Name: routine screening method for microparticles in platelet transfusions
Uploaded: 2018-01-31T13:30:00
Duration: 9 min 49 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions at JoVE.com

Мы благодарим доноров крови и персонала Канадский центр сети служб крови развития, применяемых для сбора и производства единиц тромбоцитов, используемые в данном исследовании. Мы признаем Канадский фонд для инноваций и Майкл Смит фонд для исследований в области здравоохранения для финансирования инфраструктуры в центре UBC для исследования крови. Финансирование для публикации была представлена LightIntegra Technology Inc., производитель ThromboLUX.

Следующий протокол была выполнена нормам Канадской службы крови (CBS). Добровольцев дал согласие, что их пожертвования могут быть использованы для проведения этих исследований. Концентраты тромбоцитов были подготовлены согласно CBS стандартные оперативные процедуры. Все тестирования производительности, описанных здесь была проведена в центре для исследования крови в университете Британской Колумбии, Ванкувер, Канада с институциональной утверждения Советом этики научных исследований.
1. Проверка качества управления
<ol><li>Выполните проверку контроля качества по крайней мере один раз за тестирование день для проверки надлежащей работы системы DLS. Измерьте предоставленные бусины (50 Нм радиус) следуя инструкциям производителя для использования.</li>
	<li>Получить управления флакон из холодного хранения и разрешить 15 минут, чтобы нагреть до комнатной температуры. Бисер должен сбалансировать к комнатной температуре перед использованием.</li>
	<li>Включите систему DLS до подготовки образца так 15 мин лазер теплый период завершена к тому времени, когда первый образец готов для тестирования.</li>
	<li>После запуска консоль, следуйте инструкциям на сенсорном экране войти в систему и выберите параметр тест системы для измерения образец элемента управления.</li>
	<li>Вихревой смешать флакон 10 s для обеспечения репрезентативной выборки.</li>
	<li>Заполните капилляр с бисером управления, с помощью 100 мкл фиксированным объемом пипетки, наконечник пипетки и капиллярной от тестовый набор.</li>
	<li>По завершении теста следуйте инструкциям на экране системы DLS. Примечание: Результаты теста шарик управления автоматически по сравнению с информацией, хранящейся в штрих-код бусина контроля и проход или сбой уведомления, а также образец информации показываются на экране системы DLS в конце теста.</li>
</ol>2. получение образца из концентрата тромбоцитов
Примечание: Эти шаги описывают процесс для неинвазивной выборки от переливания тромбоцитов в DLS тестирования капилляр для управления запасами обычных тромбоцитов. Обзор это показано на рисунке 1. Необходимые аксессуары: Труба герметик, ручной трубки зачистки, ножницы и всплеск щит.
<ol><li>Удалите из непроверенных данных инвентаризации концентрат тромбоцитов.</li>
	<li>Получить образец продукта тромбоцитов, либо от неиспользуемых выборки мешочек (переходите к шагу 2.3) или сегмент трубы (переходите к шагу 2.4 Если пустой или шаг 2,5 Если не пустой). Чтобы отключить мешочек трубы или трубы сегмент использовать трубы герметик. Чтобы работать трубы герметик, следуйте инструкциям производителя. Вкратце Зажим трубы быть опечатаны в точное положение между двумя подогревом челюсти. В портативное устройство, нажмите, расплавленный трубы вместе и прохладно под высоким давлением, нажимая на рычаг (продолжительность обозначается зеленый свет) обусловило постоянное, герметичность уплотнения.</li>
	<li>
Отбор проб из мешочек
	<ol>
<li>Смешать содержание тромбоцитов мешок хорошо, нежный горизонтальное движение за 5 s (чаевые от начала до конца пять раз).</li>
		<li>Откройте зажим к мешку. Мешочек эвакуированы и заполнит сам по себе. Это не необходимо полностью заполнить мешок, как только 100 мкл пример будет необходимо для тестирования DLS.</li>
		<li>Отсоедините чехол от мешок, заварены соединения труб с трубы герметик. Перейдите к шагу 3.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Отбор проб из пустых труб
	<ol>
<li>Убедитесь, что мешок тромбоцитов труб было сохранено пустое и блок трубы до сих пор на месте. Осмотрите шланги для проверки, что не существует значительное количество концентрата тромбоцитов в трубке. Если трубка не пуста по-прежнему с шагом 2.5.</li>
		<li>Закройте трубки стриптизерша на трубке как рядом труб блок максимально сжимая ручки выжать трубы между роликами.</li>
		<li>Повесить сумку вертикально и держать сжатие ручки зачистки.</li>
		<li>В то время как сохраняя зачистки закрыт, выпуск труб блок.</li>
		<li>Медленно потяните зачистки вниз пустых труб, позволяя для трубок медленно заполнить за стриптизершей. Продолжайте до ниже зачистки раздел полностью надут или зачистки находится в пределах 1 дюйм конца трубы.</li>
		<li>Каждый раз при достижении точки остановки с стриптизерши использовать трубы герметик тепла печать трубки 1 дюйм выше зачистки.</li>
