Name: measuring deformability and red cell heterogeneity in blood by ektacytometry
Uploaded: 2018-01-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Deformability and Red Cell Heterogeneity in Blood by Ektacytometry at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית מחקר מגזר מוסדות לאומיים של הסוכרת, העיכול, מחלות כליה הלאומי ללב, ריאות ואת מכון דם של מכוני הבריאות הלאומיים. הדעות שהובעו בזאת ואינן מייצגות בהכרח את הנופים הרשמי של מכוני הבריאות הלאומיים, הינם באחריות הבלעדית של המחברים.

כל הנבדקים במחקר זה נתן הסכמה בכתב בהתאם את הצהרת הלסינקי והפרוטוקולים מוסדות של בריאות מוסדיים סקירה ההנהלה הארצית אישרה.
1. הפעלת את ektacytometer
<ol><li>לחבר את הצנרור מהפתרון ניקוי הפתרונות פוליוינילפירולידון (PVP) osmolar נמוך וגבוה. להיות זהירים כדי לחבר את הצינור osmolar 0 לפתרון osmolar...

<ol>
	<li>Bessis, M., Mohandas, N., Feo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+ektacytometry:+a+new+method+of+measuring+red+cell+deformability+and+red+cell+indices.">Automated ektacytometry: a new method of measuring red cell deformability and red cell indices.</a> Blood Cells. 6 (3), 315-327 (1980).</li><li>Clark, M. R., Mohandas, N., Shohet, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotic+gradient+ektacytometry:+comprehensive+characterization+of+red+cell+volume+and+surface+maintenance.">Osmotic gradient ektacytometry: comprehensive characterization of red cell volume and surface maintenance.</a> Blood. 61 (5), 899-910 (1983).</li><li>Da Costa, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+tool+for+red+blood+cell+membrane+disorders:+Assessment+of+a+new+generation+ektacytometer.">Diagnostic tool for red blood cell membrane disorders: Assessment of a new generation ektacytometer.</a> Blood Cells Mol Dis. 56 (1), 9-22 (2016).</li><li>Clark, M. R., Mohandas, N., Shohet, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deformability+of+oxygenated+irreversibly+sickled+cells.">Deformability of oxygenated irreversibly sickled cells.</a> J Clin Invest. 65 (1), 189-196 (1980).</li><li>Rabai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deformability+analysis+of+sickle+blood+using+ektacytometry.">Deformability analysis of sickle blood using ektacytometry.</a> Biorheology. 51 (2-3), 159-170 (2014).</li><li>Bessis, M., Mohandas, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Diffraction+Patterns+of+Sickle+Cells+in+Fluid+Shear+Fields.">Laser Diffraction Patterns of Sickle Cells in Fluid Shear Fields.</a> Blood Cells. 3, 229-239 (1977).</li><li>Kim, Y., Kim, K., Park, Y., Moschandreou, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Blood Cell - An Overview of Studies in Hematology. , (2012).</li><li>Streekstra, G. J., Dobbe, J. G., Hoekstra, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+fraction+poorly+deformable+red+blood+cells+using+ektacytometry.">Quantification of the fraction poorly deformable red blood cells using ektacytometry.</a> Opt Express. 18 (13), 14173-14182 (2010).</li><li>Renoux, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+methodological+standardization+for+the+ektacytometric+measures+of+red+blood+cell+deformability+in+sickle+cell+anemia.">Importance of methodological standardization for the ektacytometric measures of red blood cell deformability in sickle cell anemia.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 62 (2), 173-179 (2016).</li><li>Parrow, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurements+of+red+cell+deformability+and+hydration+reflect+HbF+and+HbA2+in+blood+from+patients+with+sickle+cell+anemia.">Measurements of red cell deformability and hydration reflect HbF and HbA2 in blood from patients with sickle cell anemia.</a> Blood Cells Mol Dis. 65, 41-50 (2017).</li><li>Ballas, S. K., Smith, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Red+blood+cell+changes+during+the+evolution+of+the+sickle+cell+painful+crisis.">Red blood cell changes during the evolution of the sickle cell painful crisis.</a> Blood. 79 (8), 2154-2163 (1992).</li><li>Johnson, R. M., Ravindranath, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotic+scan+ektacytometry+in+clinical+diagnosis.">Osmotic scan ektacytometry in clinical diagnosis.</a> J Pediatr Hematol Oncol. 18 (2), 122-129 (1996).