Name: a novel in vitro wound healing assay to evaluate cell migration
Uploaded: 2018-03-17T13:00:00
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Este trabajo fue apoyado por fondos de la Universidad la Sapienza de Roma y la Fundación italiana de investigación de Fibrosis Quística (proyecto FFC #11/2014 aprobada por delegaciones de FFC de Siena, Sondrio Valchiavenna, Cerea Il Sorriso di Jenny y Pavía). Parte de este trabajo fue apoyado también por FILAS Grant Prot. FILAS-RU-2014-1020.
Agradecemos al Dr. Loretta Ferrera (U.O.C. Genetica Medica, Istituto Giannina Gaslini, Genova, Italia) para proporcionar a las células epiteliales bronquiales.

1. preparación de la célula
<ol><li>Semilla de 2.5x106 células en 10 mL del mínimo esencial Medium (MEM) suplementado con glutamina 2 mM (MEMg), más 10% de suero bovino fetal (FBS), antibióticos (0,1 mg/mL de penicilina y estreptomicina) y puromicina (0,5 μg/mL para la selección y mantenimiento de la línea de la célula) en un matraz T75. Incube el frasco a 37 ° C y 5% de CO2 durante 2 días. Antes de comenzar el experimento, comprobar la confluencia de las células bajo un microscopio i...

<ol>
	<li>Enyedi, B., Niethammer, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+epithelial+wound+detection.">Mechanisms of epithelial wound detection.</a> Trends Cell Biol. 25, 398-407 (2015).</li><li>Kujath, P., Kujath, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complicated+skin,+skin+structure+and+soft+tissue+infections+-+are+we+threatened+by+multi-resistant+pathogens?.">Complicated skin, skin structure and soft tissue infections - are we threatened by multi-resistant pathogens?.</a> Eur J Med Res. 15, 544-553 (2010).</li><li>Moreau-Marquis, S., Stanton, B. A., O'Toole, G. 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T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+defective+cystic+fibrosis+airway+epithelial+wound+repair+after+CFTR+rescue.">Improvement of defective cystic fibrosis airway epithelial wound repair after CFTR rescue.</a> Eur Respir J. 40, 1390-1400 (2012).</li><li>Gan, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidermal+growth+factor+receptor+(EGFR)+tyrosine+kinase+inhibitor+AG1478+increases+the+formation+of+inactive+untethered+EGFR+dimers.+Implications+for+combination+therapy+with+monoclonal+antibody+806.">The epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor AG1478 increases the formation of inactive untethered EGFR dimers. Implications for combination therapy with monoclonal antibody 806.</a> J Biol Chem. 282, 2840-2850 (2007).</li><li>Tokumaru, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+keratinocyte+migration+via+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+by+the+antimicrobial+peptide+LL-37.">Induction of keratinocyte migration via transactivation of the epidermal growth factor receptor by the antimicrobial peptide LL-37.</a> J Immunol. 175, 4662-4668 (2005).</li><li>Tjabringa, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antimicrobial+peptide+LL-37+activates+innate+immunity+at+the+airway+epithelial+surface+by+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor.">The antimicrobial peptide LL-37 activates innate immunity at the airway epithelial surface by transactivation of the epidermal growth factor receptor.</a> J Immunol. 171, 6690-6696 (2003).</li><li>Di Grazia, A., Luca, V., Segev-Zarko, L. A., Shai, Y., Mangoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporins+A+and+B+stimulate+migration+of+HaCaT+keratinocytes+and+kill+intracellular+Staphylococcus+aureus.">Temporins A and B stimulate migration of HaCaT keratinocytes and kill intracellular Staphylococcus aureus.</a> Antimicrob Agents Chemother. 58, 2520-2527 (2014).</li></ol>

Migración celular es un proceso esencial en muchos eventos fisiológicos y patológicos, incluyendo la cicatrización de heridas, desarrollo embrionario y metástasis del cáncer. El procedimiento básico para el estudio de la migración de la célula en vitro implica: (i) la creación de una monocapa de células, (ii) la producción de una pseudo-herida en la capa confluente de células, (iii) la captura de imágenes en diferentes intervalos de tiempo hasta que la herida cierre se alcanza y (iv) el análisis d...

