comités de ética independientes, a saber, ya sea «ética médica Comité de centro médico de la Universidad de Leiden», Leiden, los países bajos, o el ' Stichting Beoordeling Ethiek Biomedisch Onderzoek, Assen, los países bajos.
1. computarizado prueba batería evaluaciones
Nota: La batería debe aplicarse bajo condiciones controladas (p. ej., intensidad de la luz, temperatura y ruido de fondo) para minimizar la influencia de factores exógenos sobre los resultados del sujeto. Pruebas que pueden realizarse varias veces deben ser administradas al menos una vez antes de la administración de drogas para servir como línea de base. La Tabla de materiales proporciona un resumen de los materiales y equipos de la batería.
<ol><li>Prueba de seguimiento adaptable
	<ol>
<li>Encienda la potencia del equipo de pruebas de la batería y encienda la computadora y pantallas.</li>
		<li>Asiento al tema frente a la pantalla (asunto) y joystick.</li>
		<li>Comprobar cuál es la mano preferida sobre el tema y ajustar en consecuencia el joystick.</li>
		<li>Indicar el tema que mantenga pulsado el joystick como una pluma, con el brazo descansando sobre la mesa.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado.</li>
		<li>Rellene los detalles solicitados tales como tema y número de estudio.</li>
		<li>Ejecutar la prueba haciendo clic en 'Inicio' en la pantalla de asistente de prueba.</li>
		<li>Supervisar el rendimiento del sujeto en la pantalla de asistente de prueba y animar el tema para mantener el círculo alrededor del punto si el sujeto no puede superar el factor de dificultad 2.</li>
	</ol></li>
	<li>Movimientos sacádicos oculares y la prueba de búsqueda lisa Nota: Los electrodos del movimiento de ojo deben sujetarse a los sitios especificados en el protocolo de estudio clínico basado en el sistema 10-20 de la Federación Internacional de sociedades de electroencefalografía y Neurofisiología clínica.<ol>
<li>Identificar el ángulo externo del ojo derecho (es decir, el ángulo en el extremo exterior de la fisura entre los párpados).</li>
		<li>Repita este procedimiento para el ojo izquierdo.</li>
		<li>Identificar el lugar para el electrodo de masa de 2 cm sobre el nasion (es decir, la raíz de la nariz).</li>
		<li>Frotar bien los sitios de los electrodos de ojo utilizando una paño de algodón la piel limpieza de gel para medición bioeléctrica (ver paso 3.1) para disminuir la impedancia de la piel y utilizar un palillo de algodón-wisp.</li>
		<li>Tenga cuidado de no desgastar la piel, pero no lo frote muy suavemente. Limpie el gel residual con una gasa.</li>
		<li>Aplicar los tres electrodos autoadhesivos en los sitios preparados.</li>
		<li>Conecte los cables a los electrodos del ojo. Coloque la mano detrás del botón del electrodo para evitar que empujando la piel.</li>
		<li>Dirija los cables a lo largo de las orejas sobre el hombro del sujeto para evitar que los alambres de colgar antes de los ojos.</li>
		<li>Conecte los tres cables en el medidor de impedancia de electrodo.</li>
		<li>Compruebe la impedancia en la pantalla: Si la impedancia es de más de 5 kΩ, comprobar la calidad del accesorio de electrodo.</li>
		<li>Conectar al tema con el sistema de medición del movimiento de ojo enchufando todos los electrodos en el telefector y conecte el cable al amplificador.</li>
		<li>Instruir al sujeto para colocar la cabeza en el reposacabezas y relajarse, seguir la luz en la pantalla mediante el movimiento de los ojos y para no mover la cabeza.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado. Rellene los detalles solicitados tales como tema y número de estudio.</li>
		<li>Iniciar la prueba presionando la barra espaciadora sobre la instrucción 'go' en la pantalla de asistente de prueba.</li>
	</ol></li>
	<li>VAS de Bond y Lader
	<ol>
<li>Instruir al sujeto para anotar cómo se siente actualmente usando el ratón para marcar la línea analógica visual presentada en la pantalla.</li>
		<li>Indicar al tema que los puntos más extremos de la línea representan la sensación más extrema imaginable.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado. Rellene los detalles solicitados tales como tema y número de estudio.</li>
		<li>Instruir al sujeto para iniciar la prueba haciendo clic en el ratón.</li>
	</ol></li>
	<li>Balanceo del cuerpo Nota: Temas deben usar zapatos planos durante esta prueba. No hay instrucciones u otros estímulos se presentan en la pantalla del ordenador.<ol>
<li>Pedir el tema para estar delante del ordenador, con una distancia entre los pies de unos 10 cm y brazos colgando al lado del cuerpo.</li>
		<li>Fije la cadena que se origina en el potenciómetro integrado en el equipo de batería de pruebas sobre la cintura de los voluntarios (por ejemplo, el cinturón o pantalones) usando el clip en el extremo de la cuerda.</li>
		<li>Ajuste la altura de la mesa con el ordenador en ella hasta que la cadena es horizontal; una desviación máxima de 5 ° es aceptable. Pedir el tema para cerrar sus ojos.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado. Rellene los detalles solicitados tales como tema y número de estudio.</li>
		<li>Iniciar la prueba haciendo clic en 'Iniciar cuerpo inamovible muestreo sesión' en la pantalla de la computadora del ayudante de la prueba.</li>
	</ol></li>
	<li>VVLT Nota: Los voluntarios no se permiten escribir palabras en cualquier momento durante el procedimiento entero.<ol>
<li>Instruir al sujeto que durante la siguiente presentación automática (visual) de las palabras, el tema debe nombrar las palabras cuando éstas aparecen y recuerdan, y que al final de la lista, todas las palabras que se llaman deben ser nombrados, cada palabra una sola vez.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado. Rellene los detalles solicitados tales como tema y número de estudio.</li>
		<li>Indique el tema a leer las instrucciones en la pantalla.</li>
		<li>Dile al tema que la prueba se iniciará cuando el sujeto presiona la barra espaciadora.</li>
		<li>Grabar las palabras recordadas (correcto, incorrecto, y palabras mencionan varias veces) haciendo clic en las palabras recordadas en la pantalla de asistente de prueba.</li>
	</ol></li>
	<li>Fármaco-EEG Nota: Los electrodos deben fijarse a los sitios especificados en el protocolo, y lugares se basan en el sistema 10-20 de la Federación Internacional de sociedades de electroencefalografía y Neurofisiología clínica.<ol>
<li>Medir e identificar la ubicación exacta de los electrodos en la cabeza del sujeto.</li>
		<li>Frote bien el sitio utilizando un paño de algodón palo y gel limpiador de la piel para disminuir la impedancia de la piel. Tenga cuidado de no desgastar la piel, pero no lo frote muy suavemente.</li>
		<li>Soporte detrás del sujeto y coloque los electrodos en los sitios limpios. Trabajar de atrás hacia delante.</li>
