Name: surgical techniques for catheter placement and 5/6 nephrectomy in murine models of peritoneal dialysis
Uploaded: 2018-07-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis at JoVE.com

מחברים תודה Ferrantelli אי ג'י Liappas על תמיכתם הגדרת פרוטוקול כריתת כליה 5/6, ר Sánchez-דיאז ו- P. מרטין על הסיוע עם הערכות חנקן ureic, ו Hevia א. פ Núñez על הסיוע בזהירות עכברים. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים SAF2016-80648R "Ministerio דה Economía y Competitividad" / אזורית Fondo Europeo דה Desarrollo (MINECO/פדר) כדי מנואל לופז-קבררה ו- PI 15/00598 מ- Fondo דה Investigaciones Sanitarias (FIS)-פדר קרנות, ל אבלרדו אגילרה.

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה אוצ'ואה Severo מרכז לביולוגיה מולקולרית (מדריד, ספרד).
הערה: C57BL/6J עכברים הנשית בגילאי 12-14 שבועות ומשקלו כ 20 גרם בתחילת המחקר שימשו. כל החיות שוכנו בתנאים סטנדרטיים וניתנה מזון ומים ad libitum. מצבים ברי?...

הנתונים שפורסמו הראשון ניתוח PD שינויים באמצעות טכניקה "לסגור את מערכת" בוצעה בשנת 200929 . מערכת זו קרובה כלומר המכשיר כולו ממוקם בתוך הגוף נוזלי מוזרק עם מחט דרך יציאת גישה. הבעיה הטכנית החשוב ביותר במודלים חייתיים לטווח ארוך של עירוי נוזלים דרך קטטר היא המופע של חסימה. אופציות א...

