Name: surgical techniques for catheter placement and 5/6 nephrectomy in murine models of peritoneal dialysis
Uploaded: 2018-07-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis at JoVE.com

Авторы благодарят э. Ferrantelli и г. Liappas за их поддержку, Настройка протокола нефрэктомия 5/6, р. Санчес-Диас и P. Мартин для помощи с мочевинного азота оценок и E. ЭВИА и F. Нуньес для помощи с осторожностью мышей. Эта работа была поддержана от грантов SAF2016-80648R от «Ministerio де Economía y развитию» / региональных Europeo Fondo de Desarrollo (МИНЕКО/ФЕДЕР) Мануэль Лопес-Кабрера и PI 15/00598 от Fondo de Investigaciones Sanitarias (FIS)-ФЕДЕР средства, чтобы Абелардо Агилера.

Все методы, описанные здесь были одобрены институциональный уход животных и использование Комитета молекулярной биологии центр Северо Очоа (Мадрид, Испания).
Примечание: Самок мышей C57BL/6J в возрасте от 12 до 14 недель и массой около 20 г в начале исследования были использова?...

Первый опубликованных данных, анализируя PD изменения с помощью техники «закрыть системы» была исполнена в 200929 . Это тесное системы означает, что все устройство расположен внутри тела и жидкости вводят с иглой через порт доступа. Наиболее важной технической проблемой в дол?...

