Name: visual detection of multiple nucleic acids in a capillary array
Uploaded: 2017-11-15T14:00:00
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Este estudo foi financiado em parte por nacional ciência Natural da China subsídios da Fundação (31370813, 3147670, 31670831 e 31600672,), o fundo nacional de transgénicos planta especial (2016ZX08012-003, 2016ZX08012-005), programa de novos talentos de excelente do século em Universidade, os nacionais de investigação fundamental e projeto de desenvolvimento da China (2016YFA0500601) e China ciência Postdoctoral Foundation (2016M 591667).

Nota: Este protocolo assume que já se tornaram o molde de aço inoxidável, tendo a forma para os microcanais desejados e o adaptador de carregamento (arquivos 3D são fornecidos como suplementar arquivos 1 e 2. ). Este protocolo também pressupõe que planta isolamento de DNA já foi efectuada a.
 1. fabricação da fita com base em matriz capilar Ready-to-use <ol><li>limpar o molde de aço inoxidável.
	<ol><li>Lavar o molde de aço inox...

<ol>
	<li>Urdea, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirements+for+high+impact+diagnostics+in+the+developing+world.">Requirements for high impact diagnostics in the developing world.</a> Nature. 444, 73-79 (2006).</li><li>Yager, P., Domingo, G. J., Gerdes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Point-of-care+diagnostics+for+global+health.">Point-of-care diagnostics for global health.</a> Annu Rev Biomed Eng. 10, 107-144 (2008).</li><li>Opota, O., Jaton, K., Greub, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+diagnosis+of+bloodstream+infection:+towards+molecular+diagnosis+directly+from+blood.">Microbial diagnosis of bloodstream infection: towards molecular diagnosis directly from blood.</a> Clin Microbiol Infec. 21 (4), 323-331 (2015).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MPIC:+A+High-Throughput+Analytical+Method+for+Multiple+DNA+Targets.">MPIC: A High-Throughput Analytical Method for Multiple DNA Targets.</a> Anal Chem. 83 (5), 1579-1586 (2011).</li><li>Shao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MACRO:+a+combined+microchip-PCR+and+microarray+system+for+high-throughput+monitoring+of+genetically+modified+organisms.">MACRO: a combined microchip-PCR and microarray system for high-throughput monitoring of genetically modified organisms.</a> Anal Chem. 86 (2), 1269-1276 (2014).</li><li>Kamle, S., Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+crops:+detection+strategies+and+biosafety+issues.">Genetically modified crops: detection strategies and biosafety issues.</a> Gene. 522 (2), 123-132 (2013).</li><li>Galvin, S., Dolan, A., Cahill, O., Daniels, S., Humphreys, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+monitoring+of+the+hospital+environment:+why+and+how?.">Microbial monitoring of the hospital environment: why and how?.</a> J Hosp Infect. 82 (3), 143-151 (2012).</li><li>Sciancalepore, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdroplet-based+multiplex+PCR+on+chip+to+detect+foodborne+bacteria+producing+biogenic+amines.">Microdroplet-based multiplex PCR on chip to detect foodborne bacteria producing biogenic amines.</a> Food Microbiol. 35 (1), 10-14 (2013).</li><li>Saxena, G., Bharagava, R. N., Kaithwas, G., Raj, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+indicators,+pathogens+and+methods+for+their+monitoring+in+water+environment.">Microbial indicators, pathogens and methods for their monitoring in water environment.</a> J Water Health. 13 (2), 319-339 (2015).</li><li>Hopwood, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+Microfluidic+System+for+Rapid+Forensic+DNA+Analysis:+Sample+Collection+to+DNA+Profile.">Integrated Microfluidic System for Rapid Forensic DNA Analysis: Sample Collection to DNA Profile.</a> Anal Chem. 82 (16), 6991-6999 (2010).</li><li>Estes, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+multiplexed+PCR+on+an+integrated+microfluidic+forensic+platform+for+rapid+DNA+analysis.">Optimization of multiplexed PCR on an integrated microfluidic forensic platform for rapid DNA analysis.</a> Analyst. 137 (23), 5510-5519 (2012).</li><li>Niemz, A., Ferguson, T. M., Boyle, D. 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D., Kessel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+Ebola+tells+us+about+outbreak+diagnostic+readiness.">What Ebola tells us about outbreak diagnostic readiness.</a> Nat Biotechnol. 33 (5), 464-469 (2015).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+universal+multiplex+PCR+strategy+for+100-plex+amplification+using+a+hydrophobically+patterned+microarray.">A universal multiplex PCR strategy for 100-plex amplification using a hydrophobically patterned microarray.</a> Lab Chip. 11 (21), 3609-3618 (2011).</li><li>Notomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loop-mediated+isothermal+amplification+of+DNA.">Loop-mediated isothermal amplification of DNA.</a> Nucleic Acids Res. 28 (12), (2000).