Name: quantitative measurement of &#947;-secretase-mediated amyloid precursor protein and notch cleavage in cell-based luciferase reporter assay platforms
Uploaded: 2018-01-25T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Measurement of ÃŽÂ³-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms at JoVE.com

Os autores graças a facilidade do núcleo do Instituto de celular e biologia organísmica, Academia Sinica, apoio técnico. Este estudo foi suportado pelo Ministério da ciência e tecnologia, Taiwan (mais-103-2320-B-001-016-MY3 para Y.-F. L.), o programa de inovação translacional de Biofarmacêutica desenvolvimento – tecnologia de apoio a plataforma eixo regime (NP7 para Y.-F.L.) e Academia Sinica (para Y.-F.L.).

1. medição de sinais de repórter de Luciferase, que correspondem a clivagem de γ-Secretase de APP-C99 ou NΔE
Nota: Consulte as publicações anteriores para obter descrições detalhadas da geração de CG e NG células20,21.
<ol><li>
Semente de células NG ou CG (20, 000 células/poço) para microplacas de 96 poços em um volume final de 200 μL/poço no meio de crescimento que é composto modificado águia médio (DMEM...

<ol>
	<li>Selkoe, D. J., Hardy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer's+disease+at+25+years.">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease at 25 years.</a> EMBO Mol Med. 8 (6), 595-608 (2016).</li><li>Wolfe, M. S., Guenette, S. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substrate-targeting+gamma-secretase+modulators.">Substrate-targeting gamma-secretase modulators.</a> Nature. 453 (7197), 925-929 (2008).</li><li>Kounnas, M. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+gamma-secretase+reduces+beta-amyloid+deposition+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Modulation of gamma-secretase reduces beta-amyloid deposition in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neuron. 67 (5), 769-780 (2010).</li><li>Thathiah, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+orphan+G+protein-coupled+receptor+3+modulates+amyloid-beta+peptide+generation+in+neurons.">The orphan G protein-coupled receptor 3 modulates amyloid-beta peptide generation in neurons.</a> Science. 323 (5916), 946-951 (2009).</li><li>Flajolet, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+Alzheimer's+disease+amyloid-beta+formation+by+casein+kinase+I.">Regulation of Alzheimer's disease amyloid-beta formation by casein kinase I.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (10), 4159-4164 (2007).</li><li>Eisele, Y. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+substrates+of+presenilin/gamma-secretase.">The many substrates of presenilin/gamma-secretase.</a> J Alzheimers Dis. 25 (1), 3-28 (2011).</li><li>Gillman, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+and+Evaluation+of+BMS-708163,+a+Potent,+Selective+and+Orally+Bioavailable+gamma-Secretase+Inhibitor.">Discovery and Evaluation of BMS-708163, a Potent, Selective and Orally Bioavailable gamma-Secretase Inhibitor.</a> ACS Med Chem Lett. 1 (3), 120-124 (2010).</li><li>Hopkins, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACS+chemical+neuroscience+molecule+spotlight+on+Begacestat+(GSI-953).">ACS chemical neuroscience molecule spotlight on Begacestat (GSI-953).</a> ACS Chem Neurosci. 3 (1), 3-4 (2012).