Name: synthesis of functionalized 10-nm polymer-coated gold particles for endothelium targeting and drug delivery
Uploaded: 2018-01-15T15:00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Functionalized 10-nm Polymer-coated Gold Particles for Endothelium Targeting and Drug Delivery at JoVE.com

Эта работа была поддержана Северовосточный университет Химическая инженерия, начальных средств и Tier 1 экспериментального исследования грант от северо-восточного университета Благочинный бюро, низ K01 HL125499 и NSF-IGERT Грант NSF/DGE-096843. Авторы хотели бы также поблагодарить Thomas J. Вебстер и его лаборатории за их помощь, а также Nanomedicine науки и технологического центра и фармацевтических наук Департамента в северо-восточном университете.

<ol>
	<li>Veiseh, O., Gunn, J., Zhang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+fabrication+of+magnetic+nanoparticles+for+targeted+drug+delivery+and+imaging.">Design and fabrication of magnetic nanoparticles for targeted drug delivery and imaging.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 62 (3), 284-304 (2010).</li><li>Feng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjugated+polymer+nanoparticles+for+drug+delivery+and+imaging.">Conjugated polymer nanoparticles for drug delivery and imaging.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 2 (8), 2429-2435 (2010).</li><li>Ghosh, P., Han, G., De, M., Kim, C. K., Rotello, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gold+nanoparticles+in+delivery+applications.">Gold nanoparticles in delivery applications.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 60 (11), 1307-1315 (2008).</li><li>Kumar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Third+generation+gold+nanoplatform+optimized+for+radiation+therapy.">Third generation gold nanoplatform optimized for radiation therapy.</a> Transl. Cancer Res. 2 (4), 1-18 (2013).</li><li>Tarbell, J. M., Ebong, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+endothelial+glycocalyx:+a+mechano-sensor+and+-transducer.">The endothelial glycocalyx: a mechano-sensor and -transducer.</a> Sci. Signal. 1 (40), (2008).</li><li>Reitsma, S., Slaaf, D. W., Vink, H., van Zandvoort, M., oude Egbrink, M. G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+endothelial+glycocalyx:+composition,+functions,+and+visualization.">The endothelial glycocalyx: composition, functions, and visualization.</a> Pflugers Arch. 454 (3), 345-359 (2007).</li><li>Becker, B. F., Jacob, M., Leipert, S., Salmon, A. H., Chappell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation+of+the+endothelial+glycocalyx+in+clinical+settings:+searching+for+the+sheddases.">Degradation of the endothelial glycocalyx in clinical settings: searching for the sheddases.</a> Br. J. Clin. Pharmacol. 80 (3), 389-402 (2015).</li><li>Muzykantov, V., Muro, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+delivery+of+drugs+in+the+vascular+system.">Targeting delivery of drugs in the vascular system.</a> Int. J. Transp. Phenom. 12 (1-2), 41-49 (2011).</li><li>Simone, E., Ding, B. -. S., Muzykantov, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+delivery+of+therapeutics+to+endothelium.">Targeted delivery of therapeutics to endothelium.</a> Cell Tissue Res. 335 (1), 283-300 (2009).</li><li>Lockman, P. R., Mumper, R. J., Khan, M. A., Allen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle+technology+for+drug+delivery+across+the+blood-brain+barrier.">Nanoparticle technology for drug delivery across the blood-brain barrier.</a> Drug Dev. Ind. Pharm. 28 (1), 1-13 (2002).</li><li>Cheng, M. J., Kumar, R., Sridhar, S., Webster, T. J., Ebong, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+glycocalyx+conditions+influence+nanoparticle+uptake+for+passive+targeting.">Endothelial glycocalyx conditions influence nanoparticle uptake for passive targeting.</a> Int. J. Nanomedicine. 11, 3305-3315 (2016).</li><li>Fels, J., Jeggle, P., Liashkovich, I., Peters, W., Oberleithner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomechanics+of+vascular+endothelium.">Nanomechanics of vascular endothelium.</a> Cell Tissue Res. 355 (3), 727-737 (2014).</li></ol>

Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.

