Name: a novel in vitro wound healing assay to evaluate cell migration
Uploaded: 2018-03-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av finansiering fra Sapienza Universitetet i Roma og italienske cystisk fibrose Research Foundation (Project FFC #11/2014 vedtatt av FFC delegasjoner fra Siena, Sondrio Valchiavenna, Cerea Il Sorriso di Jenny og Pavia). Del av dette arbeidet ble også støttet av FILAS Grant Prot. FILAS-RU-2014-1020.
Vi er takknemlige for Dr. Loretta Ferrera (U.O.C. Genetica Medica, Istituto Giannina Gaslini, Genova, Italia) for å tilby bronkial epitelceller.

1. celle forberedelse
<ol><li>Frø 2.5x106 celler i 10 mL av Minimum viktig Medium (MEM) med 2 mM glutamin (MEMg), pluss 10% fosterets bovin serum (FBS), antibiotika (0,1 mg/mL av penicillin og streptomycin) og puromycin (0,5 µg/mL for valg og vedlikehold av den celle linje) i en MT75 bolle. Inkuber kolbe på 37 ° C og 5% CO2 i 2 dager. Før du starter eksperimentet, sjekk der celler under en invertert mikroskop. Merk: Cellene som brukes for eksperimentet er udødeliggjort menneskelige bronki...

<ol>
	<li>Enyedi, B., Niethammer, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+epithelial+wound+detection.">Mechanisms of epithelial wound detection.</a> Trends Cell Biol. 25, 398-407 (2015).</li><li>Kujath, P., Kujath, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complicated+skin,+skin+structure+and+soft+tissue+infections+-+are+we+threatened+by+multi-resistant+pathogens?.">Complicated skin, skin structure and soft tissue infections - are we threatened by multi-resistant pathogens?.</a> Eur J Med Res. 15, 544-553 (2010).</li><li>Moreau-Marquis, S., Stanton, B. A., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+formation+in+the+cystic+fibrosis+airway.">Pseudomonas aeruginosa biofilm formation in the cystic fibrosis airway.</a> Pulm Pharmacol Ther. 21, 595-599 (2008).</li><li>Chiappini, E., Taccetti, G., de Martino, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+lung+infections+in+cystic+fibrosis+patients:+an+update.">Bacterial lung infections in cystic fibrosis patients: an update.</a> Pediatr Infect Dis J. 33, 653-654 (2014).</li><li>Mangoni, M. L., McDermott, A. M., Zasloff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides+and+wound+healing:+biological+and+therapeutic+considerations.">Antimicrobial peptides and wound healing: biological and therapeutic considerations.</a> Exp Dermatol. 25, 167-173 (2016).</li><li>Lau, K., Paus, R., Tiede, S., Day, P., Bayat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+role+of+stem+cells+in+cutaneous+wound+healing.">Exploring the role of stem cells in cutaneous wound healing.</a> Exp Dermatol. 18, 921-933 (2009).</li><li>Hu, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering+and+regenerative+repair+in+wound+healing.">Tissue engineering and regenerative repair in wound healing.</a> Ann Biomed Eng. 42, 1494-1507 (2014).</li><li>Ramot, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+PPARgamma-mediated+signalling+in+skin+biology+and+pathology:+new+targets+and+opportunities+for+clinical+dermatology.">The role of PPARgamma-mediated signalling in skin biology and pathology: new targets and opportunities for clinical dermatology.</a> Exp Dermatol. 24, 245-251 (2015).</li><li>Lai, Y., Gallo, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AMPed+up+immunity:+how+antimicrobial+peptides+have+multiple+roles+in+immune+defense.">AMPed up immunity: how antimicrobial peptides have multiple roles in immune defense.</a> Trends Immunol. 30, 131-141 (2009).</li><li>Zasloff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides+of+multicellular+organisms.">Antimicrobial peptides of multicellular organisms.</a> Nature. 415, 389-395 (2002).