Name: a novel feeder-free system for mass production of murine natural killer cells in vitro
Uploaded: 2018-01-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro at JoVE.com

Deze studie werd ondersteund door de Research Grants Raad van Hong Kong (GRF 468513, CUHK3/CRF/12R) en de innovatie en technologie Fonds van Hong Kong (ITS/227/15, ITS InP/164/16, ITS-InP/242/16), directe subsidie voor onderzoek-CUHK (2016.035) en Hong Kong geleerde Programma.
H.-Y.L. ontworpen en begeleid alle experimenten en bijgedragen tot de voorbereiding van de manuscript. P.M.-R.C. experimenten uitgevoerd, geanalyseerd gegevens en bijgedragen tot de voorbereiding van de manuscript. P.C.-T. T., J.Y.-FC, J.S.-C., H., Q.-M.W., en G.-Y.L. verzamelde dierlijke monsters en deelgenomen aan dierproeven. J.S., X.-R.H., en K.-F.T. bijgedragen tot de voorbereiding van de manuscript.

Het protocol is voor het verkrijgen en differentiatie van de NK beenmerg-afgeleide cellen (BM-NK) gebaseerd op eerder gepubliceerde methoden20,21,22. Alle procedures met muizen zijn goedgekeurd door het dier Experimental ethische Commissie (AEEC) aan de Chinese Universiteit van Hongkong.
1. bereiding van OP9 voorwaardelijke Medium
<ol><li>Cultuur van de lymfkliertest stroma cellijn OP9 in alpha-MEM ...

