Name: transurethral instillation procedure in adult male mouse
Uploaded: 2017-11-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse at JoVE.com

Författarna har inte några bekräftelser.

alla förfaranden med djur, inklusive metod och varaktigheten av anestesi, liksom postoperativ vård, diskuterades med en veterinär och godkänts av institutionell djur vård och användning kommittén (IACUC) på den anknuten institution. I detta manuskript, utfördes alla förfaranden med 8 till 15 veckor gamla C57BL/6 hanmöss och protokollet följer djurvård riktlinjerna godkändes av IACUC vid University of Colorado.
 1. beredning av slangar Obs: för att ing...

<ol>
	<li>Lee, S., Yang, G., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostatic+inflammation+induces+urinary+frequency+in+adult+mice.">Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice.</a> PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).</li><li>Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostatic+inflammation+induces+fibrosis+in+a+mouse+model+of+chronic+bacterial+infection.">Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection.</a> PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).</li><li>Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+bacterial+infection+and+inflammation+incite+reactive+hyperplasia+in+a+mouse+model+of+chronic+prostatitis.">Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis.</a> Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).</li><li>Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+bacterial+inflammation+of+the+mouse+prostate.">Acute bacterial inflammation of the mouse prostate.</a> Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).</li><li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+inflammation+of+the+lower+urinary+tract.">Models of inflammation of the lower urinary tract.</a> Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).</li><li>Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transurethral+induction+of+mouse+urinary+tract+infection.">Transurethral induction of mouse urinary tract infection.</a> J Vis Exp. (42), (2010).</li><li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+cystitis+is+accompanied+by+increased+peripheral+thermal+sensitivity+in+mice.">Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice.</a> J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).</li><li>Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+and+host+responses+to+Escherichia+coli+urinary+tract+infection+in+genetically+distinct+mouse+strains.">Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains.</a> Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).</li><li>Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravesical+resiniferatoxin+decreases+spinal+c-fos+expression+and+increases+bladder+volume+to+reflex+micturition+in+rats+with+chronic+inflamed+urinary+bladders.">Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders.</a> BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).</li><li>Cayan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Botulinum+toxin+type+A+may+improve+bladder+function+in+a+rat+chemical+cystitis+model.">Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model.</a> Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).</li><li>Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+mouse+bladder+inflammatory+response+to+E.+coli+lipopolysaccharide.">Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide.</a> Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).</li><li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LPS-sensory+peptide+communication+in+experimental+cystitis.">LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).</li><li>Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+invasion+augments+epithelial+cytokine+responses+to+Escherichia+coli+through+a+lipopolysaccharide-dependent+mechanism.">Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism.</a> J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).</li><li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discriminators+of+mouse+bladder+response+to+intravesical+Bacillus+Calmette-Guerin+(BCG).">Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG).</a> BMC Immunol. 8, 6 (2007).</li><li>Bjorling, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+acrolein-induced+cystitis+in+mice.">Acute acrolein-induced cystitis in mice.</a> BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).</li><li>Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+bladder+distention+evoked+visceromotor+responses+as+a+model+for+bladder+pain+in+mice.">Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li></ol>

Detta manuskript beskriver i detalj en metod för transuretral instillation i vuxna manliga mus. Differentiell primära sådd området kan nås med hjälp av PE rör av olika diametrar. PE-50 rekommenderas för att framgångsrikt nå urinblåsan lumen, medan en större diameter PE-10 används för att nå AP och SV (figur 3A-B). Förutom valet av storlek av PE rör och målorgan för inympning spela andra faktorer, såsom volym av ingjuten inokulatet, också en roll i slutet...

Metoden med transuretral instillation har använts i tidigare studier som en av metoder för att skapa gnagare modeller av urinblåsan patologier1,2,3,4 och kan användas för att utvärdera den effektiviteten av lokalt levererade möss. Även om djurmodeller inte fullt recapitulate mänskliga patologier, ger identifiering av de underliggande mekanismerna i djurstudier en bättre förståelse av de mänskliga LUT störningarna såsom interstitiell cystit/blåsa smärtsyndrom, neurogen cystit, autoimmuna cystit och prostata inflammation5.
Transuretral instillation förfarandet utförs på en vuxen manlig musen är mer tekniskt krävande än intravesical instillation i en vuxen kvinnlig mus6. Manliga urinröret tillsammans med dess små diameter naturligt böjda anatomi gör det tekniskt svårt att åstadkomma transuretral införandet av en kateter. Därför utförliga anvisningar för transuretral induktion av mus urinvägarna infektion6 och LUT inflammation7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 via urinblåsan-insatt kateter skisserades tidigare för honmöss endast. Detta manuskript syftar till att ge en stegvis beskrivning av tekniken för transuretral instillation av ämnen hos hanmöss inklusive videoklipp, bilder och illustrationer. Transuretral instillation i en vuxen manlig mus kan utföras med variabel infektionsstadierna liknande den som tidigare beskrivits i kvinnliga mus7 och samman med ytterligare tekniker såsom Elektromyogram inspelningar av visceromotor svar (VMR)16.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>63019-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>63019-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>311411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (EtOH)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch</td>
			<td>Becton Dickson</td>
			<td>205155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch</td>
			<td>Becton Dickson</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle</td>
			<td>Instech</td>
			<td>LS22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle</td>
			<td>Instech</td>
			<td>LS27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6&#34; Long x 2&#34; Wide x 1&#34; Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone</td>
			<td>Norton</td>
			<td>40204034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac</td>
			<td>Surgilube</td>
			<td>281020543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fluriso</td>
			<td>13985-528-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Forceps, Curved</td>
			<td>vwr</td>
			<td>82027-392</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 1 ml Syringe</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>309626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J61007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8~12 weeks old male C57B/6 Mice</td>
			<td>Jackson Lab</td>
			<td>#000664</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transurethral instillation procedure in adult male mouse