Этот метод является эффективным методом для синтеза настраиваемый, сверхмалых КОЛЫШЕК с покрытием AuNPs. Важной частью этой процедуры является первоначальный формирования THPC максимум золота, наночастицы, который может быть подтвержден изменение цвета от желтого до коричневого, что будет происходить после того, как HAuCl4 был добавлен к содержимому в колбу круглым дном (шаг 2.3 протокол). Без изменения цвета показывает, что существует не наночастиц сформирован и что первоначальные шаги следует проверить и повторил прежде. В случае, если цвет изменится на нечто иное, чем коричневый Винно-красный или серый результате частицы, вероятно, не будет вокруг целевой 2,5 Нм и новой партии следует также.
После формирования ядро золото обмен THPC КОЛЫШЕК и очистительные процедуры содержат несколько ключевых шагов для успешного завершения протокола. Смешивание на ночь позволяет для замены реакции идти до конца. Неудачных очистки может произойти, если вода диализа не изменяется с установленной частотой. Агрегации и осаждение частиц также может возникать, если частицы остаются в диализа для более чем 72 ч. Другие потенциальные проблемы могут наблюдаться во время замораживания сушки. Если сверхмалых КОЛЫШЕК с покрытием AuNP решение не было полностью заморожено или лиофилизатор не был установлен корректно, образцы могут быть потеряны. Обратитесь к руководству лиофилизатор, некоторые виды оборудования могут потребоваться различные образцы препаратов.
Простота синтеза и биосовместимость результате частиц представляют преимущества использования этих PEG-AuNPs. Кроме того эти наночастицы имеют преимущество в состоянии взаимодействовать с наноразмерных клеточных структур, что подтверждается возможность выявления деградированных Гликокаликс путем поглощения этих наночастиц. Это преимущество может быть использованы для разработки новых методов лечения атеросклероза и превентивных мер. Помимо того, что мы представляем здесь, еще одно преимущество этого протокола, что она позволяет обширные настройки частиц, а также увеличение стабильности и возможностей хранения путем присоединения тиоловых, содержащие ПЭГ на наночастиц золота4. Другой конец цепи PEG может содержать любую функциональную группу, и множество молекул может быть конъюгированных для этих групп. В этом протоколе, прилагаются все три общих функциональных групп (метил, карбоксильные и аминокислот). Отношение КОЛЫШЕК, решили сначала приоритеты флуоресцентного обнаружения, то возможность включения вторичных таргетинга общие, с помощью группы карбоновые кислоты. Соотношения этих групп может быть tweaked на основании приложения, и также может быть скорректирована длины и формы полимеров.
Для измерения поглощения частиц, мы конъюгированных флуоресцентного зонда к одной из функциональных групп. Следует отметить, что любой спряжение за то, что мы описали приведет к изменению свойств поверхности наночастиц. Каждой итерации наночастиц в отношении дополнительных компонентов и спряжение реакции должны быть проверены на желаемые свойства.
Этот метод производит сверхмалых наночастиц золота, предназначенных для преодоления оборонительных свойства эндотелия внеклеточного Гликокаликс, что затрудняет усвоение условно размеров наночастиц. Однако малый размер одалживает к сложности в визуализации и наркотиков, Загрузка аспект. Эти частицы значительно меньше, чем типичный наночастиц размер диапазона, и в результате значительно уменьшается площадь поверхности для вложений терапии и ориентации постановление. Это может привести к сложности, собирание индивидуальных сигналов в визуализации приложений, хотя по-прежнему кластеры частиц могут быть легко определены, как показано в конфокальных изображения. Сокращение поверхности для вложений таргетинга лигандов и терапии может потребовать больше частиц под управлением для достижения цели дозировка требований. Однако мелкие частицы будет более эффективным в доставке, когда учетом Гликокаликс.
Эти Роман сверхмалых частиц способны доставки в трудно достичь наноразмерных областей внутри тела с минимальным ущербом микроокружения. Добавление привязки позволяет для увеличения биосовместимость и предлагает функциональные группы для настройки тяжелых частиц для различных приложений. Меньшего размера по сравнению с типичными наночастиц поставляется с некоторые недостатки, но если разработаны стратегически, сверхмалых частиц является перспективным подходом к размещение трудно проникнуть, сложных и хрупких Гликокаликс в сосудистой Доставка ориентации и наркотиков.