</li><li>Hulkower, K. I., Herber, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+and+invasion+assays+as+tools+for+drug+discovery.">Cell migration and invasion assays as tools for drug discovery.</a> Pharmaceutics. 3, 107-124 (2011).</li><li>Di Grazia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+frog+skin-derived+antimicrobial+peptide+esculentin-1a(1-21)NH2+promotes+the+migration+of+human+HaCaT+keratinocytes+in+an+EGF+receptor-dependent+manner:+a+novel+promoter+of+human+skin+wound+healing?.">The frog skin-derived antimicrobial peptide esculentin-1a(1-21)NH2 promotes the migration of human HaCaT keratinocytes in an EGF receptor-dependent manner: a novel promoter of human skin wound healing?.</a> PLoS One. 10, e0128663 (2015).</li><li>Di Grazia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=D-Amino+acids+incorporation+in+the+frog+skin-derived+peptide+esculentin-1a(1-21)NH2+is+beneficial+for+its+multiple+functions.">D-Amino acids incorporation in the frog skin-derived peptide esculentin-1a(1-21)NH2 is beneficial for its multiple functions.</a> Amino Acids. 47, 2505-2519 (2015).</li><li>Cappiello, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Esculentin-1a-derived+peptides+promote+clearance+of+Pseudomonas+aeruginosa+internalized+in+bronchial+cells+of+cystic+fibrosis+patients+and+lung+cell+migration:+biochemical+properties+and+a+plausible+mode+of+action.">Esculentin-1a-derived peptides promote clearance of Pseudomonas aeruginosa internalized in bronchial cells of cystic fibrosis patients and lung cell migration: biochemical properties and a plausible mode of action.</a> Antimicrob Agents Chemother. 60, 7252-7262 (2016).</li><li>Bebok, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+of+cAMP+agonists+to+activate+rescued+deltaF508+CFTR+in+CFBE41o-+airway+epithelial+monolayers.">Failure of cAMP agonists to activate rescued deltaF508 CFTR in CFBE41o- airway epithelial monolayers.</a> J Physiol. 569, 601-615 (2005).</li><li>Trinh, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+defective+cystic+fibrosis+airway+epithelial+wound+repair+after+CFTR+rescue.">Improvement of defective cystic fibrosis airway epithelial wound repair after CFTR rescue.</a> Eur Respir J. 40, 1390-1400 (2012).</li><li>Gan, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidermal+growth+factor+receptor+(EGFR)+tyrosine+kinase+inhibitor+AG1478+increases+the+formation+of+inactive+untethered+EGFR+dimers.+Implications+for+combination+therapy+with+monoclonal+antibody+806.">The epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor AG1478 increases the formation of inactive untethered EGFR dimers. Implications for combination therapy with monoclonal antibody 806.</a> J Biol Chem. 282, 2840-2850 (2007).</li><li>Tokumaru, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+keratinocyte+migration+via+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+by+the+antimicrobial+peptide+LL-37.">Induction of keratinocyte migration via transactivation of the epidermal growth factor receptor by the antimicrobial peptide LL-37.</a> J Immunol. 175, 4662-4668 (2005).</li><li>Tjabringa, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antimicrobial+peptide+LL-37+activates+innate+immunity+at+the+airway+epithelial+surface+by+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor.">The antimicrobial peptide LL-37 activates innate immunity at the airway epithelial surface by transactivation of the epidermal growth factor receptor.</a> J Immunol. 171, 6690-6696 (2003).</li><li>Di Grazia, A., Luca, V., Segev-Zarko, L. A., Shai, Y., Mangoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporins+A+and+B+stimulate+migration+of+HaCaT+keratinocytes+and+kill+intracellular+Staphylococcus+aureus.">Temporins A and B stimulate migration of HaCaT keratinocytes and kill intracellular Staphylococcus aureus.</a> Antimicrob Agents Chemother. 58, 2520-2527 (2014).</li></ol>