<ol>
	<li>Schreiber, R. D., Old, L. J., Smyth, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+immunoediting:+integrating+immunity's+roles+in+cancer+suppression+and+promotion.">Cancer immunoediting: integrating immunity's roles in cancer suppression and promotion.</a> Science. 331 (6024), 1565-1570 (2011).</li><li>Junttila, M. R., de Sauvage, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+tumour+micro-environment+heterogeneity+on+therapeutic+response.">Influence of tumour micro-environment heterogeneity on therapeutic response.</a> Nature. 501 (7467), 346-354 (2013).</li><li>Rusakiewicz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+infiltrates+are+prognostic+factors+in+localized+gastrointestinal+stromal+tumors.">Immune infiltrates are prognostic factors in localized gastrointestinal stromal tumors.</a> Cancer Res. 73 (12), 3499-3510 (2013).</li><li>Mamessier, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+breast+cancer+cells+enhance+self+tolerance+by+promoting+evasion+from+NK+cell+antitumor+immunity.">Human breast cancer cells enhance self tolerance by promoting evasion from NK cell antitumor immunity.</a> J Clin Invest. 121 (9), 3609-3622 (2011).</li><li>Stern, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-emptive+immunotherapy+with+purified+natural+killer+cells+after+haploidentical+SCT:+a+prospective+phase+II+study+in+two+centers.">Pre-emptive immunotherapy with purified natural killer cells after haploidentical SCT: a prospective phase II study in two centers.</a> Bone Marrow Transplant. 48 (3), 433-438 (2013).</li><li>Miller, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+adoptive+transfer+and+in+vivo+expansion+of+human+haploidentical+NK+cells+in+patients+with+cancer.">Successful adoptive transfer and in vivo expansion of human haploidentical NK cells in patients with cancer.</a> Blood. 105 (8), 3051-3057 (2005).</li><li>Rubnitz, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NKAML:+a+pilot+study+to+determine+the+safety+and+feasibility+of+haploidentical+natural+killer+cell+transplantation+in+childhood+acute+myeloid+leukemia.">NKAML: a pilot study to determine the safety and feasibility of haploidentical natural killer cell transplantation in childhood acute myeloid leukemia.</a> J Clin Oncol. 28 (6), 955-959 (2010).</li><li>Curti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+transfer+of+alloreactive+haploidentical+KIR+ligand-mismatched+natural+killer+cells+after+infusion+in+elderly+high+risk+acute+myeloid+leukemia+patients.">Successful transfer of alloreactive haploidentical KIR ligand-mismatched natural killer cells after infusion in elderly high risk acute myeloid leukemia patients.</a> Blood. 118 (12), 3273-3279 (2011).</li><li>Bachanova, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clearance+of+acute+myeloid+leukemia+by+haploidentical+natural+killer+cells+is+improved+using+IL-2+diphtheria+toxin+fusion+protein.">Clearance of acute myeloid leukemia by haploidentical natural killer cells is improved using IL-2 diphtheria toxin fusion protein.</a> Blood. 123 (25), 3855-3863 (2014).</li><li>Stringaris, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukemia-induced+phenotypic+and+functional+defects+in+natural+killer+cells+predict+failure+to+achieve+remission+in+acute+myeloid+leukemia.">Leukemia-induced phenotypic and functional defects in natural killer cells predict failure to achieve remission in acute myeloid leukemia.</a> Haematologica. 99 (5), 836-847 (2014).