Name: a preclinical mouse model of osteosarcoma to define the extracellular vesicle-mediated communication between tumor and mesenchymal stem cells
Uploaded: 2018-05-06T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

S.R. Baglio fue apoyado por una beca por la Associazione Italiana por la Ricerca sul Cancro (AIRC) cofinanciado por la Unión Europea. Además, este proyecto ha recibido no financiación del programa de investigación e innovación de horizonte 2020 de la Unión Europea bajo el Convenio de subvención de Marie Sklodowska-Curie 660200 (a S.R. Baglio).

Tejidos adiposos humanos para aislamiento de células madre mesenquimales fueron obtenidos del Departamento de cirugía plástica del Hospital de Tergooi (Hilversum, Holanda) después de la aprobación por el Comité institucional de ética y consentimiento informado por escrito. MSCs adiposos GFP-positivas fueron obtenidos del Departamento de medicina y Ciencias quirúrgicas para niños y adultos (Universidad de Modena y Reggio Emilia).
Los experimentos con animales se realizaron conforme a l...

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	<li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hallmarks+of+cancer:+The+next+generation.">Hallmarks of cancer: The next generation.</a> Cell. 144 (5), 646-674 (2011).</li><li>Karnoub, A. 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Vesículas extracelulares secretadas por el tumor (EVs) pueden alterar la fisiología de las células mesenquimales locales y distantes para generar un ambiente propicio para el tumor. Aquí se describe la generación de un modelo de ratón preclínica de osteosarcoma que permite la disección de las interacciones mediadas por EV entre células tumorales y células madre mesenquimal (MSCs) en vivo. Nos muestran que la inyección sistémica de tumor humano educado EV MSCs en ratones fuertemente xenoinjertos de os...

El microambiente tumoral participa activamente en la mayoría, si no todos, los aspectos de la progresión de la tumorigénesis y cáncer, incluyendo la formación de metástasis y el desarrollo de la resistencia a la terapéutica1. Esto subraya la necesidad de modelos de ratón de cáncer preclínico orthotopic que permite la disección de las interacciones del tumor-estroma complejo que ocurre en el lugar del tumor.
Entre los muchos componentes celulares del microambiente tumoral, las células madre mesenquimales (MSCs) fuertemente contribuir a la progresión del cáncer en varios tipos de cáncer como el cáncer de mama, cáncer de próstata, tumores cerebrales, mieloma múltiple y osteosarcoma2 ,3,4,5,6,7. MSCs son células multipotentes que residen en varios tejidos adultos y fetales, incluyendo médula ósea, tejido adiposo, placenta, cordón umbilical y otros8,9. En respuesta a señales inflamatorias generadas por cáncer, MSCs migran hacia sitios de tumor, incorporan en el microambiente del tumor y finalmente se diferencian en células de apoyo de cáncer10. Estas MSCs asociada con el cáncer proporcionan factores esenciales (es decir, factores de crecimiento, quimiocinas, citoquinas y mediadores inmunosupresores) para la progresión del tumor actuando sobre las células tumorales y el estroma circundante2, 3 , 11 , 12 , 13. mientras el tumor-promover efectos de MSCs asociada con el cáncer han sido investigados en numerosos modelos de cáncer, son poco conocidos los mecanismos por los cuales las células del tumor reprogramar MSCs para dar forma a un nicho de promoción de cáncer. Aquí describimos la generación de un modelo de xenoinjerto de orthotopic que permite específicamente el estudio de la interacción pro-tumorigenic entre las células de cáncer de hueso y MSCs mediante vesículas extracelulares (EVs).
EVs son mediadores cruciales de la comunicación intercelular entre el tumor y las células stromal14. EVs llevar biomoléculas funcionales de la célula de origen, incluyendo proteínas, lípidos y RNAs reguladoras. Una vez liberado en el espacio extracelular, estas vesículas pueden ser tomadas por las células circundantes o llevaron a sitios distantes por medio de la sangre o la circulación linfática y profundamente pueden influir el comportamiento de la célula blanco. 15 , 16 , 17 por ejemplo, absorción de cáncer EVs por fibroblastos del estromales puede resultar en miofibroblastos diferenciación apoyo angiogénesis y acelerar el tumor crecimiento en vivo18,19, internalización por endotelial las células pueden estimular la angiogénesis tumoral y aumentar la permeabilidad vascular16,20, y la interacción con las células inmunes podría conducir a la supresión de la respuesta inmune antitumoral21.
Recientemente demostramos, usando un modelo de ratón de xenoinjerto bioluminiscente orthotopic del osteosarcoma, que las células tumorales liberan gran cantidad de EVs que MSCs para adquirir un fenotipo pro-tumorigenic y pro-metastásico. Este efecto es debido a un cambio drástico en el perfil de expresión de citoquinas MSC (denominado "Educación MSC") y puede prevenirse mediante la administración de un anticuerpo de terapéutica del receptor de la interleucina 6 (IL-6R)7. Nuestro trabajo demostró que el cáncer EVs son moduladores cruciales del comportamiento MSC, así proporcionando un análisis razonado para enfoques dirigidos a microambiente detener la progresión de osteosarcoma. Adjunto, describimos un protocolo paso a paso para investigar la MSC de tumor EV-mediada interacción en vivo. Este modelo se pretende: 1) específicamente definir las alteraciones de cáncer EV-inducido del comportamiento MSC en el microambiente tumoral, 2) evaluar cómo esta interacción contribuye a crecimiento de tumor de hueso y formación de metástasis y 3) estudio si interferir con la interferencia mediada por EV en vivo previene la progresión del cáncer.