Функции почек и почечных болезней
Почки являются основных органов, участвующих в гомеостаза, фильтрации крови и гормонов. Существуют различные условия, которые приводят к почечной недостаточности и последующего начала уремия, которая была определена как группа системных симптомов вследствие накопления отходов в крови сохраняется из-за расстройства функции почек1. Кроме того поскольку гомеостатических возможности также затрагивает при почечной недостаточности, гипертонии вследствие перегрузки тома может произойти, который также является опасным, поскольку это может привести к сердечной недостаточности1. При функциональной способности почек является менее чем 10% - 15%, пациент должен пройти один из следующих вариантов терапевтическое: гемодиализ, перитонеальный диализ (PD) или трансплантации почки.
PD это интересный вариант, который позволяет больным продолжить лечение от комфорта их дома или практически в любом месте, таким образом избегая необходимость частых больницы посещений и остается. PD техника устраняет небольшие токсичные молекулы и избыток воды, порожденных тела2 через инстилляции осмотического жидкости (жидкость, перитонеальный диализ, PDF) в брюшной полости. Этот инстилляции генерирует осмотический градиент, необходимые для обмена растворов и воды между перитонеального капилляров и PDF, процесс, известный как ультрафильтрации (UF).
Брюшной травмы, вызванные перитонеального диализа
Брюшной полости покрыта мембраной (PM) в составе монослоя мезотелиальной клетки, опираясь на матрицу, которая также находятся несколько кровеносные сосуды, фибробласты, макрофаги и других клеточных популяций. К сожалению, перитонеальной мембраной всегда страдает некоторые изменения во время лечения PD, например апоптоз и потеря мезотелиальной клетки, мезенхимальные переход мезотелиальной (ММП) и клеток эндотелия (конец MT), набор воспалительных клеток и фиброциты, сосудистых изменений, ангиогенез, lymphangiogenesis и/или фиброз3,4,5,6,,78,9. Эти изменения несут ответственность за развитие UF потенциала провал10, который исключает продолжение терапии, требуя, что пациент должен получать альтернативное лечение выжить (гемодиализа и трансплантации почки) . Таким образом для этих пациентов, важно задержать или контролировать развитие этих перитонеальный изменений.
Она предположила, что уремия одиночку может вызвать воспаление11, но самым важным фактором местных PDF bioincompatibility. Большинство PDF использовать глюкозу как осмотического агента, который вызывает воспаление. Благодаря PDF хранения раз и стерилизации глюкозы страдает процесс деградации, и появляются новые продукты от этой реакции, генерации более воспаления, MMT и апоптоз12,13. Кроме того существует также возможность механических повреждений из-за метода инстилляции. Все эти факторы, действуя постоянно, может создавать постоянные и периодические воспалительных состояние, приводит к хроническому воспалению, который ведет к ухудшению мембраны и, окончательно, UF провал. Как этот ущерб может быть уменьшена или избегать все еще вопрос исследования.
Анализируя развитие поражений: от человеческих образцов Животные модели
Работа с человека биопсия является ограничивающим фактором, из-за трудностей в получении образцов ткани. Эти образцы можно получить только из операций выполняются из-за неисправности катетер или трансплантации, обычно после нескольких лет лечения PD. Этот подход полезен для анализа патологические изменения, понесенные перитонеальной мембраной подвергается PDF, но не является достаточным для изучения развития процесса. Другая возможность заключается в анализе клеток, слить с диализа стоков, но это по-прежнему не удается предоставить полный сценарий. Слияние обоих методов возможна только с животных моделей. Перитонеальные структура аналогична среди млекопитающих, и поэтому есть модели с различными видами животных. Есть несколько исследований, основанных на овец (Rodela соавт. 14 и стволами и др. 15) и кролик16,17 моделей; Однако мелкие животные предпочтительнее, как они проще в дом и поддерживать и также более экономичным. Использование крыс18,19,20,21,22,,2324 предлагает более короткое время лечения необходимо соблюдать Морфо функциональные изменения. Он представлял весьма полезной моделью для изучения различных вопросов, например эффект анти фиброзных наркотики например BMP-7 (кости морфообразующих белка-7)25 и РАН (ренин ангиотензиновая система) ориентации26,27 , 28.
Однако мышиных модель стала идеальная модель с много преимуществ над другими. Наиболее интересным преимуществом является возможность использования генетически измененных мышей для изучения молекулярных и клеточных основу перитонеальный повреждения. В самом деле мышей часто используются для анализа многочисленных заболеваний, поскольку существует много различных штаммов с различных хорошо известных генетических особенностей. Другие преимущества включают сокращение пространство, необходимое для жилья, снижение стоимости экспериментов (из-за меньшего размера животных), легкость обработки, наличие реагентов и все большее количество информации о различных штаммов мышей с тех пор они были наиболее часто используемых животных в научных исследованиях.
Модель на основе мышей, используя имплантированным был наиболее недавно созданной модели для PD29,30и было показано, чтобы имитировать перитонеальный ухудшения, понесенные PD пациентов из-за воздействия в PDF. Эта модель сотрудничал понять, что патологические процессы вовлечены31,32,33. Кроме того он был использован для проверки различных потенциальных методов лечения для улучшения этого ухудшения, используя иммунных модуляторов и противовоспалительные препараты и другие анти фиброзных и анти ангиогенных агентов, например ингибиторов ЦОГ-2 (циклооксигеназы-2) 34, агонистов PPAR-γ (Пероксисома иным активирован рецептором γ)35, тамоксифен36, Paricalcitol (витамин D рецептор активатор, который модулирует иммунной реакции)37,38 Rapamycin и Небиволол 39.
Разработка модели мыши с имплантированным катетер
Цель этой модели — напоминают, насколько это возможно, метод используется в человека пациентов PD, позволяя выполнять расширенный лечение ПД в мелких животных. До настоящего времени были протестированы три техники для инстилляций диализа жидкости в брюшину в мышей. Первая, слепой проколы передней брюшной стенки, является спорным из-за многочисленные риски, которые она может понести, таких как перитонеальный ущерб, кровотечение и, как слепо выполняется, висцерального прокол. Второй способ-это так называемый «открытой постоянной системы», в которой устройства для инъекций жидкости помещается за пределами тела. Эта процедура является наиболее близок к выполняемой в организме человека. Однако он не допускает развитие долгосрочных экспериментов, как это может увеличить риск заражения и обычно требует использования анестезии привить PDF, который может вмешиваться в результаты. Третий метод является система «закрытой». С этим подходом весь устройство, используемое для жидкости инстилляции расположен внутри тела животного. С иглой через порт доступа, который помещается подкожно вводят жидкость. Эта процедура уменьшает риск перитонеальный инфекции и кровотечения, а также потребность в анестезии.
Для изучения влияния уремия в PD, недавно мышиных модель была также укреплены40 на основе модели вливания PDF с катетер. Эта модель приносит в Роман технику для выполнения нефрэктомии у мышей, таким образом снижения функции почек. В настоящей статье была разработана модификация протокола, используемых Ferrantelli et al. в 2015 году40 . Этот новый протокол позволяет катетер имплантации при нефрэктомии, уменьшает длину раны, нанесенные во время операции и облегчает доступ к функции почек.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1207px;" width="1207">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Minute Mouse Port 4French with retention beads and cross holes</td>
			<td style="width:180px;">Access technologies</td>
			<td style="width:244px;">MMP-4S-061108A</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Posi-Grip Huber point needles 25 ga. X 1/2&#180;&#180;&#160;</td>
			<td style="width:180px;">Access technologies</td>
			<td style="width:244px;">PG25-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">High Temperature Cautery Kit</td>
			<td style="width:180px;">Bovie</td>
			<td style="width:244px;">18010-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Forane</td>
			<td style="width:180px;">abbVie</td>
			<td style="width:244px;">880393.4 HO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">non absorbable suture 6/0</td>
			<td style="width:180px;">Laboratorio Agar&#243;</td>
			<td style="width:244px;">6121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Scissors&#160;</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">14079-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">forceps</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">clamp</td>
			<td style="width:180px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:244px;">13002-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Buprenorphine 0,3 mg/ml</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">cotton swabs</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:592px;">Dalsy (Ibuprofen) 20mg/mL oral suspension</td>
			<td style="width:180px;">AbbVie&#160;S.R.L.&#160;</td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>pharmaceutical product</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical techniques for catheter placement and 5/6 nephrectomy in murine models of peritoneal dialysis