Celle migrasjon er en viktig prosess i mange fysiologiske og patologiske arrangementer inkludert sårheling, embryonale utvikling og kreft metastasering. Den grunnleggende prosedyren å studere celle migrasjon i vitro innebærer: (i) etableringen av en celle monolayer, (ii) produksjon av et pseudo sår i confluent laget av celler, (iii) erobringen av bilder på ulike tidsintervaller til såret nedleggelse er nådd , og (iv) analyse av bildesekvens for å kvantifisere overføringshastighet de valgte cellene.
...

Det er hovedsakelig kjent at sårheling i dyr er en grunnleggende prosess å reetablere integritet og normal funksjon av vev lag etter skade1. Til tross for epithelial overflater utsatt for eksterne miljøet (f.eks, hud, luftveier, og mage traktater) danner en beskyttende barriere fra fysiske og kjemiske fornærmelser, dannelsen av sår oppstår lett, spesielt etter kirurgi eller mikrobielle infeksjoner2. Eksempel fører kolonisering av lungevev av opportunistiske bakteriell patogen Pseudomonas aeruginosa, spesielt i cystisk fibrose (CF) lider, til skade av luftveiene epitel med påfølgende respirasjonssvikt3, 4. Sårheling er en kompleks vert reparasjon mekanisme for å gjenopprette en skadet vev5normal arkitektur. Det er preget av første betennelse, etterfulgt av en fornyelse perioden omfatter epithelialization, angiogenese og vev remodeling med kollagen produksjon og celle differensiering6,7,8 . Sikre epithelial integritet og kontrollere mikrobiell spredning, produsere alle levende organismer forsvar molekyler, inkludert antimikrobielle peptider (ampere)9,10. Såret helbredelsesprosessen er svært vanskelig å simulere i vitro skyldes mangel på celle rusk og komplekse interaksjoner mellom ulike celletyper. Men i vitro evne til et peptid å akselerere nedleggelsen av en pseudo såret ved å stimulere migrering av epitelceller er et tegn på sin evne til å helbrede en kompromittert epitel. Faktisk celle migrasjon er en hastighetsbegrensning hendelse i sårheling, og studere faktorer som kan påvirke celle migrasjon vil bidra til å mål terapi for forbedret sårtilheling.
Her, gis en svært reproduserbar eksperimentelle analysen basert på spesielle silikon kultur setter å vurdere celle migrasjon i vitro. Den er basert på etablering av et 500 μm gap (pseudo såret) på en confluent celle monolayer. Cellene på kanten av kunstige "såret" feltet starter overføring til celle-fri området, forming nye celle-celle kontakter. Sett inn kultur representerer et nytt verktøy for rask sårheling eksperimenter. To reservoarer med en 500 μm vegg tilbys, og de kan være riktig plassert i en 3 cm rett plate eller av en 12-vel plate. Fylle hvert kammer av sette med en celle suspensjon kan cellene vokse i hver angitte området til samløpet, mens fjerning av sette vil skape en ren celle-fri avstand på ca 500 μm (samme bredde som separasjon veggen). Et riktig celle kultur medium med en test forbindelse kan deretter legges til parabolen plate/godt. Etterpå kan gapet nedleggelsen visualiseres i forskjellige tidsintervaller under en invertert mikroskop, fortrinnsvis en utstyrt med et videokamera for bildeopptak. Til slutt, måling av endringer i celle-dekket området av webbaserte automatiserte image analyseprogrammet tillater kvantifisering av hastigheten på såret nedleggelse og celle migrasjon. Total, denne metoden er et skritt fremover med hensyn til klassisk analysen, der en ripe gjøres manuelt ved incising confluent celle monolayers med en steril nål eller en pipette tips11. Faktisk den siste fremgangsmåten kan ødelegge plast bunnen av parabolen plate/godt og overflatebehandlingen, opprette rynker. I tillegg har "såret" området ikke en godt definert bredde langs hele lengden av gapet, som dette er svært avhengig av stort trykk som brukes av forskere til pinne-spissen. Videre kan forskyves cellene danne klumper av levende og døde celler på kantene av scratch; Videre kan spredning av levende celler i området "såret" påvirke hastigheten av celle migrasjon, genererer ikke reproduserbare resultater12.
I tillegg takket være en ripe bildet analyse plattform, kan brukere raskt motta (i minutter) kvantitative data på hos de merkede cellene uten nødvendigheten av å skaffe ekstra programvare. Denne plattformen er dugelig å analysere fase kontrast mikroskopi bilder av lav (~ 5 X), medium (~ 10 X) og høy (~ 20 X) forstørrelse. Etter å ha lastet en zip-fil med bilder (i *.jpg, *.jpeg, *.jp2, *.png, *.gif, *.tiff format) utføres analyse automatisk for å generere en Sammendrag-fil som viser prosentandelen av både celle-dekket områder og bunnen og hastigheten på cellen migrasjon, med forskjellige tidsintervaller.
I dette arbeidet, ved hjelp av en frosk-hud AMP-avledet dvs Esc(1-21) og dens diastereomer Esc(1-21) - 1 c13og en bronkial cellen linje uttrykke funksjonelle CF transmembrane konduktans regulator (CFTR)14,15, et eksempel på peptid-indusert celle migrasjon med ubehandlet (kontroll) eksempler er gitt. Merk at airway epitel og CFTR spille en avgjørende rolle i å opprettholde lungefunksjonen og såret reparasjon16. Videre gjennom selektiv hemmere (f.eks AG1478)17 av epidermal vekstfaktor reseptor (EGFR), bevis på at overføringen av bronkial celler forårsaket av de nevnte peptidene innebærer aktivering av EGFR12, 18 er rapportert.
Oppsummert er er målet med denne prosedyren å vise hvordan bruken av slike silikon kultur setter representerer en rask og lett tilgjengelig analysen å nøyaktig fastslå migrering av tilhenger celler (f.eks bronkial epitelceller) og den molekylære mekanismer som styrer slike hendelser.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="852">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Minimal essential medium (MEM)&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB2071L</td>
			<td style="width:256px;">Warm in 37 &#176;C water bath before use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Glutamine</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3000D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Heat inactivated Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECS0180DH&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Penicillin and Streptomycin</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3001D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Puromycin</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P8833</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Trypsin/EDTA 1X in PBS</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3052D</td>
			<td>Warm at room temperature before use</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:299px;">DPBS without calcium and magnesium (CMF-PBS)</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">DPBS with calcium and magnesium (PBS)</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Ibidi Culture-Insert 2 well</td>
			<td style="width:179px;">Ibidi&#160;</td>
			<td style="width:119px;">80209</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Wimasis Image Analysis</td>
			<td style="width:179px;">Ibidi&#160;</td>
			<td style="width:119px;">30002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PRISM software&#160;</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td style="width:119px;">version 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel in vitro wound healing assay to evaluate cell migration