		<li>Ponga la tapa del electrodo a través de la caja con la pasta y limpie el resto golpeando la tapa a lo largo del borde de la caja. Nota: El tapón debe llenar completamente, pero no sobrecargado con pasta.</li>
		<li>Presione el electrodo en el sitio limpio separando el pelo del cuero cabelludo si es necesario. Introduzca el electrodo en la piel y tenga cuidado que son pelos tan poco como sea posible bajo el electrodo.</li>
		<li>Poner el cable del electrodo sobre el hombro del sujeto en el regazo del sujeto.</li>
		<li>Use un pequeño trozo de pelo para fijar el electrodo con la pasta (que aparece de la apertura de la tapa del electrodo) y una pieza adicional del pelo (en ángulo recto con respecto a la otra pieza) con alguna pasta para reparar además el electrodo a la piel.</li>
		<li>Compruebe si la impedancia del electrodo por debajo de 5 kΩ y ajusta si es necesario.</li>
		<li>Utilice cinta para empaquetar los cables y para fijar el paquete en la ropa del sujeto.</li>
		<li>Conectar los cables del electrodo del equipo de grabación.</li>
		<li>Abrir el programa EEG en el equipo.</li>
		<li>Instruir al sujeto a relajarse y a no moverse o hablar durante la medición.</li>
		<li>Indicar el tema cerrar los ojos del sujeto.</li>
		<li>Iniciar el script de prueba mediante el programa instalado.</li>
	</ol></li>
</ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Evaluación</td>
			<td>Dominio</td>
			<td colspan="2">Descripción</td>
			<td colspan="2">Valores de resultado</td>
			<td>Específicos</td>
		</tr>
<tr>
<td>Prueba de seguimiento adaptable</td>
			<td>Coordinación visuo-motor, vigilancia</td>
			<td colspan="2">Un círculo se mueve aleatoriamente sobre la pantalla del ordenador. El sujeto debe tratar de mantener un punto dentro del círculo móvil accionando una palanca de mando. Si este esfuerzo tiene éxito, aumenta la velocidad del círculo móvil. La velocidad se reduce si el tema de prueba no puede mantener el punto dentro del círculo.</td>
			<td colspan="2">Porcentaje de tiempo seguido correctamente</td>
			<td>Tiempo de administración: 4 minutos</td>
		</tr>
<tr>
<td>Prueba de movimiento de ojo sacádicos</td>
			<td>Movimientos de ojo sacádicos</td>
			<td colspan="2">El tema es necesaria para seguir una fuente de luz con sólo los ojos, que se mueve horizontalmente en la pantalla a 58 cm de distancia. La fuente de luz salta de lado a lado para medición de movimientos de ojo sacádicos.</td>
			<td colspan="2">Porcentaje del tiempo de los ojos del sujeto están lisos de la búsqueda del objetivo, para cada velocidad de estímulo y para cada frecuencia de estímulo</td>
			<td>Tiempo de administración: 2 minutos.</td>
		</tr>
<tr>
<td>Prueba de búsqueda lisa</td>
			<td>Búsqueda lisa</td>
			<td colspan="2">El tema es necesaria para seguir una fuente de luz con sólo los ojos, que se mueve horizontalmente en la pantalla a 58 cm de distancia. La fuente de luz se mueve continuamente para medición de búsqueda lisa.</td>
			<td colspan="2">Velocidad máxima (grados/s), tiempo de reacción (s), salto de tamaño (grado), primaria desviación sacádicos (deg) y la imprecisión (%) se calculan para cada movimientos oculares sacádicos</td>
			<td>Tiempo de administración: 2 minutos.</td>
		</tr>
<tr>
<td>Prueba de balanceo del cuerpo</td>
			<td>Control postural en un solo plano</td>
			<td colspan="2">El tema se le pide que quieto, con los ojos cerrados mientras que conectado al medidor por medio de una cuerda. Los pies deben ser parte de 10 cm aproximadamente y las manos en una posición relajada al lado del cuerpo.</td>
			<td colspan="2">Movimiento antero-posterior en mm</td>
			<td>Tiempo de administración: 2 minutos.</td>
		</tr>
<tr>
<td>Escala de análogo visual (B & L)</td>
			<td>Valoración subjetiva del estado de alerta, estado de ánimo, calma</td>
			<td colspan="2">Sujetos se les pide que indican cómo se siente con respecto a un estado específico haciendo clic en una línea de 100 mm, flanqueado por dos adjetivos opuestos (e.g. sueño - despierto). La prueba consta de 16 elementos (es decir, líneas).</td>
			<td colspan="2">Todas las puntuaciones se miden en milímetros, desde el principio de la línea a la izquierda hasta el punto donde la marca producida por el sujeto cruza la línea. Esta puntuación representa el adjetivo a la derecha de la línea (por ejemplo, una puntuación en una escala marcada despierta - somnolencia indica que el sujeto se siente drowsier). Se calculan puntuaciones compuestas para los tres dominios: el total para el estado de alerta se compone de nueve cuentas, estado de ánimo de cinco y la tranquilidad de los dos.</td>
			<td>Tiempo de administración: 2 minutos.</td>
		</tr>
<tr>
<td>Test de aprendizaje verbal visual</td>
			<td>Aprendizaje, a corto y largo plazo memoria recuperación</td>
			<td colspan="2">Temas se presentan 30 palabras de tres ensayos consecutivos de la palabra, es decir, la palabra prueba de aprendizaje. Cada ensayo termina con una llamada libre de las palabras presentadas (inmediata memoria - una prueba para determinar la adquisición y consolidación de la información). Aproximadamente 30 minutos después de comenzar el primer ensayo, el sujeto se le pide recordar tantas palabras como sea posible (retrasado recuperación - esta prueba medidas activa recuperación de la memoria de largo plazo). Inmediatamente después de eso, el tema somete a una prueba de reconocimiento de memoria, que consta de 15 presentan palabras y 15 'distractores' (reconocimiento retrasado - pruebas almacenamiento de memoria).</td>
			<td colspan="2">Por juicio se registran un número correcto, total número incorrecto y total número total de dobles. Para el ensayo de reconocimiento, se registran el total correcto, total número incorrecto y tiempo de reacción (y SD de RT).</td>
			<td>Tiempo de administración: 10 minutos</td>
		</tr>
<tr>
<td>Fármaco-EEG</td>
			<td>actividad de EEG cuantitativa, cerebral</td>
			<td colspan="2">Sujetos se les pide a relajarse y según el protocolo de mantener los ojos abierto o cerraron.</td>
			<td colspan="2">Cada plomo (plomo frontal: frontal (Fz) - central (Cz), principal central : Cz - parietal (Pz), plomo parietal : Pz - occipital (Oz)), se realiza un análisis rápido Fourier transformación para obtener la suma de las amplitudes en el delta-(2-4 Hz), theta (4-7.5 Hz), alfa (7,5-13,5 Hz), beta (13.5-35 Hz) y gamma - gamas de frecuencia (35-48,9 Hz)</td>
			<td>Tiempo de administración: 4 minutos</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabla 1: Descripción y características de las evaluaciones. Descripción de las características específicas de las pruebas individuales, incluyendo una descripción del dominio que se prueba el tiempo de administración y las variables de resultado específico.