Перитонеальный диализ (PD) является заместительная почечная терапия, последовательно на администрации и задняя восстановления гиперосмотических жидкости в брюшной полости для слива воды и токсичных метаболитов, которые функционально недостаточный почки не могут ликвидации. К сожалению эта процедура ухудшается брюшины. Повреждение тканей вызывает наступление воспаление лечить травмы. Если сохраняется травмы и воспаление переходит в хроническую форму, это может привести к фиброза, который является обычным явлением во многих заболеваний. В ПД хроническое воспаление и фиброза, а также других конкретных процессов, связанных с них, привести к ухудшению способности ультрафильтрации, что означает отказ и последующее прекращение техники. Работа с образцах предоставляет сведения об этом ухудшения но представляет технические и этические ограничения для получения биопсии. Животные модели необходимы для изучения этого ухудшения, поскольку они преодолеть эти недостатки.
В 2008 году, была разработана модель настой хронический мышь, которая выгоды от широкого круга генетически измененных мышей, открывая возможность изучения механизмов. Эта модель использует настроенный устройство, предназначенное для мышей, состоящий из катетера, подключенное к порту доступа, который подкожно помещен на задней части животного. Эта процедура позволяет избежать непрерывной прокол брюшины в ходе долгосрочных экспериментов, сокращения инфекции и воспаления благодаря инъекции. Благодаря этой модели перитонеальный повреждений, вызванных хроническим воздействием PD жидкости характерны и модуляции. Эта техника позволяет инфузии больших объемов жидкости и могут быть использованы для изучения других заболеваний, в которых необходима вакцинация наркотиков или других веществ более продолжительных периодов времени.
Эта статья показывает метод хирургической размещения катетера в мышах. Кроме того он объясняет процедуру для 5/6 нефрэктомия имитировать состояние почечной недостаточности у пациентов PD.

Рисунок 1 показывает все материалы, необходимые для процедур, описанных в разделе протокол. Для этого примера, представленный мышей или не нефрэктомия (8 животных на группы) (Рисунок 2) были подвержены смесь двух разных файлов PDF, широко ис...