תפקוד כליות, מחלת כליות
הכליות הן איברים חיוניים מעורבים הומאוסטזיס, סינון הדם וייצור הורמונים. ישנם תנאים שונים להוביל לכשל כלייתי, תחילתה עוקבות של אורמיה, אשר הוגדרה כקבוצת מהתופעות מערכתית בשל הצטברות פסולת בדם נשמרות עקב הפרעות תפקוד כליה1 יתר על כן, מאז יכולת homeostatic מושפעת גם כאשר קיים כשל כליות, יתר לחץ דם עקב עומס נפח עלולה להתרחש, וזה גם מסוכן כמו זה יכול להוביל ספיקת לב1. כאשר יכולת תפקודית של הכליות הוא פחות מ 10% - 15%, המטופל חייב לעבור לאחת האפשרויות הטיפוליות הבאות: המודיאליזה, דיאליזה פריטוניאלית (PD) או השתלת כליות.
המשטרה היא אופציה מעניינת זה מאפשר לחולים להמשיך טיפול מן הנוחות של הבית שלהם או כמעט בכל מקום, ובכך נמנע הצורך החולים תכופים מבקר ונשאר. הטכניקה המשטרה מבטלת מולקולות רעילים קטנות, המים העודפים שנוצרו על-ידי הגוף2 דרך החדרה נוזלים osmotic (נוזל דיאליזה פריטוניאלית, PDF) לתוך חלל הצפק. החדרה זו יוצרת מעבר הצבע osmotic הכרחי עבור ההחלפה של מומסים בגבול ומים בין נימי הצפק PDF, תהליך המכונה אולטראפילטרציה (UF).
הצפק פגיעה הנגרמת על ידי דיאליזה פריטוניאלית
חלל הצפק מכוסה על ידי קרום (PM) המורכבת של טפט התאים mesothelial נח על מטריצה, המאכלס גם מספר כלי הדם, fibroblasts, מקרופאגים אוכלוסיות תאים אחרים. למרבה הצער, קרום הצפק סובל תמיד כמה שינויים במהלך הטיפול PD, כגון אפופטוזיס ועל אובדן התאים mesothelial, המעבר mesenchymal של mesothelial (MMT) ותאי אנדותל (end-MT), גיוס של תאים דלקתיים ו fibrocytes, שינויים בכלי הדם, אנגיוגנזה, lymphangiogenesis ו/או פיברוזיס3,4,5,6,7,8,9. שינויים אלה אחראים התפתחות UF קיבולת כשל10, שמונע את המשך הטיפול, הדורש כי החולה חייב לקבל טיפול חלופי כדי לשרוד (המודיאליזה או השתלת כליות) . לכן, עבור חולים אלו, זה חיוני כדי לעכב או לשלוט על התפתחות שינויים אלה הצפק.
זה כבר העריכו כי אורמיה לבד עלול לגרום לדלקת11, אבל המקומיים הגורם החשוב ביותר היא PDF bioincompatibility. רוב מסמכי Pdf להשתמש גלוקוז כסוכן osmotic, הגורמת לדלקת. הודות PDF אחסון פעמים של עיקור, גלוקוז סובל תהליך של השפלה, מוצרים חדשים מבית כזאתי מופיעים, יצירת דלקת,12,MMT, אפופטוזיס13יותר. יתר על כן, יש גם האפשרות של פגיעה מכנית עקב השיטה החדרה. כל הגורמים הללו, מתנהג באופן רציף, עשויה ליצור מצב דלקתי מתמיד, חוזרים ונשנים, שמוביל דלקת כרונית, אשר מסיע ממברנה התדרדרות וכשל, באופן סופי, UF. כמה נזק זה יכול להיות מופחת או נמנע הוא עדיין עניין של מחקר.
ניתוח על ההתפתחות של נגעים: מדגימות האנושי מודלים בבעלי חיים
עבודה עם ביופסיות האנושית היא גורם מגביל עקב הקושי בהשגת דגימות רקמה. דגימות אלה ניתן להשיג רק ניתוחים שבוצעו עקב תקלה קטטר או השתלת, בדרך כלל לאחר שנים של טיפול המשטרה. גישה זו שימושית לצורך הניתוח של שינויים פתולוגיים סבל על ידי קרום הצפק נחשף ל- PDF, אך אינה מספיקה כדי ללמוד על התפתחות התהליך. אפשרות אחרת היא לנתח תאים מרוקנת מכל למטעי דיאליזה, אבל זה עדיין לא ניתן לספק תרחיש מלא. מיזוג בשתי הטכניקות אפשרי רק עם מודלים בעלי חיים. המבנה הצפק הוא דומה בקרב יונקים, לכן ישנם דגמים עם מיני בעלי חיים שונים. ישנם כמה מחקרים בהתבסס על כבשים (Rodela. et al. 14 ו- Barrell. et al. 15) ומודלים ארנב16,17 ; עם זאת, חיות קטנות יותר עדיפים כמו הם להקל על הבית, לשמור על, הם גם חסכוני יותר. השימוש של חולדות18,19,20,21,22,23,24 מציע זמן טיפול קצר יותר היה צריך לצפות שינויים מורפו-פונקציונלי. הוא ייצג את מודל שימושי מאוד לחקור נושאים שונים כגון ההשפעה של תרופות anti-fibrotic לדוגמה BMP-7 (עצם morphogenic חלבון-7)25 וראס (מערכת הרנין-אנגיוטנסין-אלדוסטרון) מיקוד26,27 , 28.
עם זאת, המודל מאתר התפתחה מודל אידיאלי עם יתרונות רבים על פני אחרים. היתרון הכי מעניין הוא ששינה האפשרות של שימוש גנטית עכברים ללמוד את הבסיס המולקולרי וסלולריות לנזק הצפק. למעשה, עכברים מועסקים לעיתים קרובות לניתוח של מחלות רבות, שכן ישנם זנים שונים עם רקע גנטי ידועים שונים. יתרונות נוספים כוללים את שטח מופחתת הנדרש עבור דיור, מופחתת עלות הניסויים (בגלל גודל קטן יותר החיה), קלות הטיפול, הזמינות של ריאגנטים, הכמות הגוברת של מידע זמין על זנים שונים של עכברים מאז הם היו חיות הנפוצות ביותר במחקר.
