Name: transurethral instillation procedure in adult male mouse
Uploaded: 2017-11-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse at JoVE.com

Forfatterne har ikke noen anerkjennelse.

alle prosedyrer med dyr, inkludert metoden og varigheten av anestesi, samt postoperativ pleie, ble diskutert med en veterinær og godkjent av dyr institusjon og bruk Committee (IACUC) på den tilknyttede institusjon. I dette manuskriptet ble alle prosedyrer utført med 8 til 15-uke-gamle C57BL/6 mannlige mus og protokollen følger retningslinjene for dyr omsorg som er godkjent av IACUC ved University of Colorado.
 1. forberedelse av rør Merk: for å innpode i inocu...

<ol>
	<li>Lee, S., Yang, G., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostatic+inflammation+induces+urinary+frequency+in+adult+mice.">Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice.</a> PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).</li><li>Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostatic+inflammation+induces+fibrosis+in+a+mouse+model+of+chronic+bacterial+infection.">Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection.</a> PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).</li><li>Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+bacterial+infection+and+inflammation+incite+reactive+hyperplasia+in+a+mouse+model+of+chronic+prostatitis.">Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis.</a> Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).</li><li>Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+bacterial+inflammation+of+the+mouse+prostate.">Acute bacterial inflammation of the mouse prostate.</a> Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).</li><li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+inflammation+of+the+lower+urinary+tract.">Models of inflammation of the lower urinary tract.</a> Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).</li><li>Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transurethral+induction+of+mouse+urinary+tract+infection.">Transurethral induction of mouse urinary tract infection.</a> J Vis Exp. (42), (2010).</li><li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+cystitis+is+accompanied+by+increased+peripheral+thermal+sensitivity+in+mice.">Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice.</a> J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).</li><li>Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+and+host+responses+to+Escherichia+coli+urinary+tract+infection+in+genetically+distinct+mouse+strains.">Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains.</a> Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).</li><li>Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravesical+resiniferatoxin+decreases+spinal+c-fos+expression+and+increases+bladder+volume+to+reflex+micturition+in+rats+with+chronic+inflamed+urinary+bladders.">Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders.</a> BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).</li><li>Cayan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Botulinum+toxin+type+A+may+improve+bladder+function+in+a+rat+chemical+cystitis+model.">Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model.</a> Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).</li><li>Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+mouse+bladder+inflammatory+response+to+E.+coli+lipopolysaccharide.">Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide.</a> Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).</li><li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LPS-sensory+peptide+communication+in+experimental+cystitis.">LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).</li><li>Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+invasion+augments+epithelial+cytokine+responses+to+Escherichia+coli+through+a+lipopolysaccharide-dependent+mechanism.">Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism.</a> J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).</li><li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discriminators+of+mouse+bladder+response+to+intravesical+Bacillus+Calmette-Guerin+(BCG).">Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG).</a> BMC Immunol. 8, 6 (2007).</li><li>Bjorling, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+acrolein-induced+cystitis+in+mice.">Acute acrolein-induced cystitis in mice.</a> BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).</li><li>Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+bladder+distention+evoked+visceromotor+responses+as+a+model+for+bladder+pain+in+mice.">Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li></ol>

Dette manuskriptet beskriver i detalj en metode for transurethral instillasjon voksne mannlige musen. Differensial primære seeding området kan nås ved hjelp av PE rør med forskjellige diametere. PE-50 anbefales for vellykket nå urinblæren lumen, mens en større diameter PE-10 brukes til AP og SV (figur 3A-B). I tillegg til valget av størrelsen på PE rør og målet organ for vaksinering spille andre faktorer, som volumet av innpodet inoculum, også en rolle i slutten ...

Transurethral instillasjon tilnærmingen er brukt i tidligere studier som én av metodene til å opprette gnager modeller av blæren, patologi,1,,2,,3,,4 og kan brukes til å evaluere den effektiviteten av lokalt levert i mus. Selv om dyremodeller ikke fullt recapitulate menneskelige patologi, gir identifikasjon av de underliggende mekanismene i dyrestudier en bedre forståelse av de menneskelige LUT lidelser som interstitiell cystitt/blære smertesyndrom, neurogenic cystitis, autoimmune cystitis og prostatic betennelse5.
Transurethral instillasjon prosedyren utføres på en voksen mann mus er mer teknisk utfordrende enn intravesical instillasjon i en voksen kvinnelig musen6. Naturlig buet anatomi av mannlige urinrøret med liten diameter gjør det teknisk vanskelig å oppnå transurethral innsetting av et kateter. Derfor detaljerte instruksjoner for transurethral induksjon musen urin spor infeksjon6 og LUT betennelse7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 via blæren satt inn kateter ble tidligere skissert for kvinnelige mus bare. Dette manuskriptet har som mål å gi en detaljert beskrivelse av teknikken for transurethral instillasjon stoffer i mannlige mus inkludert videoklipp, bilder og illustrasjoner. Transurethral instillasjon prosedyrer i en voksen mann mus kan utføres med variabel inoculates lik som tidligere beskrevet i kvinnelige musen7 og slått sammen med flere teknikker som eletromyografi opptak av visceromotor svar (VMR)16.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>63019-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>63019-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>311411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (EtOH)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch</td>
			<td>Becton Dickson</td>
			<td>205155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch</td>
			<td>Becton Dickson</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle</td>
			<td>Instech</td>
			<td>LS22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle</td>
			<td>Instech</td>
			<td>LS27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6&#34; Long x 2&#34; Wide x 1&#34; Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone</td>
			<td>Norton</td>
			<td>40204034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac</td>
			<td>Surgilube</td>
			<td>281020543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fluriso</td>
			<td>13985-528-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Forceps, Curved</td>
			<td>vwr</td>
			<td>82027-392</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 1 ml Syringe</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>309626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J61007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8~12 weeks old male C57B/6 Mice</td>
			<td>Jackson Lab</td>
			<td>#000664</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transurethral instillation procedure in adult male mouse