Los autores no tienen nada que revelar.

Prueba de efecto farmacodinámico es clave en el desarrollo de fármacos de fase temprana, como garantiza el paso siguiente de la introducción de un nuevo medicamento en un mayor número de pacientes34. En el caso de fármacos desarrollados para ser activos en el SNC es especialmente importante mostrar los efectos que indican la penetración de la barrera blood - brain35. Aunque una punción lumbar después de que un tema ha recibido la droga es a menudo elegida como un proxy para la penetración de la barrera blood - brain, es una técnica invasiva y onerosa y por otra parte, la presencia de la droga en el líquido cefalorraquídeo (LCR) no es igual a activación de la droga atando a sus destinos en el cerebro.
Fase I estudios tradicionalmente son estudios de gran cantidad de datos, con múltiples series de cuotas en estrecha sucesión, para caracterizar el perfil farmacocinético y farmacodinámico de un nuevo medicamento. Medicamentos que funcionan en el SNC son que puedan afectar a más de un dominio neuropsicológico y neurofisiológico, como diversos receptores a menudo no se encuentran sólo en una región del cerebro individual. Los principales implicados en la cognición los receptores nicotínicos se encuentran en el prefrontal, el motor y cortezas entorrinal y con menor densidad, en la corteza cingulada y temporal corteza, tálamo y ganglios basales36. Además, una región del cerebro solo a menudo está conectada a múltiples otros cerebro regiones37.
Por lo tanto, la base de la batería de test computarizado consta de un conjunto de pruebas sensibles, de los cuales puede modificarse la composición (es decir, las pruebas pueden añadir o quitar de la batería) basado en los efectos esperados del CNS, para maximizar la probabilidad de resultados positivos. Esta flexibilidad permite la batería adecuada para su uso en estudios con distintos tipos de drogas, sino también en diferentes poblaciones. Por ejemplo, en un estudio de investigación de un nuevo medicamento en un pequeño grupo de 24 pacientes con la enfermedad de Huntington (un trastorno del movimiento neurodegenerativas), la batería core fue actualizada para incluir una prueba de habilidad motor fina (el finger tapping test, donde en 5 consecutivos ensayos de 10 s cada uno, la barra espaciadora necesita taladrarse con el dedo índice de la mano dominante lo antes posible), como una de las características de la enfermedad de Huntington son alteraciones en la habilidad de motor fina38. Medición de la motricidad fina no está incluido en la batería central, pero es de importancia para el estudio de posibles cambios en el motor en funcionamiento en la enfermedad de Huntington. Sin embargo, las pruebas de núcleo han permanecido bastante estables con el tiempo, que indica la sensibilidad de la batería para los efectos de un gran número de fármacos.
El número de pruebas de la batería debe mantenerse conciso para permitir múltiples pruebas siguientes FDA, donde deben planificarse sesiones de prueba tal que el (presunto) perfil farmacocinético de un fármaco es seguido de cerca. Se generará información sobre efecto farmacodinámico coincidiendo con procesos farmacocinéticos tales como absorción, pico de concentración y eliminación de la droga, información que puede combinarse en un modelo farmacocinético-farmacodinámico, que fue también desarrolló el protocolo descrito en este documento29.
En algunos casos, el mecanismo exacto de acción de un compuesto en fase de investigación no es entiende todavía completamente de los estudios en animales. Durante las últimas dos décadas se han utilizado las pruebas de la base de la batería computarizada para caracterizar el perfil de los efectos de un gran número de diferentes fármacos en fase de investigación pero también registradas desde que se conoce el mecanismo de acción. Esto ha resultado en una base de datos de perfiles específicos de drogas, donde diferentes medicamentos con el mismo mecanismo de acción, perfiles de batería de prueba comparables se observan3. Esto permite que el perfil de un nuevo fármaco frente a los perfiles de compuestos de los cuales se conoce el mecanismo de acción, y si se encuentra una semejanza esto podría dar a conocer el mecanismo de acción del compuesto en fase de investigación. El hecho de que perfiles de prueba comparables han sido identificados por diferentes compuestos con un mecanismo similar de acción proporciona prueba fuerte para la sensibilidad de las pruebas de la base de la batería de pruebas para efectos de la droga del CNS.
La posibilidad de repetición en un período corto de tiempo después de la administración de drogas es vital para el éxito de una batería como la batería computarizada descrita en este documento. El SNC sin embargo está influenciado por factores endógenos y exógenos, alterando prueba de rendimiento39 de un tema. Esto destaca la importancia de la normalización de las condiciones del medio de prueba, junto con otros factores específicos del tema. Las condiciones exactas que se mantendrán durante la ejecución de las pruebas deben ser especificadas en el protocolo del estudio y confirmó uniformemente en todas las materias durante todo el estudio. La iluminación y la temperatura deben mantenerse constante durante el periodo de prueba y la cantidad de distracción (ruidos, varias personas en la sala durante la prueba, etc.) debe mantenerse al mínimo. Otros factores que pueden controlarse son ciertos aspectos del estilo de vida de los sujetos, tales como ritmo diurno, descanso y fatiga, la ingesta de cierto tipo de alimentos y bebidas y el uso de sustancias psicoactivas.
Además, es un hecho conocido que los resultados de la prueba neuropsicológica pueden ser influenciados por práctica o aprendizaje efectos40, especialmente memoria exámenes como historia y palabra lista aprendizaje41 (p. ej., prueba VVLT). Por lo tanto, atención específica debe de asignarse al número de sesiones de entrenamiento y ejecución de la prueba.
Otro estandarizado, las baterías de test informatizados han sido desarrolladas y son ampliamente utilizadas en el desarrollo de drogas, con los que se describen en Egerhazi et al. 22 y Underwood et al. 23 entre los más utilizados en los ensayos clínicos. Como se mencionó antes, la batería de test automatizado descrito en el documento actual es diferente de estos sistemas que también incluye medidas de evaluaciones neurofisiológicas (p. ej., pupilometría, movimiento del ojo, EEG) por medio de complementos fácil en el sistema informático, además de las más tradicionales pruebas neuropsicológicas como el test de n-back (descrito en Alvarez-Jiménez et al. 29). los sistemas de otros sin embargo son ordenadores portátiles, que hace pruebas en múltiples sitios factibles. Actualmente la instalación de la batería de test computarizado desarrollada por CHDR no es adecuada para el fácil transporte entre sitios. Una versión más portable (es decir, ordenador portátil) ha sido diseñada y actualmente está siendo validada. Esto permite para probar en ensayos clínicos multicéntricos y posiblemente incluso en el hogar de, por ejemplo, pacientes que no pueden visitar a la investigación Instituto debido a problemas de movilidad.