</li><li>Rouce, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TGF-&#946;/SMAD+pathway+is+an+important+mechanism+for+NK+cell+immune+evasion+in+childhood+B-acute+lymphoblastic+leukemia.">The TGF-&#946;/SMAD pathway is an important mechanism for NK cell immune evasion in childhood B-acute lymphoblastic leukemia.</a> Leukemia. 30 (4), 800-811 (2016).</li><li>Derynck, R., Akhurst, R. J., Balmain, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-&#946;+signaling+in+tumor+suppression+and+cancer+progression.">TGF-&#946; signaling in tumor suppression and cancer progression.</a> Nature Genet. 29 (2), 117-129 (2001).</li><li>Massague, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGFbeta+in+cancer.">TGFbeta in cancer.</a> Cell. 134 (2), 215-230 (2008).</li><li>Ikushima, H., Miyazono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGFbeta+signalling:+a+complex+web+in+cancer+progression.">TGFbeta signalling: a complex web in cancer progression.</a> Nat Rev Cancer. 10 (6), 415-424 (2010).</li><li>Pickup, M., Novitskiy, S., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+TGF&#946;+in+the+tumour+microenvironment.">The roles of TGF&#946; in the tumour microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 13 (11), 788-799 (2013).</li><li>Rook, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+transforming+growth+factor+beta+on+the+functions+of+natural+killer+cells:+depressed+cytolytic+activity+and+blunting+of+interferon+responsiveness.">Effects of transforming growth factor beta on the functions of natural killer cells: depressed cytolytic activity and blunting of interferon responsiveness.</a> J Immunol. 136 (10), 3916-3920 (1986).</li><li>Bellone, G., Aste-Amezaga, M., Trinchieri, G., Rodeck, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+NK+cell+functions+by+TGF-beta+1.">Regulation of NK cell functions by TGF-beta 1.</a> J Immunol. 155 (3), 1066-1073 (1995).</li><li>Trotta, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-&#946;+utilizes+SMAD3+to+inhibit+CD16-mediated+IFN-&#947;+production+and+antibody-dependent+cellular+cytotoxicity+in+human+NK+cells.">TGF-&#946; utilizes SMAD3 to inhibit CD16-mediated IFN-&#947; production and antibody-dependent cellular cytotoxicity in human NK cells.</a> J Immunol. 181 (6), 3784-3792 (2008).</li><li>Shull, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+disruption+of+the+mouse+transforming+growth+factor-&#946;1+gene+results+in+multifocal+inflammatory+disease.">Targeted disruption of the mouse transforming growth factor-&#946;1 gene results in multifocal inflammatory disease.</a> Nature. 359 (6397), 693-699 (1992).</li><li>Chen, T. J., Kotecha, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytobank:+providing+an+analytics+platform+for+community+cytometry+data+analysis+and+collaboration.">Cytobank: providing an analytics platform for community cytometry data analysis and collaboration.</a> Curr Top Microbiol Immunol. 377, 127-157 (2014).</li><li>Williams, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+NK1.1+,+Ly49++NK+cells+from+flt3++multipotent+marrow+progenitor+cells.">Differentiation of NK1.1+, Ly49+ NK cells from flt3+ multipotent marrow progenitor cells.</a> J Immunol. 163 (5), 2648-2656 (1999).</li><li>Fathman, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+earliest+natural+killer+cell-committed+progenitor+in+murine+bone+marrow.">Identification of the earliest natural killer cell-committed progenitor in murine bone marrow.</a> Blood. 118 (20), 5439-5447 (2011).</li><li>Tang, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smad3+promotes+cancer+progression+by+inhibiting+E4BP4-mediated+NK+cell+development.">Smad3 promotes cancer progression by inhibiting E4BP4-mediated NK cell development.</a> Nat Commun. 6 (8), 14677 (2017).</li></ol>

