Name: the pilocarpine model of temporal lobe epilepsy and eeg monitoring using radiotelemetry system in mice
Uploaded: 2018-02-27T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice at JoVE.com

Questo lavoro è stato supportato dal grant National Research Foundation di Corea (NRF) finanziata dal governo coreano (NRF-2014R1A1A3049456) e una sovvenzione dalla Corea Health Technology R & D Project attraverso la Corea salute industria Development Institute (KHIDI), finanziato dal Ministero della salute & benessere, Repubblica di Corea (HI15C2854).

Tutte le procedure sperimentali sono state approvate dal comitato etico della Università Cattolica di Corea e sono state effettuate in conformità della istituti nazionali di salute Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio (NIH pubblicazioni n. 80-23).
1. SE induzione
<ol><li>Acquisto di topi C57BL/6NHsd maschio 8-settimana-vecchio e pesare ogni mouse. Quindi, utilizzare un pennarello per segnare le code di tutti i topi per la loro facile identificazione durante l'induzione di SE...

<ol>
	<li>Chang, B. S., Lowenstein, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epilepsy.">Epilepsy.</a> N Engl J Med. 349 (13), 1257-1266 (2003).</li><li>Scharfman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobiology+of+epilepsy.">The neurobiology of epilepsy.</a> Curr Neurol Neurosci Rep. 7 (4), 348-354 (2007).</li><li>Rakhade, S. N., Jensen, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epileptogenesis+in+the+immature+brain:+emerging+mechanisms.">Epileptogenesis in the immature brain: emerging mechanisms.</a> Nat Rev Neurol. 5 (7), 380-391 (2009).</li><li>Cavalheiro, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pilocarpine+model+of+epilepsy.">The pilocarpine model of epilepsy.</a> Ital J Neurol Sci. 16 (1-2), 33-37 (1995).</li><li>Curia, G., Longo, D., Biagini, G., Jones, R. S., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pilocarpine+model+of+temporal+lobe+epilepsy.">The pilocarpine model of temporal lobe epilepsy.</a> J Neurosci Methods. 172 (2), 143-157 (2008).</li><li>Morimoto, K., Fahnestock, M., Racine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kindling+and+status+epilepticus+models+of+epilepsy:+rewiring+the+brain.">Kindling and status epilepticus models of epilepsy: rewiring the brain.</a> Prog Neurobiol. 73 (1), 1-60 (2004).</li><li>Levesque, M., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+kainic+acid+model+of+temporal+lobe+epilepsy.">The kainic acid model of temporal lobe epilepsy.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 37 (10), 2887-2899 (2013).</li><li>Sharma, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesial+temporal+lobe+epilepsy:+pathogenesis,+induced+rodent+models+and+lesions.">Mesial temporal lobe epilepsy: pathogenesis, induced rodent models and lesions.</a> Toxicol Pathol. 35 (7), 984-999 (2007).</li><li>Hellier, J. L., Dudek, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemoconvulsant+model+of+chronic+spontaneous+seizures.">Chemoconvulsant model of chronic spontaneous seizures.</a> Curr Protoc Neurosci. 9, 19 (2005).</li><li>Pitkanen, A., Lukasiuk, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+cellular+basis+of+epileptogenesis+in+symptomatic+epilepsy.">Molecular and cellular basis of epileptogenesis in symptomatic epilepsy.</a> Epilepsy Behav. 14, 16-25 (2009).</li><li>Mathern, G. W., Adelson, P. D., Cahan, L. D., Leite, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+neuron+damage+in+human+epilepsy:+Meyer's+hypothesis+revisited.">Hippocampal neuron damage in human epilepsy: Meyer's hypothesis revisited.</a> Prog Brain Res. 135, 237-251 (2002).</li><li>Turski, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limbic+seizures+produced+by+pilocarpine+in+rats:+behavioural,+electroencephalographic+and+neuropathological+study.">Limbic seizures produced by pilocarpine in rats: behavioural, electroencephalographic and neuropathological study.</a> Behav Brain Res. 9 (3), 315-335 (1983).</li><li>Brulet, R., Zhu, J., Aktar, M., Hsieh, J., Cho, K. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+with+conditional+NeuroD1+knockout+display+reduced+aberrant+hippocampal+neurogenesis+but+no+change+in+epileptic+seizures.">Mice with conditional NeuroD1 knockout display reduced aberrant hippocampal neurogenesis but no change in epileptic seizures.</a> Exp Neurol. 293, 190-198 (2017).</li><li>Cho, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aberrant+hippocampal+neurogenesis+contributes+to+epilepsy+and+associated+cognitive+decline.">Aberrant hippocampal neurogenesis contributes to epilepsy and associated cognitive decline.</a> Nat Commun. 6, 6606 (2015).</li><li>Cavalheiro, E. A., Santos, N. F., Priel, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pilocarpine+model+of+epilepsy+in+mice.">The pilocarpine model of epilepsy in mice.</a> Epilepsia. 37 (10), 1015-1019 (1996).</li><li>Racine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modification+of+seizure+activity+by+electrical+stimulation.+II.+Motor+seizure.">Modification of seizure activity by electrical stimulation. II. Motor seizure.</a> Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 32 (3), 281-294 (1972).</li><li>Hester, M. S., Danzer, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accumulation+of+abnormal+adult-generated+hippocampal+granule+cells+predicts+seizure+frequency+and+severity.">Accumulation of abnormal adult-generated hippocampal granule cells predicts seizure frequency and severity.</a> J Neurosci. 33 (21), 8926-8936 (2013).</li><li>Shibley, H., Smith, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pilocarpine-induced+status+epilepticus+results+in+mossy+fiber+sprouting+and+spontaneous+seizures+in+C57BL/6+and+CD-1+mice.">Pilocarpine-induced status epilepticus results in mossy fiber sprouting and spontaneous seizures in C57BL/6 and CD-1 mice.</a> Epilepsy Research. 49 (2), 109-120 (2002).</li><li>Borges, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+and+glial+pathological+changes+during+epileptogenesis+in+the+mouse+pilocarpine+model.">Neuronal and glial pathological changes during epileptogenesis in the mouse pilocarpine model.</a> Exp Neurol. 182 (1), 21-34 (2003).</li><li>Pavlova, M. K., Shea, S. A., Bromfield, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Day/night+patterns+of+focal+seizures.">Day/night patterns of focal seizures.</a> Epilepsy Behav. 5 (1), 44-49 (2004).</li></ol>