La batería automatizada es una batería flexible, en el sentido de que otras pruebas neuropsicológicas o fisiológicos que han demostrado ser sensibles a los efectos de la droga del CNS pueden ser incorporados en el sistema. Eventos relacionados con potenciales (ERP)42 son un ejemplo reciente de este proceso: ERPs están ganando interés en la investigación clínica y está creciendo la demanda de la inclusión de pruebas de medición de diferentes ERPs en los ensayos clínicos. Se está realizando la validación continua de ERPs para ejecución en la batería de test informatizados en CHDR.
En Resumen, la batería de test estandarizados, informatizados de evaluaciones neuropsicológicas y neurofisiológicas descritas en este documento está diseñada para investigar los efectos farmacodinámicos de la droga activa CNS en desarrollo de fármacos de la fase temprana. Las pruebas de base han mostrado fiable y en varias ocasiones a ser sensibles a los efectos del CNS, que indica la penetración de la barrera hematoencefálica y la activación farmacológica de sitios de destino en el SNC.

Con la esperanza de vida humana en constante aumento durante el último siglo la prevalencia e incidencia de las enfermedades del cerebro del envejecimiento, tales como demencia y otros procesos neurodegenerativos, crecen también. En paralelo, por lo tanto está ampliando el desarrollo de nuevos fármacos para el tratamiento de estas enfermedades. Sin embargo, muchos nuevos fármacos destinados a ser activos en el SNC no llegan al mercado debido a la falta de efectos centrales o efectos secundarios no deseados en las fases posteriores de desarrollo de drogas1. En fase tradicional 1 estudios los objetivos son obtener información sobre la farmacocinética, es decir, el efecto que el cuerpo humano tiene sobre el medicamento (por ejemplo por metabolización), así como de seguridad y tolerabilidad de la droga nueva. Prueba temprana del efecto farmacodinámico (el efecto que la droga tiene en el cuerpo), sin embargo, puede ser incluso más importante en las decisiones sobre el avance en el desarrollo clínico de un nuevo compuesto y puede ayudar a evitar decisiones erróneas con consecuencias en el más adelante fases del desarrollo del proceso2.
En las últimas dos décadas, el centro para investigación de drogas humana (CHDR) ha desarrollado una batería de pruebas computarizadas de medidas neuropsicológicas y neurofisiológicas sensibles a los efectos del CNS de drogas. Esta batería de pruebas se utiliza varias veces durante el día para medir efectos farmacodinámicos de un compuesto nuevo. Tal modo proporciona evidencia de la capacidad del medicamento para tener el efecto deseado, para penetrar la barrera hematoencefálica y entrar en el cerebro, o la falta de ella3. También, los resultados de la batería podrían proporcionar información sobre el mecanismo de acción de un compuesto como las pruebas individuales corresponden a dominios específicos de CNS drogas sensibles. Por ejemplo, si se observan efectos de la nueva droga en el laberinto de aprendizaje de prueba, que es una prueba de memoria de trabajo visoespacial, esto podría indicar que el fármaco actúa sobre receptores en partes del cerebro involucrada en la memoria de trabajo visoespacial. Además, la batería se utiliza para detectar los efectos secundarios del CNS para compuestos que no están diseñados para trabajar en el SNC, y donde la activación del CNS debe descartarse.
La batería se compone de un gran número de pruebas cognitivas y neurofisiológicas, que han demostrado ser sensibles a detectar efectos farmacodinámicos de CNS drogas activas3,4,5,6. La batería core consta de seis dominios neuropsicológicos: funcionamiento ejecutivo, atención, memoria, funcionamiento visuomotor o coordinación, motricidad y efectos subjetivos de la droga. Las pruebas principales son: ojo sacádicos movimiento7, búsqueda lisa ojo movimiento8, el Bowdle VAS9, el bonos y Lader VAS10, balanceo de cuerpo, seguimiento adaptable11, aprendizaje verbal visual12y cuantitativo, que cubrir los principales dominios cognitivos y neurofisiológicos mencionados anteriormente. Estas pruebas han demostrado ser capaces de medir los cambios en las funciones del CNS como resultado de la administración de varios tipos y clases de fármacos (véase abajo). La batería puede administrarse repetidamente (hasta 12 veces después de la administración de la droga) debido al tiempo de administración total de 30 min, que es esencial para caracterizar el perfil de concentración efecto de una droga. La batería puede ser ampliada y ajustada con diferentes pruebas para investigar las clases de fármacos específicos o receptores específicos aún. La batería de test ha sido validada en una amplia gama de fármacos que actúan sobre diferentes sistemas CNS (p. ej., benzodiazepinas, antipsicóticos, etanol y cannabis12,13,14,15 ,16,17,18,19,20,21) para ser capaces de demostrar de manera fiable efectos CNS relacionados con las drogas.
Mientras que otro computarizado prueba baterías existen (descrito por ejemplo en Egerhazi et al. 22 y Underwood et al. 23) y son ampliamente utilizados en los ensayos clínicos, la batería de pruebas descrita en este documento se destaca ya que no sólo incluye pruebas neuropsicológicas como la VVLT y la caña, pero también mediciones neurofisiológicas (p. ej., EEG, movimientos oculares las pruebas), así la combinación de diferentes aspectos del cerebro en funcionamiento en una prueba de batería y que mejor refleja la naturaleza multimodal de la conducta cognitiva. Además, como la batería es computarizada, los resultados son generados electrónicamente. Esto resulta en valores de resultado que son los mismos cuando se utiliza en diferentes estudios por el personal de investigación, permitiendo para la estandarización de resultados, así como los valores que son menos propenso a errores en comparación con el marcador a mano. Los archivos de resultado pueden cargarse fácilmente en los sistemas de bases de datos electrónicas y pueden usarse para generar informes provisionales de los efectos farmacodinámicos de nuevos medicamentos dentro de un día.
Hay al menos una clase de medicamentos donde la prueba temprana del efecto farmacológico en el cerebro ha sido difícil; los fármacos colinérgicos (pro). La acetilcolina es uno de los principales neurotransmisores del SNC y se ha demostrado que juega un papel fundamental en la cognición, específicamente en procesos como el aprendizaje y la memoria24,25. En consecuencia, la disfunción colinérgica está indicada para subyacen procesos neurodegenerativos como la enfermedad de Alzheimer26. Nuevos compuestos diseñados para mejorar el funcionamiento cognitivo, como los agonistas específicos de receptores muscarínicos y nicotínicos, entrando en los estudios clínicos.
Como los estudios de fase temprana generalmente se realizan en sujetos sanos, a menudo jóvenes que realizan cognitivamente en un nivel normal, es difícil estudiar o incluso mostrar prueba del efecto farmacodinámico de un nuevo medicamento diseñado para tratar el deterioro cognitivo en pacientes con una enfermedad de el cerebro.