מודל המבוסס על עכברים העסקת התקן מושתל כבר המודל ביותר לאחרונה הוקמה משטרת29,30, הוכח לחקות הצפק בליה הנגרמת החולים במחלה עקב חשיפה מסמכי Pdf. מודל זה שיתפה פעולה כדי להבין את שהתהליכים הפתולוגיים ערבו31,32,33. יתר על כן, זה כבר משמש לאימות טיפולים פוטנציאליים שונים עבור ameliorating זה הידרדרות באמצעות המערכת החיסונית מאפננים, תרופות אנטי דלקתיות, אחרים anti-fibrotic וסוכנים אנטי-אנגיוגנזה, כגון מעכבי COX-2 (cyclooxygenase-2) 34, אגוניסטים PPAR-γ (פראוקסיזום מופעל proliferator קולטן-γ)35, טמוקסיפן36, Paricalcitol (ויטמין D קולטן activator זה שמחליש את התגובה החיסונית)37, Rapamycin38 ו Nebivolol 39.
פיתוח המודל עכבר עם קטטר מושתל
המטרה של מודל זה הוא דומה, ככל האפשר, הטכניקה בשימוש בחולים אנושיים PD, ומאפשר לבצע טיפולים מורחב של משטרת חיות קטנות. עד כה, שלוש טכניקות החדרה של נוזל דיאליזה לתוך הצפק נבדקו בעכברים. הראשון, עיוור לנקב של החזית קיר הבטן, שנוי במחלוקת בשל הסיכונים מרובות זה שכ"ט, כגון נזק הצפק, דימום, והוא, כמו דקירה שבוצעו בצורה עיוורת, מהבטן. השיטה השנייה היא מה שנקרא "פתוח קבוע מערכת", שבה ההתקן הזרקת הנוזל ממוקמת מחוץ לגוף. ההליך זה הכי דומה לזו שבוצעה ב בני אדם. עם זאת, הוא אינו מאפשר ההתפתחות של ניסויים ארוכי טווח, מכיוון שהוא עלול להגביר את הסיכויים לזיהום, בדרך כלל דורשת השימוש בהרדמה כדי להחדיר PDF, אשר עלולים להפריע התוצאות. השיטה השלישית היא "מערכת סגורה". עם גישה זו, המכשיר כולו משמש החדרה נוזלים הינו ממוקם בתוך גוף החיה. נוזל מוזרק עם מחט דרך יציאת גישה, אשר ממוקם subcutaneously. הליך זה מפחית את הסיכון של דלקת הצפק, דימום כמו גם את הצורך בהרדמה.
כדי לחקור את ההשפעה של אורמיה ב- PD, מודל מאתר האחרונות היה גם שרד40 בהתבסס על המודל אינפוזיה PDF עם קטטר. מודל זה מביא טכניקה חדשנית לביצוע של כריתת כליה בעכברים, ובכך להקטין את תפקוד הכליות. במאמר הנוכחי, שינוי של פרוטוקול מועסק על ידי. Ferrantelli et al. ב 201540 פותחה. פרוטוקול חדש זה מאפשר השרשה קטטר תוך כריתת כליה, מפחית את אורך הפצע אשר נגרם במהלך הניתוח מקלה על גישה לכליות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1207px;" width="1207">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Minute Mouse Port 4French with retention beads and cross holes</td>
			<td style="width:180px;">Access technologies</td>
			<td style="width:244px;">MMP-4S-061108A</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Posi-Grip Huber point needles 25 ga. X 1/2&#180;&#180;&#160;</td>
			<td style="width:180px;">Access technologies</td>
			<td style="width:244px;">PG25-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">High Temperature Cautery Kit</td>
			<td style="width:180px;">Bovie</td>
			<td style="width:244px;">18010-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Forane</td>
			<td style="width:180px;">abbVie</td>
			<td style="width:244px;">880393.4 HO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">non absorbable suture 6/0</td>
			<td style="width:180px;">Laboratorio Agar&#243;</td>
			<td style="width:244px;">6121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Scissors&#160;</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">14079-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">forceps</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">clamp</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">13002-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Buprenorphine 0,3 mg/ml</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">cotton swabs</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Dalsy (Ibuprofen) 20mg/mL oral suspension</td>
			<td style="width:180px;">AbbVie&#160;S.R.L.&#160;</td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical techniques for catheter placement and 5/6 nephrectomy in murine models of peritoneal dialysis