En gran parte es conocido que la cicatrización de heridas en los animales es un proceso fundamental para restablecer la integridad y la función normal de las capas de tejido después de la lesión1. A pesar de superficies epiteliales expuestas al medio externo (por ejemplo, la piel, vías respiratoria y tracto gastrointestinal) forman una barrera protectora de insultos físicos y químicos, la formación de heridas puede ocurrir fácilmente, especialmente después cirugía o infecciones microbianas2. Por ejemplo, la colonización del tejido pulmonar por el bacteriano patógeno oportunista Pseudomonas aeruginosa, sobre todo en enfermos de fibrosis quística (FQ), lleva a daño del epitelio de las vías aéreas con la consecuente insuficiencia respiratoria3, 4. La cicatrización es un mecanismo de reparación de host complejo para restaurar la arquitectura normal de un tejido lesionado5. Se caracteriza por la inflamación inicial, seguida de un período de regeneración abarca epithelialization, angiogénesis y remodelación tisular con la producción de colágeno y de la célula diferenciación6,7,8 . Para asegurar la integridad epitelial y para controlar la proliferación microbiana, todos los organismos vivos producen moléculas de defensa, incluyendo péptidos antimicrobianos (AMPs)9,10. El proceso de cicatrización es muy difícil simular en vitro debido a la falta de restos celulares y las interacciones complejas entre diferentes tipos de células. Sin embargo, la capacidad en vitro de un péptido para acelerar el cierre de una herida pseudo estimulando la migración de células epiteliales es indicativa de su capacidad para sanar un epitelio comprometido. De hecho, migración celular es un evento de limitación de velocidad en la cicatrización de heridas, y estudiar los factores que pueden afectar la migración celular ayudará a terapias objetivo para mejorar la cicatrización.
Aquí, un ensayo experimental altamente reproducible se proporciona basado en silicona especial cultura insertos para evaluar la migración de células in vitro. Se basa en la creación de un espacio μm 500 (pseudo-herida) sobre una monocapa celular confluente. Las células en el borde del campo artificial "herido" comenzará a migrar a la zona libre de células, formando nuevos contactos célula-célula. La inserción de la cultura representa una nueva herramienta para experimentos de cicatrización rápida. Se proporcionan dos depósitos separados por una pared μm 500, y pueden ser colocados correctamente en una placa de 3 cm plato o en el pozo de una placa de 12 pozos. Llena cada compartimiento del parte movible con una suspensión permite a las células crecer en cada área designada hasta confluencia, mientras que la extracción del inserto generará un espacio libre de células de aproximadamente 500 μm (el mismo ancho que el muro de separación). Un medio de cultivo celular adecuada complementado con un compuesto de prueba puede añadirse al plato placa/bien. Luego, el cierre de la brecha puede ser visualizado en diferentes intervalos de tiempo bajo un microscopio invertido, preferiblemente uno equipado con una cámara de vídeo para la adquisición de la imagen. Por último, medición de los cambios en el área de célula cubierta por el programa de análisis de imagen automatizado basado en web permite la cuantificación de la velocidad de la herida cierre y migración celular. En general, este método es un paso adelante en relación con el análisis clásico, donde un cero se hizo manualmente mediante la incisión de monocapas confluentes de células con una aguja estéril o pipeta tip11. De hecho, el último procedimiento puede destruir el plástico inferior del plato placa/pozo y el revestimiento de la superficie, creando arrugas. Además, el área de "herido" no tiene un ancho bien definido a lo largo de toda la longitud de la brecha, como esto depende altamente de la presión aplicada por los investigadores a la punta de aguja. Además, las células desalojadas pueden formar cúmulos de células vivas y muertas en los bordes del scratch; por otra parte, la propagación de las células vivas en el área de "herido" puede interferir con la velocidad de migración de la célula, generando resultados no reproducibles12.
Además, gracias a una plataforma de análisis de imagen cero, los usuarios pueden rápidamente recibir (en minutos) datos cuantitativos sobre el comportamiento migratorio de las celdas seleccionadas sin necesidad de adquirir software adicional. Esta plataforma es capaz de analizar imágenes de microscopía de contraste de fase de baja (~ 5 X), mediana (~ 10 X) y aumento alto (~ 20 X). Después de subir un archivo zip de imágenes (*.jpg, *.jpeg, *.jp2, *.png, *.gif, formato *.tiff) automáticamente se realizaron el análisis para generar un archivo de resumen que muestra el porcentaje de zonas cubiertas de células y zonas cero, así como la velocidad de la célula migración, a intervalos de tiempo distintos.
En este trabajo, mediante el uso de un amplificador-derivado de la piel de rana, es decir, Esc(1-21) y su diastereomer Esc(1-21) - 1 c13y una línea de células bronquiales expresando el funcional CF conductancia transmembrana (CFTR) del regulador14,15, se proporciona un ejemplo de la migración celular inducida por el péptido en comparación con las muestras sin tratamiento (control). Tenga en cuenta que el epitelio de las vías respiratorias y el CFTR desempeñan un papel crucial en el mantenimiento de la función pulmonar y16de la reparación de la herida. Además, mediante inhibidores selectivos (por ejemplo, AG1478)17 de receptor del factor de crecimiento epidérmico (RFCE), evidencia que la migración de las células bronquiales inducida por los péptidos mencionados implica activación de EGFR12, 18 se divulga.
En Resumen, el objetivo de este procedimiento es mostrar cómo el uso de estos rellenos de silicona cultura representa un ensayo rápido y de fácil acceso para determinar con precisión la migración de células adherentes (p. ej., células epiteliales bronquiales) y molecular mecanismos que controlan este tipo de eventos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="852">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Minimal essential medium (MEM)&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB2071L</td>
			<td style="width:256px;">Warm in 37 &#176;C water bath before use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Glutamine</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3000D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Heat inactivated Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECS0180DH&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Penicillin and Streptomycin</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3001D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Puromycin</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P8833</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Trypsin/EDTA 1X in PBS</td>
			<td style="width:179px;">Euroclone</td>
			<td style="width:119px;">ECB3052D</td>
			<td>Warm at room temperature before use</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:299px;">DPBS without calcium and magnesium (CMF-PBS)</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">DPBS with calcium and magnesium (PBS)</td>
			<td style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Ibidi Culture-Insert 2 well</td>
			<td style="width:179px;">Ibidi&#160;</td>
			<td style="width:119px;">80209</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Wimasis Image Analysis</td>
			<td style="width:179px;">Ibidi&#160;</td>
			<td style="width:119px;">30002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PRISM software&#160;</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td style="width:119px;">version 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel in vitro wound healing assay to evaluate cell migration