</li><li>Mori, Y., Nagamine, K., Tomita, N., Notomi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+loop-mediated+isothermal+amplification+reaction+by+turbidity+derived+from+magnesium+pyrophosphate+formation.">Detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by turbidity derived from magnesium pyrophosphate formation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 289 (1), 150-154 (2001).</li><li>Tomita, N., Mori, Y., Kanda, H., Notomi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loop-mediated+isothermal+amplification+(LAMP)+of+gene+sequences+and+simple+visual+detection+of+products.">Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of gene sequences and simple visual detection of products.</a> Nat Protoc. 3 (5), 877-882 (2008).</li><li>Iwamoto, T., Sonobe, T., Hayashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loop-mediated+isothermal+amplification+for+direct+detection+of+Mycobacterium+tuberculosis+complex,+M-avium,+and+M-intracellulare+in+sputum+samples.">Loop-mediated isothermal amplification for direct detection of Mycobacterium tuberculosis complex, M-avium, and M-intracellulare in sputum samples.</a> J Clin Microbiol. 41 (6), 2616-2622 (2003).</li><li>Goto, M., Honda, E., Ogura, A., Nomoto, A., Hanaki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colorimetric+detection+of+loop-mediated+isothermal+amplification+reaction+by+using+hydroxy+naphthol+blue.">Colorimetric detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by using hydroxy naphthol blue.</a> Biotechniques. 46 (3), 167-172 (2009).</li><li>Iseki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+multiplex+loop-mediated+isothermal+amplification+(mLAMP)+method+for+the+simultaneous+detection+of+bovine+Babesia+parasites.">Development of a multiplex loop-mediated isothermal amplification (mLAMP) method for the simultaneous detection of bovine Babesia parasites.</a> J Microbiol Methods. 71 (3), 281-287 (2007).</li><li>Liang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+loop-mediated+isothermal+amplification+detection+by+sequence-based+barcodes+coupled+with+nicking+endonuclease-mediated+pyrosequencing.">Multiplex loop-mediated isothermal amplification detection by sequence-based barcodes coupled with nicking endonuclease-mediated pyrosequencing.</a> Anal Chem. 84 (8), 3758-3763 (2012).</li><li>Shao, Y., Zhu, S., Jin, C., Chen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+multiplex+loop-mediated+isothermal+amplification-RFLP+(mLAMP-RFLP)+to+detect+Salmonella+spp.+and+Shigella+spp.+in+milk.">Development of multiplex loop-mediated isothermal amplification-RFLP (mLAMP-RFLP) to detect Salmonella spp. and Shigella spp. in milk.</a> Int J Food Microbiol. 148 (2), 75-79 (2011).</li><li>Fang, X., Chen, H., Yu, S., Jiang, X., Kong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+viruses+accurately+by+a+multiplex+microfluidic+loop-mediated+isothermal+amplification+chip.">Predicting viruses accurately by a multiplex microfluidic loop-mediated isothermal amplification chip.</a> Anal Chem. 83 (3), 690-695 (2011).</li><li>Stedtfeld, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-Z:+a+device+for+point+of+care+genetic+testing+using+a+smartphone.">Gene-Z: a device for point of care genetic testing using a smartphone.</a> Lab Chip. 12 (8), 1454-1462 (2012).</li><li>Liu, D., Liang, G., Zhang, Q., Chen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Mycobacterium+tuberculosis+using+a+capillary-array+microsystem+with+integrated+DNA+extraction,+loop-mediated+isothermal+amplification,+and+fluorescence+detection.">Detection of Mycobacterium tuberculosis using a capillary-array microsystem with integrated DNA extraction, loop-mediated isothermal amplification, and fluorescence detection.</a> Anal Chem. 85 (9), 4698-4704 (2013).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Point-of-Care+Multiplexed+Assays+of+Nucleic+Acids+Using+Microcapillary-based+Loop-Mediated+Isothermal+Amplification.">Point-of-Care Multiplexed Assays of Nucleic Acids Using Microcapillary-based Loop-Mediated Isothermal Amplification.</a> Anal Chem. 86 (14), 7057-7062 (2014).</li><li>Shao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+detection+of+multiple+genetically+modified+organisms+in+a+capillary+array.">Visual detection of multiple genetically modified organisms in a capillary array.</a> Lab Chip. 17 (3), 521-529 (2017).</li><li>Lizardi, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutation+detection+and+single-moledule+counting+using+isothermal+rolling-circle+amplification.">Mutation detection and single-moledule counting using isothermal rolling-circle amplification.</a> Nat Genet. , (1998).</li><li>Piepenburg, O., Williams, C. H., Stemple, D. L., Armes, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+detection+using+recombination+proteins.">DNA detection using recombination proteins.</a> Plos Biol. 4 (7), 1115-1121 (2006).</li><li>Opota, O., Jaton, K., Greub, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+diagnosis+of+bloodstream+infection:+towards+molecular+diagnosis+directly+from+blood.">Microbial diagnosis of bloodstream infection: towards molecular diagnosis directly from blood.</a> Clin Microbiol Infect. 21 (4), 323-331 (2015).</li></ol>