		<li>Отпустите ручки стриптизерша ручной трубки.</li>
		<li>Тепло печать снова 1 до 2 дюймов выше предыдущих печать для создания этапа тестирования.</li>
		<li>Отрезать этапа тестирования от блока тромбоцитов. Этот сегмент будет использоваться для тестирования DLS.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Отбор проб из труб, который не является пустым
	<ol>
<li>Повесить сумку вертикально и освободить блок трубы.</li>
		<li>Осмотрите шланги для определения, если есть любые значительные твердые сгустки. Если существуют твердые сгустки, печать над ними таким образом, что они не могут быть лишены в сумку.</li>
		<li>Закройте трубку стриптизерша на трубке как недалеко от запечатанного концу шланга как можно.</li>
		<li>Стрип содержимое трубки в мешок, сжимая ручки выжать трубы между роликами и, сохраняя при этом зажима, стриптизерша трубки вдоль трубы продвигаться мешок.</li>
		<li>Удаление тромбоцитов мешок из подвесной крюк и осторожно смешать сумка для 5 s, наклоняя его от начала до конца пять раз сохраняя зачистки закрыт.</li>
		<li>Повесьте сумку вертикально при сохранении стриптизерша закрыт.</li>
		<li>Медленно потяните зачистки вниз пустых труб, позволяя для трубок медленно заполнить за стриптизершей. Продолжайте до ниже зачистки раздел полностью надут или зачистки находится в пределах 1 дюйм конца трубы.</li>
		<li>Каждый раз при достижении точки остановки с стриптизерши использовать трубы герметик тепла печать трубки 1 дюйм выше зачистки.</li>
		<li>Релиз зачистки.</li>
		<li>Тепло печать снова 1 до 2 дюймов выше предыдущих печать для создания этапа тестирования.</li>
		<li>Cut off и отменить последнюю часть трубы.</li>
		<li>Отрезать этапа тестирования от блока тромбоцитов. Этот сегмент будет использоваться для тестирования DLS.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Заполнение образца в DLS тестирования капилляров
<ol><li>С помощью чистой, сухой ножницы и всплеск Щит вырезать один конец мешочек трубы или тестирование сегмента. Примечание: Капиллярные, используемые для тестирования DLS должны заполняться немедленно.</li>
	<li>Заполнение капилляра, используя средство выборки (собрал 100 мкл фиксированным объемом пипетки, наконечник пипетки и капилляров), рисовать образца непосредственно из открытой сумке или сегмента трубы в капилляр.</li>
	<li>Печать в нижней части заполненные капилляров, аккуратно вставив заполненные капилляров в капилляр герметик при применении нежный твист и некоторое давление против лоток.</li>
	<li>Отсоедините 100 мкл фиксированный объем пипеткой и кончик из капилляров, гарантируя капилляра остается прочно в капилляр герметик.</li>
	<li>Выньте капилляра из лотка герметик капиллярной трубки, протрите площадку изопропиловый спирт и убедитесь, что нет пузырьков воздуха оказались в ловушке, нежно стряхивая нижней части капилляра.</li>
	<li>Поместите капилляра в системе DLS.</li>
</ol>4. выполнение теста DLS
<ol><li>Выберите параметр теста MP инициировать новый DLS тест для измерения содержания микрочастица тромбоцитов образца.</li>
	<li>Введите образец информации (пожертвование идентификационный номер (ISBT), Дата окончания коллекции/производства и код продукта) с использованием сканера штрих-кодов или вручную.</li>
	<li>Если код продукта не доступен из которого система DLS можно извлечь данные жидкости среднего, выберите соответствующий текучей среды вручную (для большинства тромбоцитов концентраты выберите плазмы, но образцы, содержащие решения добавка тромбоцитов (ССА), введите процент остаточной плазмы). Примечание: Небольшое отклонение в процентах пас от номинального 65% вызовет небольшая ошибка в вязкости (автоматически вычисляется системой DLS), которая минимально влияет на вычисляемые MP радиуса, но не % MP.</li>
	<li>Поместите капилляра в системе DLS проинструктировано и запуска теста.</li>
	<li>После завершения теста, удалите образец из капилляра держателя и распоряжаться расходных материалов надлежащим образом в соответствии с руководящими принципами Фонда. Удалите образец из капилляра держателя и распоряжаться расходных материалов надлежащим образом в соответствии с руководящими принципами Фонда.</li>
	<li>Тег тромбоцитов мешок с цветом, соответствующий результат, например оранжевый неактивированные (однородные) с % МП равна или ниже 15% и розовый для активации (разнородным) с % МП выше 15%.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56893/56893fig1.jpg"> Рисунок 1 : Метод обзор. Обзор шагов выполнялась для управления запасами обычных тромбоцитов в банке крови больницы: получение образца от тромбоцитов концентрат, загрузки образца в капилляр для измерения DLS, выполняя DLS тест, чтобы идентифицировать микрочастицы и с помощью сообщил микрочастица содержимого для идентификации активированных тромбоцитов. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56893/56893fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