Nuestro grupo ha desarrollado una herramienta que puede utilizarse para demostrar la prueba principios de la farmacología de una droga nueva: el modelo de desafío farmacológico. Se utiliza un fármaco ya aprobado y comercializado para inducir síntomas de enfermedad como temporales y reversibles en sujetos sanos, mediante un mecanismo farmacológico relacionadas con la enfermedad que es objeto como indicación para el compuesto nuevo. En la mayoría de los casos, este efecto es un efecto secundario indeseado de la droga, resultando de la activación de receptores en una ubicación diferente en el cuerpo humano comparado con el sitio donde la droga se piensa para trabajar. Por ejemplo, la escopolamina de antagonista del receptor muscarínico de la acetilcolina se utiliza para el tratamiento de las náuseas y vómitos debidos a enfermedad de movimiento. Los efectos secundarios resultantes de antagonizar los receptores muscarínicos de la acetilcolina en el cerebro son los efectos anti-cognitivos tales como la reducción de la atención y la memoria que se asemeja a los déficits en la enfermedad de Alzheimer27.
Puesto que la escopolamina se utiliza como un modelo de desafío muscarínico para inducir como Alzheimer, aún temporal, efecto cognitivo en sujetos sanos27, CHDR ha desarrollado y validado un modelo de desafío farmacológicos con mecamilamina. Mecamilamina es un acetilcolina nicotínicos no competitivo del receptor antagonista28 que resulta en disfunción colinérgica, es decir, déficits cognitivos transitorios, en varones jóvenes sanos29,30.
Lo anterior mencionado batería computarizada se ha utilizado para investigar el potencial de los niveles de dosis diferentes de mecamilamina para mostrar efectos sobre las pruebas neurofisiológicas y cognitivas. La expectativa era que con el aumento de dosis, los efectos en las diferentes pruebas también aumentaría. Posteriormente estos efectos estaban relacionados con las concentraciones plasmáticas de la droga, resultando en la relación (farmacocinéticos-farmacodinámicos) de efectos de concentración de plasma de mecamilamina29.
Las pruebas incorporadas en el diseño de este estudio fueron seleccionadas en base a los efectos previstos de la literatura y el mecanismo farmacológico de acción de la mecamilamina sobre los receptores nicotínicos:
Prueba de seguimiento de la adaptación:
Esta es una tarea de seguimiento de la búsqueda, para la medición de coordinación visuomotor y atención sostenida. Un círculo de dimensiones conocidas se mueve aleatoriamente sobre una pantalla. El sujeto debe tratar de mantener un punto dentro del círculo móvil accionando una palanca de mando. Si este esfuerzo tiene éxito, aumenta la velocidad del círculo móvil. Por el contrario, la velocidad disminuye si el tema de prueba no puede mantener el punto dentro del círculo. En contraste con métodos de rastreo no adaptables, esto conduce a un desafío constante y adaptado individualmente durante todo el procedimiento. El examen de seguimiento adaptativo utilizado fue desarrollado por Hobbs & Strutt, según especificaciones de Borland y Nicholson11.
Búsqueda lisa y pruebas de movimiento de ojo sacádicos:
El uso de un equipo para medición de movimientos de ojo sacádicos y de seguimiento suave fue descrito originalmente por Baloh et al. 7y para la búsqueda lisa por Bittencourt et al. 8y ha sido ampliamente validado en CHDR por Van Steveninck et al. 19 , 20 , 21 el tema es necesaria para seguir una fuente de luz con los ojos, que se mueve horizontalmente en la pantalla a 58 cm de distancia. La fuente de luz se mueve continuamente para la medición de la búsqueda suave y saltos de lado a lado para medición de movimientos de ojo sacádicos.
VASs:
Evaluación de los sentimientos subjetivos del estado de alerta, estado de ánimo y calma se realizó mediante un conjunto de 16 líneas analógicas visuales según Norris (1971) y Bond y Lader10. Partituras analógicas visuales dependen de la capacidad de sujetos para semi-cuantificar un estado subjetivo. Líneas analógicas visuales consisten en segmentos de línea de 10 cm. El tema se presenta con 16 líneas, 1 a la vez, en la pantalla del ordenador. En los dos extremos de la línea, oposición a dos palabras que representan Estados de ánimo (p. ej., feliz – triste, tenso-relajado) se presentan. Temas ponen una marca en un punto en la línea que mejor representa su estado subjetivo correspondiente a la condición de prueba. El resultado es una distancia (m) calculada a partir de la marca en la línea.
Balanceo de cuerpo:
Una cadena que se origina de un potenciómetro, que está incorporado en el equipo de batería de pruebas, se utiliza para medir estabilidad postural en un solo plano, mientras que el tema se encuentra todavía con los ojos cerrados (descrito en de Haas et al. 12).
VVLT:
La VVLT es una prueba de aprendizaje y la memoria la palabra, que se describe con más detalle en de Haas et al. 12 temas se presentan con una serie de 30 palabras, uno por uno en la pantalla del ordenador. Las palabras necesitan ser pronunciado y recordado. Hay tres pruebas de memoria inmediata, uno retrasado ensayo de recuerdo libre (es decir, sin la presentación de las palabras después de aproximadamente 20 minutos) y un ensayo de reconocimiento.