A plataforma calma demonstrado aqui, que combina a tecnologia da lâmpada com uma matriz capilar, permite a detecção simultânea de múltiplos alvos de gene OGM-relacionados em um único, altamente eficaz e fácil de operar o teste.
Para executar com êxito as reações de lâmpada multiplex na gaveta, três pontos críticos precisam ser notado. Em primeiro lugar, alcançar a mesma altura para o lado superior dos capilares e o padrão hidrofílico e hidrofóbico da matriz capilar são críti...

Sistemas de baixo custo, rápidos e fácil de usar para a detecção simultânea de vários ácidos nucleicos são urgentemente necessárias em uma escala larga dos campos, tais como diagnósticos clínicos1,2,3, OGM deteção4, 5,6, microbiana monitoramento7,8,9, análise forense de10,11e testes especialmente point-of-care (POCTs), onde os recursos são geralmente limitadas12,13,14.
Cadeia da polimerase (PCR), incluindo seus métodos derivados do PCR em tempo real e PCR multiplex, é a técnica mais amplamente aplicada para a deteção nestes campos. No entanto, esses métodos tipicamente somente detectam um alvo em um teste de15 e eles exigem electricidade e sofisticados equipamentos profissionais.
Outra tecnologia promissora para a detecção de ácidos nucleicos é mediada por Loop isotérmica amplificação (lâmpada), que foi descrita pela primeira vez em 2000,16. A lâmpada é uma método de deteção de DNA de alta eficiência. Teoricamente, ele pode amplificar de 1 cópia de 10 exemplares9 amplicons dentro de uma hora, tudo realizado a uma temperatura constante, (ou seja, entre 60-65 ° C). Amplificação bem-sucedida irá produzir uma grande quantidade de pirofosfato o subproduto insolúvel e causar uma mudança na turbidez17, que poderia ser diretamente observado a olho nu. Uma mudança de cor também pode ser observada pela adição de íons metálicos ou corantes fluorescentes como calceína18, ácido nucleico tintura19e hidroxila naftol azul20. Por causa da conveniência da operação e as vantagens de alta sensibilidade, lâmpada está sendo amplamente aplicada na deteção de ácido nucleico.
Atualmente, existem principalmente duas estratégias para ensaios de luz multiplex. Um é executar múltiplos ensaios de lâmpada por ter vários lâmpada cartilha define em um tubo21,22,23. No entanto, a multiplicidade e a eficiência de amplificação iria ser limitadas pela interferência intrínseca e competição entre diferentes da primeira demão de moda. Além disso, pode ser difícil identificar os diferente produtos de lâmpada na mesma reação. Outra estratégia baseia-se no isolamento físico. Primeira demão diferentes conjuntos foram isolados em compartimentos individuais de miniaturizado, e várias reações de lâmpada então são executadas simultaneamente24,25. Essas abordagens, que são geralmente baseadas em chips microfluídicos, fornecem uma solução em potencial para reações de lâmpada de alta produtividade. No entanto, a fabricação dos chips e o multiplex pre-revestimento da primeira demão de moda é complicado, que podem aumentar os custos e diminuir a reprodutibilidade.
Recentemente, alguns estudos descreveram realizando reações de lâmpada em capilares para ignorar a complicado fabricação de chips microfluídicos e alcançaram a deteção de baixo custo26,27. No entanto, com relação à análise de alta produtividade, esses capilares são semelhantes às versões em miniatura de tira da polimerase, porque as amostras e os reagentes da reação (incluindo os conjuntos de diferentes da primeira demão) devem ser individualmente preparados e entregues a diferentes unidades de reação dentro de capilares. Para realizar a análise paralela e multiplex, equipamento adicional, por exemplo, uma bomba de seringa multicanal, é necessário para carregamento paralelo de amostras ou reagentes.
Para superar as limitações associadas com os atuais métodos para multiplex detecção de ácidos nucleicos, desenvolvemos uma plataforma miniaturizada que combina tecnologia de iluminação visual com uma matriz capilar. Esta plataforma é para vários destinos, compacto em tamanho, baixo custo e fácil de operar28. Aqui, descrevemos os detalhes de como fabricar a matriz capilar e realizar as reações de lâmpada na matriz. O protocolo descrito aqui tem sido padronizado usando a deteção de organismo geneticamente modificado (OGM) como um modelo. Importante, este protocolo também pode ser usado para detecção de alta produtividade de outros alvos de ácido nucleico.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>UltraEverDry(super-hydrophobic coat)</td>
			<td>UltraTech</td>
			<td>4001</td>
			<td>supplier:Exiron chemistry(CHINA) CO.,LTD.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDMS</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>8332557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bst polymerase</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>M0275L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>betain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B0300-1VL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>calcein</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0875-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MKBP0495V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>B1003S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTPs</td>
			<td>Shanghai Sangon</td>
			<td>B804BA0022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chitosan</td>
			<td>Shanghai Sangon</td>
			<td>LJ0805S309J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photoshop 7.0 software</td>
			<td>Adobe Systems Inc., CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GenePix Pro 6.1</td>
			<td>Molecular Devices, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>microarray analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoCAD</td>
			<td>Adobe Systems Inc.</td>
			<td></td>
			<td>3D construction software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV filter (ZWB2)</td>
			<td>YXSensing</td>
			<td></td>
			<td>supplier : taobao</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visual detection of multiple nucleic acids in a capillary array