Наночастицы были применены для доставки лекарств и изображений для его способность перемещаться через тело, чтобы достичь целевых областей интерес1,2. Частицы могут накапливаться внутри опухоли через сосудистую Дырявый или локализовать где целевой лигандом оверэкспрессировали и воздействию. Золото, в частности, стал часто используемые наночастиц материал из-за его уникальной химические и физические свойства, которые влияют на транспорт и выпуск терапии3. Золото является эффективным наночастиц материалом, потому что его поверхность может быть изменен для привязки к тиолами и обладает высокой биосовместимостью, из-за его низкой токсичности4. AuNPs могут быть перевозчиков наркотиков больших биомолекулярных и добились успеха в предоставлении пептиды, нуклеиновых кислот и белков, позволяя AuNPs быть благоприятной для ориентации2,4.
К сожалению эффективность доставки наркотиков наночастиц сдерживается отрицательно заряженных Гликокаликс, который является внеклеточным пальто на мембраны для большинства клеток млекопитающих и имеет размеры поры до 7 Нм5,6. Этот размер поры меньше, чем большинство перевозчиков наркотиков наночастиц, которые имеют типичный диапазон диаметров 50-200 Нм. В условиях болезнь эти поры Гликокаликс становится больше из-за деградации, увеличение проницаемости через эндотелиальных клеток. Однако большинство наночастиц все еще слишком велик, чтобы воспользоваться этой структурных изменений в Гликокаликс. Одним из следствий этой рассогласование размера является, что условно размера частиц не выгодно взаимодействовать с эндотелиальных клеток, которые выстилают кровеносных сосудов. Это влияет на поставки внутривенно управляемых частиц в эндотелия и можно сказать частиц транспорта через крови мозга барьер7,8,9,10.
Один из подходов к борьбе с этой проблемы — использовать мелкие частицы проходят через мелкие поры в Гликокаликс. Здесь мы синтезировать 10,5 Нм сверхмалых золотых наночастиц, который обычно должен сдерживаться нетронутыми, здоровые Гликокаликс. Как только Гликокаликс начинает ставиться, наночастиц должны легко проникают в клетки путем увеличения размера пор. Протокол в этом документе подробно синтез сверхмалых золото ядра, покрытые PEG, который увеличивает биосовместимость и уменьшает системный клиренс4. ПРИВЯЗКИ также может содержать несколько типов функциональных групп, открывая возможности для сопряжения таргетинга лигандов, флуорофоров и терапии. Ранее опубликованные результаты показывают, что эти сверхмалых наночастиц, как правило, быть рассмотрен более благоприятно в регионах нарушается Гликокаликс эндотелиальной функции даже без каких-либо активной ориентации4,11. Это указывает на целесообразность и важность использования частицы правильного размера для доставки приложений. Следующий протокол представляет синтеза, очистки и характеристика PEG-покрытием AuNPs (PEG-AuNP), с обсуждения для пошива функциональных групп и спряжения для других приложений.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="742">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">795429</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:249px;">Gold (III) Chloride trihydrate (HAuCl4.3H2O)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">520918</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Sodium bicarbonate</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">S5761</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">Tetrakis (hydroxymethyl) phosphnium chloride</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">404861</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Mono-functional mPEG-thiol</td>
			<td style="width:159px;">Layson Bio Inc.</td>
			<td style="width:173px;">MPEG-SH-2000-1g</td>
			<td style="width:161px;">Mw: 2,000 Da</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">hetero bi-functional anime-PEG-thiol</td>
			<td style="width:159px;">Layson Bio Inc.</td>
			<td style="width:173px;">NH2-PEG-SH-3400-1g</td>
			<td style="width:161px;">Mw: 3,400 Da</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Carboxymethyl-PEG-thiol</td>
			<td style="width:159px;">Layson Bio Inc.</td>
			<td style="width:173px;">CM-PEG-SH-2000-1g</td>
			<td style="width:161px;">Mw: 2,000 Da</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">Cellulose dialysis membrane (12-14 kDa)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">D9777</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Zerostat anti-static instrument</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">Z108812</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">Alexa Fluor 647 (AF647) carboxylic acid succinimidyl ester</td>
			<td style="width:159px;">Fisher</td>
			<td style="width:173px;">A20006</td>
			<td style="width:161px;">Fluorophore</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">Fisherbrand Qualitative Grade Plain Filter Paper Circles - P5 grade</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>09-801-B</td>
			<td style="width:161px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Transmission electron microscopy</td>
			<td>JEOL USA</td>
			<td style="width:173px;">JEOL JEM-1000</td>
			<td style="width:161px;">TEM</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:249px;">Dynamic Light Scattering</td>
			<td style="width:159px;">Brookhaven Instruments Corporation</td>
			<td style="width:173px;">Brookhaven 90 Plus Particle Size Analyzer</td>
			<td style="width:161px;">DLS</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Fluorometer</td>
			<td>Horiba Scientific</td>
			<td style="width:173px;">Jobin Yvon Fluromax 4</td>
			<td style="width:161px;">Fluorometer</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">CellTiter 96 AQueous&#160;One Solution Cell Proliferation Assay (MTS)</td>
			<td style="width:159px;">Promega</td>
			<td style="width:173px;">G3582</td>
			<td style="width:161px;">MTS</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Plate reader</td>
			<td style="width:159px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:173px;">SpectraMax M4</td>
			<td style="width:161px;">Plate&#160; reader</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">10E4 epitope HS mouse monoclonal IgM antibody (primary antibody)</td>
			<td style="width:159px;">Amsbio</td>
			<td>370255</td>
			<td style="width:161px;">Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">Alexa Fluor 488 goat anti-mouse IgG&#160; (secondary antibody)</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>R37120</td>
			<td style="width:161px;">Secondary antibody</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:249px;">VECTASHIELD mounting medium with DAPI</td>
			<td style="width:159px;">Vector Laboratories</td>
			<td style="width:173px;">H-1000</td>
			<td style="width:161px;">With DAPI</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:249px;">Confocal Microscope</td>
			<td style="width:159px;">Carl Zeiss Meditex AG</td>
			<td style="width:173px;">Zeiss LSM 700</td>
			<td>Confocol microscopy</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of functionalized 10-nm polymer-coated gold particles for endothelium targeting and drug delivery