El objetivo de este trabajo es mostrar un nuevo método para evaluar la capacidad de algunas moléculas inmunomoduladoras, como péptidos antimicrobianos (AMPs), para estimular la migración celular. Lo importante, migración celular es un evento de limitación de velocidad durante el proceso de cicatrización para restablecer la integridad y la función normal de las capas de tejido después de la lesión. La ventaja de este método sobre el análisis clásico, que se basa en un rasguño hecho manualmente en una monocapa de células, es que el uso de la cultura de silicona especial inserta proporcionando dos compartimientos para crear un campo de pseudo-herido libre con un ancho bien definido (500 μm ). Además, debido a una plataforma de análisis de imagen automatizado, es posible obtener rápidamente datos cuantitativos sobre la velocidad de la herida cierre y migración celular. Más precisamente, se mostrará el efecto de dos amplificadores de piel de rana en la migración de células epiteliales bronquiales. Además, el tratamiento previo de estas células con inhibidores específicos proporcionará información sobre los mecanismos moleculares subyacentes a este tipo de eventos.

Este protocolo se utilizó para determinar el efecto de Esc(1-21) y Esc(1-21) - 1 c en términos de actividad de la migración celular inducida en las células epiteliales bronquiales expresando la CFTR funcional de cicatrización. En este ensayo, cultura insertos fueron colocadas en los pocillos de una placa de 12 pozos, y cada compartimiento fue sembrado con 35.000 células en MEMg suplementado con 10% FBS. Las células alcanzaron confluencia completa dentro de 24 horas después, se gen...