</li><li>Yang, T., Arslanova, D., Gu, Y., Augelli-Szafran, C., Xia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+gamma-secretase+modulation+differentiates+inhibitor+compound+selectivity+between+two+substrates+Notch+and+amyloid+precursor+protein.">Quantification of gamma-secretase modulation differentiates inhibitor compound selectivity between two substrates Notch and amyloid precursor protein.</a> Mol Brain. 1, 15 (2008).</li><li>McKee, T. D., Loureiro, R. M., Dumin, J. A., Zarayskiy, V., Tate, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+cell-based+method+for+determining+the+gamma-secretase+enzyme+activity+against+both+Notch+and+APP+substrates.">An improved cell-based method for determining the gamma-secretase enzyme activity against both Notch and APP substrates.</a> J Neurosci Methods. 213 (1), 14-21 (2013).</li><li>Basi, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+precursor+protein+selective+gamma-secretase+inhibitors+for+treatment+of+Alzheimer's+disease.">Amyloid precursor protein selective gamma-secretase inhibitors for treatment of Alzheimer's disease.</a> Alzheimers Res Ther. 2 (6), 36 (2010).</li><li>Liao, Y. F., Tang, Y. C., Chang, M. Y., Wang, B. J., Hu, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+small+molecular+(D)-leucinamides+as+potent,+Notch-sparing+gamma-secretase+modulators.">Discovery of small molecular (D)-leucinamides as potent, Notch-sparing gamma-secretase modulators.</a> Eur J Med Chem. 79, 143-151 (2014).</li><li>Liao, Y. F., Wang, B. J., Cheng, H. T., Kuo, L. H., Wolfe, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+necrosis+factor-alpha,+interleukin-1beta,+and+interferon-gamma+stimulate+gamma-secretase-mediated+cleavage+of+amyloid+precursor+protein+through+a+JNK-dependent+MAPK+pathway.">Tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1beta, and interferon-gamma stimulate gamma-secretase-mediated cleavage of amyloid precursor protein through a JNK-dependent MAPK pathway.</a> J Biol Chem. 279 (47), 49523-49532 (2004).</li><li>Wang, B. 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A., Miele, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=gamma-Secretase+inhibitors+and+modulators.">gamma-Secretase inhibitors and modulators.</a> Biochim Biophys Acta. 1828 (12), 2898-2907 (2013).</li><li>Coric, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+Prodromal+Alzheimer+Disease+With+Avagacestat:+A+Randomized+Clinical+Trial.">Targeting Prodromal Alzheimer Disease With Avagacestat: A Randomized Clinical Trial.</a> JAMA Neurol. 72 (11), 1324-1333 (2015).</li><li>Mitani, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+between+gamma-secretase+inhibitors+and+modulators+on+cognitive+function+in+amyloid+precursor+protein-transgenic+and+nontransgenic+mice.">Differential effects between gamma-secretase inhibitors and modulators on cognitive function in amyloid precursor protein-transgenic and nontransgenic mice.</a> J Neurosci. 32 (6), 2037-2050 (2012).</li><li>Penninkilampi, R., Brothers, H. M., Eslick, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+Agents+Targeting+gamma-Secretase+Increase+Risk+of+Cancer+and+Cognitive+Decline+in+Alzheimer's+Disease+Patients:+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis.">Pharmacological Agents Targeting gamma-Secretase Increase Risk of Cancer and Cognitive Decline in Alzheimer's Disease Patients: A Systematic Review and Meta-Analysis.</a> J Alzheimers Dis. 53 (4), 1395-1404 (2016).</li></ol>