В медицинских исследованиях из-за их размера, биосовместимость и изменяемые поверхности широко использовались наночастиц золота (AuNPs). Ориентации и наркотиков доставки являются некоторые из применений этих AuNPs, но эндотелиальной внеклеточной матрицы оборонительных свойства препятствуют частиц поглощения. Для решения этой проблемы, мы описываем метод синтеза для сверхмалых наночастиц золота для повышения сосудистого доставки, с настраиваемыми функциональными группами и полимерные длины для дальнейшей корректировки. Протокол урожайность 2,5 Нм AuNPs, покрытые тетракис (гидроксиметил) фосфониевых хлорид (THPC). Замена THPC с гетеро функциональные полиэтиленгликоля (PEG) на поверхности AuNP увеличивает гидродинамические радиус до 10,5 Нм при оказании различных функциональных групп на поверхности. Последняя часть протокола включает в себя факультативное добавление Флюорофор разрешить AuNPs быть визуализированы под флуоресценции для отслеживания наночастиц поглощения. Диализ и лиофилизации были использованы для очистки и изоляции AuNPs. Эти люминесцентные наночастицы могут быть визуализированы в экспериментах в пробирке и в естественных условиях благодаря биосовместимых PEG покрытия и флуоресцентных зондов. Кроме того диапазон размеров эти наночастицы делают их идеальным кандидатом для зондирования Гликокаликс без нарушения нормальной сосудистую функцию, которая может привести к улучшению доставки и терапии.