EMS является основателем LightIntegra Technology Inc., медицинского устройства компании разработка ThromboLUX системы для тонкодисперсный и тромбоцитов качества тестирования. Все авторы являются сотрудниками LightIntegra технологии. Производство и свободный доступ к этой статье авторами LightIntegra Technology Inc.

Этот протокол описывает метод динамического рассеяния света для скрининга микрочастица, оптимизированный для частиц высокой концентрации, обнаруженные в биологических образцов, такие, как концентраты тромбоцитов. Изначально метод DLS нормируется точно измерить размер. Относительная Концентрация микрочастиц может быть преобразован в абсолютной концентрации если известно содержание тромбоцитов и площади пика тромбоцитов используется как ссылка пик19. Как тромбоцитов концентрации обычно получаются с гематологические анализаторы или потока цитофлуориметрами эти методы могут считаться компаньон технологий DLS.
Функциональность системы DLS застрахован, запустив управления бусины регулярно. Дистиллированная вода может быть измерена для проверки, что фоновый шум является минимальным. Коммерчески доступные тромбоцитов стандарты могут быть проанализированы как MP-отрицательные элементы управления и после добавления 125 Нм радиус бисера, как MP-позитивных элементов управления. В пределах концентрации биологических диапазон MP интерес процедуры являются практические и быстро выполнять как часть рутинной банка крови.
В отличие от проточной цитометрии этот метод не основан на сравнении интенсивности рассеяния частиц, но скорее скорость их броуновского движения. Таким образом exosomes может быть также обнаружен несмотря на свои небольшие размеры и сообщаются отдельно от MP.
Разработан как инструмент скрининга, ограничения данного метода связаны с ее неспособность различать различные виды микрочастиц. Есть потенциальные возможности для совершенствования, если используются шаги дополнительной изоляции; образцы могут быть опробованы до и после определенных удаление микрочастиц через антитела сочетании магнитных шарик захвата. Кроме того нельзя предположить, что все обнаруженные микрочастицы являются производным потому что хиломикроны, образованная в гиперлипидемии47,48 и малых бактерий или вирусов6 будет также сообщено в диапазоне микрочастица клеток. Однако другие гарантии существуют в рамках кровоснабжение, чтобы избежать высокой lipemic или загрязненных тромбоцитов войти инвентаризации банка крови больницы.
Выбор антикоагулянта в образце влияет на степень активации тромбоцитов и, следовательно, содержание MP49. Для сравнения различных продуктов этот фактор необходимо рассматривать. Кроме того, Обмен плазмы с MP свободного подвеса СМИ как ССА будет влиять на содержание MP и порог для определения неоднородности-если только около одной трети от первоначального содержания MP остается в пределах остатков плазмы в концентрате соответственно Нижний порог MP контента будет указано, такой же уровень активации тромбоцитов как 100% плазмы. Процент MP-MP содержание относительно тромбоцитов. Ранее сообщалось, что средняя тромбоцитов PAS продукта был ниже, так что средний % МП по-прежнему 9,5%19. Порог % МП для PAS тромбоцитов, лицензирована в США в настоящее время равен 10%.
Хотя основным источником MP в концентраты тромбоцитов является донором, процессы, которые вызывают стресс для тромбоцитов увеличит уровень MP в зависимости от восприимчивости тромбоцитов подчеркнуть-если уже высоко тромбоциты активируются, незначительные стрессоры такие как продлен срок годности, возбудитель инактивации, Стиральная, облучения или переноса на большие расстояния может привести к значительному увеличению содержания MP. Ни один из этих факторов стресса показали значительно повлиять на однородной, без активации тромбоцитов19. Кроме того внимание следует уделить возможности для изменения состава образца в капилляр, если не испытаны сразу же после подготовки (завершение шага 3 настоящего Протокола).
В центре внимания этого протокола находится на определении состава частиц, присутствующих в трансфузии тромбоцитов и использовать микрочастиц в качестве биомаркеров активации тромбоцитов. Трансфузии тромбоцитов помеченный как или не активирована (оранжевый) или активирована (розовый), основанный на пороге процент микрочастица 15%. Порог 15%, MP для тромбоцитов в плазме 100% эмпирически определяется какой персентили в среднем 66 с нескольких сайтов.
Тромбоцитов управления запасами на основе обычной микрочастица, скрининг с DLS призвана улучшить пациента ухода и диск эффективности затрат, предотвращая неиммунизированных тромбоцитов огнеупорность. Внедрение системы DLS для скрининга тромбоцитов сумки позволят пользователю наиболее прямой неактивированные тромбоцитов в популяциях пациентов риску развития тромбоцитов огнеупорность.