Questo lavoro descrive le procedure sperimentali per l'induzione di SE e la valutazione dei grippaggi cronici.
Diversi fattori possono influire sulla riuscita induzione SE. Accurato monitoraggio del comportamento secondo la scala di Racine è fondamentale per lo sviluppo di SRS. Testa annuendo, clono arto anteriore, allevamento e cadere sono i tratti distintivi del comportamento di acuta crisi epilettiche in via di sviluppo SE fase4,16...

TLE è uno dei più comuni epilessie acquisite1. Persone con epilessia crisi epilettiche ricorrenti a seguito di attività di un neurone anormale nel cervello2,3. Dato che spesso la TLE è insolubile, è fondamentale capire i meccanismi di base alla base dello sviluppo dell'epilessia.
Modelli animali che possono ricapitolare le caratteristiche chiave di TLE umano possono offrire migliore apprezzamento della patofisiologia TLE, permettendoci di facilmente controllare e manipolare fattori critici nella epilettogenesi. Fra loro, SE chemoconvulsants-indotto è stato ampiamente usato4,5. A differenza di altri modelli di epilessia, come la stimolazione elettrica che non mostra nessuna sclerosi ippocampale e robusto SRS6,7,8, l'iniezione sistemica di chemoconvulsants può imitare la patogenesi cliniche di TLE umana, cioè, la ferita di cervello iniziale, un periodo latente e un epilettico cronico tappa manifestandosi SRS5,9,10. Pertanto, questa tecnica può essere utilizzata in vari studi che spiega i meccanismi di danno cerebrale acuto, epilettogenesi o soppressione di sequestro. Inoltre, alterazioni istopatologiche indotte da chemoconvulsants sono simili a quelli osservati in TLE umana, fornendo un ulteriore spiegazione razionale per l'uso di TLE modelli del roditore10,11,12. In particolare, danni strutturali che coinvolgono l'ippocampo sono state costantemente riprodotte in entrambi i modelli kainic SE indotta da acido e pilocarpina. Tuttavia, rispetto all'iniezione di acido kainic, il modello di Pilocarpina può produrre più robusto SRS in topi, che possono offrire vantaggi considerevoli per studiare l'epilessia cronica quando si considera l'ampia disponibilità di topi transgenici linee5, 13 , 14 , 15. Inoltre, progressione di sequestro dopo l'iniezione di Pilocarpina è generalmente più veloce del modello di acido kainic, fornendo la prova supplementare per l'uso efficace di un modello di pilocarpina di epilessia.
Qui, noi dimostrare un metodo di induzione SE tramite l'iniezione i.p. di pilocarpina e realizzando video e controllo di EEG nell'epilessia cronica.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:829px;" width="829">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:189px;">C57BL/6</td>
			<td style="width:233px;">Envigo</td>
			<td style="width:175px;">C57BL/6NHsd</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Scopolamine methyl nitrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2250</td>
			<td>Make 10X stock</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Terbutaline hemisulfate salt</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T2528</td>
			<td>Make 10X stock</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Pilocarpine hydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Intensive care unit</td>
			<td>Daejong instrument industry Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>28~30&#8451;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ketamine hydrochloride</td>
			<td>Yuhan corporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Xylazine hydrochloride</td>
			<td>Bayer Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Diazepam</td>
			<td>SAMJIN</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Castor oil (Kolliphor EL)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5135</td>
			<td>Polyoxyl 35 hydrogenated castor oil</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Saline</td>
			<td>Daihan pharm. Co.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">5% Dextrose</td>
			<td>Daihan pharm. Co.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Iodine solution (Povidin)</td>
			<td>Firson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">vet ointment (Terramycin)</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Blue Nylon</td>
			<td>AILEE</td>
			<td>NB617</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mupirocin (Bearoban)</td>
			<td>Daewoong Pharmaceutical Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ketoprofen</td>
			<td>Samchundang Pharm. Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Gentamicin</td>
			<td>Huons, Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1 mL syringe</td>
			<td>Sung shim medial Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">26 guage needle</td>
			<td>Sung shim medial Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>26 G * 13 mm (1/2&#34;)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">30 guage needle</td>
			<td>Sung shim medial Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>30 G * 13 mm (1/2&#34;)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Razor blade</td>
			<td>Dorco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Drill</td>
			<td>Saeshin precision Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>207A, 35K (speed)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Telemetry video/EEG system</td>
			<td>Data sciences International. Inc.</td>
			<td>Version 5.20-SP6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Implantable transmitter</td>
			<td>Data sciences International. Inc.</td>
			<td>ETA-F10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Screw</td>
			<td>Sungho Steel</td>
			<td></td>
			<td>M1.4, 2 mm length stainless steel</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Vertex dental material&#160;</td>
			<td>Dentimex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Acetone</td>
			<td>Duksan pure chemicals Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>CAS 67-64-1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>millipore</td>
			<td>1.04005.1000</td>
			<td>4 %&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9378</td>
			<td>30 % solution in 0.01 M PBS</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cresyl violet acetate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ethanol</td>
			<td>EMD Millipore Co.</td>
			<td>UN1170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">xylene</td>
			<td>Duksan pure chemicals Co., Ltd.</td>
			<td>UN1307</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Acetic acid glacial</td>
			<td>Junsei chemical</td>
			<td>31010-0350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">FSC33 Clear&#160;</td>
			<td>Leica biosystems</td>
			<td></td>
			<td>OCT compound for tissue freezing</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DPX Mounting for histology</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Forceps</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Scissors</td>
			<td>Solco biomedical</td>
			<td>02-2445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Stereotaxic frame</td>
			<td>David Kopf Instruments</td>
			<td>E51070012</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the pilocarpine model of temporal lobe epilepsy and eeg monitoring using radiotelemetry system in mice