Os resultados promissores de um fase 1b ensaio de aducanumab imunoterapia para AD estabeleceram firmemente o papel crítico de Aβ na patogênese da AD22 e sugerem que abordagens anti-Aβ ainda são uma estratégia viável para o desenvolvimento de drogas antianúncios. Aqui, descrevemos ensaios cell-based, para quantificar a proteólise γ-secretase-catalisada de APP-C99 e NΔE usando sistemas de repórter de luciferase de vaga-lume. APP-C99 e NΔE são os dois substratos de γ-secretase mais bem...

Oligoméricas formas de amiloide-β (Aβ) são acreditadas para ser a causa primária de neurodegeneração nos cérebros de pacientes que sofrem de doença de Alzheimer (AD)1. Peptídeos aβ são produzidos pela gradual clivagem da proteína precursora amiloide (APP), primeiro por β-secretase e depois por γ-secretase2. Na década passada, abordagens terapêuticas para o tratamento da AD têm-se centrado na prevenção da produção de Aβ3. A maioria dos estudos focaram-se também o aumento da atividade de α-secretase, que pode impede a clivagem de γ-secretase de APP e, assim, diminuir a produção de Aβ, ou a inibição da β-e/ou γ-secretase atividades4. Infelizmente, não-seletivo da inibição da β ou γ-secretases resultados em inevitáveis efeitos colaterais que são devido à interferência com o funcionamento de outros substratos fisiológicos de β e γ-secretase5,6. No que se refere a inibidores de γ-secretase, estudos recentes relataram a descoberta de um número de moduladores químicos e genéticos que podem regular a produção de Aβ enquanto exercer efeitos insignificantes sobre o tratamento de γ-secretase-mediada essencial de entalhe7 ,8,9,10,11,12, no entanto, terapêutica bem sucedida ainda não foram desenvolvidas. Assim, ainda mais sistemáticas telas são garantidas para descobrir novos modificadores de genéticas e químicas que podem seletivamente modular γ-secretase-mediada processamento de APP.
Γ-Secretase é conhecido para cravar mais de 90 diferentes proteínas de membrana-ancorado. Entre estes substratos é entalhe, cuja actividade é fundamental para a determinação do destino de célula e diferenciação durante desenvolvimento13. Seletivamente a modular γ-secretase-catalisada APP processamento na ausência de afectar o entalhe processamento será essencial para minimizar efeitos colaterais relacionados com entalhe de γ-secretase-inibidores, e esta seletividade é pensada para ser um fator principal que será dite a eficácia biológica de moduladores de γ-secretase potenciais para o tratamento crônico da AD. Tem havido um número de derivados de arylsulfonamide, tais como o GSI-953 (begacestat) e BMS-708163 (avagacestat), que foram encontrados para exibem inibição potente e seletiva de γ-secretase14,15. Um estudo anterior demonstrou que a inibição diferencial de γ-secretase clivagem da APP e entalhe pode ser observada usando um ensaio quantitativo ELISA-baseado em combinação com validação no vivo usando zebrafish16. Além disso, foram estabelecidas paradigmas baseada em célula de ensaio para abordar a potencial seletividade de substrato de γ-secretase em direção a APP e o entalhe de17,18. Usando protocolos semelhantes as descritas neste documento, nós descobrimos recentemente uma nova classe de (D)-leucinamides que potente modular γ-secretase clivagem da APP com entalhe poupadores seletividade19. Juntos, esta coleção de estudos fornece um prova de conceito a noção de que a seletividade/disponibilidade de substrato de γ-secretase podem estar sujeitas a modulação química e verificação experimental de apoio. No entanto, essas plataformas de ensaio muitas vezes dependem de relativamente baixa produtividade leituras e abordagens de trabalho intensivos que não podem cumprir padrões industriais para programas de descoberta de drogas.
Nós recentemente geraram ensaios de gene do repórter do luciferase baseada em célula que quantitativamente podem determinar a atividade catalítica de γ-secretase em direção a dois substratos distintos, 99-amino ácido fragmento C-terminal da APP (APP-C99) e o extracelular domínio-excluído peptídeo Notch (NΔE). Tanto APP-C99 e NΔE foram amplamente utilizados como substratos diretos de γ-secretase em vários ensaios. Para gerar ensaios de gene repórter do luciferase homogênea e consistente para a clivagem de γ-secretase de APP-C99 ou NΔE, geramos uma linha de HEK-derivado de célula estável (CG) que constitutivamente expressa um Gal4 vagalume orientada por promotor do luciferase repórter ( Gal4-Luc) e a proteína de fusão Gal4/VP16-com a tag APP-C99 (C99-GV). Além disso, geramos uma outra linha de HEK-derivado de célula estável (NG) que constitutivamente expressa Gal4-Luc e NΔE Gal4/VP16-marcados (NΔE-GV). Usando estes ensaios romance substrato específico γ-secretase, agora oferecemos um método para quantificar e distinguir a atividade catalítica de γ-secretase em direção a diferentes substratos (APP-C99 em células CG), ou NΔE em células de NG. Além disso, os substrato específico γ-secretase ensaios foram projetados para ser propício para plataformas de triagem de alto teor. Estes ensaios γ-secretase recém-gerado poderiam pavimentar o caminho para a descoberta de moduladores de γ-secretase romance que poderia melhorar a função cognitiva, suprimindo a produção de Aβ sem suscitar indesejável inibição de entalhe para o tratamento de última geração do anúncio.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>VictorLight luminescence plate reader</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>2030-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class II, Type 2 Biological Safety Cabinet</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1300 Series A2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CL-387,785</td>
			<td>EMD Calbiochem</td>
			<td>233100-1MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPT</td>
			<td>Merck</td>
			<td>565770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>12100046</td>
			<td>main compnent of growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blasticidin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1113903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeocin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>R25005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hygromycin B</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10687010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytomer</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>BR717805 Aldrich</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microplate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>156545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetracycline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T7660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steady-Glo luciferase assay reagent</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E2510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humidified CO2 incubator</td>
			<td>Revco</td>
			<td>Ultima II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-REx293 cell line</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>R71007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wallac 1420 software version 3.0</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td>instrument control software of the luminescence microplate reader</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative measurement of &#947;-secretase-mediated amyloid precursor protein and notch cleavage in cell-based luciferase reporter assay platforms