Fármaco-EEG:
De fármaco-EEG estándar, los electrodos se limitan a los cables de corte sagital medio (Fz, Cz, Pz y Oz), dos electrodos para el registro de movimientos oculares (canthi externo) y un electrodo de tierra situado 2 cm por encima de la nasion. Cambios en la amplitud de las siguientes bandas de frecuencia son cuantificados por análisis de espectro (es decir, transformación de Fourier rápida): ß-banda (13.5-35 Hz), γ-banda (35-48,9 Hz), α-banda (7.5 13.5 Hz) y θ- y δ-bandas (7,5 Hz o menos).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>NeuroCart general computer hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplicon Impact E70 (=computer)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical insulation transformer</td>
			<td>Thalheimer Trenntransformator</td>
			<td>ERT 230/23/6G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 inch widescreen</td>
			<td>DELL</td>
			<td>U2412M</td>
			<td>for subject</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PS2 Mouse</td>
			<td>DELL</td>
			<td></td>
			<td>for subject</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PS2 Keyboard</td>
			<td>DELL</td>
			<td></td>
			<td>for subject</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photocamera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>EOS 1100D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EOS utility program</td>
			<td>Canon</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>photocamera software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>17 inch computer screen (research assistant)</td>
			<td>DELL</td>
			<td>1708FP monitor</td>
			<td>for research assistant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB keyboard (research assistant)</td>
			<td>DELL</td>
			<td></td>
			<td>for research assistant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB mouse (research assistant)</td>
			<td>DELL</td>
			<td></td>
			<td>for research assistant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NeuroCart general computer software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 7 or higher</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E-prime 2.0</td>
			<td>Psychology Software Tools, Inc. (PST)</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>every test has a custom, internally validated script</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EEG and eye electrodes hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grass series Amplifier Systems</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15LT</td>
			<td>amplifier for EEG electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quad, wide-band, high-gain, programmable AC amplifier</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15A54</td>
			<td>part of the 15LT ampyfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quad, high-gain, programmable AD amplifier</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15A94</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioelectric Input Box, Electrode Board Model BIPOLA</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15LT</td>
			<td>input box for electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Impedance Meter</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>F-EZM5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A/ D converter</td>
			<td>Cambridge Electronic Design (CED), Cambridge, UK</td>
			<td>1401 Mk1 and Mk2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold electrodes</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>Fx-E5GH</td>
			<td>EEG electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambu ECG electrodes</td>
			<td>BlueSensor</td>
			<td>N-OO-s/25</td>
			<td>Eye electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EC2 cream</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>electrode cream</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuprep</td>
			<td>Weaver and Company</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>Skin prep gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EEG and eye electrodes software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grass link 15 software</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>N.A.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spike 2</td>
			<td>Cambridge Electronic Design Limited</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>every test has a custom, validated script</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adaptive tracking materials (hard and software)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adaptive tracking joystick</td>
			<td>Job Kneppers Ontwerp en Realisatie B.V., Delft.</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>custom built</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrackerUSB</td>
			<td>Kevin Hobbs, CarbisDesign, UK</td>
			<td>N.A.</td>
			<td>Adaptive tracking software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bodysway hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Posturograph</td>
			<td>Sentech BV</td>
			<td>Celesco SP2 -50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical insulation transformer</td>
			<td>Thalheimer Trenntransformator</td>
			<td>ERT 230/23/6G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grass series Amplifier Systems</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15LT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quad, wide-band, high-gain, programmable AC amplifier</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15A54</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quad, high-gain, programmable AD amplifier</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15A94</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioelectric Input Box, Electrode Board Model BIPOLA</td>
			<td>Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Product Group/Natus</td>
			<td>15LT</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a computerized test battery to study pharmacodynamic effects on the central nervous system of cholinergic drugs in early phase drug development

Investigación de efectos farmacodinámicos en una fase temprana de la investigación de drogas sistema nervioso central (SNC) puede proporcionar información valiosa para el desarrollo de nuevos compuestos. Una batería de pruebas neuropsicológicas y neurofisiológicas informatizada y completamente validada ha demostrado ser sensible para detectar los efectos inducidos por la droga de varios compuestos nuevos y existentes. La batería de pruebas cubre los dominios principales de CNS, que han demostrado para responder a los efectos de la droga y pueden administrarse repetidamente después de la administración de drogas para caracterizar el perfil de concentración efecto de una droga.
Las pruebas estándar de la batería son movimientos oculares sacádicos, del movimiento de ojo lisos de la búsqueda, la escala analógica visual (VAS) de Bowdle, Bond y VAS de Lader, balanceo del cuerpo, seguimiento adaptable, aprendizaje verbal visual y electroencefalografía cuantitativa (qEEG). Sin embargo, la batería es muy adaptable en la naturaleza, lo que significa que puede ser compuesta y ajustado con las pruebas para investigar las clases de fármacos específicos, o receptores específicos incluso.
Mostrando efectos de los fármacos colinérgicos nuevo diseñados para tener un resultado pro-cognitivo ha sido difícil. El modelo de desafío farmacológico es una herramienta para la primera prueba de Farmacología. Aquí, un fármaco comercializado se utiliza para inducir síntomas de enfermedad como temporales y reversibles en sujetos sanos, mediante un mecanismo farmacológico relacionadas con la enfermedad que es objeto como indicación para el compuesto nuevo. La batería de pruebas se implementó para investigar el potencial de la mecamilamina del antagonista del receptor nicotínico para ser utilizado como un modelo de desafío para la disfunción colinérgica, como se ve en enfermedades neurodegenerativas.
Un empeoramiento de las puntuaciones de una manera dosis dependiente en la prueba de aprendizaje verbal visual (VVLT; una prueba de habilidades de aprendizaje y la memoria) y la prueba de seguimiento adaptable (una medida de control visuomotor y excitación), en particular, demostró que la batería es sensible para mostrar el efecto farmacodinámico agudo después de la administración de fármacos anticolinérgicos.

Las evaluaciones de la batería de prueba automatizada generan archivos de datos estandarizados y electrónicos. Vea la tabla 1 para los detalles en los valores de resultado por prueba.
La batería se utiliza principalmente en estudios clínicos de drogas de fase temprana investiga efectos de compuestos novedosos en comparación con un placebo (inactivo) o un fármaco comparador (activo). Por lo tanto, el 'tratamiento' factor debe considerarse en el análisis estadístico de los datos. Debe realizarse una evaluación de la dosis (es decir, libre de drogas) para la mayoría de las pruebas utilizadas en el protocolo, para servir como base de datos. La VVLT puede realizarse sólo en un punto del tiempo post dosis (a menudo en el tiempo-punto donde la concentración de droga es mayor), sin medición de la dosis, los efectos de aprendizaje y la interferencia del proceso de aprendizaje de la dosis antes y después de la dosis se utilizan listas de palabras diferentes. Como la mayoría de las pruebas es realizadas varias veces después de la administración de drogas para caracterizar el perfil de tiempo de los efectos de drogas, se debe considerar el efecto del tiempo en el análisis estadístico de los datos.
En el protocolo los resultados fueron analizados con un análisis de modelo mixto de covarianza (ANCOVA) con el tema, sujeto por tratamiento y tema por tiempo como efectos aleatorios; y tratamiento, periodo de estudio y tratamiento por el tiempo como efectos fijos. El valor basal promedio por prueba fue tomado como covariable, como mediciones iniciales fueron realizadas dos veces para evitar la pérdida de datos de referencia si una de las evaluaciones resultó insuficiente. Antes de implementar el modelo mixto, los datos fueron inspeccionados para la normalidad de la distribución por medio de diagramas de Q-Q. Si es necesario, datos sería transformado en registro para distribución normal. El análisis se realiza utilizando el enfoque menos cuadrado de medios (LSM), donde, por tratamiento en el análisis de una estimación de la media se calcula por el modelo (es decir, el LSM). El LSM no es lo mismo que la media de datos para el tratamiento, porque una corrección de línea de base llevó a cabo, y valores faltantes fueron estimados por el modelo e incluidos en el análisis.
El análisis se presenta en los gráficos de LSM, que se basan en las estimaciones de los análisis y son diferentes de los medios gráficos basados en el perfil de tiempo de datos. Como LSMs no tienen desviaciones estándar, los gráficos están hechos con barras de error de intervalo de confianza de 95%. Para evitar el hacinamiento de la gráfica, sólo las barras de error del tratamiento con el valor más alto se demuestran para arriba y del tratamiento con el valor más bajo se muestran abajo.