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			<td >Equipment</td>
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			<td ></td>
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		<tr >
			<td >Ultra Centrifuge</td>
			<td >Beckman</td>
			<td >Optima L-90K</td>
			<td></td>
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			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Rotor SW32Ti</td>
			<td >Beckman</td>
			<td >369650</td>
			<td colspan="4">Referred to in the manuscript as ultra-swinging bucket rotor</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Transmission electron microscope</td>
			<td >Zeiss</td>
			<td >EM109</td>
			<td>Or similar TEM</td>
			<td></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >Digital camera</td>
			<td >Nikon</td>
			<td >DMX 1200F</td>
			<td>Or similar camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Imaging software TEM&#160;</td>
			<td >Nikon</td>
			<td >ACT-1</td>
			<td></td>
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			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence microscope</td>
			<td >Zeiss</td>
			<td >Imager.D2</td>
			<td colspan="2">Or similar Fluorescence microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Imaging software FM</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td >ZEN Blue</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Incubator</td>
			<td >Nuaire</td>
			<td >4750E</td>
			<td></td>
			<td></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >Centrifuge</td>
			<td >Hettick</td>
			<td >ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
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			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >-80 Freezer</td>
			<td >Thermo electro corporation</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >FACS</td>
			<td >BD</td>
			<td >BD FACScalibur</td>
			<td>Or similar flow cytometer</td>
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			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Drill</td>
			<td >Ferm</td>
			<td >FCT-300</td>
			<td>With 0.8 mm drill</td>
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			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HSS micro twist drills, 0.8 mm</td>
			<td >Proxxon</td>
			<td >28 852</td>
			<td>0.8 mm drill</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >IVIS camera</td>
			<td >Xenogen</td>
			<td >Ivis Lumina</td>
			<td colspan="5">Referred to in the manuscript as bioluminescence camera. Xenogen is now part of Perkin Elmer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Living image software2.60</td>
			<td >Xenogen / Igor Por</td>
			<td >n.a</td>
			<td colspan="2">Xenogen is now part of Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >10 &#181;L Syringe</td>
			<td >Hamilton</td>
			<td >Neuros Model 1701 RN</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Needle: Hamilton RN Needle for Syringe, 26 Gauge, Pointstyle AS, custom length 2 cm</td>
			<td >Hamilton</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Caliper</td>
			<td >Mitutoyo</td>
			<td >G08004463</td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >Autoclave</td>
			<td >Astell</td>
			<td >n.a.</td>
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		<tr >
			<td >Heat Lamp</td>
			<td >Philips</td>
			<td >n.a.</td>
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		<tr >
			<td >Culture media</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >Fetal Bovine Serum</td>
			<td >Hyclone</td>
			<td >RYG35912</td>
			<td></td>
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			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Platelet Lysate</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >IMDM medium</td>
			<td >Lonza</td>
			<td >BE12-722F</td>
			<td></td>
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			<td></td>
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		<tr >
			<td >alpha-MEM medium</td>
			<td >Lonza</td>
			<td >BE02-002F</td>
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		<tr >
			<td >DMEM medium</td>
			<td >Lonza</td>
			<td>BE12-614F</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >pen/strep/glutamine</td>
			<td >GIBCO</td>
			<td >10378-016</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >heparin</td>
			<td >LEO</td>
			<td >012866-08</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Trypsin/EDTA (10x)</td>
			<td >GIBCO</td>
			<td >15400-054</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cells</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >adipose deriverd MSCs</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >GFP-positive MSCs</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >human fibroblasts</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >143B cells</td>
			<td >ATCC</td>
			<td >CRL-8303</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >FLUC-143B cells</td>
			<td >ATCC</td>
			<td >CRL-8303</td>
			<td>Transduced</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Disposables</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture flasks 175 cm2</td>
			<td >CELLSTAR</td>
			<td >660175</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >50 mL tubes</td>
			<td >Greiner bio-one</td>
			<td >210261</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Freeze tubes</td>
			<td >Thermoscientific</td>
			<td >377224</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ultra-Clear tubes</td>
			<td >Beckman</td>
			<td >344058</td>
			<td colspan="4">Referred to in the manuscript as ultra-centrifuge tubes</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0,22 &#181;m filter</td>
