Name: cavernous nerve stimulation and recording of intracavernous pressure in a rat
Uploaded: 2018-04-23T12:30:00
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Os autores têm sem agradecimentos.

Os animais estavam alojados na Universidade do Sul da Dinamarca animais cuidados instalação conforme as normas institucionais. Todas as experiências em animais foram realizadas em conformidade com o guia de institutos nacionais de saúde para o cuidado e o uso de animais de laboratório. Este é um procedimento de cirurgia aguda, não-sobrevivência.
1. preparação da tubulação, eletrodo e instrumentos para o procedimento cirúrgico
<ol><li>Utilizar os seguintes instrumentos microcirú...

<ol>
	<li>Eckhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Untersuchungen &#252;ber die Erektion des Hundes In: Beitr&#228;ge zur Anatomie und Physiologie. , 123-166 (1863).</li><li>Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+as+a+model+for+the+study+of+penile+erection.">The rat as a model for the study of penile erection.</a> J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).</li><li>Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+characterization+of+a+bio-assay+of+erectile+function+in+a+rat+model.">The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model.</a> J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).</li><li>Martinez-Pineiro, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+for+the+study+of+penile+erection:+pharmacologic+and+electrical-stimulation+parameters.">Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters.</a> Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).</li><li>Hayashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+FK1706+on+erectile+function+following+bilateral+cavernous+nerve+crush+injury+in+a+rat+model.">The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model.</a> J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).</li><li>Burnett, A. L., Becker, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophilin+ligands+promote+penile+neurogenesis+and+erection+recovery+after+cavernous+nerve+injury.">Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury.</a> J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).</li><li>Yamashita, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+injury-related+erectile+dysfunction+following+nerve-sparing+radical+prostatectomy:+a+novel+experimental+dissection+model.">Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model.</a> Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).</li><li>Burnett, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GGF2+is+neuroprotective+in+a+rat+model+of+cavernous+nerve+injury-induced+erectile+dysfunction.">GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction.</a> J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).</li><li>Lin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle+Improved+Stem+Cell+Therapy+for+Erectile+Dysfunction+in+a+Rat+Model+of+Cavernous+Nerve+Injury.">Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury.</a> J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).</li><li>Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+erectile+dysfunction.">Animal models of erectile dysfunction.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).</li><li>Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+as+an+animal+model+for+male+erectile+function+evaluation+in+sexual+medicine+research.">Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research.</a> J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).</li><li>Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+pitfalls+in+some+of+the+experimental+studies+in+erectile+function+and+dysfunction:+a+consensus+article.">Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article.</a> J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).</li><li>Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigative+models+in+erectile+dysfunction:+a+state-of-the-art+review+of+current+animal+models.">Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models.</a> J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).</li><li>Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+sequelae+of+cavernous+nerve+injury+in+the+rat:+is+there+model+dependency.">Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency.</a> J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).</li><li>Albersen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injections+of+adipose+tissue-derived+stem+cells+and+stem+cell+lysate+improve+recovery+of+erectile+function+in+a+rat+model+of+cavernous+nerve+injury.">Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury.</a> J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).</li></ol>

O principal objetivo deste estudo foi descrever uma técnica cirúrgica simplificada de canulação peniana crus para gravação de ICP e isolamento da NC para eletroestimulação. Nós introduzimos modificações para a dissecação do corpo cavernoso para simplificar a cirurgia e proporcionar gravações reprodutíveis do aumento do ICP com estimulação de CN. Com uma incisão de pele vertical de 1 cm, lateral para a base do pênis, usando a tuberosidade palpável como orientação, atingimos boa exposição do isquio...