</li><li>Mohandas, N., Clark, M. R., Jacobs, M. S., Shohet, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+factors+regulating+erythrocyte+deformability.">Analysis of factors regulating erythrocyte deformability.</a> J Clin Invest. 66 (3), 563-573 (1980).</li><li>Lazarova, E., Gulbis, B., Oirschot, B. V., van Wijk, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next-generation+osmotic+gradient+ektacytometry+for+the+diagnosis+of+hereditary+spherocytosis:+interlaboratory+method+validation+and+experience.">Next-generation osmotic gradient ektacytometry for the diagnosis of hereditary spherocytosis: interlaboratory method validation and experience.</a> Clin Chem Lab Med. 55 (3), 394-402 (2017).</li><li>Anderson, C., Aronson, I., Jacobs, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythrocyte+Deformability+is+Reduced+and+Fragility+increased+by+Iron+Deficiency.">Erythrocyte Deformability is Reduced and Fragility increased by Iron Deficiency.</a> Hematology. 4 (5), 457-460 (1999).</li><li>Reinhart, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Washing+stored+red+blood+cells+in+an+albumin+solution+improves+their+morphologic+and+hemorheologic+properties.">Washing stored red blood cells in an albumin solution improves their morphologic and hemorheologic properties.</a> Transfusion. 55 (8), 1872-1881 (2015).</li><li>Shin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+impairment+of+erythrocyte+deformability+as+indicator+of+microangiopathy+in+type+2+diabetes+mellitus.">Progressive impairment of erythrocyte deformability as indicator of microangiopathy in type 2 diabetes mellitus.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 36 (3), 253-261 (2007).</li><li>Tu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+Red+Blood+Cell+Vitamin+C+Concentrations+Induce+Red+Blood+Cell+Fragility:+A+Link+to+Diabetes+Via+Glucose,+Glucose+Transporters,+and+Dehydroascorbic+Acid.">Low Red Blood Cell Vitamin C Concentrations Induce Red Blood Cell Fragility: A Link to Diabetes Via Glucose, Glucose Transporters, and Dehydroascorbic Acid.</a> EBioMedicine. 2 (11), 1735-1750 (2015).</li><li>Tiburcio, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+switch+in+infected+erythrocyte+deformability+at+the+maturation+and+blood+circulation+of+Plasmodium+falciparum+transmission+stages.">A switch in infected erythrocyte deformability at the maturation and blood circulation of Plasmodium falciparum transmission stages.</a> Blood. 119 (24), e172-e180 (2012).</li><li>Henon, S., Lenormand, G., Richert, A., Gallet, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+determination+of+the+shear+modulus+of+the+human+erythrocyte+membrane+using+optical+tweezers.">A new determination of the shear modulus of the human erythrocyte membrane using optical tweezers.</a> Biophys J. 76 (2), 1145-1151 (1999).</li><li>Mills, J. P., Qie, L., Dao, M., Lim, C. T., Suresh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonlinear+elastic+and+viscoelastic+deformation+of+the+human+red+blood+cell+with+optical+tweezers.">Nonlinear elastic and viscoelastic deformation of the human red blood cell with optical tweezers.</a> Mech Chem Biosyst. 1 (3), 169-180 (2004).</li><li>Moura, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+real+time+evaluation+of+red+blood+cell+elasticity+by+optical+tweezers.">Automatic real time evaluation of red blood cell elasticity by optical tweezers.</a> Rev Sci Instrum. 86 (5), 053702 (2015).</li><li>Evans, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+membrane+concept+applied+to+the+analysis+of+fluid+shear-+and+micropipette-deformed+red+blood+cells.">New membrane concept applied to the analysis of fluid shear- and micropipette-deformed red blood cells.</a> Biophys J. 13 (9), 941-954 (1973).</li><li>Chen, X., Feng, L., Jin, H., Feng, S., Yu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+erythrocyte+deformability+using+atomic+force+microscopy:+correlation+study+of+the+erythrocyte+deformability+with+atomic+force+microscopy+and+hemorheology.">Quantification of the erythrocyte deformability using atomic force microscopy: correlation study of the erythrocyte deformability with atomic force microscopy and hemorheology.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 43 (3), 243-251 (2009).