Интерес к микрочастицы вращалась главным образом вокруг их участие в ячейки к ячейке коммуникации и биологических процессах. 1 , 2 , 3 совсем недавно, микрочастицы также привлекли интерес как потенциальных ранних диагностических маркеров аутоиммунных и сердечно-сосудистых заболеваний. 4 , 5 микрочастицы, также известный как внеклеточного везикулы или exosomes, были широко изучены проточной цитометрии. К сожалению несмотря на попытки унифицировать цитометрии обычного потока существует консенсус на протоколе оптимального использования. 6 , 7 , 8 , 9 , 10
Хотя обычной проточной цитометрии можно охарактеризовать конкретные MP субпопуляций,11 , он имеет несколько сообщили ограничения. 11 , 12 , 13 , 14 некоторые из этих ограничений были рассмотрены с использованием более высокой мощности лазеров и детекторы в так называемый «мелкие частицы вариант»,15,16 , а также обнаружения на 15-25 ° вперед разброс угол и изменение давления оболочка . 17 , 18 тем не менее, метод быстрый и easy-to-use скрининга, который могут быть объединены с этим сложные методы по-прежнему необходимо использовать микрочастицы как ранних диагностических маркеров. Повышенные уровни микрочастиц обнаруживаются примерно в одной трети из нормальной крови доноров19 и указывать субклинической условий. Следовательно уровни высокой микрочастица в донорской крови продуктов могут быть несовместимы с уязвимых получателей. 20
При предоставлении Трансфузии тромбоцитов, существует риск неиммунизированных огнестойкости - условие которой тело пациента отвергает подряд переливаний и не допускает значительную часть тромбоцитов распространить. 21 , 22 номера иммунной огнеупорность может привести к впустую переливаний, остается осложнения здоровья для пациентов и расширенном больницу. 23 Трансфузии тромбоцитов, содержащие большое количество микрочастиц может быть фактором для развития неиммунизированных огнеупорность в уязвимых гематологии онкологии больных. 20 это возможность управлять тромбоцитов инвентаризации по составу Трансфузии тромбоцитов, скрининг на микрочастицы, снижая тем самым риск для уязвимых пациентов. Однако, большинство микрочастица тестов требуют изоляции микрочастицы из тромбоцитов5,12 или иным образом весьма труда курс Интенсив24,25 и поэтому не могут быть реализованы регулярно в больнице банков крови.
Метод, описанный здесь использует Динамическое рассеяние света (DLS) - также известный как спектроскопии корреляции фотонов или квази упругого рассеяния света. На протяжении десятилетий Динамическое рассеяние света широко используются в фармацевтической промышленности для характеристики препарата липосомального формулировок или эмульсии где размеры частиц находятся в диапазоне от субмикронных. 26 , 27 однако, инструменты, разработанные для этих приложений не оптимизированы для экрана продуктов крови. Была разработана новая система DLS преодолеть технические ограничения и сделать полезным для скрининга Трансфузии тромбоцитов динамического рассеяния света. 28
Динамическое рассеяние света измерения выполняются, освещающие взвешенных частиц с лазерного света и анализируя время вариации интенсивности рассеянного света, который является следствием частиц, движущихся в суспензии. Кроме того этот метод использует обратная связь между скорости частицы и размер - мелкие частицы двигают быстро и крупных частиц двигаться медленно - предоставлять информацию о распределением размера и относительной концентрации компонентов образца. С помощью DLS, среднее микрочастица контента и средний радиус микрочастица компонента могут быть количественно. Содержание микрочастиц в крови продукт дается как % МП, основанный на площади в измеренные гистограмму для частицы радиусом 50-550 Нм. В то время как частицы с радиусами ниже 50 Нм обнаружены DLS и сообщенное системой DLS, они не включаются в % MP. Вместо того, чтобы изолировать микрочастицы из тромбоцитов, неоднородность Трансфузии тромбоцитов определяется на основании относительное содержание микрочастиц и тромбоцитов в образце. В самом деле соотношения тромбоцитов и тонкодисперсный пиков может использоваться для расчета абсолютной концентрации MP, когда известно количество тромбоцитов. 19