			<td >Millex</td>
			<td >SLGV033RS</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >200 mesh Formvar-carbon-coated nickel grids</td>
			<td >EMS (Electron Microscopy Sciences)</td>
			<td ></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.5 mL insulin syringes with 29G Needle</td>
			<td >Terumo</td>
			<td >U-100&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Petri dish</td>
			<td >Sigma - Aldrich</td>
			<td >P7612</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Filter paper&#160;</td>
			<td >Thermo fisher Scientific</td>
			<td >50363215</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Reagents / kits</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >paraformaldehyde</td>
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			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PBS</td>
			<td >Braun</td>
			<td >220/12257974/110</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >glutaraldehyde</td>
			<td >EMS (Electron Microscopy Sciences)</td>
			<td >16300</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >uranyl oxalate</td>
			<td >EMS (Electron Microscopy Sciences)</td>
			<td >22510</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >urany acetate</td>
			<td >EMS (Electron Microscopy Sciences)</td>
			<td >22400</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >methyl cellulose</td>
			<td >EMS (Electron Microscopy Sciences)</td>
			<td >1560</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PKH67</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >mini67-1kt</td>
			<td colspan="2">Referred to in the manuscript as GFLD</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >BSA</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >A8412</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CBA - human inflammatory cytokine kit</td>
			<td >BD</td>
			<td >551811</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Formaldehyde 37%</td>
			<td >VWR</td>
			<td >104003100</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Carbon Steel surgical blades</td>
			<td >Swann-Morton</td>
			<td >206</td>
			<td colspan="3">Referred to in the manuscript as surgical knife</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >anti-human vimentin antibody</td>
			<td >Santa Cruz</td>
			<td >sc-6260</td>
			<td>Clone V9</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Antibody diluent</td>
			<td >DAKO</td>
			<td >S0809</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HRP-labeled anti mouse IgG antibody</td>
			<td >Life Technologies</td>
			<td >32230</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAB-kit</td>
			<td >DAKO</td>
			<td >K500711</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >hematoxyllin</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >GHS232</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >EDTA-buffer</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Citrate buffer</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >rabbit polyclonal anti-GFP antibody</td>
			<td >Abcam</td>
			<td >n.a.</td>
			<td>Ab290</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI&#160;</td>
			<td >Life Technologies</td>
			<td >D1306</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Paracetamol, 120 mg / 5 ml syrup</td>
			<td >Bayer</td>
			<td >n.a.</td>
			<td colspan="2">Sinaspril, paracetamol solution for kids</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Isoflurane 1000 mg/g</td>
			<td >Vumc pharmacy</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >buprenofine hydrochloride, 0.3 mg/ml</td>
			<td >Indivior UK Limited</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >lidocaine-HCL 2%</td>
			<td >Vumc pharmacy</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >70% ethanol</td>
			<td >VWR</td>
			<td >93003.1006</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tissue glue</td>
			<td >Derma+Flex, formulated medical cyanoacrylate</td>
			<td >Vygon</td>
			<td>LB604060</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Eyedrops: Vidisec Carbogel, 2 mg/ml</td>
			<td >Bausch+Lomb</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >D-luciferin, potassium salt</td>
			<td >Gold Biotechnology</td>
			<td >LUCK-1</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass slides</td>
			<td >Thermo scientific</td>
			<td >630-0954</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stainless steel loops&#160;</td>
			<td >n.a.</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Mice experiments</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Mice, Hsd:Athymic Nude-Foxn1nu,&#160; female, 6 weeks at arrival, bacterial status conform FELASA</td>
			<td >ENVIGO</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Paper-pulp smart home (cage enrichment)</td>
			<td >Bio Services</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Alpha-dri bedding material</td>
			<td >Shepperd Speciality Papers</td>
			<td >n.a.</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Mouse food: Teklad global 18% protein rodent diet</td>
			<td >ENVIGO</td>
			<td >2918-11416M</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sutures</td>
			<td >Ethicon</td>
			<td >V926H</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Scissors</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >S3146-1EA</td>
			<td>(or similar)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tweezers</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >F4142-1EA</td>
			<td>(or similar)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical mouse model of osteosarcoma to define the extracellular vesicle-mediated communication between tumor and mesenchymal stem cells