</li><li>Musielak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Red+blood+cell-deformability+measurement:+review+of+techniques.">Red blood cell-deformability measurement: review of techniques.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 42 (1), 47-64 (2009).</li><li>Dobbe, J. G., Streekstra, G. J., Hardeman, M. R., Ince, C., Grimbergen, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+the+distribution+of+red+blood+cell+deformability+using+an+automated+rheoscope.">Measurement of the distribution of red blood cell deformability using an automated rheoscope.</a> Cytometry. 50 (6), 313-325 (2002).</li><li>Dobbe, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+red+blood+cell-deformability+distributions.">Analyzing red blood cell-deformability distributions.</a> Blood Cells Mol Dis. 28 (3), 373-384 (2002).</li><li>Kikuchi, Y., Arai, T., Koyama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+filtration+method+for+red+cell+deformability+measurement.">Improved filtration method for red cell deformability measurement.</a> Med Biol Eng Comput. 21 (3), 270-276 (1983).</li><li>Moessmer, G., Meiselman, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+micropore+filtration+approach+to+the+analysis+of+white+cell+rheology.">A new micropore filtration approach to the analysis of white cell rheology.</a> Biorheology. 27 (6), 829-848 (1990).</li><li>Guo, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+analysis+of+red+blood+cell+deformability.">Microfluidic analysis of red blood cell deformability.</a> J Biomech. 47 (8), 1767-1776 (2014).</li><li>Doh, I., Lee, W. C., Cho, Y. H., Pisano, A. P., Kuypers, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deformation+measurement+of+individual+cells+in+large+populations+using+a+single-cell+microchamber+array+chip.">Deformation measurement of individual cells in large populations using a single-cell microchamber array chip.</a> Appl Phys Lett. 100 (17), 173702-173703 (2012).</li><li>Baskurt, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+three+commercially+available+ektacytometers+with+different+shearing+geometries.">Comparison of three commercially available ektacytometers with different shearing geometries.</a> Biorheology. 46 (3), 251-264 (2009).</li><li>Baskurt, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+guidelines+for+hemorheological+laboratory+techniques.">New guidelines for hemorheological laboratory techniques.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 42 (2), 75-97 (2009).</li><li>Uyuklu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+storage+duration+and+temperature+of+human+blood+on+red+cell+deformability+and+aggregation.">Effects of storage duration and temperature of human blood on red cell deformability and aggregation.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 41 (4), 269-278 (2009).</li><li>Uyuklu, M., Meiselman, H. J., Baskurt, O. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hemoglobin+oxygenation+level+on+red+blood+cell+deformability+and+aggregation+parameters.">Effect of hemoglobin oxygenation level on red blood cell deformability and aggregation parameters.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 41 (3), 179-188 (2009).</li><li>Embury, S. H., Clark, M. R., Monroy, G., Mohandas, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concurrent+sickle+cell+anemia+and+alpha-thalassemia.+Effect+on+pathological+properties+of+sickle+erythrocytes.">Concurrent sickle cell anemia and alpha-thalassemia. Effect on pathological properties of sickle erythrocytes.</a> J Clin Invest. 73 (1), 116-123 (1984).</li><li>von Tempelhoff, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+blood+rheological+properties+and+red+blood+cell+indices(MCH,+MCV,+MCHC)+in+healthy+women.">Correlation between blood rheological properties and red blood cell indices(MCH, MCV, MCHC) in healthy women.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 62 (1), 45-54 (2016).</li><li>Da Costa, L., Galimand, J., Fenneteau, O., Mohandas, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hereditary+spherocytosis,+elliptocytosis,+and+other+red+cell+membrane+disorders.">Hereditary spherocytosis, elliptocytosis, and other red cell membrane disorders.</a> Blood Rev. 27 (4), 167-178 (2013).</li></ol>