Transuretral instillation kan användas för att leverera olika lösningar med aktiva ingredienser (t.ex. läkemedel, kemikalier, bakterier och virus) lokalt i urinblåsan att inducera djurmodeller av urinblåsan patologier eller utvärdera den effektiviteten av intravesical behandlingar. Mest gnagare modeller av nedre urinvägarna (LUT) patologier induceras hos honmöss på grund att underlätta intravesical instillation av ämnen via kvinnliga urinröret. Dock beror på anatomiska skillnader mellan den kvinnliga och manliga LUT, transuretral instillation i en manlig mus har ansetts vara en mycket krävande procedur, och det har inte tidigare beskrivits. I detta manuskript ger vi en detaljerad beskrivning av hur du förbereder polyeten (PE) slangar för efterföljande insättning i urinröret av en manlig mus. Dessutom diskuterar vi idealtyper av PE slangen ska användas beroende på den önskade platsen för inympning. Dessutom beskriver vi punkt för punkt hur man förbereder ett djur för en framgångsrik transuretral instillation att undvika skador på urinröret och säkerställa leverans av lösningen till önskad plats. Förfarandet är startat av Upprullningskraften förhuden och ollonet att exponera öppnandet av den urinrörets meatus. Nästa, ollonet är förstått av trubbiga icke-krossning pincett att stabilisera penis och PE slangen. PE slangen sätts först in i urinrörets meatus parallellt med animaliskt kroppen, då dess vinkel justeras genom att luta katetern för att manövrera det för att följa den naturliga krökningen av urinröret. Denna teknik kan användas till inducerad murina modeller av urinblåsan patologier och utvärdera effektiviteten av intravesical behandlingar hos hanmöss.

Transuretral instillation av blått färgämne via PE 50 slangar resulterade i instillation av färgämnet i urinblåsan (figur 4A) och via PE 10 slangar i färgläggning av SV och AP (figur 4B), respektive. För att utvärdera om den utförda transuretral instillationen orsakar en omedelbar reflux av inokulatet till njurarna eller inte, observerades njure och urinledare följt av instillation av 100 µL av blått färgämne och ...

Watch this Scientific Journal Video about Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse at JoVE.com

Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse

Transuretral instillation är en utmanande förfarande och inte är väl beskriven i litteraturen. Syftet med detta manuskript är att beskriva en teknik för transuretral införande av en kateter för intravesical leverans av vätskor med aktiva substanser i den urinblåsa eller prostata hos vuxna manliga möss.

Transuretral Instillation förfarande i vuxna manliga mus

Transurethral instillation can be used to deliver different solutions with active ingredients (e.g., drugs, chemicals, bacteria, and viruses) locally into ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Transuretral Induktion av Mouse Urinvägsinfektion

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Retroviral Transduction av T-cell receptorer i Mus T-celler

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Non-surgical Intratracheal Instillation of Mice with Analysis of Lungs and Lung Draining Lymph Nodes by Flow Cytometry

Icke-kirurgisk intratrakeal instillation av möss med analys av lungor och Lungsjukas Tömning lymfkörtlar med flödescytometri

Phagocytic cells such as alveolar macrophages and lung dendritic cells (LDCs) continuously sample antigens from the alveolar spaces in the 
lungs. LDCs, ...

Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System

Odling Mikroglia från neonatal och vuxna centrala nervsystemet

Microglia are the resident macrophage-like cells of the central nervous system (CNS) and, as such, have critically important roles in physiological and ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

Komplett tymektomi hos vuxna råttor med icke-invasiv endotrakeal intubation

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice

Urinvägsinfektion i en liten djurmodell: transuretral kateterisering av manliga och kvinnliga möss

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, ...

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Kvantifiera Vibriocholerae koloniseringen och diarré hos vuxna zebrafisk modellen

Vibrio cholerae is best known as the infectious agent that causes the human disease cholera. Outside the human host, V. cholerae primarily exists in the ...

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

Modellering tuberkulos i Mycobacterium marinum infekterade vuxna zebrafiskar

Mycobacterium tuberculosis is currently the deadliest human pathogen causing 1.7 million deaths and 10.4 million infections every year. Exposure to this ...

A Model of Self-limited Acute Lung Injury by Unilateral Intra-bronchial Acid Instillation

En modell av självbegränsade akuta lung skador genom ensidig Intrabronkial syra instillation

Selective intra-bronchial instillation of hydrochloric acid (HCl) to the murine left mainstem bronchus causes acute tissue injury with histopathologic ...

Experimental Viral Infection in Adult Mosquitoes by Oral Feeding and Microinjection

Experimentell virusinfektion hos vuxna myggor genom oral utfodring och mikroinjektion

Mosquito-borne viruses (MBVs), which are infectious pathogens to vertebrates, are spread by many mosquito species, posing a severe threat to public ...