En el microambiente tumoral, residentes o a las células madre mesenquimales (MSCs) contribuyen a la progresión maligna en varios tipos de cáncer. Bajo la influencia de señales ambientales específicas, estas células madre adultas pueden liberar mediadores paracrinos conduce a crecimiento acelerado del tumor y metástasis. Definición de la diafonía entre tumor y MSCs es de vital importancia para entender los mecanismos subyacentes a la progresión del cáncer y para identificar nuevas dianas para la intervención terapéutica.
Las células cancerosas producen altas cantidades de vesículas extracelulares (EVs), que pueden afectar profundamente el comportamiento de las células Diana en el microambiente del tumor o en sitios distantes. Tumor EVs incluyen biomoléculas funcionales, incluyendo inflamatorios RNAs y proteínas (onco), que pueden educar a células estromales para mejorar el comportamiento metastático de las células cancerosas o para participar en la formación de nichos previamente metastásico. En este artículo, describimos el desarrollo de un modelo de ratón de cáncer preclínico que permite la evaluación específica de la diafonía EV-mediada entre el tumor y las células madre mesenquimales. En primer lugar, describimos la purificación y caracterización de EVs secretada por el tumor y la evaluación de la internalización de EV por MSCs. Entonces hacemos uso de un inmunoensayo multiplex basados en grano para evaluar la alteración del perfil de expresión de citoquinas MSC inducida por cáncer EVs. Por último, ilustramos la generación de un modelo de ratón de xenoinjerto de orthotopic bioluminiscente de osteosarcoma que recapitula la interacción tumor-MSC y mostrar la contribución de la educación EV MSCs a formación crecimiento y metástasis del tumor.
Nuestro modelo ofrece la oportunidad de definir cómo cáncer EVs forma un entorno de apoyo al tumor y para evaluar si el bloqueo de la comunicación mediada por EV entre tumor y MSCs previene la progresión del cáncer.