Система DLS обеспечивает работников здравоохранения с качественной и количественной информации о микрочастиц в образцах, полученных из человеческой крови или продуктов крови. Основным преимуществом метода описаны DLS над альтернативные методы, такие как проточной цитометрии, электронная микроскопия,29 наночастиц отслеживания анализа30 или перестраиваемый резистивный пульс зондирования31 является подготовка образца: аликвоты концентраты тромбоцитов может измеряться непосредственно без необходимости изолировать депутат от тромбоцитов, разбавления образца или другие изменения. 9 , 17 в дополнение, DLS является абсолютной калибровке методом и не страдает от недостатка калибровки бусины с соответствующим показателем преломления. 14 , 32
Корреляция между активации тромбоцитов и MP содержание ранее показывает микроскопии33,20 и может быть выведен из увеличение содержания MP в патологических условиях15,34, 35 , 36 и в vitro условиях известно для активации тромбоцитов. 19 , 37 , 38 однако, далее необходимы исследования в полной мере понять отношения DLS-измеряется микрочастица содержание и тромбоцитов активации. Основываясь на наших текущих знаний активированных тромбоцитов содержат большое количество микрочастиц, они являются лучшими используется для терапевтического лечения активно кровотечения пациентам39, в то время как пациенты гематологии онкологии воспользоваться неактивированные тромбоцитов с без или низкий уровень микрочастицы20. Недавно было сообщено, что в vitro отзывчивость доноров тромбоцитов значительно не снижают восстановления и выживания этих тромбоцитов в одной переливания пациентам стабильной, главным образом-кровотечение гематологии онкологии40 . Из этого можно сделать вывод, что активации тромбоцитов, выявленные высоким содержанием MP также играет значительную роль не в профилактического лечения больных. Однако, из-за узких отбора пациентов, это исследование не рассматривается влияние факторов доноров для сложных больных фебрильных (исключены из сферы исследования), не стабильна и получить много больше, чем просто один переливания тромбоцитов. На вопрос, как можно уменьшить сложность этих пациентов дел - который обещает уменьшить огнеупорность - остается без ответа.
Микрочастицы являются ранние маркеры воспаления41,42,,4344 и тромбоцитов активации45 и поэтому обнаружен в многих обычных доноров. 19 следовательно, активированных тромбоцитов и микрочастицы, присутствуют в пожертвования тромбоцитов. Это разумно предположить, что пациентов с лихорадкой, т.е. полностью активирована врожденной иммунной системы, не может мириться с дополнительной проблемой переливание активированных тромбоцитов. Однако необходимы исследования, чтобы доказать эту гипотезу. Тонкодисперсный скрининг может облегчить текущие неопределенность в отношении содержания Трансфузии тромбоцитов и уменьшить сложность лечения пациентов.
Отношение активированного неактивированные тромбоцитов в банке крови больницы зависит, главным образом на население стран-доноров и в гораздо меньшей степени по транспорту, облучение, инактивации патогенов и других процессов, которые могут увеличить активации тромбоцитов в концентраты. 19 данных из крупных больницы крови банков в Соединенных Штатах показали, что средний состав тромбоцитов Инвентаризация 49% активирована и 51% неактивированные (диапазон для активированных тромбоцитов: 38-62%, личные сообщения). Если кровь продукта поставщиков или банков крови больницы хотят знать, сколько концентраты тромбоцитов активирована и неактивированные они производят или получить и хотят управлять их инвентаризации на основе активации тромбоцитов, как указано в тонкодисперсный содержание, это Протокол может быть подходящим для них.
Основываясь на составе тромбоцитов, банк крови больницы смогут направить неактивированные, однородной тромбоцитов для профилактического использования и активирован, гетерогенных тромбоциты для терапевтического использования. Тромбоцитов скрининг позволяет больниц для обеспечения максимального использования имеющихся запасов, которая улучшает обслуживание пациентов и снижает стоимость. Этот протокол предназначен для персонала лабораторий, которые знакомы с основной обработки и манипуляции продуктов крови.
Представленные здесь является метод скрининга для микрочастиц в трансфузии тромбоцитов, которые обычно могут применяться для управления инвентаризации банка крови больницы, где желательно выбрать продукт, основанный на содержание микрочастица. Цель настоящего Протокола заключается в наметить осуществление и оценку DLS скрининг донорской тромбоцитов. Описывается протокол рассматриваются общие вопросы неинвазивные доступ к образцы, интеграция тестирования в банк крови рабочего потока и характеристики производительности.

