Name: highly sensitive and quantitative detection of proteins and their isoforms by capillary isoelectric focusing method
Uploaded: 2018-09-19T12:30:00
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作者感谢瑞典乌普萨拉大学的 Claesson 教授对发展这个项目的支持。此外, 作者感谢罗斯史密斯和莉娜 Claesson 威尔士, 乌普萨拉大学的批评阅读和建议, 以改善手稿。

1. 细胞培养、刺激和裂解
注意: 此方法可与许多单元格类型一起使用。以人脐静脉内皮细胞 (血管内皮细胞) 为例, 说明该方法的应用。
<ol><li>培养血管内皮细胞对凝胶涂层, 10 厘米培养皿在内皮细胞基底培养基适当补充 (参见材料表), 并且包含 5% FCS, 表皮生长因子 (5 ng/毫升), 血管内皮生长因子 (VEGF:0.5 ng/毫升), 基本的后代 (10), 胰岛素样生长因子 (20 ng/毫升), 松 (0....

<ol>
	<li>O'Neill, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoelectric+focusing+technology+quantifies+protein+signaling+in+25+cells.">Isoelectric focusing technology quantifies protein signaling in 25 cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (44), 16153-16158 (2006).</li><li>Aspinall-O'Dea, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibody-based+detection+of+protein+phosphorylation+status+to+track+the+efficacy+of+novel+therapies+using+nanogram+protein+quantities+from+stem+cells+and+cell+lines.">Antibody-based detection of protein phosphorylation status to track the efficacy of novel therapies using nanogram protein quantities from stem cells and cell lines.</a> Nat Protoc. 10 (1), 149-168 (2015).</li><li>Fan, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofluidic+proteomic+assay+for+serial+analysis+of+oncoprotein+activation+in+clinical+specimens.">Nanofluidic proteomic assay for serial analysis of oncoprotein activation in clinical specimens.</a> Nat Med. 15 (5), 566-571 (2009).</li><li>Padhan, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+sensitivity+isoelectric+focusing+to+establish+a+signaling+biomarker+for+the+diagnosis+of+human+colorectal+cancer.">High sensitivity isoelectric focusing to establish a signaling biomarker for the diagnosis of human colorectal cancer.</a> BMC Cancer. 16 (1), 683 (2016).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGFR2+induces+c-Src+signaling+and+vascular+permeability+in+vivo+via+the+adaptor+protein+TSAd.">VEGFR2 induces c-Src signaling and vascular permeability in vivo via the adaptor protein TSAd.</a> J Exp Med. 209 (7), 1363-1377 (2012).</li><li>Iacovides, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+quantification+of+AKT+isoforms+and+phosphoforms+in+breast+cancer+using+a+novel+nanofluidic+immunoassay.">Identification and quantification of AKT isoforms and phosphoforms in breast cancer using a novel nanofluidic immunoassay.</a> Mol Cell Proteomics. 12 (11), 3210-3220 (2013).</li><li>Price, F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+JAK-STAT+signaling+stimulates+adult+satellite+cell+function.">Inhibition of JAK-STAT signaling stimulates adult satellite cell function.</a> Nat Med. 20 (10), 1174-1181 (2014).</li><li>Unger, F. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoproteomic+analysis+of+ischemia-dependent+changes+in+signaling+protein+phosphorylation+in+colorectal+normal+and+cancer+tissue.">Nanoproteomic analysis of ischemia-dependent changes in signaling protein phosphorylation in colorectal normal and cancer tissue.</a> J Transl Med. 14, 6 (2016).</li><li>Urasaki, Y., Pizzorno, G., Le, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+uridine+administration+induces+fatty+liver+and+pre-diabetic+conditions+in+mice.">Chronic uridine administration induces fatty liver and pre-diabetic conditions in mice.</a> PLoS One. 11 (1), e0146994 (2016).</li><li>Schmidt, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Case-specific+potentiation+of+glioblastoma+drugs+by+pterostilbene.">Case-specific potentiation of glioblastoma drugs by pterostilbene.</a> Oncotarget. 7 (45), 73200-73215 (2016).</li></ol>

蛋白质的敏感性和分辨力是生物蛋白质组学研究的关键。能够检测出细胞中微小数量的蛋白质是很有价值的。cIEF 可以为蛋白质及其亚型4的检测提供改进的灵敏度和分辨率。
该技术已成功地应用于许多蛋白质组研究报告5,6,7。尽管如此, 还是有一些限制与它相关, 例如, 并不是所有的主要?...