En este estudio, se analizó la capacidad de osteosarcoma secretada EVs para educar MSCs hacia un fenotipo pro-tumorigenic y pro-metastásico. Demostramos que las células de osteosarcoma liberan exosomas como EVs que se internalizan por MSCs. Mide la alteración del perfil de expresión de citoquinas MSC inducida por cáncer EVs y se evaluó el efecto de las MSCs EV-educado en crecimiento del tumor y la formación de metástasis. La representación general del diseño de estudio se ilust...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells

Un modelo de ratón preclínica de Osteosarcoma a definir la comunicación mediada por vesículas extracelular entre Tumor y las células madre mesenquimales

Inyección directa de vesículas extracelulares derivadas de cáncer (EVs) conduce a la reprogramación de la médula ósea apoyando la progresión del tumor; sin embargo, está claro que las células median este efecto. Adjunto, describimos un protocolo paso a paso para investigar EV-mediada de células madre tumorales mesenquimales (MSC) interacciones en vivo, revelando un papel crucial para MSCs EV-educado en metástasis.

Within the tumor microenvironment, resident or recruited mesenchymal stem cells (MSCs) contribute to malignant progression in multiple cancer types. Under ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

Desarrollo y mantenimiento de un tumor del paciente preclínicos Derivado modelo de xenoinjerto para la Investigación de Novela Anti-Cancer Therapies

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Investigación

Investigación sobre el cáncer

A Mimic of the Tumor Microenvironment: A Simple Method for Generating Enriched Cell Populations and Investigating Intercellular Communication

Un imitador del microambiente tumoral: Un método simple para generar poblaciones de células enriquecido y Comunicación intercelular Investigando

Understanding the early heterotypic interactions between cancer cells and the surrounding non-cancerous stroma is important in elucidating the events ...

The Colon-26 Carcinoma Tumor-bearing Mouse as a Model for the Study of Cancer Cachexia

El Colon-26 Carcinoma portadores de tumores de ratón como modelo para el estudio del cáncer de caquexia

Cancer cachexia is the progressive loss of skeletal muscle mass and adipose tissue, negative nitrogen balance, anorexia, fatigue, inflammation, and ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Aislamiento de células tumorales circulantes en un modelo de ratón ortotópico de cáncer colorrectal

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

Determining the Optimal Inhibitory Frequency for Cancerous Cells Using Tumor Treating Fields (TTFields)

Determining the Optimal Inhibitory Frequency for Cancerous Cells Using Tumor Treating Fields TTFields

Determinar la frecuencia inhibidora óptima para las células cancerosas Usando Tumor Tratamiento Fields (TTFields)

Tumor Treating Fields (TTFields) are an effective treatment modality delivered via the continuous, noninvasive application of low-intensity (1-3 V/cm), ...

Analyzing the Communication Between Monocytes and Primary Breast Cancer Cells in an Extracellular Matrix Extract (ECME)-based Three-dimensional System

Analyzing the Communication Between Monocytes and Primary Breast Cancer Cells in an Extracellular Matrix Extract ECME-based Three-dimensional System

Análisis de la comunicación entre monocitos y las células de cáncer de mama primario en una matriz extracelular extracto (ECME)-sistema tridimensional basado en

Embedded in the extracellular matrix (ECM), normal and neoplastic epithelial cells intimately communicate with hematopoietic and non-hematopoietic cells, ...

A Method to Define the Effects of Environmental Enrichment on Colon Microbiome Biodiversity in a Mouse Colon Tumor Model

Un método para definir los efectos del enriquecimiento ambiental sobre la biodiversidad de microbioma de Colon en un modelo de Tumor de Colon murino

Several recent studies have illustrated the beneficial effects of living in an enriched environment on improving human disease. In mice, environmental ...

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Modelado de Osteosarcoma usando las células de vástago de Pluripotent inducido derivados del paciente el síndrome de Li-Fraumeni

Li-Fraumeni syndrome (LFS) is an autosomal dominant hereditary cancer disorder. Patients with LFS are predisposed to a various type of tumors, including ...

Three-Dimensional Bone Extracellular Matrix Model for Osteosarcoma

Modelo de matriz extracelular ósea tridimensional para el Osteosarcoma

Osteosarcoma (OS) is the most common and a highly aggressive primary bone tumor. It is characterized with anatomic and histologic variations along with ...

Capturing Small Molecule Communication Between Tissues and Cells Using Imaging Mass Spectrometry

Molécula pequeña comunicación entre tejidos y células mediante espectrometría de masas en la proyección de imagen de captura

Imaging mass spectrometry (IMS) has routinely been applied to three types of samples: tissue sections, spheroids, and microbial colonies. These sample ...