Vários destinos, curto período de tempo e recurso-acessível metodologias para a detecção de vários ácidos nucleicos em um único, fácil de operar o teste são urgentemente necessários no diagnóstico da doença, monitorização microbiana, deteção de organismo geneticamente modificado (OGM), e análise forense. Descrevemos anteriormente a plataforma chamada calma (Capillary Abaseada em rray Loop-mediada isotérmica amplificação para Multiplex de detecção visual de ácidos nucleicos). Aqui, descrevemos melhorada fabricação e processos de desempenho para essa plataforma. Aqui, nós aplicamos uma gaveta pequena, ready-to-use montada por matriz capilar para multiplex de detecção visual de ácidos nucleicos. A matriz capilar é previamente tratada dentro de um padrão hidrofóbico e hidrofílico antes da fixação mediada por loop de amplificação isotérmica (lâmpada) cartilha de moda em capilares. Após a montagem do adaptador de carregamento, mistura de reação de lâmpada é carregada e isolada em cada capilar, devido a força capilar por uma única etapa de pipetagem. As reações de lâmpada são executadas em paralelo em capilares. Os resultados são lidos visualmente para fora pela iluminação com uma lanterna UV à mão. Usando esta plataforma, demonstramos que o monitoramento de 8 frequentemente aparecendo elementos e genes em amostras de OGM com sensibilidade e alta especificidade. Em resumo, a plataforma descrita neste documento destina-se a facilitar a detecção de vários ácidos nucleicos. Acreditamos que será amplamente aplicável em áreas onde a análise de ácidos nucleicos de alto rendimento é necessária.

Neste método, é importante evitar a contaminação cruzada entre diferentes capilares durante o carregamento da amostra. Para este efeito, quitosana foi introduzida, que poderia manter os primers em capilares individuais. Para testar se funcionava ou não, pre-consertamos o primer de ADH1 (gene endógeno referência de milho) definido na gaveta capilar com o padrão de "T" e "U", conforme ilustrado no Figura 3a. Conforme ...

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Visual Detection of Multiple Nucleic Acids in a Capillary Array

Detecção visual de vários ácidos nucleicos em uma matriz capilar

Este protocolo descreve a fabricação de uma gaveta pequena, ready-to-use que pode ser aplicada para a detecção visual de vários ácidos nucleicos em um teste único, que é fácil de operar. Nesta abordagem, uma matriz capilar foi usado para multiplex e altamente eficiente detecção de alvos de OGM.

Multi-target, short time, and resource-affordable methodologies for the detection of multiple nucleic acids in a single, easy to operate test are urgently ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Fabrication of Electrochemical-DNA Biosensors for the Reagentless Detection of Nucleic Acids, Proteins and Small Molecules

Fabricação de Eletroquímica-DNA Biossensores para Detecção Reagentless de ácidos nucléicos, proteínas e pequenas moléculas

As medicine is currently practiced, doctors send specimens to a central laboratory for testing and thus must wait hours or days to 
receive the results. ...

Bioengenharia

On-chip Isotachophoresis for Separation of Ions and Purification of Nucleic Acids

On-chip Isotachophoresis para separação dos íons e purificação de ácidos nucléicos

Electrokinetic techniques are a staple of microscale applications because of their unique ability to perform a variety of fluidic and electrophoretic ...

A Microfluidic Device for Studying Multiple Distinct Strains

Um dispositivo micro para o Estudo múltiplas linhagens distintas

The study of cell responses to environmental changes poses many experimental challenges: cells need to be imaged under changing conditions, often in a ...

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Capilar Força Litografia de Engenharia tecido cardíaco

Cardiovascular disease remains the leading cause of death worldwide1. Cardiac tissue engineering holds much promise to deliver groundbreaking medical ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

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This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

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