<table >
	<tbody>
		<tr >
			<td >ThromboLUX-M</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc.&#160;</td>
			<td >LPN120</td>
			<td >DLS System</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ThromboSight Software</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc.&#160;</td>
			<td >LPN124</td>
			<td >DLS analysis software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Capillaries</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Optinova MLE)</td>
			<td >LPN065</td>
			<td >Custom extruded non-activating, non-birefringent plastic tube, inspected and irradiated</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MiniPet&#160;</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor TriContinent Scientific)</td>
			<td >LPN082</td>
			<td >100 &#181;L fixed volume pipette for sampling&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MicroFlex 1-200 &#181;L Pipette tips</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor ESBE Scientific)</td>
			<td >LPN080</td>
			<td >Pipette tips for sampling</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Critoseal&#160;</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Fisher Scientific)</td>
			<td >LPN075</td>
			<td >Capillary Tube Sealant</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dukal Alcohol Pad or equivalent</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Dukal Corp.)</td>
			<td >LPN085</td>
			<td >Isopropyl pad (saturated with 70% isopropyl alcohol)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Control beads, 50 nm radius</td>
			<td >LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor PolySciences Inc.)</td>
			<td >LPN128</td>
			<td >Control beads</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microbead NIST Traceable Particle Size Standard, 3 &#181;m</td>
			<td >PolySciences Inc.</td>
			<td >64060</td>
			<td >Standard microbeads: 1.5 &#181;m radius Polystyrene beads; range 1.43-1.58 &#181;m; 1% solids suspensions in de-ionized water</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Nanobead NIST Traceable Particle Size Standard, 250 nm</td>
			<td >PolySciences Inc.</td>
			<td >64014-15</td>
			<td >Standard nanobeads: 125 nm radius Polystyrene beads; range 120 - 130 nm; 1% solids suspensions in de-ionized water</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Genesis BPS RapidSeal II or equivalent</td>
			<td >Genesis BPS</td>
			<td >428-SE640</td>
			<td >Tube sealer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fresenius Kabi Tube Stripper or equivalent</td>
			<td >Fresenius Kabi</td>
			<td >6R4452</td>
			<td >Manual tube stripper</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Biohazard Shield - Cell Counter or equivalent</td>
			<td >CardinalHealth</td>
			<td >S1389-75</td>
			<td >Splash Shield</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Corning LSE Vortex Mixer or equivalent</td>
			<td >Corning Incorporated</td>
			<td >6775</td>
			<td >Vortex mixer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >FACSCanto II Flow cytometer&#160; with FACSDiva software version 6.1.3 or equivalent</td>
			<td >BD Biosciences</td>
			<td >338960</td>
			<td >Flow cytometer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