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A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Aquí, presentamos un protocolo para evaluar el efecto de péptidos sobre la migración de células epiteliales bronquiales. Este método permite la obtención de datos cuantitativos sobre la velocidad de cierre herida de migración celular rápida y altamente reproducible.

Una novela In Vitro de la herida curativa ensayo para evaluar la migración de la célula

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

The goal of this procedure is to show how to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such antimicropeptides, to stimulate cell migration, which is a rate-limiting event during the wound-healing process. Generally speaking, the basic procedure to study cell migration in vitro involves the creation of cell monolayer, the production of pseudo-wound, the capture of images at different time intervals until wound closure is reached, and analysis of the image sequence to quantify cell migration. Now, the advantage of this method over the classic assay, which is based on a manually made scratch, is due to the usage of special silicone culture inserts to create the pseudo-wound field, which is completely free of cells and with a very well-defined width, 500 micrometer.In addition, thanks to a web-based, automated image analysis program, it is possible to rapidly receive within minutes quantitative data on the speed of wound closure and cell migration. So overall, this is a reliable experimental technique that can be applied to any kind of adherent cells with very high reproducibility of data. Here, it is provided, as an example, the effect of a frog skin antimicropeptide on the migration of bronchial epithelial cells and how pretreatment of these cells with specific inhibitors can give information on the molecular mechanism underlying such events.More precisely, it will be shown how the peptide-induced cell migration involves activation of epidermal growth factor receptor. To begin experiment, remove the flask containing cells from the cell culture incubator, and check the circumference on an inverted microscope equipped with an automatic image acquisition system. If 90%of complete confluence is reached, move to a biosafety hood, and carefully aspirate the culture medium using a 10-milliliter plastic pipette under sterile conditions and gently discard the medium into waste bottle.Wash the cells with six milliliter PBS without calcium and magnesium, that is, CMF. Gently rock the flask manually and discard CMF. Then, add other 10 milliliter CMF to further remove cell debris and non-attached cells.At this point, close the flask, and put it back into the cell culture incubator for 10 minutes. Take out the flask, discard CMF, and gently add two milliliter trypsin-EDTA to detach cells from the plastic surface. Gently rock the flask manually, allowing the solution to completely cover the cells, and incubate the flask for additional 10 minutes.Afterwards, remove the flask from the incubator, and check whether the trypsin addition process is complete. If this is the case, the cells will be in suspension and will appear rounded under the microscope. To inactivate trypsin, add 10 milliliter culture media supplemented with 10%heat-inactivated bovine serum, and carefully wash the flask.Collect the cell suspension, transfer this volume into a conical 50-milliliter tube, and centrifuge the sample. After centrifugation, check the pellet formation, aspirate the supernatant, and resuspend the cell pellet in six milliliter culture medium supplemented with serum. Pipette the cell suspension up and down for several times to break up any clumps formation.This process may take some minutes. Afterwards, take out 10 microliter with a micropipette tip, and inject the volume under the cover glass of a Burker or Neubauer chamber and count the cell number. In each well of a 12-well plate, put the culture insert with the help of sterile tweezers.Each insert is provided of two compartments separated by a 500-micrometer wall, and there's a sticky underside to allow adhesion. However, by means of tweezers, apply some pressure along the insert edges to fix them to the surface of the plate. Fill each compartment of the insert with 70 microliter of cell suspension containing about 3.5 by 10 to fourth cells per chamber.Importantly, the concentration of cells applied into each compartment depends on the type of cells. It is recommended to use a cell density that leads to complete confluence within 24 hours. Under the microscope at four-fold magnification, check that cells are not leaking from the insert compartments, and then incubate the plate for 24 hours.After incubation, gently remove the inserts with sterile tweezers without breaking the cell monolayers, and transfer the insert onto absorbent paper. Wash the cells by adding one milliliter medium per well. Be careful not to add the medium directly on top of cell monolayers, to avoid their disruption.Close the plate, and gently rock it manually. Aspirate the medium, and replace it with one milliliter of fresh medium per well. Visualize the cell-free gaps under the microscope, and acquire images at time zero.Withdraw the media from the wells, and add PBS supplemented with calcium and magnesium. Shake the plate, remove PBS, and finally add the test compounds to the wells. For untreated control samples, one millimeter medium is used.Incubate the plate. For each sample, observe the cell migration under the microscope at four-fold magnification, and acquire images after 15, 20, and 24 hours incubation. During this step, try to capture images in the same areas as for time zero.The choice of time intervals at which images are captured depends on the migration speed of the selected cells. When the experiment is finished, select images for each sample at the different time intervals, and create a zip file. It is important to have at least three replicates for each sample at each time interval.Open the automated Image Analysis Wimasis program, and upload the zip file using the lowest magnification. The program will automatically provide by email a summary file containing the experimental data of cell-covered area and scratch areas as percentages of each single sample, for example, samples 1a and 2a, at the selected time points. Calculate a mean value of all samples at time zero.Normalize all data with respect to the mean value at time zero. Calculate a mean value of all samples at each time point and the relative standard error. By using two-way ANOVA test, perform statistical analysis.The obtained data can be plot into a graph as a histogram showing the percentage of cell-covered area at different time points for different sample groups. These histograms show the wound closure obtained after 15, 20, and 24 hours treatment of bronchial cells with different concentrations of the antimicropeptide esculentin 1-21-1c or esculentin 1-21 in comparison to the control. As pointed out by the histograms and some representative micrographs, esculentin 1-21-1c is more efficient in promoting re-epithelialization of pseudo-wound in bronchial cells induced in the almost-complete closure of the wound field within approximately 20 hours at one micromolar, while a higher concentration is needed for esculentin 1-21, that is, 10 micromolar.To study the role of some receptors, such as epidermal growth factor receptor, on cell migration, pretreat the cell monolayers with a specific inhibitor, for example, the compound AG1478. To this purpose, before removing the insert, aspirate the medium in each compartment, wash it once, and add 70 microliter of media supplemented with five micromolar AG1478. Incubate the plate for 30 minutes.Then, remove the insert with tweezers, and proceed as described earlier. These are the final data showing that the peptide-induced cell migration involves activation of epidermal growth factor receptor. Indeed, after pretreatment with inhibitor AG1478, the percentage of cell-covered area is significantly reduced at all time intervals compared to the results found when the cells are not pre-incubated with AG1478 before adding the peptide.In conclusion, the described method has a high potential to significantly improve the understanding on the migratory feature of different types of cells, as well as on the selection of the most promising wound-healing promoters and/or inhibitors, within a short time and with a high accuracy.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