דיאליזה פריטוניאלית (PD) הוא טיפול החלפת הכליות עקבית על ניהול ושחזור האחורי של נוזל hyperosmotic בתוך חלל הצפק לנקז מטבוליטים רעילים ומים הכליות לא מספיק פונקציונלית אינם מסוגלים לחסל. למרבה הצער, הליך זה מתדרדר של הצפק. נזק לרקמות מפעיל את התפרצות של דלקת לרפא את הפגיעה. אם הפגיעה נמשכת והופך להיות דלקת כרונית, היא עלולה להוביל פיברוזיס, וזו תופעה שכיחה במחלות רבות. PD, דלקת כרונית, פיברוזיס, יחד עם אחרים תהליכים ספציפיים הקשורים אלה, להוביל להידרדרות קיבולת אולטראפילטרציה, מה שאומר את כשל ואת הפסקת עוקבות של הטכניקה. עבודה עם דגימות אנושי מספק מידע על הידרדרות זו אבל מתנות מגבלות טכניות ומוסרי כדי להשיג ביופסיות. מודלים בעלי חיים חיוניים ללמוד הידרדרות זו מאז הם להתגבר על חסרונות אלה.
מודל אינפוזיה העכבר כרונית פותחה בשנת 2008, אשר נהנה מתוך מגוון רחב של עכברים מהונדסים, פותח את האפשרות של הלומדים את המנגנונים המעורבים. מודל זה מעסיקה התקן מותאם אישית עבור עכברים, המורכב קטטר המחובר ליציאת גישה הממוקמים subcutaneously מאחורי החיה. נוהל זה מונע פנצ'רים רציפה של הצפק במהלך ניסויים ארוכי טווח, להפחתת זיהומים ודלקות בשל זריקות. בזכות מודל זה, הצפק נזק הנגרם על ידי חשיפה כרונית של נוזלים PD יש כבר מאופיין, מאופנן. טכניקה זו מאפשרת לעירוי של כמויות גדולות של נוזלים, יכול לשמש לחקר מחלות אחרות אשר נחוצה חיסון של סמים או חומרים אחרים על פני פרקי זמן ארוכים.
מאמר זה מציג את שיטת המיקום כירורגי של הקטטר בעכברים. יתר על כן, זה מסביר את השגרה כריתת כליה 5/6 לחקות את המצב של מחסור של הכליות נוכח החולים במחלה.