Los efectos farmacodinámicos agudos de una sola dosis oral de clorhidrato de mecamilamina en 10 mg y 20 mg, una infusión de 15 minutos de bromhidrato de escopolamina 0.5 mg y placebo doble (oral e intravenosa) se muestran en la figura 1 (cambio desde el inicio gráfico LSM). Como la VVLT se realiza sólo una vez después de la dosis, se muestran los datos VVLT de manera tradicional diagrama de caja, con diferentes cajas por tratamiento (ver figura 2).
El protocolo descrito en este artículo es parte de un estudio más amplio descrito en literatura publicada29,30 y una prensa en papel publicaron. Los resultados que se describen a continuación son un ejemplo de los resultados de dos pruebas de la batería computarizada, en 12 sujetos masculinos jóvenes sanos, en un diseño cruzado de cuatro vías. Para más detalles sobre el estudio, por favor ver Baakman et al. 30
Como era de esperar, el rendimiento en la prueba de seguimiento adaptable (el porcentaje correctamente rastreado) fue influenciado negativamente por la administración de antagonistas colinérgicos mecamilamina y escopolamina. Tanto la mecamilamina 20 mg y los tratamientos de escopolamina 0.5mg empeoraron significativamente la puntuación en comparación con administración de placebo. El efecto global del tratamiento fue de F = 43.25 (3,33), p < 0.0001, la mecamilamina 20 mg Estimado diferencia fue-2.06% rastreado correctamente (intervalo de confianza [IC] del 95%:-3.97, -0,15) con una p = 0.0355 y la escopolamina estimada diferencia fue-10.4% correctamente rastreado (intervalo de confianza [IC] del 95%:-12.4,-8.39) con p < 0.0001.
En el VVLT, administrado una vez que la dosis en h +3,5 para las pruebas de memoria inmediata y h + 5 para el retraso y ensayos de reconocimiento, todos los tratamientos inducida por un rendimiento más pobre (es decir, menos palabras recordadas) en el tercer ensayo de recuperación inmediata y el ensayo de recuerdo diferido (efecto global del tratamiento fue de F = 15.17 (3,33), p < 0.0001 para la prueba de memoria tercera inmediata y F = 9.98 (3,34), p < 0.0001 para la prueba de memoria retrasada). Los dos niveles de dosis de la mecamilamina demostraron una dosis relacionadas con el efecto que la dosis de 20 mg mostró una disminución más grande en número total recordado correctamente en comparación con el placebo que lo hizo la dosis de 10 mg en comparación con placebo. Para el tercer ensayo de recuperación inmediata, los resultados son: en palabras de media -2,7 (intervalo de confianza [IC] del 95%:-5.1, -0.3), p = 0.0286 para la administración de mecamilamina 10 mg y en palabras de media-3.6 (IC del 95%:-5.9, -1.4), p = 0,0025 para la 20 mg Administración de la mecamilamina. Para el ensayo de recuperación tardía, los resultados son: en palabras de media -3,1 (intervalo de confianza [IC] del 95%:-5.8, -0,4), p = 0,0259 para la administración de mecamilamina 10 mg y en palabras de media-3.8 (intervalo de confianza [IC] del 95%:-6.4, -1,2), p = 0.0051 para la administración de 20 mg mecamilamina. Administración de escopolamina 0,5 mg demostrada efectos negativos aún más fuertes en la memoria de la palabra: en palabras de media-7.7 (intervalo de confianza [IC] del 95%:-10.1,-5.4), p < 0.0001 para el tercer ensayo de la memoria inmediata y en palabras de media-7.1 (95% de confianza intervalo [IC]: -9.8, -4,5), p < 0.0001 para el ensayo de recuerdo diferido, todo en comparación con placebo.
Administración de la escopolamina en sujetos sanos se sabe para inducir grandes efectos negativos en los resultados de las pruebas cognitivas, como por ejemplo fue descrito en un estudio grande en 90 sujetos masculinos sanos6. Los resultados descritos anteriormente muestran que las pruebas de la batería computarizada también fueron capaces de demostrar este efecto anti-cognitivo significativo de escopolamina 0,5 mg administrados por vía intravenosa. Con respecto a administración de mecamilamina, literatura informa que dosis más bajas de hasta 20 mg inducen efectos negativos en la prueba cognoscitiva resultados31,32,33, aunque el efecto real es mucho más pequeño en comparación con el efecto de la escopolamina de30, que también es evidente en los resultados de este protocolo.
Estos resultados muestran que las pruebas de la batería de test informatizados son sensibles para mostrar efectos farmacodinámicos agudos después de administraciones individuales de los fármacos anticolinérgicos investigados. Las pruebas pueden diferenciar entre la administración de placebo y droga, y más importante aún, pueden distinguir entre la escopolamina antagonista muscarínico y la mecamilamina antagonista nicotínico. Estos efectos aparecen repetidamente en múltiples pruebas, evidentes a partir de los resultados estadísticos y los gráficos relacionados con los resultados de las pruebas (datos presentados en Baakman et al. 30).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56569/56569fig1.jpg"> Figura 1: efecto de placebo, mecamilamina oral de 10 mg y 20 mg y escopolamina intravenosa 0.5 mg en la prueba de seguimiento adaptable en varones jóvenes sanos 12. Curso temporal de valores (y SD para las puntuaciones mayores y menor) para la prueba de seguimiento adaptable, medido en varios puntos del tiempo después de la administración de drogas (en t = 0), cambiar de base de datos de 12 sujetos masculinos sanos. El porcentaje de seguimiento correctamente es presentado en el eje y, dosis posterior al punto del tiempo se presentaron en eje x, con doble resultados del placebo (oral e intravenosa) (círculo gris), resultados de mecamilamina 10 mg (magenta cuadrado), mecamilamina 20 mg resultados (verde triángulos) y 0,5 mg escopolamina (diamantes azules). Esta figura ha sido modificada de Baakman et al. 30 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/56569/56569fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56569/56569fig2.jpg"> Figura 2: efecto de la escopolamina intravenosa 0.5 mg, placebo y mecamilamina oral de 10 mg y 20 mg en el test de aprendizaje verbal visual en varones jóvenes sanos 12. Resultados de Boxplot de la VVLT retrasaron reconocimiento ensayo (figura de la izquierda) y ensayo de tercera inmediata destitución, con el número de palabras correctamente recordadas en el eje y y el tratamiento en el eje x, de 12 sujetos masculinos sanos. El efecto global del tratamiento se muestra en la esquina inferior izquierda, el p-valores de contrastes individuales de tratamiento comparado con placebo son representados por medio de los asteriscos (*). La mediana está representada por la línea negra gruesa en la caja. La media está representada por el rojo soy '. Los círculos grises representan puntos de datos reales (es decir, observaciones). Esta figura ha sido modificada de Baakman et al. 30 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/56569/56569fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Computerized Test Battery to Study Pharmacodynamic Effects on the Central Nervous System of Cholinergic Drugs in Early Phase Drug Development at JoVE.com

A Computerized Test Battery to Study Pharmacodynamic Effects on the Central Nervous System of Cholinergic Drugs in Early Phase Drug Development

Usa una batería computarizada validada de pruebas neuropsicológicas y neurofisiológicas para el estudio de efectos farmacodinámicos en el sistema nervioso central de drogas desarrollados recientemente en el desarrollo de la fase temprana. Para demostrar la batería, se describen los efectos agudos de la mecamilamina y la reversión de estos efectos por dos fármacos agonistas.