טכניקות ektacytometry המתוארים הם פשוטים ואוטומטיים טוב, המבטיח תוצאות חוקיים וגם לשחזור. למרות זאת, קיימים כמה צעדים קריטיים. בקרת טמפרטורה נאותה של הדם חשוב. אחסון בטמפרטורת החדר במשך יותר מ 8 שעות עשוי להשפיע על SS ½ ערכים. 34 Ensuring כי הטמפרטורה של המכונה הוא יציב ב 37 ° C חשוב גם, כמו צמ?...

Ektacytometry מספק מידה נוח של ודפורמביליות תא אדום בתגובה שינויים גזירה (נמדד בפסקל ומתגבר (פי אי)) או השעיית osmolality בינוני. הפרמטרים הרלוונטי של תא אדום ודפורמביליות כוללים מדד אלונגציה מרבית (EI מקסימום), מידת ודפורמביליות מקסימלית של תא אדום בתגובה הגדלת גזירה, גזירה ½ (הה ½), את מאמץ גזירה הדרוש להשגת מקסימלי חצי ודפורמביליות. 1 osmotic ektacytometry מעבר צבע יש מספר פרמטרים אינפורמטיבי. אלה כוללים האינדקס התארכות מינימלי (EI דקות), מידת השטח לבנפח יחס את osmolality שבו היא מתרחשת (O דקות), אשר היא מידת השבריריות osmotic. EI ומקס את osmolality שבו היא מתרחשת (O (מקסימום EI)) לספק מידע על קרום התא וגמישות פני השטח. התארכות מקסימלי חצי בזרוע hypertonic של המילוי ההדרגתי osmotic מיוצג על ידי EI hyper. EI hyper osmolality שבו היא מתרחשת, O היפר, מספקים מידע על צמיגות תאיים של התא האדום הנקבע על-ידי ריכוז המוגלובין. 2 , 3 מדידה ודפורמביליות בדם heterogenous, זה מורכב על ידי העובדה כי תאים נוקשה, כמו במגל כדוריות דם אדומות, לא ליישר כהלכה עם הכיוון של זרימה כגון תאים deformable בתגובה הגדלת גזירה. במקום לייצר תמונת דיפרקציה אליפטית אופיינית, לייצר תאים נוקשה דפוס כדורית, כשהתוצאה היא תבנית עקיפה בצורת יהלום כאשר המצופים באליפסה המיוצר על ידי תאי deformable. 4 , 5 , 6 . התבנית כדורית הוכח כדי שיתאימו בלתי הפיך במגל תאים על-ידי ביצוע ektacytometry בשברים מבודד של תאים בעקבות צפיפות צנטריפוגה. 6 בחישוב מדד התארכות כוללת מדדים של שני הציר קצרים וארוכים של האליפסה; מעויין מייצרת ולכן ירידה ניכרת של התארכות על ידי הגדלת הרוחב של הציר קצר. 7 בעבר הוכח כי מידת העיוות תבנית עקיפה הוא מתואם עם האחוז של המוגלובין מגל (HbS) והן את אחוז במגל בתאי דם מחולים עם האנמיה החרמשית. 5 מידת העיוות תבנית עקיפה ניתן להשיג על ידי ניתוחים מתמטיים מורכבים. 8 זה ניתן להשיג על-ידי התאמת פתיחת הצמצם במצלמה-ektacytometer או את רמת האפור של התוכנה התאמה לשנות את גובה תבנית עקיפה. 5 . אולם, פרטים לגבי כיצד להתאים את רמת האפור אינם מוגדרים היטב ואינו הצמצם במצלמה נגיש על הדור האחרון של ektacytometer זמינים מסחרית. כדי לעקוף בעיות אלה, לרווח המצלמה נגיש בקלות יכול לשמש כדי להתאים תבנית עקיפה לגבהים. 9 בשיטה זו כדי להעריך הטרוגניות הסלולר, מידת העיוות תבנית עקיפה ישויך עם האחוז של עוברית המוגלובין בדם של חולים עם אנמיה מגל התא. 10 מספר פרמטרים osmotic ektacytometry הדרגתיות הן באופן דומה בקורלציה עם האחוז של העובר או אנמיה המוגלובין בדם מחולים עם האנמיה החרמשית. תבנית עקיפה עיוות מתאמים סביר משקפים את התרומה של המוגלובין הרכב אל אחוז נוקשה, שאינם deformable תאים. עניין נוסף, הפרופיל כולה osmotic ektacytometry הדרגתיות עובר שינויים biphasic התואמים אחוז תאים צפופים במחזור במהלך משברים חרמשית. 11
Ektacytometry שימושית גם במחקר של מספר הפרעות אחרות. Osmotic ektacytometry הדרגתיות היא אבחון לטיפול בהפרעות קרום תא אדום בירושה, כמו ספרוציטוזיס תורשתי, elliptocytosis תורשתי pyropoikilocytosis תורשתי. 3 , 12 , 13 , 14 Decreased ודפורמביליות מתרחשת מחסור בברזל. 15 אפיון "הנגע אחסון" של דם העסיקה ektacytometry ומחקרים עתידיים חוקרים גם את טיב הנגע, התערבויות למניעת הקמתו במהלך האחסון של דם שהופקד וסביר להניח תועלת טכניקות המוצג כאן. 16 Decreased תא אדום ודפורמביליות יש גם היה בקורלציה עם מחלת microvascular בחולי סוכרת. 17 מחקרים שנעשו לאחרונה קישור היפרגליקמיה, ריכוזים ascorbate תא אדום ואת השבריריות osmotic מראים שגורמים אלה עשוי להיות חשוב בהתפתחות של מחלות microvascular. 18 Ektacytometry מחקרים נערכים כעת לחקור את השערה זו (Parrow ועל לוין, שלא פורסמו נתונים). דם הבמה מלריה זיהום הוא שדרת מעניין אחר של חקירות ודפורמביליות תא אדום. הסלולר ודפורמביליות של הפלזמודיום falciparum נגוע כדוריות דם אדומות יורדת באופן דרמטי במהלך 48 השעות של התבגרות תאיים של הטפיל משלב טבעת לשלב schizont. הראיות מראות כי זה ודפורמביליות ירד מתהפך על התבגרות של הטפיל. ההיפוך עולה בקנה אחד עם שחרורו של כדוריות אדומות נגוע למחזור. ירידה ודפורמביליות נחשב להיות מתווך על ידי חלבונים הפלזמודיום לקדם פחמיות של התא האדום. 19 מחקרים אלה מייצגים מדגם קטן של תנאים חשובים קלינית היכן ודפורמביליות כדוריות דם אדומות מדידה ופרמטרים הדרגתיות osmotic הרלוונטיים. קיימים מספר תחומי מחקר נוספים.