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis at JoVE.com

Surgical Techniques for Catheter Placement and 5/6 Nephrectomy in Murine Models of Peritoneal Dialysis

Хирургические методы для размещения катетера и 5/6 нефрэктомия в мышиных моделях перитонеального диализа

Эта статья показывает метод хирургической размещения в мышах внутрибрюшинного катетера, подключенный к порту доступа, которая располагается на задней части животного. Кроме того он объясняет процедуру для 5/6 нефрэктомия напоминают уремический состояние больных PD.

Peritoneal dialysis (PD) is a renal replacement therapy consistent on the administration and posterior recovery of a hyperosmotic fluid in the peritoneal ...

Research

JoVE Journal

Engineering

Setting Limits on Supersymmetry Using Simplified Models

Установка ограничений на суперсимметрии с помощью упрощенных моделей

Experimental limits on supersymmetry and similar theories are difficult to set because of the enormous available parameter space and difficult to ...

Characterization of Electrode Materials for Lithium Ion and Sodium Ion Batteries Using Synchrotron Radiation Techniques

Характеристика электродных материалов для литий-ионных и натрия-ионных аккумуляторов с использованием методов синхротронного излучения

Intercalation compounds such as transition metal oxides or phosphates are the most commonly used electrode materials in Li-ion and Na-ion batteries. ...

Thermal Measurement Techniques in Analytical Microfluidic Devices

Тепловые методы измерения в аналитической микрофлюидных устройств

Thermal measurement techniques have been used for many applications such as thermal characterization of materials and chemical reaction detection. ...

Detection and Recovery of Palladium, Gold and Cobalt Metals from the Urban Mine Using Novel Sensors/Adsorbents Designated with Nanoscale Wagon-wheel-shaped Pores

Обнаружение и восстановление палладия, золота и кобальта металлов из рудника городской использующие новые Датчики / адсорбенты Места с наноразмерных Wagon колеса в форме порах

Developing low-cost, efficient processes for recovering and recycling palladium, gold and cobalt metals from urban mine remains a significant challenge in ...

3D Printing of Biomolecular Models for Research and Pedagogy

3D печать биомолекулярной модели для исследования и педагогики

The construction of physical three-dimensional (3D) models of biomolecules can uniquely contribute to the study of the structure-function relationship. 3D ...

Gain-compensation Methodology for a Sinusoidal Scan of a Galvanometer Mirror in Proportional-Integral-Differential Control Using Pre-emphasis Techniques

Gain-компенсация Методика синусоидального сканирования гальванометра Зеркало в пропорционально-интегрально-дифференциального контроля с использованием предыскажений методов

Galvanometer mirrors are used for optical applications such as target tracking, drawing, and scanning control because of their high speed and accuracy. ...

Fabrication of Polymer Microspheres for Optical Resonator and Laser Applications

Изготовление полимерных микросфер для оптического резонатора и лазерных приложений

This paper describes three methods of preparing fluorescent microspheres comprising &#960;-conjugated or non-conjugated polymers: vapor diffusion, ...

Fabrication of Magnetic Nanostructures on Silicon Nitride Membranes for Magnetic Vortex Studies Using Transmission Microscopy Techniques

Изготовление магнитных наноструктур на мембраны нитрида кремния магнитный вихревой исследований с использованием методов передачи микроскопии

Electron and x-ray magnetic microscopies allow for high-resolution magnetic imaging down to tens of nanometers. However, the samples need to be prepared ...

Simultaneous Measurement of Turbulence and Particle Kinematics Using Flow Imaging Techniques

Одновременное измерение турбулентности и Кинематика частицы с помощью потока, методы визуализации

Numerous problems in scientific and engineering fields involve understanding the kinematics of particles in turbulent flows, such as contaminants, marine ...

Microfluidic Fabrication Techniques for High-Pressure Testing of Microscale Supercritical CO2 Foam Transport in Fractured Unconventional Reservoirs

Microfluidic Fabrication Techniques for High-Pressure Testing of Microscale Supercritical CO2 Foam Transport in Fractured Unconventional Reservoirs

Методы микрофлюидного изготовления для тестирования высокого давления микромасштабного сверхкритического CO2 foam Transport в раздробленных нетрадиционных резервуарах

Pressure limitations of many microfluidic platforms have been a significant challenge in microfluidic experimental studies of fractured media. As a ...