Formålet med dette arbeidet er å vise en roman metode for å vurdere muligheten for noen immunmodulerende molekyler, som antimikrobielle peptider (ampere), å stimulere celle migrasjon. Viktigere, er celle migrasjon en hastighetsbegrensning hendelse under sårhelende prosessen å reetablere integritet og normal funksjon av vev lag etter skader. Fordelen med denne metoden over klassisk analysen, som er basert på en manuelt laget ripe i en celle monolayer, er bruk av spesielle silikon kultur setter gir to avdelinger for å opprette en celle-fri pseudo såret felt med en godt definert bredde (500 μm ). I tillegg, på grunn av en automatiserte image analyse plattform er det mulig å raskt få kvantitative data på hastigheten på såret nedleggelse og celle migrasjon. Mer presist, vises effekten av to frosk-hud forsterkere på overføringen av bronkial epitelceller. Videre, forbehandling av disse cellene med bestemte hemmere vil gi informasjon om molekylære mekanismer underliggende slike hendelser.

Denne protokollen ble brukt til å bestemme sårheling effekten av Esc(1-21) og Esc(1-21) - 1 c i form av celle migrasjon aktivitet indusert på bronkial epitelceller uttrykke den funksjonelle CFTR. I denne analysen, kultur setter ble plassert i brønner av en 12-vel plate, og hvert kammer var sådd med 35 000 celler i MEMg med 10% FBS. Cellene nådd komplett samløpet innen 24 h. etterpå, en 500 μm gap ble generert og hver godt var fylt med MEMg som inneholder peptid i ulike konsentras...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration at JoVE.com

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Her presenterer vi en protokoll for å evaluere effekten av peptider på overføringen av bronkial epitelceller. Denne metoden gir rask og svært reproduserbar obtainment av kvantitative data på hastigheten av celle migrasjon og såret nedleggelse.

En roman In Vitro sår helbredelse analysen for å vurdere celle migrasjon

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Competitive Homing Assays to Study Gut-tropic T Cell Migration

In order to exert their function lymphocytes need to leave the blood and migrate into different tissues in the body. Lymphocyte adhesion to endothelial ...

A Quantitative Evaluation of Cell Migration by the Phagokinetic Track Motility Assay

En kvantitativ vurdering av Cell Migration ved Phagokinetic Track Motilitet Assay

Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Kvantitativ<em&gt; In vitro</em&gt; Analysen for å måle Neutrophil vedheft til Aktiverte primære humane mikrovaskulær endotelceller under statiske betingelser

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro analysen å evaluere virkningen av immunoregulatory Pathways på HIV-spesifikke CD4 T Cell effektorfunksjon

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

Introduksjon Kokulturanalyse for å vurdere patogenindusert nøytrofil transepiteriemigrasjon

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Bildebasert flowcytometrisystemer Technique å evaluere Endringer i Granulocytt Funksjon<em&gt; In Vitro</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Gu&#233;rin

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-GuÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â©rin

En CFSE basert analyse for å studere migrasjon av murine Skin dendrittiske celler i Tømming lymfeknuter Under infeksjon med<em&gt; Mycobacterium bovis</em&gt; Bacille Calmette-Guérin

Dendritic cells (DCs) are important for initiating immune responses, in part through their ability to acquire and shuttle antigen to the draining lymph ...

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

Utvikling og identifikasjon av en Novel undergruppe av menneskelige nøytrofilmedierte avledet Giant Fagocytter<em&gt; In Vitro</em

Neutrophils (PMN) are best known for their phagocytic functions against invading pathogens and microorganisms. They have the shortest half-life amongst ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Bruk av en Monocyte ett lag Assay å evaluere Fcy Receptor-mediert Fagocytose

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

En High-throughput Kompatibel Assay å evaluere Drug Effekt mot macrophage passert<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...