טכניקות חלופיות למדידת תא אדום ודפורמביליות כוללים מלקחיים אופטיים (ידוע גם בשם מלכודות לייזר) אשר השתמש המאפיינים הפיזיים של פוטונים כדי למתוח כדוריות אדומות בודד אחד או יותר. 20 טכניקה זו יש את היתרון של מדידה את ודפורמביליות של אריתרוציטים יחיד, אבל קצת אי-ודאות בכיול כוח הפיק השתנות ניכר על פני לימודי 21 וניתן לניתוח נתונים עתירי עבודה אלא אם כן אוטומטי. 22 micropipette, אשר משתמשת לחץ שלילי האחות של כדוריות דם אדומות לתוך micropipette, שאיפה גם שימש כדי למדוד את ודפורמביליות של כדוריות אדומות. 7 , 23 מדידות מרובות, כגון הלחץ הנדרש לרוקן את התא האדום, אפשריות עם כל מדד הגדרת מאפיינים שונים של התא האדום. 23 מיקרוסקופ כוח אטומי הוא טכניקה ברזולוציה גבוהה המודד ממברנה נוקשות על ידי לכימות סטיה קרן לייזר כמחוון הטיה זיז לאורך פני השטח של תא אדום. 24 טכניקות אלה מספקים מידע אודות אריתרוציטים בודדים, לא להתאים בקלות למדוד שינויים באוכלוסיות של כדוריות דם אדומות, ו, באופן כללי, דורשים מומחיות טכנית ניכר.
הרצון לטעום הפרט והן על אוכלוסיות של תאים בו זמנית הוביל ההתקדמות אוטומציה, התפתחות מיקרופלואידיקה ושיטות מבוסס על מערך. כמו ektacytometry, rheoscopy מודד ודפורמביליות כפונקציה של גזירה אבל תמונות נרכשים ישירות באמצעות מיקרוסקופ. 25 עבור ניתוחים דרך-הניח גבוה יותר, הדמיה תא אוטומטיות כבר מועסקים לייצר הפצות ודפורמביליות באמצעות rheoscope. 26 הטרוגניות הסלולר ניתן לכמת בשיטה זו אם הנתונים מנושא בקרה בריאים זמינים. 27 מיקרופלואידיקה טכניקות מאפשרים גם עבור ניתוחים דרך-הניח גבוהה של תאים בודדים; עיצובים מרובים באמצעות עיבודים של סינון,28 תא המעבר מאבחנים,29 אשר מודד את הזמן הנדרש עבור תזרים כדוריות דם אדומות דרך micropore חלופות למדוד את הלחץ הנדרש להובלה כדוריות דם אדומות למדי מאשר זמן 30 פותחו. פלטפורמה אחרת לניתוח דרך-הניח גבוהה של תאים בודדים הוא השבב מערך microchamber תא בודד, אשר יש יתרון נוסף של התרת במורד הזרם מבוסס על-ידי קרינה פלואורסצנטית אפיון של התאים. 31 למרות כל אחת מהטכניקות הללו שעשוי להיות שימושי, וייתכן שהוא מעולה עבור יישומים מסוימים, היתרונות השוואתית של ektacytometry כולל רגישות, קלות שימוש, דיוק. 32 הדור האחרון של ektacytometers זמינים מסחרית גם מחזיקים צדדיות ניכר במספר של מבחני שניתן לבצע.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="878">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">LoRRca MaxSis standard version</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">LORC109000</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">LoRRca MaxSis Osmoscan</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">LORC109001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Polyvinylpyrrolidone solution (PVP) 0mOsm</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">QRR030910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Polyvinylpyrrolidone solution (PVP) 500mOsm</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">QRR030930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Polyvinylpyrrolidone solution (PVP) 5mL vials</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">QRR030901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">X clean</td>
			<td style="width:115px;">Mechatronics</td>
			<td style="width:119px;">QRR010946</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">P1000&#160;</td>
			<td style="width:115px;">MilliporeSigma</td>
			<td>Z646555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">P200</td>
			<td style="width:115px;">MilliporeSigma</td>
			<td style="width:119px;">Z646547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">P200 filter tips</td>
			<td style="width:115px;">MidSci</td>
			<td style="width:119px;">AV200-H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">P1250 filter tips</td>
			<td style="width:115px;">MidSci</td>
			<td style="width:119px;">AV1250-H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Kimwipes</td>
			<td style="width:115px;">MidSci</td>
			<td style="width:119px;">8091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">1.5 mL eppendorf tubes</td>
			<td style="width:115px;">MidSci</td>
			<td style="width:119px;">AVSS1700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">15 mL conical vial</td>
			<td style="width:115px;">MidSci</td>
			<td style="width:119px;">C15R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring deformability and red cell heterogeneity in blood by ektacytometry