In het huidige werk, hebben we een nieuwe methode voor de productie van beenmerg-afgeleide lymfkliertest NK cellen in vitrobeschreven. De cel feeder in de oorspronkelijke systeem21,22 is met succes vervangen door de voorwaardelijke medium OP9 cellen, die grotendeels de stabiliteit van het systeem van differentiatie vergroot. Bovendien, het systeem kan produceren hoge hoeveelheid en zuiverheid van volwassen NK cellen voor in vitro als in vivo...

Progressie van kanker is grotendeels afhankelijk van de tumor communicatie1,2, met inbegrip van gastheer afkomstige immunocytes, bijvoorbeeld, NK-cellen. Verschillende studies aangetoond dat intratumoral NK-cellen zijn negatief gecorreleerd met tumor progressie3,4. Bovendien, klinische studies is gebleken dat adoptief celtherapie NK een mogelijke strategie voor kanker5,6,7,8,9. NK cel-gebaseerde kanker immunotherapie onlangs voorgesteld als een therapeutische optie voor solide tumoren, maar uitdagingen bestaan als gevolg van de afscheiding van immunosuppressieve cytokinen en Downregulatie van liganden in de communicatie van stevige tumors activeren 10,11. Transformeren groeifactor-β (TGF-β) is gesuggereerd een onderdrukkende rol te spelen in carcinogenese, maar paradoxaal genoeg kankercellen produceren ook TGF-β1 ter ondersteuning van de tumor ontwikkeling12,13,14 , 15. de cytolytische activiteit van NK cellen via de down-regulering interferon responsiviteit en CD16-gemedieerde interferon-gamma (IFN-γ) productie in vitro16,17, TGF-β signalering kunt onderdrukken 18.
Hoewel verstoring van TGF-β signalering in de communicatie van de tumor kan een mogelijke manier voor het elimineren van kankers, volledig blokkeren TGF-β signalering zal leiden tot auto-immune ziekten als gevolg van zijn anti-inflammatoire functie, zoals blijkt uit de ontwikkeling van negatieve bijwerkingen, met inbegrip van systemische ontstekingen, modellen cardiovasculaire afwijkingen en autoimmuniteit in muis19. Dus, inzicht in het werkingsmechanisme bij immuunsuppressie TGF-β-gemedieerde zal leiden tot de identificatie van een toegankelijk therapeutisch doel voor de behandeling van kanker.
Om het ophelderen van de moleculaire gebeurtenissen die nodig zijn voor cel ontwikkeling van NK, gevestigde Williams et al. een in vitro -systeem voor20differentiëren lymfkliertest beenmerg hematopoietische stamcellen in NK cellen. Dit systeem vergemakkelijkt grotendeels het mechanistisch onderzoek naar NK-cel ontwikkeling, met inbegrip van de identificatie van nieuwe progenitorcellen van NK cellen21. Echter het beenmerg progenitoren moeten worden gekweekt in het systeem met ondersteunende OP9 stromale cellen als een feeder laag20,21, en deze heterogene celpopulatie grotendeels beperkt de verdere toepassing van gene disrupting tools (bijvoorbeeld, siRNA-gemedieerde gene silencing) specifiek toegepast op de onderscheidende NK-cellen.
Hier beschrijven we een feeder-vrij systeem dat is ontwikkeld door verdere aanpassing van de in vitro -systeem van Williams et al.20. In ons systeem, de OP9 feeder stromale cellen zijn niet vereist, en in plaats daarvan OP9 voorwaardelijke voedingsbodem wordt gebruikt zonder de differentiatie van NK cellen in vitroen dit onlangs leiden ons om te ontdekken welk TGF-β vermag bevordering van progressie van kanker via E4bp4-afhankelijke NK cel ontwikkeling in de tumor communicatie22te onderdrukken. Dit nieuwe systeem biedt met succes een achtergrond-gratis methode voor het ophelderen van het moleculaire mechanisme van NK-cel ontwikkeling onder bepaalde voorwaarden (bijvoorbeeldhoge TGF-β1, siRNA-gemedieerde gene silencing, enz.) in vitro.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1113px;" width="1113">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:297px;">OP9 cell line</td>
			<td style="width:129px;">ATCC</td>
			<td style="width:344px;">ATCC&#174; CRL-2749&#8482;</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MEM &#945;, no nucleosides</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>22561021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10500064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PBS, pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Recombinant Murine IL-7</td>
			<td>PEPROTECH</td>
			<td>217-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Recombinant Murine SCF</td>
			<td>PEPROTECH</td>
			<td>250-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Recombinant Murine Flt3-Ligand</td>
			<td>PEPROTECH</td>
			<td>250-31L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Recombinant Murine IL-2</td>
			<td>PEPROTECH</td>
			<td>212-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Lipofectamin RNAiMAX Transfection Reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>1377815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">IC Fixation Buffer&#160;</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>00-8222-49</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Flow Cytometry Staining Buffer&#160;</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>00-4222-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-conjugated anti-mouse CD244</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>12-2441-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cy3-conjugated anti-mouse NKp46</td>
			<td>Bioss</td>
			<td>bs-2417R-cy3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Nonsense control (NC)</td>
			<td>Ribobio</td>
			<td>siN05815122147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">siRNA against mouse E4BP4 mRNA</td>
			<td>Ribobio</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5&#8242;-GAUGAGGGUGUA 
			GUGGGCAAGUCUU-3&#8242;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel feeder-free system for mass production of murine natural killer cells in vitro

Natural killer (NK) cellen behoren tot het aangeboren immuunsysteem en een eerstelijns anti-kanker immuunsysteem verdediging; echter, zij worden onderdrukt in de communicatie van de tumor en het onderliggende mechanisme is nog grotendeels onbekend. De voortgang van het onderzoek van NK-cel-immuniteit wordt beperkt door het ontbreken van een consistente en betrouwbare bron van NK-cellen. Wij rapporteren hier een in vitro -systeem dat hoge kwaliteit en kwantiteit van beenmerg-afgeleide lymfkliertest NK cellen onder een feeder-free-conditie bieden kan. Wat nog belangrijker is, wij ook laten zien dat met succes de rijping van de cel E4bp4-afhankelijke NK siRNA-gemedieerde gene silencing remt met behulp van dit systeem. Deze roman in vitro NK cel differentiatie systeem is dus een biomaterial oplossing voor onderzoek van de immuniteit.