毛细管电聚焦 (cIEF) 是一种基于毛细管的自动免疫分析法, 根据其电荷1、2、3来解析蛋白质。它具有高度的重现性, 能够快速、定量地解决蛋白质及其后 translationally 修饰亚型。它提出了一种替代传统方法, 如西方印迹。虽然西方印迹是非常好的确认存在丰富的蛋白质在容易接近的样品;可变性、时间消耗和准确定量所有目前的挑战, 特别是在检查生物组织样本。事实上, 变异是西方印迹中的一个固有问题, 因为有许多步骤, 例如 SDS 页凝胶的装载和运行, 蛋白质转移到膜上, 用各种试剂孵化 (e., 初级和中级抗体, ECL), 并发展到 x 射线胶片4。目前, 随着化学发光信号 (数字西部) 数字记录的实施, 西方印迹技术正在得到改进。最近, 一个自动化的西方印迹系统已经开发, 即毛细管西部, 这是一个更无免提和无凝胶系统。整个化验是自动化的在样品板材 (样品与所有必要的试剂) 的装载以后入系统3,4。该仪器将执行所有步骤, 如蛋白质分离, 固定化的蛋白质在毛细血管壁, 抗体孵化, 洗涤之间的不同步骤, 以及发展和量化的化学发光信号。因此, 这里提出的 cIEF 程序提供了更高的分辨率和灵敏度。
这种方法是敏感的, 因为信号可以产生和量化从 picograms 的蛋白质1。灵敏度高, 重现性好, 使该技术对临床样品的分析非常有用。它可以检测和区分后翻译修改 (例如,不同的磷酸化蛋白亚型) 的蛋白质。该技术已成功地用于解剖不同的信号通路4,5在临床研究旨在开发新的治疗癌症3, 它具有很大的潜力, 蛋白质生物标志物和药物发现.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="920">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:367px;">NanoPro 1000</td>
			<td style="width:107px;">ProteinSimple</td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Premix G2, pH 5&#8211;8 (nested) separation gradient, pH 2&#8211;4 plug</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-972</td>
			<td>Ampholyte premix</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMSO inhibitor mix</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-510</td>
			<td>Phosphatase inhibitors; for cIEF 1:50 dilution used</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Aqueous Inhibitor Mix</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-482</td>
			<td>Protease inhibitor; for cIEF 1:25 dilution used</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">pI standard ladder 3</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-646</td>
			<td>For cIEF 1:60 dilution used</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sample diluent</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-649</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Antibody diluent&#160;</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Wash concentrate</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>041-108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anolyte Refill</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Catholyte Refill</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-338</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Peroxide XDR</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>041-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Luminol</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Bicine/CHAPS Lysis Buffer</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Capillaries-Charge Separation (1 pack) for&#160;</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>CBS700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Assay Plate/Lid Kit</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td>040-663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Peroxidase-AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)&#160;</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch&#160;</td>
			<td>711-035-152</td>
			<td>For cIEF used (1: 300)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Peroxidase-AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)&#160;</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch&#160;</td>
			<td>715-035-150</td>
			<td>For cIEF used (1: 300)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Phospho-Erk 1/2 Primary Antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>9101</td>
			<td>For cIEF used (1: 50)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Pan Erk Primary Antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>9102</td>
			<td>For cIEF used (1: 100)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Compass software</td>
			<td>ProteinSimple</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HUVEC</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>PCS-100-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MV2 (EBM-2)</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>&#160;C-22221</td>
			<td>Endothelia cell basal medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endothelial Cell Growth Medium MV2 SupplementPack</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-39221</td>
			<td>Supplementation to MV2 above</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">VEGFA</td>
			<td>PeproTech</td>
			<td>100-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Long R3 IGF</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>85580C/I1146</td>
			<td>Insulin-like growth factor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bioruptor (Sonicator)</td>
			<td>Diagenode</td>
			<td>B01020001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BCA Protein Assay kit&#160;</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>23225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NuPAGE 4-12% Bis-Tris Protein Gels</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>NP0322BOX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NuPAG MOPS SDS Running Buffer (20X)</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>NP0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NuPAGE Transfer Buffer (20X)</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>NP0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Immobilon PVDF membrane</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>IPVH00010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microfuge tube vortexer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Microtiter plate adapter for centrifuge</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Pipettors&#160;</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Tips</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Ice</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:301px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

highly sensitive and quantitative detection of proteins and their isoforms by capillary isoelectric focusing method