Transurethral instillasjon kan brukes til å levere ulike løsninger med aktive ingredienser (f.eks legemidler, kjemikalier, bakterier og virus) lokalt i urinblæren indusere dyremodeller blæren patologi eller vurdere den effektiviteten av intravesical behandlinger. Mest gnager modeller av lavere urin skrift (LUT) patologi er indusert i kvinnelige mus grunn å intravesical instillasjon av stoffer via den kvinnelige urinrøret. Men på grunn av anatomiske forskjellene mellom den kvinnelige og mannlige LUT, transurethral instillasjon i en mannlig mus har vært ansett en svært utfordrende prosedyre, og det har ikke vært beskrevet tidligere. I dette manuskriptet gir vi en detaljert beskrivelse av hvordan å forberede polyetylen rør for påfølgende innsetting urinrøret mannlige museklikk. Dessuten, diskuterer vi de ideelle typene PE rør brukes avhengig av ønsket område av vaksinering. I tillegg beskriver vi punkt for punkt hvordan å forberede et dyr for en vellykket transurethral instillasjon unngå skader til urethra og sikre løsningen til ønsket plassering. Prosedyren er startet av trekke prepuce og glans å utsette åpningen av urinrøret kjøtt. Deretter glans er forstått av sløv ikke-knusing tang å stabilisere penis og PE slangen. PE slangen settes først inn i urinrøret kjøtt parallelt med dyr kroppen og dens vinkel justeres ved å vippe kateter for å manøvrere det å følge ryggsøylens naturlige urinrøret. Denne teknikken kan brukes til indusert murine modeller av blæren patologi og/eller evaluere effektiviteten av intravesical behandlinger i mannlige mus.

Transurethral instillasjon blått fargestoff via PE 50 slangen førte instillasjon fargestoff i urinblæren (figur 4A), og via PE 10 rør i Fargelegging av SV og AP (figur 4B), henholdsvis. For å vurdere om de utførte transurethral instillasjon forårsaker en umiddelbar refluks av inoculum til nyrene eller ikke, ble nyrene og ureter observert etterfulgt av instillasjon av 100 µL av blått fargestoff og fluorescerende farge (<s...

Watch this Scientific Journal Video about Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse at JoVE.com

Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse

Transurethral instillasjon er en utfordrende prosedyre og har ikke blitt godt beskrevet i litteraturen. Målet med dette manuskriptet er å beskrive en teknikk for transurethral innsetting av et kateter for intravesical levering av væsker med aktive stoffer i urinblæren og/eller prostata hos voksne mannlige mus.

Transurethral instillasjon prosedyre i voksne mannlige musen

Transurethral instillation can be used to deliver different solutions with active ingredients (e.g., drugs, chemicals, bacteria, and viruses) locally into ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Non-surgical Intratracheal Instillation of Mice with Analysis of Lungs and Lung Draining Lymph Nodes by Flow Cytometry

Phagocytic cells such as alveolar macrophages and lung dendritic cells (LDCs) continuously sample antigens from the alveolar spaces in the 
lungs. LDCs, ...

Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System

Dyrking Microglia fra Neonatal og voksne sentralnervesystemet

Microglia are the resident macrophage-like cells of the central nervous system (CNS) and, as such, have critically important roles in physiological and ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

Komplett tymektomi hos voksne rotter med Non-invasiv endotrakeal intubering

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice

Urinveisinfeksjon i en liten dyr modell: Transurethral Catheterization mannlige og kvinnelige mus

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, ...

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Kvantifisere Vibrio cholerae kolonisering og diaré i voksen sebrafisk modell

Vibrio cholerae is best known as the infectious agent that causes the human disease cholera. Outside the human host, V. cholerae primarily exists in the ...

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

Modellering tuberkulose Mycobacterium marinum infisert voksen sebrafisk

Mycobacterium tuberculosis is currently the deadliest human pathogen causing 1.7 million deaths and 10.4 million infections every year. Exposure to this ...

A Model of Self-limited Acute Lung Injury by Unilateral Intra-bronchial Acid Instillation

En modell av selv-begrenset akutt lungeskade av ensidig intra-bronkial acid drypping

Selective intra-bronchial instillation of hydrochloric acid (HCl) to the murine left mainstem bronchus causes acute tissue injury with histopathologic ...

Experimental Viral Infection in Adult Mosquitoes by Oral Feeding and Microinjection

Eksperimentell virusinfeksjon hos voksne mygg ved oral fôring og mikroinjeksjon

Mosquito-borne viruses (MBVs), which are infectious pathogens to vertebrates, are spread by many mosquito species, posing a severe threat to public ...