Epilessia del lobo temporale (TLE) è un disturbo neurologico comune nell'età adulta. Per gli studi traslazionali dell'epilessia cronica, indotti da pilocarpina epilepticus di condizione (SE) è frequentemente selezionati per ricapitolare i grippaggi ricorrenti spontanei (SRS). Qui presentiamo un protocollo di induzione SE da intraperitoneale (i.p.) l'iniezione di pilocarpina e monitoraggio dei grippaggi ricorrenti cronici negli animali vivi, utilizzando un sistema di elettroencefalogramma (EEG) e di telemetria wireless video. Abbiamo dimostrato notevoli cambiamenti comportamentali che richiedono attenzione dopo l'iniezione di pilocarpina e loro correlazione con la perdita di un neurone hippocampal a 7 giorni e post-Pilocarpina 6 settimane. Inoltre descriviamo le procedure sperimentali di impianto dell'elettrodo per video e registrazione EEG e analisi della frequenza e durata dei sequestri ricorrenti cronici. Infine, si discutono i motivi possibili perché i risultati attesi non sono raggiunti in ogni caso. Questo fornisce una panoramica di base di modellazione di epilessia cronica nei topi e linee guida per la risoluzione dei problemi. Crediamo che questo protocollo può servire come base per modelli adatti di epilessia cronica ed epilettogenesi.

Successo SE può indurre la morte delle cellule ippocampali e SRS (Figura 1 e Figura 2). Abbiamo terminato grippaggi acuti del comportamento tramite l'iniezione di diazepam a 3 h dopo l'inizio SE e sacrificato i topi 7 giorni o 6 settimane più tardi.
Per controllo del video-EEG, i topi hanno ricevuti chirurgia implantare a 4 settimane dopo SE e casi SRS sono stati valu...

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The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice

Questo manoscritto descrive un metodo di indurre il epilepticus di condizione di iniezione sistemica pilocarpina e di monitoraggio spontanei sequestri ricorrenti in animali vivi, utilizzando un sistema di elettroencefalogramma e telemetria wireless video. Questo protocollo può essere utilizzato per studiare i meccanismi patofisiologici di epilessia cronica, nella epilettogenesi e grippaggi acuti.

Il modello di pilocarpina di epilessia del lobo temporale e monitoraggio EEG utilizzando il sistema di radiotelemetria in topi

Temporal lobe epilepsy (TLE) is a common neurological disorder in adulthood. For translational studies of chronic epilepsy, pilocarpine-induced status ...

Research

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Medicine

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L&#39;impianto di trasmettitori Radiotelemetry Cedendo dati su ECG, frequenza cardiaca, temperatura corporea e attività di movimento libero topi di laboratorio

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

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