免疫印迹法已成为许多实验室的常规技术, 用于从生物样品中进行蛋白质的表征。下面的协议提供了一种替代策略, 毛细管等电聚焦 (cIEF), 与传统的免疫印迹法相比有许多优点。这是一种基于抗体的、自动化的、快速的和定量的方法, 在超薄毛细管内发生完全的西方印迹过程。这种技术不需要凝胶转移到膜, 剥离的印迹, 或 x 射线胶片, 这是通常需要的常规免疫印迹法。在这里, 蛋白质被分离根据他们的充电 (电性点; pI), 使用少于微升 (400 nL) 总蛋白质裂解。电泳后, 蛋白质通过紫外线照射固定在毛细血管壁上, 其次是初级和次生 (辣根过氧化物酶 (HRP) 共轭) 抗体孵化, 通过增强的方法检测其结合化学发光 (ECL), 产生一个光信号, 可以捕获和记录的电荷耦合器件 (CCD) 相机。数字图像可以通过软件进行分析和量化 (峰值区域)。这个高吞吐量程序可以一次处理96个样本;高度敏感, 蛋白质检测在微量范围内;并产生高度可重复性的结果, 因为自动化。当样品数量 (例如组织样本和活检) 是一个限制因素时, 所有这些方面都非常有价值。该技术也有广泛的应用, 包括筛选药物或抗体, 生物标志物发现和诊断目的。

一种新的检测方法的设计:图 1A显示了检测板布局。最大地, 96 个井可以使用从384井板材在12个井块为每个情况 (抗体)。每块12口井都可以从 A1-A12 或 A13-A24 开始。颜色编码行允许一个区分样品或试剂从彼此。在检测模板 (图 1B) 中, 可以存储该特定化验的相关信息, 可用于结果分析的后期阶段。图 1C</stro...

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Highly Sensitive and Quantitative Detection of Proteins and Their Isoforms by Capillary Isoelectric Focusing Method

毛细管等电聚焦是一种基于抗体的、超灵敏的高通量技术, 它能够从极小的生物样品中详细描述蛋白质及其亚型。下面介绍了一种自动和机器人的方法, 用于检测和量化特定蛋白质及其亚型。

毛细管电聚焦法对蛋白质及其亚型的高灵敏度和定量检测

Immunoblotting has become a routine technique in many laboratories for protein characterization from biological samples. The following protocol provides ...