Nós desenvolvemos um par de ensaios de gene repórter baseada em célula para medir quantitativamente a clivagem de γ-secretase de substratos distintos. Este manuscrito descreve procedimentos que podem ser usados para monitorar a clivagem γ-secretase-mediada de APP-C99 ou entalhe, utilizando um sistema de repórter Gal4 vagalume orientada por promotor do luciferase. Estes ensaios foram estabelecidos por estàvel co transfecting células HEK293 com o gene do repórter do luciferase orientado a Gal4 e o fragmento de Gal4/VP16-marcados C-terminal da APP (APP-C99; Células CG), ou a Gal4/VP16-tag entalhe-ΔE (NΔE; Células de NG). Usando estes ensaios de repórter em paralelo, temos demonstrado que um inibidor ErbB2, CL-387.785, preferencialmente pode suprimir a clivagem de γ-secretase de APP-C99 em células CG, mas não NΔE em células de NG. As diferenciais respostas exibidas pelas células CG e NG, quando tratados com CL-387.785, representam uma característica preferencial para moduladores de γ-secretase, e essas respostas estão em contraste com a pan-inibição de γ-secretase induzido por DAPT. Nossos estudos fornecem a evidência direta que γ-secretase atividades em direção a diferentes substratos podem ser diferenciadas em um contexto celular. Estes novos ensaios, podem ser ferramentas úteis na descoberta da droga melhorada das terapias AD.

Inibição de ErbB2 pelo CL-387.785 diferencialmente pode promover o processamento de APP-C99 por Γ -secretase sem afetar a clivagem do entalhe Para estabelecer um ensaio baseados em células que quantitativamente pode medir a clivagem proteolítica de um substrato específico γ-secretase, geramos a linhagem de células HEK293-derivado CG por transfection co estável de uma tetraciclina-inducible C-terminal Gal4/VP16-tag APP-C99 e um...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Measurement of ÃŽÂ³-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms at JoVE.com

Quantitative Measurement of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms

Medida quantitativa da proteína precursora amiloide γ-Secretase-mediada e clivagem de entalhe em plataformas de ensaio baseada em célula Luciferase Reporter

Estamos com sucesso geraram dois ensaios de substrato específico γ-secretase. Ambos os ensaios cell-based aqui apresentados destinam-se para quantificar o γ-secretase actividades enzimáticas através da saída de repórteres de luciferase de vaga-lume.

We have developed a pair of cell-based reporter gene assays to quantitatively measure &#947;-secretase cleavage of distinct substrates. This manuscript ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Quantitative Measurement of &#947;-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Seleção de Aptamers para proteína β-amilóide, o agente causador da doença de Alzheimer

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Neurociência

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Em células vivas, imagens de células precursoras de órgãos sensoriais na Intact Drosophila As pupas

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field

Um Ensaio Galvanotaxis para Análise de Precursores Neurais Cinética migração celular em um campo aplicado externamente Corrente Contínua Elétrica

The discovery of neural stem and progenitor  cells (collectively termed neural precursor cells) (NPCs) in the adult  mammalian brain has led to a body of ...

High-throughput Analysis of Mammalian Olfactory Receptors: Measurement of Receptor Activation via Luciferase Activity

De alta capacidade de análise de mamíferos olfativas Receptores: Medição do Receptor de ativação via luciferase Atividade

Odorants create unique and overlapping patterns of olfactory receptor activation, allowing a family of approximately 1,000 murine and 400 human receptors ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detecção de<em&gt; In Situ</em&gt; Complexos proteína-proteína no<em&gt; Drosophila</em&gt; Larval Junção Neuromuscular Usando Proximity Ligation Assay

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

Infusão estereotáxica de oligomica beta-amilóide no ratinho Hippocampus

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Quantitative Measurement of Relative Retinoic Acid Levels in E8.5 Embryos and Neurosphere Cultures Using the F9 RARE-Lacz Cell-based Reporter Assay

Medição quantitativa de níveis relativos ácido retinóico em E8.5 embriões e neurosphere culturas Usando a F9 RARE-Lacz baseado em células de Ensaio Reporter

Retinoic acid (RA) is an important developmental morphogen that coordinates anteroposterior and dorsoventral axis patterning, somitic differentiation, ...

Modeling Amyloid-&#946;42 Toxicity and Neurodegeneration in Adult Zebrafish Brain

Modeling Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²42 Toxicity and Neurodegeneration in Adult Zebrafish Brain

Toxicidade do Amyloid-β42 de modelagem e neurodegeneração no cérebro adulto de Zebrafish

Alzheimer's disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease in which accumulation of toxic amyloid-&#946;42 (A&#946;42) peptides leads to ...

Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells

Desenvolvimento de ensaio para quantificação de conteúdo elevado de Sod1 proteína mutante formação agregada em células vivas

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that can be caused by inherited mutations in the gene encoding copper-zinc ...

Quantitative Autoradiographic Method for Determination of Regional Rates of Cerebral Protein Synthesis In Vivo

Método autoradiográfico quantitativo para determinação das taxas regionais de síntese protéica cerebral in vivo

Protein synthesis is required for development and maintenance of neuronal function and is involved in adaptive changes in the nervous system. Moreover, it ...