Estudo in vivo da função erétil em animais experimentais começou em 1863 com o trabalho experimental pioneiro de Eckhard1. Eletroestimulação dos nervos pélvicos foi usada para induzir o aumento da pressão Intracraniana em cães. Ao longo doséculo 20, protocolos experimentais similares foram usados em animais maiores, como cães, macacos, gatos e coelhos. Avaliando a função erétil em um rato foi desenvolvida pelo Quinlan et al , em 1989,2. O método já foi modificado e atualizado por vários outros grupos34. Hoje, o rato é o mais amplamente utilizado modelo animal para estudar a patologia da disfunção erétil e avaliando as opções de tratamento emergente. As principais etapas do processo incluem, gravação de pressão arterial sistêmica, usando uma linha na artéria carótida, canulação o peniana crus para medida de pressão Intracraniana e estimulação da NC para induzir um aumento da pressão Intracraniana. Embora diversos pesquisadores refinaram o modelo, sua reprodutibilidade continua a ser um problema, e resultados variáveis têm sido relatados por laboratórios diferentes. Várias armadilhas ainda persistem.
Anteriores artigos5,6,7,8,9,10 descrevem o uso de exposição completa do pênis com Desluvamento de pênis para canulação do corpo cavernoso. Isto não é uma abordagem ideal como manipulação e dissecação interrupções causa lesão às estruturas, que são essenciais para a função erétil. A dissecação da NC tem sido bem descrito10,11, mas a estimulação do nervo não é o ideal, devido a vários fatores que poderiam afetar os resultados experimentais. A técnica de estimulação CN inclui levantamento do nervo no tecido circundante puxando o eletrodo bipolar gancho, que é posicionado ao redor do nervo, e o nervo antes cada estimulação de secagem. Isso pode levar a vários graus de dano do nervo e escapamento corrente elétrico, resultando em uma resposta diminuída ou falso aumento a pressão Intracraniana através da estimulação dos caminhos alternativos , por exemplo, os músculos do assoalho pélvico, bexiga e gastrointestinal trato de12. Todos esses fatores limitam de reprodutibilidade.
Durante nosso estudo, observamos que a profundidade e o tipo de anestesia tem um profundo efeito sobre a pressão Intracraniana. Os anestésicos usados são pentobarbital de sódio, xilazina/cetamina ou cetamina/midazolam injeção ou inalação de oxigênio/isoflurano.
Aqui nós descrevemos um método simplificado de cirúrgico e fornecer dados para apoiar a padronização do protocolo experimental.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="741">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Adson forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11006-12</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Dumont #7 forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11271-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Dumont #5 forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11273-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">ToughCut Mayo scissor</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">14110-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature Vannas Spring scissor</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">15006-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Ultra Fine Hemostat</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">13020-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Crile Hemostat</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">13004-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Kwik-Sil Adhesive</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">KWIK-SIL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Teflon coated silver wire 0.125 mm</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">AGT0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Elastic wire retractors</td>
			<td style="width:199px;">Custom made</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Scalpel blade</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">10023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">PE-50 tubing</td>
			<td style="width:199px;">Warner Instruments</td>
			<td style="width:119px;">64-0753</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">23 G Needle</td>
			<td style="width:199px;">Kruuse</td>
			<td style="width:119px;">121272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">SD-9 Square Pulse Stimulator</td>
			<td style="width:199px;">Somatco</td>
			<td style="width:119px;">1077/183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Blood pressure transducer and cable</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td>BLPR2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Raucotupf Cotton-tipped Applicators</td>
			<td style="width:199px;">Lohmann-Raucher</td>
			<td style="width:119px;">11966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Pro-ophta Ocular Sticks</td>
			<td style="width:199px;">Lohmann-Raucher</td>
			<td style="width:119px;">16515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">NaCl 0,9 % 100 mL</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Heparin</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">25 mL Syringe</td>
			<td style="width:199px;">Odense University Hospital</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Vet eye ointment - Viscotears</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">silver wires&#160;</td>
			<td colspan="2">Science Products GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Silicon Glue&#160;</td>
			<td colspan="3">Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cavernous nerve stimulation and recording of intracavernous pressure in a rat

A estimulação do nervo cavernoso (CN) e a medida da pressão intracavernous (ICP) têm sido amplamente utilizados para testar e avaliar terapias para disfunção erétil. No entanto, os métodos usados variam entre laboratórios e armadilhas continuam a existir. O objetivo deste estudo foi descrever uma técnica cirúrgica que fornece um modelo confiável e reprodutível. Ao expor o músculo isquiocavernoso no seu ponto de inserção na tuberosidade isquial, as crus penianas podem ser canuladas com dissecção mínima e prejuízo para as estruturas envolvidas na função erétil. Estimulação repetida da NC, sem a necessidade de elevação e de secagem, foi alcançada por meio de um eléctrodo de prata bipolar µm 125 e cola de silicone biocompatível para isolar o complexo de eletrodo-nervo. Esse método impede a neurapraxia reduzindo o alongamento e secagem do nervo e fornece o completo isolamento do nervo, eliminando vazamento elétrico e impedindo a estimulação das vias alternativas.

O uso deste protocolo com as configurações recomendadas de estimulação, sob anestesia por inalação com oxigênio de 2,0% de isoflurano 0,8 L/min, deve produzir resultados como mostrado na Figura 11 e Figura12, onde há vários de costas estímulos entre 75-80 mm Hg. Figura 13 mostra a mesma resposta estável sobre uma estimulação de 20 min com a resposta estável em 73-77 mm Hg. o teste d...

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Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

Este estudo descreve um procedimento cirúrgico simplificado e técnica para a realização de estimulação do nervo cavernoso com o isolamento do nervo-eletrodo complexas usando cola de silicone e medição de pressão intracavernous.

Estimulação do nervo cavernoso e gravação de pressão Intracavernous em um rato

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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