这种方法可以帮助回答生物医学研究领域的关键问题，如生物标志物的发现、药物的发现、诊断以及药物或抗体的筛选。该技术的主要优点是高通量，能够以高度可重复的方式检测蛋白质等构形式。这种技术的影响延伸到许多疾病的诊断，因为它可以测量受影响的蛋白质或其异构体。虽然这种方法可以提供细胞信号通路洞察，它也可以应用于需要分析特定蛋白质的其他系统。此方法的可视化演示至关重要，因为检测步骤由于去除气泡、装载板等技巧而难以学习。首先，在47微升样品稀释剂中加入一微升的DMSO抑制剂混合物和两个微升蛋白酶抑制剂，制备样品稀释剂混合物，使DMSO和蛋白酶抑制剂的最终浓度为X. 稀释以前分离的蛋白质酸盐，使用样品稀释剂混合物获得所需的浓度。接下来，在137.675微升的麻醉剂预混中加入3.325微升标准梯、6个蛋白酶抑制剂微升和3微升DMSO抑制剂。旋转样品至少15秒，并保持在冰上。将两种准备好的溶液以一比三的比例混合，使DMSO蛋白酶抑制剂和等电点标准梯的最终浓度为一 X，毛细管中的蛋白质达到最终所需的浓度。将蛋白质添加到样品混合物中后，所有步骤都将在冰上或四摄氏度下执行。在冰上放置一个384井的盘子。根据采用自动西式印迹系统软件设计的测定模板布局，将样品的10微升混合到合适的板材井中。在此之后，用抗体稀释剂稀释初级抗体和次级抗体。然后，移液器将10微升的初级抗体和15个微升的二级抗体进入每个井。接下来，将发光醇和过氧化物 XDR 混合在一对一的比例中。移液器 15 微升的过氧化光混合到每个井中。将样品和罐板添加到板中后，在 2500 倍 G 和 4 摄氏度下离心 10 分钟，以旋转液体并清除气泡。如果气泡仍然存在，请使用薄移液器尖端手动清除气泡。打开自动西方印迹系统软件，然后从文件菜单中单击"新"。转到布局窗格，并分配 384 井板中里根和样品的位置。通过单击块中任意位置的井来执行里根任务。选择一排块，每个井有 12 个孔。接下来，转到布局窗格工具栏并插入示例、主、辅助或发光行块。转到协议窗格，并在板中选择一个里根位置。然后，单击示例列中的单元格，然后从下拉菜单中选择里根。以相同的方式，为每个周期选择主、辅助和发光的里根位置。在初级抗体或二级抗体列中一次单击一个细胞，如有必要，更改孵育时间。然后，通过单击协议部分中的"添加"按钮来添加周期。在模板窗格中，输入与样本相关的信息，例如初级抗体和二级抗体的身份、其目录号和稀释。保存新的检测文件。在单击"开始"按钮之前，请快速检查布局以确保一切正确。现在，单击"开始"开始运行。该软件将提示用户清除废物，重新填充水和毛细管盒，添加酒精和脂肪到资源托盘，添加洗涤缓冲液，并将板装入冷却样品托盘。运行开始几分钟后，计算机屏幕上将显示一个仪器状态栏。单击运行摘要屏幕以查看状态和分离窗格。要观察毛细管中的电泳分离，请通过单击所需的循环，然后单击控制面板中的播放按钮来播放该毛细管的分离影片。打开运行文件并选择分析屏幕选项卡。单击"编辑"，然后分析"以更改等电点范围。应用适当的等电点标准。添加峰值拟合，并添加峰值名称。最后，选择要在峰值选项卡中使用的数据并导出数据以进行进一步分析。此处显示了血管内皮生长因子刺激解酶的磷酸化细胞外信号调节激酶的电谱图。有非常高的诱导磷酸化蛋白质观察到与血管内皮生长因子。插图显示了内源载荷控制 HSP 70，表示未处理和经过处理的样品的样品负载相似。在传统的免疫blot中，只有两个波段被检测到，即使通过毛细管等电聚焦分析将磷酸化细胞外信号调节激酶蛋白解析为四个峰值。此处显示了血管内皮生长因子刺激的细胞外信号调节激酶的电谱图。插图显示并行使用的相同加载控件。传统的免疫blot只显示两个对应于细胞外信号调节激酶1和细胞外信号调节激酶2的波段。而与毛细管等电聚焦，细胞外信号调节激酶蛋白被分解成六个峰，对应于所有四个不同的磷酸化峰和两个非磷酸化峰。掌握后，如果执行得当，此技术可以在几个小时内完成，具体取决于周期数。在尝试此程序时，重要的是要记住使用比传统免疫布洛茨更高的抗体浓度。这种方法的视觉演示至关重要，因为检测步骤由于技巧（如去除气泡、加载板板等）而难以学习。看完此视频后，您应该对如何设计分析、准备样品、运行分析以及分析数据以观察蛋白质的不同异构形式有充分的了解。

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Highly Sensitive and Rapid Fluorescence Detection with a Portable FRET Analyzer

高度敏感和快速荧光检测用便携式分析仪FRET

Recent improvements in F&#246;rster resonance energy transfer (FRET) sensors have enabled their use to detect various small molecules including ions and ...

科研

生物化学

An Efficient Method for the Isolation of Highly Purified RNA from Seeds for Use in Quantitative Transcriptome Analysis

对于高度纯化RNA的种子定量转录组分析的隔离中使用的有效方法

Plant seeds accumulate large amounts of storage reserves comprising biodegradable organic matter. Humans rely on seed storage reserves for food and as ...

Capillary Electrophoresis Separation of Monoclonal Antibody Isoforms Using a Neutral Capillary

使用中性毛细管单克隆抗体亚型的毛细管电泳分离

Biotherapeutic proteins, such as monoclonal antibodies (mAbs), are feasible alternatives for the treatment of chronic-degenerative diseases. The ...

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方法可视化和用透射电子显微镜分析膜蛋白的相互作用

Monotopic proteins exert their function when attached to a membrane surface, and such interactions depend on the specific lipid composition and on the ...

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酶活化致癌物和药物对共价 DNA 加合物的生成研究体外及其对32 P-postlabeling 的测定

Covalent DNA adducts formed by chemicals or drugs with carcinogenic potency are judged as one of the most important factors in the initiation phase of ...

Detection of Detergent-sensitive Interactions Between Membrane Proteins

膜蛋白对洗涤剂敏感相互作用的检测

Our ability to explore protein-protein interactions is the key to understanding regulatory connections in the cell. However, detection of protein-protein ...

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用两个稳定 Isotopically 标记鞘磷脂种鞘磷脂的定量和定性方法

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Regulated protein-protein interactions are a guiding principle for many signaling events, and the detection of such events is an important element in ...

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