Синтезированные AuNPs, с THPC или PEG покрытием (рис. 1A и Рисунок 1B, соответственно), отражаются с ТЕА и размеры измеряются с помощью ТЕА и DLS для обеспечения надлежащего наночастиц распределения размеров частиц. Рисунок 2 показывает ТЕА изображение образца THPC-AuNP на 80 кв и 150000 крат. Диаметр в диапазоне THPC-AuNP частиц от 2-3 Нм, основанный на панели калибровки изображений ТЕА. Этот THPC-AuNP размер проявляется также в DLS размер измерения гистограммы показан на рисунке 2, в котором THPC покрытием AuNP это показано, что пик на 2,5 Нм. ПЭГилирование не видна под ТЕА как Полимеры являются не электронно плотной. ТЕА изображений образцов PEG-AuNP просто подтверждает наличие отдельных разрозненных частиц, который ожидается, потому что PEG полимер Корона вокруг наночастиц помощи в предотвращении агрегации. Для этих образцов PEG-AuNP, DLS размер измерения Гистограмма показывает сдвиг в пик, чтобы примерно 10,5 Нм на DLS. Вложения дальнейшего лигандами или наркотиков на функциональные группы повлияет на размер наночастиц, а также и должны быть приняты во внимание при измерении диаметра.
Появление Флюорофор (рис. 1 c) подтверждается с помощью флуориметр для измерения флуоресценции сигнал от образца наночастиц, как показано на рисунке 3. При возбуждении с длиной волны 633 нм, излучение измеряется иметь максимум от 660 до 672 Нм, который соответствует информации производителя продукта максимального излучения 665 нм. Аналогичным образом для обеспечения флуоресцентные реагирования должны быть проверены вложения других флуоресцентных зондов.
Биосовместимость частиц и жизнеспособности соответствующих клеток оцениваются с помощью МТС пробирного проверить относительную клеточный метаболизм МТС после 16 ч инкубации с различных концентраций наночастиц. Флюорофор конъюгированных Пегилированный AuNPs показывает без существенных токсичности, как указано на аналогичный уровень жизнеспособности клеток на всех концентрациях до 1 мг/мл (Рисунок 4A). Этот биосовместимость может меняться в зависимости от терапевтического или лиганд, придает остальных функциональных групп для дальнейшей настройки частицы. Наркотиков вложения имеют тенденцию к увеличению токсичности, но в зависимости от концентрации рабочей, он не может повлиять на жизнеспособность в значительной степени.
Поглощение люминесцентные, AuNPs (рис. 1 c) Пегилированный адэрентных клеток оценивается с помощью искусственного крыса эндотелиальные клетки жировой ткани с нетронутыми или неблагополучных Гликокаликс (рис. 4В). Дисфункциональные Гликокаликс условия достигаются путем добавления фермента heparinase III к культуре, что приводит к деградации компонент Гликокаликс сульфат heparan и ущерба матрица12. Рисунок 4B показывает различные уровни поглощения PEG-AuNPs, как красные точки на вид поперечного сечения представитель эндотелиальных клеток. Здоровые Гликокаликс отпугивает поглощения этих золотых наночастиц, но значительное увеличение наблюдается при занятых11фермента. Этот результат подчеркивает потенциал этих сверхмалых наночастиц доставить эндотелиальных клеток образом контролируется различных взаимодействий, которые основаны на здоровье Гликокаликс терапии.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56760/56760fig1.jpg"> Рисунок 1: схема наночастиц золота. (A) THPC покрытием AuNP наносферы перед заменой КОЛЫШЕК. (B) Пегилированный AuNP с 3 типами PEG окончаний, включая COOH, NH2, CH3. Голубые волны представляют собой полимер. (C) конъюгированных наночастицы для флуоресценции изображений. Красные звезды шоу флуорофоров, конъюгированных NH2 функциональных групп. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56760/56760fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56760/56760fig2.jpg"> Рисунок 2: размер измерения наночастиц золота. Слева: ТЕА наночастиц золота до того КОЛЫШЕК на 80 кв и 150000 крат, с линейки шкалы показано. Справа: Гистограмма наночастиц размер измеряется DLS до (AuNP) и после замены (PEG-AuNP) THPC с ПЭГ. DLS результаты для THPC-покрытием AuNP количественно, что визуализируется на ТЕА. DLS PEG-покрытием AuNP результаты преодолеть проблему неспособности визуализировать ПЭГ по ТЕА благодаря полимеров, не будучи электронно плотной. ТЕА PEG-AuNP будет показывать только ядро золотых наночастиц и будет выглядеть так же как AuNP, THPC-ограничен. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56760/56760fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56760/56760fig3.jpg"> Рисунок 3: флуоресценции данных флуоресцентные PEG-AuNP. Пика флуоресценции в 667 Нм матчи выбросов Флюорофор конъюгированных PEG-AuNP. А.е.: условные единицы.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56760/56760fig4.jpg"> Рисунок 4: сотовый взаимодействия с флуоресцентные PEG-AuNP. (A) клеток жизнеспособности (МТС метаболизм) участок для крыса жира площадку эндотелиальных клеток после совместного 16 ч инкубации с флуоресцентные PEG-AuNP. (B) конфокальный поперечные изображения фиксированной крыса жира площадку эндотелиальные клетки окрашивали DAPI для ядра (синий) и антитела против heparan сульфат, компонент Гликокаликс (зеленый). Верхнее изображение здорового Гликокаликс и нижней деградированных Гликокаликс слой; Существует значительно больше красной флуоресценцией из наночастиц в образце с деградированных Гликокаликс. Шкалы бар-10 мкм. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56760/56760fig4large.jpg" target="_blank">пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Functionalized 10-nm Polymer-coated Gold Particles for Endothelium Targeting and Drug Delivery at JoVE.com