Representatieve resultaten worden verkregen volgens de beschreven protocol. Totale opschorting beenmergcellen werden gekweekt onder de feeder-vrije differentiatie systeem voor 11 dagen; aanzienlijke toename van de proliferatie tarief werd waargenomen door dag 7 vergeleken met het aantal totaal aantal cellen op dag 0(Figuur 1). Volwassen NK-cellen met hoge nucleaire aan cytoplasmatische ratio en morfologie van de submodule-rijke cytoplasma wer...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro at JoVE.com

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

Hier presenteren we een protocol om de massa van gen-zwijgen lymfkliertest NK cellen met behulp van een systeem van differentiatie feeder-gratis voor mechanistisch onderzoek in vitro en in vivo.

Een nieuwe Feeder-vrij systeem voor massaproductie van lymfkliertest Natural Killer cellen In Vitro

Natural killer (NK) cells belong to the innate immune system and are a first-line anti-cancer immune defense; however, they are suppressed in the tumor ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

Preparation and Use of HIV-1 Infected Primary CD4+ T-Cells as Target Cells in Natural Killer Cell Cytotoxic Assays

Bereiding en het gebruik van HIV-1 geïnfecteerde primaire CD4 + T-cellen als doelcellen in Natural Killer Cell Cytotoxische Assays

 Natural killer (NK) cells are a vital component of the innate immune response to virus-infected cells. It is important to understand the ability of NK ...

Artificial Antigen Presenting Cell (aAPC) Mediated Activation and Expansion of Natural Killer T Cells

Artificial Antigen Presenting Cell aAPC Mediated Activation and Expansion of Natural Killer T Cells

Kunstmatige antigeen presenterende cel (AAPC) gemedieerde activering en uitbreiding van Natural Killer T-cellen

Natural killer T (NKT) cells are a unique subset of T cells that display markers characteristic of both natural killer (NK) cells and T cells1. Unlike ...

Isolation, Identification, and Purification of Murine Thymic Epithelial Cells

Isolatie, identificatie en zuivering van Muriene thymus epitheelcellen

The thymus is a vital organ for T lymphocyte development. Of thymic stromal cells, thymic epithelial cells (TECs) are particularly crucial at multiple ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial antigeen presenterende cellen (KaAPC) voor Efficient<em&gt; In Vitro</em&gt; Uitputting van Human Antigeen-specifieke T-cellen

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

A Novel In vitro Model for Studying the Interactions Between Human Whole Blood and Endothelium

A Novel In vitro Model for Studying the Interactions Between Human Whole Blood and Endothelium

A Novel<em&gt; In vitro</em&gt; Model voor het bestuderen van de interactie tussen menselijk volbloed en endotheel

The majority of all known diseases are accompanied by disorders of the cardiovascular system. Studies into the complexity of the interacting pathways ...

Super-resolution Imaging of the Natural Killer Cell Immunological Synapse on a Glass-supported Planar Lipid Bilayer

Super-resolutie beeldvorming van de Natural Killer Cell Immunological Synapse op een glas-ondersteunde Planar lipidendubbellaag

The glass-supported planar lipid bilayer system has been utilized in a variety of disciplines. One of the most useful applications of this technique has ...

In Vitro Generation of Murine Plasmacytoid Dendritic Cells from Common Lymphoid Progenitors using the AC-6 Feeder System

In Vitro Generation of Murine Plasmacytoid Dendritic Cells from Common Lymphoid Progenitors using the AC-6 Feeder System

In vitro generatie van Muriene plasmacytoïde dendritische cellen van Common Lymfoïde Progenitors met behulp van de AC-6 Feeder System

Plasmacytoid dendritic cells (pDCs) are powerful type I interferon (IFN-I) producing cells that are activated in response to infection or during ...

An Optimized Method for Isolating and Expanding Invariant Natural Killer T Cells from Mouse Spleen

Een geoptimaliseerde werkwijze voor het isoleren en Expanding Invariant Natural Killer T-cellen van Mouse Spleen

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

Flow cytometrische analyse van de NK-cel lytische activiteit in humaan volbloed

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Een roman In Vitro wond genezing Assay om te evalueren van de cel migratie

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...