איור 1 מציג את כל החומרים הדרושים בצע את ההליכים המתוארים בסעיף פרוטוקול. עבור דוגמה זו, עכברים נאספו או לא כריתת כליה (8 חיות לכל קבוצה) (איור 2) נחשפו במהלך 40 ימים (שתי זריקות ביום, מחכים לפחות שעתיים בין שניהם) תערובת של שני מסמכי Pdf שונים, נפ?...

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis at JoVE.com

Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis

טכניקות ניתוחיות קטטר השמה, כריתת כליה 5/6 דגמים מאתר של דיאליזה פריטוניאלית

מאמר זה מציג את שיטת המיקום כירורגי בעכברים של קטטר בקרום הבטן מחובר ליציאת גישה זה ממוקם מאחורי החיה. יתר על כן, זה מסביר את השגרה כריתת כליה 5/6 להידמות המדינה uremic של החולים במחלה.

Peritoneal dialysis (PD) is a renal replacement therapy consistent on the administration and posterior recovery of a hyperosmotic fluid in the peritoneal ...

Research

JoVE Journal

Engineering

Setting Limits on Supersymmetry Using Simplified Models

קביעת מגבלות על שימוש במודלים פשוטה סימטריית

Experimental limits on supersymmetry and similar theories are difficult to set because of the enormous available parameter space and difficult to ...

Characterization of Electrode Materials for Lithium Ion and Sodium Ion Batteries Using Synchrotron Radiation Techniques

אפיון של חומרי אלקטרודה לסוללות ליתיום יון ויון נתרן באמצעות טכניקות Synchrotron קרינה

Intercalation compounds such as transition metal oxides or phosphates are the most commonly used electrode materials in Li-ion and Na-ion batteries. ...

Thermal Measurement Techniques in Analytical Microfluidic Devices

טכניקות מדידת תרמית במכשירי microfluidic אנליטי

Thermal measurement techniques have been used for many applications such as thermal characterization of materials and chemical reaction detection. ...

Detection and Recovery of Palladium, Gold and Cobalt Metals from the Urban Mine Using Novel Sensors/Adsorbents Designated with Nanoscale Wagon-wheel-shaped Pores

איתור והשחזור של פלדיום, מתכות זהב וקובלט ממכרה העירונית באמצעות חיישנים / Adsorbents רומן יעודיים עם נקבוביות-בצורת גלגל עגלה ננומטריים

Developing low-cost, efficient processes for recovering and recycling palladium, gold and cobalt metals from urban mine remains a significant challenge in ...

3D Printing of Biomolecular Models for Research and Pedagogy

3D הדפסה של מודלים Biomolecular למחקר פדגוגיה

The construction of physical three-dimensional (3D) models of biomolecules can uniquely contribute to the study of the structure-function relationship. 3D ...

Gain-compensation Methodology for a Sinusoidal Scan of a Galvanometer Mirror in Proportional-Integral-Differential Control Using Pre-emphasis Techniques

מתודולוגיה רווח-פיצוי עבור סריקה סינוסי המראה גַלוָנוֹמֶטֶר ב פרופורציונלי-אינטגרל-דיפרנציאל בקרה באמצעות טכניקות טרום דגש

Galvanometer mirrors are used for optical applications such as target tracking, drawing, and scanning control because of their high speed and accuracy. ...

Fabrication of Polymer Microspheres for Optical Resonator and Laser Applications

ייצור של פולימרים microspheres עבור מהוד אופטי ויישומי לייזר

This paper describes three methods of preparing fluorescent microspheres comprising &#960;-conjugated or non-conjugated polymers: vapor diffusion, ...

Fabrication of Magnetic Nanostructures on Silicon Nitride Membranes for Magnetic Vortex Studies Using Transmission Microscopy Techniques

ייצור של Nanostructures מגנטית על ממברנות הסיליקון ניטריד ללימודי מערבולת מגנטי באמצעות טכניקות במיקרוסקופ שידור

Electron and x-ray magnetic microscopies allow for high-resolution magnetic imaging down to tens of nanometers. However, the samples need to be prepared ...

Simultaneous Measurement of Turbulence and Particle Kinematics Using Flow Imaging Techniques

מדידה סימולטני של מערבולת, קינמטיקה של חלקיקים באמצעות זרימת טכניקות הדמיה

Numerous problems in scientific and engineering fields involve understanding the kinematics of particles in turbulent flows, such as contaminants, marine ...

Microfluidic Fabrication Techniques for High-Pressure Testing of Microscale Supercritical CO2 Foam Transport in Fractured Unconventional Reservoirs

Microfluidic Fabrication Techniques for High-Pressure Testing of Microscale Supercritical CO2 Foam Transport in Fractured Unconventional Reservoirs

טכניקות ייצור מיקרו-נוזלים לבדיקות בלחץ גבוה של הובלת קצף CO2 סופר-קריטי בקנה מידה במאגרים לא קונבנציונליים סדוקים

Pressure limitations of many microfluidic platforms have been a significant challenge in microfluidic experimental studies of fractured media. As a ...