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Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Investigación

Inmunología e Infección

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Cuantitativo<em&gt; In vitro</em&gt; Ensayo para medir la adhesión de neutrófilos al Activado Primaria células endoteliales microvasculares humanas en condiciones estáticas

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

Ensayo in vitro para evaluar el impacto de inmunoreguladoras Caminos de CD4 T función específica para el VIH efector celular

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Ensayo de cocultivo para evaluar la migración transepitelial de neutrófilos inducida por patógenos

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Imagen basada en Citometría de Flujo Técnica para evaluar los cambios en función de los granulocitos<em&gt; In Vitro</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Gu&#233;rin

Un ensayo basado en CFSE para estudiar la migración de la piel murina de células dendríticas en los nodos linfáticos de drenaje durante la infección con<em&gt; Mycobacterium bovis</em&gt; Bacilo de Calmette-Guérin

Dendritic cells (DCs) are important for initiating immune responses, in part through their ability to acquire and shuttle antigen to the draining lymph ...

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

El desarrollo y la identificación de una subpoblación de Novela derivada de neutrófilos humanos fagocitos gigante<em&gt; In Vitro</em

Neutrophils (PMN) are best known for their phagocytic functions against invading pathogens and microorganisms. They have the shortest half-life amongst ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

El uso de una monocapa de monocitos Ensayo para evaluar la fagocitosis mediada por el receptor Fc gamma

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

Un ensayo compatible de alto rendimiento para evaluar la eficacia del fármaco contra los macrófagos a pases<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

Un novedoso sistema de alimentador-libre para la producción masiva de células de asesino naturales murinos In Vitro

Natural killer (NK) cells belong to the innate immune system and are a first-line anti-cancer immune defense; however, they are suppressed in the tumor ...