ודפורמביליות תא אדום ירד הוא מאפיין של מספר הפרעות. במקרים מסוימים, מידת ודפורמביליות פגום יכול לחזות חומרת המחלה או מופע של סיבוכים חמורים. שימושים Ektacytometry לייזר viscometry עקיפה כדי למדוד את ודפורמביליות של כדוריות דם אדומות או הגדלת גזירה או של הדרגה osmotic-ערך קבוע של גזירה יישומית. עם זאת, מדידות ודפורמביליות ישירה קשים לפרש כאשר מודדים את הדם heterogenous, אשר מאופיין על ידי הנוכחות של כדוריות אדומות הנוקשה deformable. זאת בשל חוסר היכולת של תאים נוקשה כדי ליישר כהלכה בתגובה גזירה ותוצאות תבנית עקיפה מעוותת בסימן ירידה מוגזמת ודפורמביליות נראית לעין. מדידה של מידת העיוות מספק חיווי הטרוגניות של אריתרוציטים בדם. ב האנמיה החרמשית, זה הוא מתואם עם האחוז של תאים נוקשה, אשר משקף את ריכוז המוגלובין והרכב המוגלובין אריתרוציטים. בנוסף מדידה ודפורמביליות, ektacytometry הדרגתיות osmotic מספק מידע אודות השבריריות osmotic ואת המצב הידרציה של אריתרוציטים. פרמטרים אלה משקפים גם את ההרכב המוגלובין של כדוריות דם אדומות מחולים חרמשית. Ektacytometry מודד ודפורמביליות בקרב אוכלוסיות של תאי דם אדומים, לא, לכן, לספק מידע על ודפורמביליות או תכונות מכניות של אריתרוציטים בודדים. בכל מקרה, המטרה אחת מהטכניקות שתוארו במסמך זה היא כדי לספק שיטה נוח ואמין למדידת ודפורמביליות והטרוגניות הסלולר של דם. טכניקות אלה עשוי להיות שימושי עבור ניטור שינויים הטמפורלי, כמו גם התקדמות המחלה והתגובה התערבות טיפולית בהפרעות מספר. האנמיה החרמשית הוא דוגמה אחת מאופיין היטב. הפרעות אפשריות אחרות איפה מדידות ודפורמביליות תא אדום ו/או הטרוגניות עניין כוללים אחסון הדם, סוכרת, הפלזמודיום זיהום, מחסור בברזל, את anemias המוליטית עקב פגמים ממברנה.