Una batería de pruebas computarizadas para el estudio de efectos farmacodinámicos en el sistema nervioso Central de los fármacos colinérgicos en fase temprana desarrollo de fármacos

Investigating potential pharmacodynamic effects in an early phase of central nervous system (CNS) drug research can provide valuable information for ...

En nuestros estudios, utilizamos una batería de prueba que consiste en varios métodos neuropsicológicos y neurofisiológicos diferentes. Cada prueba es sensible a diferentes clases de fármacos activos del SNC. Una de las principales ventajas de esta técnica es que permite mediciones repetidas durante los días de estudio.De esta manera, se pueden determinar las relaciones de efectos de concentración. Debido a que los datos procesados y analizados casi inmediatamente, los resultados se pueden utilizar para las decisiones de aumento de dosis sin ningún retraso. Para comenzar este procedimiento, encienda el ordenador de la batería de prueba y encienda el ordenador y las pantallas.A continuación, siénte el sujeto delante de la pantalla del ordenador y el joystick. Confirme la mano preferida del sujeto y ajuste el joystick en consecuencia. Indique al sujeto que sostenga el joystick como un bolígrafo con el brazo apoyado sobre la mesa.Posteriormente, inicie el script de prueba a través del programa instalado. Rellene los detalles solicitados, como el tema y el número de estudio. A continuación, ejecute la prueba haciendo clic en Inicio en la pantalla Asistencia de prueba.Supervise el rendimiento del sujeto en la pantalla de Asistencia de prueba y anime al sujeto a mantener el círculo alrededor del punto si el sujeto no puede exceder el factor de dificultad dos. En este paso, identifique el Canthus externo del ojo derecho. Repita este procedimiento para el ojo izquierdo.A continuación, identifique el lugar donde el electrodo de tierra, dos centímetros por encima del Nasion. Frote a fondo los sitios de los electrodos oculares usando un gel limpiador de la piel de toallita de algodón para la medición bioeléctrica para disminuir la impedancia de la piel. Tenga cuidado de no abrasar la piel.Pero no frote demasiado suavemente. Después de eso, limpie el gel residual con una gasa. Aplique tres electrodos autoadhesivos en los sitios preparados.Después de eso, conecte los cables a los electrodos oculares, lavados con tampón. Coloque la mano detrás del botón de presión del electrodo para evitar que empuje hacia la piel. Dirija los cables a lo largo de las orejas sobre el hombro del sujeto para evitar que los cables cuelguen delante de los ojos.A continuación, conecte los tres cables en el medidor de impedancia del electrodo. Inicie el script de prueba a través del programa instalado y rellene los detalles solicitados, como el asunto y el número de estudio. A continuación, inicie la prueba cuando aparezca la instrucción Go en la pantalla Asistencia de prueba.Para el Pharmacode EEG estándar, los electrodos están unidos a los cables midsagittal. Las ubicaciones se basan en el sistema 10/20. Aquí, presentamos el método para el estado de reposo EEG con los ojos cerrados;pero otros paradigmas, incluyendo potenciales relacionados con eventos también son posibles.Mientras que cuatro electrodos son suficientes para muchos casos, el número de electrodos puede variar, dependiendo del experimento, con el máximo de treinta y dos. Para realizar una prueba visual de escala analógica, indique al sujeto que anote su sensación actual utilizando el ratón para marcar el objeto visual a lo largo de la línea que se presenta en la pantalla. Informar al sujeto que los puntos más extremos de la línea representan la sensación más extrema imaginable.Inicie el script de prueba y rellene los detalles solicitados, como el asunto y el número de estudio. A continuación, indique al sujeto que inicie la prueba haciendo clic con el ratón. En la prueba de balanceo del cuerpo, pida al sujeto que se ponga delante de la computadora con la distancia entre los pies de unos 10 centímetros y los brazos que cuelgan junto al cuerpo.Coloque la cuerda que se origina en el potenciómetro integrado en el ordenador de la batería de prueba en la cintura del sujeto mediante un clip. A continuación, ajuste la altura de la tabla con el equipo en ella, hasta que la cadena esté horizontal. Después de eso, pídele al sujeto que cierre los ojos.Inicie el script de prueba y rellene los detalles solicitados. A continuación, inicie la prueba haciendo clic en iniciar la sesión de muestreo de balanceo del cuerpo en la pantalla del equipo de Asistencia de prueba. En la prueba visual de aprendizaje verbal, instruya al sujeto, que durante la presentación visual de las palabras, él o ella debe nombrar las palabras cuando aparezcan y recordarlas.Y que al final de la lista, recuerde las palabras con nombres. Inicie el script de prueba y rellene los detalles solicitados. Después de eso, indique al sujeto que lea las instrucciones escritas que se muestran en la pantalla.Indique al sujeto que la prueba se iniciará cuando el sujeto presione la barra espaciadora. Registre las palabras retiradas haciendo clic en las palabras retiradas en la pantalla Asistencia de prueba. Aquí se muestra el curso de tiempo de los valores medios de doce sujetos masculinos sanos para la prueba de seguimiento adaptativo medida en múltiples puntos de tiempo después de la administración del medicamento.El porcentaje de seguimiento correcto se presenta en el eje Y. El punto de tiempo post-dosis se presenta en el eje X con resultados dobles de placebo. 10 miligramos de resultados de Mecamylamine, 20 miligramos de resultados de mecamilamina y 0.5 miligramos de escopolamina.La batería de prueba es flexible y se puede ajustar a un determinado perfil de fármaco. El procedimiento también se puede combinar con otras mediciones farmacodinámicas o con muestras de sangre o evaluaciones médicas como ECG y presión arterial. Esto puede responder preguntas adicionales sobre seguridad y farmacocinética.La batería de prueba permite a los investigadores explorar la penetración cerebral y la actividad farmacológica de nuevos compuestos, no sólo en voluntarios sanos, sino también en pacientes con trastornos neurológicos o psiquiátricos. Después de ver este video, usted debe tener una buena comprensión de cómo esta batería de prueba se puede utilizar para obtener medidas sensibles de los efectos de drogas a través de una amplia gama de dominios funcionales neuropsicológicos y neurofisiológicos.

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