routine screening method for microparticles in platelet transfusions

Управление запасами тромбоцитов, основанные на скрининг микрочастица содержание в концентраты тромбоцитов является новой инициативой улучшения качества для банков крови больницы. Клетки фрагмент от микрочастиц (МП), когда они подчеркнули. Компоненты крови и крови может содержать клеточных фрагментов из различных клеток, прежде всего из активированных тромбоцитов. При выполнении их роли как врожденные иммунные клетки и основных игроков в коагуляции и гемостаз, тромбоциты изменить форму и генерировать микрочастицы. С Динамическое рассеяние света (DLS)-на основе обнаружения микрочастица, это позволяет дифференцировать активированные (высокая тонкодисперсный) от неактивированные (низкая тонкодисперсный) тромбоцитов в переливании и оптимизации использования дефицитных крови продукта. Предыдущие исследования показывают, что предоставление неактивированные тромбоциты для профилактического использования в гематологии онкологии больных может уменьшить их риск стать огнеупорных и улучшения ухода за пациентами. Цель этого метода скрининга является регулярно дифференцировать активирован неактивированные тромбоцитов. Метод, описанный здесь описываются шаги необходимо выполнить для управления запасами обычных тромбоцитов в банке крови больницы: получение образца от переливания тромбоцитов, загрузки образца в капилляр для измерения DLS, выполняя DLS тест идентифицировать микрочастицы и с использованием сообщил микрочастица содержимого для идентификации активированных тромбоцитов.

Watch this Scientific Journal Video about Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions at JoVE.com

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Управление запасами тромбоцитов, основанные на скрининг микрочастица содержание в концентраты тромбоцитов — это новая инициатива улучшения качества в банках крови больницы. Цель заключается в дифференцировать активированные из неактивированные тромбоциты для оптимизации использования тромбоцитов. Предоставление неактивированные тромбоцитов больных гематологии онкологии может уменьшить их высоким риском стать огнеупорные.

Типовых скрининг метод для микрочастиц в трансфузии тромбоцитов

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Research

JoVE Journal

Medicine

High Content Screening in Neurodegenerative Diseases

Высокая Скрининг Содержание в нейродегенеративных заболеваний

The functional annotation of genomes, construction of molecular networks and novel drug target identification, are important challenges that need to be ...

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Подготовка и инактивации болезнетворных микроорганизмов из продуктов Double Dose Buffy Coat тромбоцитов помощью перехвата системных крови

Blood centers are faced with many challenges including maximizing production yield from the blood product donations they receive as well as ensuring the ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

Скрининг на Меланома Модификаторы помощью рыбок данио автохтонные модели опухоли

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Простой метод мышь интубации легких

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Turbidimetry on Human Washed Platelets: The Effect of the Pannexin1-inhibitor Brilliant Blue FCF on Collagen-induced Aggregation

Турбидиметрия на человеке промытых тромбоциты: Влияние Pannexin1-ингибитор Brilliant Blue FCF на индуцированный коллаген агрегации

Turbidimetry is a laboratory technique that is applied to measure the aggregation of platelets suspended in either plasma (platelet-rich plasma, PRP) or ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

Метод Количественная верхней конечности производительности в повседневной жизни при помощи акселерометров

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Неонатальная мышь Метод Cochlear Explant Technique как<em&gt; In Vitro</em&gt; Инструмент скрининга в исследованиях слуха

While there have been remarkable advances in hearing research over the past few decades, there is still no cure for Sensorineural Hearing Loss (SNHL), a ...

Screening Bioactive Nanoparticles in Phagocytic Immune Cells for Inhibitors of Toll-like Receptor Signaling

Скрининг биоактивных наночастиц в фагоцитарных иммунных клетках для ингибиторов сигнальной сигнальной сигнальной сигнализации

Pharmacological regulation of Toll-like receptor (TLR) responses holds great promise in the treatment of many inflammatory diseases. However, there have ...

Handheld Metal Detector Screening for Metallic Foreign Body Ingestion in Children

Портативный металлодетектор скрининга для заглатывания металлический инородного тела в детей

Coins are the most common ingested metallic foreign bodies among children. The goal of this protocol is to assess the accuracy and feasibility of using a ...

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Обнаружение на основе тромбоцитов оксида азота в крови путем измерения VASP фосфорилирование

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...