הממצאים ektacytometry המתוארים בכתב יד זה יכול לשמש כדי למדוד תא אדום ודפורמביליות בכל מצב. תיאור סכמטי של הגדרת כללי של ektacytometer מוצג באיור1. אוכלוסיות הומוגניות של אריתרוציטים תיצור תבנית עקיפה אליפטית בתגובה הגדלת גזירה יכול לשמש כדי לחשב מדד התארכות כמוצג <str...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Deformability and Red Cell Heterogeneity in Blood by Ektacytometry at JoVE.com

Measuring Deformability and Red Cell Heterogeneity in Blood by Ektacytometry

מדידת ודפורמביליות והטרוגניות תא אדום בדם על ידי Ektacytometry

כאן אנו מציגים טכניקות כדי למדוד ודפורמביליות תא אדום והטרוגניות התאית על ידי ektacytometry. טכניקות אלה חלים כללי חקירות תא אדום ודפורמביליות וחקירת ספציפי מחלות הדם מאופיין על ידי הנוכחות של כדוריות אדומות הנוקשה deformable במחזור, כגון האנמיה החרמשית.

Decreased red cell deformability is characteristic of several disorders. In some cases, the extent of defective deformability can predict severity of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

דלדול של אוכלוסיות תאים ספציפיים על ידי דלדול משלים

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

טיהור אוכלוסייה תאים ספציפיים על ידי מיון פלואורסצנטי תא פעיל (FACS)

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

אנטיגנים מוגנים תאי דם אדומים פונקציונליים על ידי ההשתלה של ממברנה Polyglycerols Hyperbranched הקומפקטי

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

Assay גופיים תא דם אדום המוליזה להערכת סוכני Endosomolytic pH המגיבים למשלוח cytosolic של סמי Biomacromolecular

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

שיטות כמותיות לאיתור של הפעלת משלים-Induced נוגדן בתאי דם אדומים

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Phagosome pH by Ratiometric Fluorescence Microscopy

מדידת pH Phagosome ידי ratiometric מיקרוסקופ פלואורסצנטי

Phagocytosis is a fundamental process through which innate immune cells engulf bacteria, apoptotic cells or other foreign particles in order to kill or ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

מדידת פעילות פרץ גרנולוציט ו מונוציטים Phagocytosis חמצוני בדם אנושי

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

ניתוח תזרים Cytometric של תא הטבעי Killer ממס פעילות דם מלא אנוש

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

לתוספי משפר את היעילות התמרה חושית Lentiviral של תאי NK העיקרי מאתר ואנושי

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines

תא דם אדום פשוט שיטת תמוגה להקמת שורות תאי B Lymphoblastoid

A number of methods exist for the transformation of B lymphocytes by the Epstein Barr virus in vitro into immortalized cell lines. We have developed a new ...