Synthesis of Functionalized 10-nm Polymer-coated Gold Particles for Endothelium Targeting and Drug Delivery

Мы описываем метод синтеза биологически наночастиц золота 10 Нм, функционализированных покрытие поли-этиленгликоля на поверхность. Эти частицы могут быть использоваться в пробирке и в естественных условиях для оказания терапии наноразмерных клеточной и внеклеточной пространств, трудно доступ с размерами обычных наночастиц.

Синтез функционализированных 10-Нм полимерным покрытием частиц золота для ориентации эндотелия и доставки лекарств

Gold nanoparticles (AuNPs) have been used extensively in medical research due to their size, biocompatibility, and modifiable surface. Specific targeting ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Синтез, монтаж, и характеристика монослоя охраняемые пленок золота наночастицы для Белки электрохимии монослоя

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

Gold Nanostar Synthesis with a Silver Seed Mediated Growth Method

Золото Nanostar Синтез с опосредованная Серебряный Метод роста Семени

The physical, chemical and optical properties of nano-scale colloids depend on their material composition, size and shape 1-5. There is a great interest ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

Строительные леса Self-отчетности для 3-Dimensional культуре клеток

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

Models and Methods to Evaluate Transport of Drug Delivery Systems Across Cellular Barriers

Модели и методы для оценки Перевозка системам по наркотикам Доставка по клеточные барьеры

Sub-micrometer carriers (nanocarriers; NCs) enhance efficacy of drugs by improving solubility, stability, circulation time, targeting, and release. ...

A Rapid and Quantitative Fluorimetric Method for Protein-Targeting Small Molecule Drug Screening

Быстрое и количественный Флуориметрический Метод белка-таргетинга маленькая молекула наркотиками Скрининг

We demonstrate a new drug screening method for determining the binding affinity of small drug molecules to a target protein by forming fluorescent gold ...

The Synthesis of RGD-functionalized Hydrogels as a Tool for Therapeutic Applications

Синтез РГД-функционализированного гидрогелей в качестве инструмента для терапевтических применений

The use of polymers as biomaterials has provided significant advantages in therapeutic applications. In particular, the possibility to modify and ...

Manufacture and Drug Delivery Applications of Silk Nanoparticles

Производство и поставка снадобья Применение шелкового наночастицами

Silk is a promising biopolymer for biomedical and pharmaceutical applications due to its outstanding mechanical properties, biocompatibility and ...

Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

Синтез ориентации Моноцит пептидные Амфифильность мицелл для визуализации атеросклероза

Atherosclerosis is a major contributor to cardiovascular disease, the leading cause of death worldwide, which claims 17.3 million lives annually. ...

Comprehensive Evaluation of the Effectiveness and Safety of Placenta-Targeted Drug Delivery Using Three Complementary Methods

Всеобъемлющая оценка эффективности и безопасности препарата плаценты целевой доставки с помощью трех взаимодополняющих методов

No effective treatments currently exist for placenta-associated pregnancy complications, and developing strategies for the targeted delivery of drugs to ...

Synthesis of Near-Infrared Emitting Gold Nanoclusters for Biological Applications

Синтез ближнего инфракрасного излучающих золотых нанокластеров для биологического применения

Over the past decade, fluorescent gold nanoclusters (AuNCs) have witnessed growing popularity in biological applications and enormous efforts have been ...