Name: methods for staging pupal periods and measurement of wing pigmentation of drosophila guttifera
Uploaded: 2018-01-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera at JoVE.com

हम शॉन बी कैरोल और थॉमस वर्नर धंयवाद फ्लाई स्टॉक प्रदान करने के लिए, उपकरण के लिए Naoyuki फ्यूज, Byung Seok जिन फिल्माने में उनकी सहायता के लिए, Kiyokazu Agata सलाह के लिए और एलिजाबेथ Nakajima अंग्रेजी संपादन के लिए । इस काम को KAKENHI 17K19427 और टाकेडा साइंस फाउंडेशन ने सपोर्ट किया था ।

1. फ्लाई स्टॉक
<ol><li>सभी निंन प्रोटोकॉल के लिए Drosophila guttifera का उपयोग करें ।</li>
	<li>प्लास्टिक शीशियों का उपयोग करें (व्यास 25 मिमी x ऊंचाई ९६ मिमी) और फाइबर प्लग (व्यास 23 मिमी x ऊंचाई 26 मिमी) स्टॉक रखरखाव के लिए. एक मान?...

<ol>
	<li>Carson, H. L., Hardy, D. E., Spieth, H. T., Stone, W. S., Hecht, M. K., Steere, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolutionary+biology+of+the+Hawaiian+Drosophilidae.">The evolutionary biology of the Hawaiian Drosophilidae.</a> Essays in evolution and genetics in honor of Theodosius Dobzhansky. , 437-543 (1970).</li><li>Markow, T. A., O'Grady, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drosophila: a guide to species identification and use. , (2006).</li><li>Patterson, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Drosophilidae of the southwest. 4313, 7-216 (1943).</li><li>Setoguchi, S., Takamori, H., Aotsuka, T., Sese, J., Ishikawa, Y., Matsuo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+dimorphism+and+courtship+behavior+in+Drosophila+prolongata.">Sexual dimorphism and courtship behavior in Drosophila prolongata.</a> J Ethol. 32 (2), 91-102 (2014).</li><li>Werner, T., Jaenike, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drosophilids of the Midwest and Northeast. , (2017).</li><li>Arnoult, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+and+diversification+of+fly+pigmentation+through+evolution+of+a+gene+regulatory+module.">Emergence and diversification of fly pigmentation through evolution of a gene regulatory module.</a> Science. 339 (6126), 1423-1426 (2013).</li><li>Camino, E. M., Butts, J. C., Ordway, A., Vellky, J. E., Rebeiz, M., Williams, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolutionary+origination+and+diversification+of+a+dimorphic+gene+regulatory+network+through+parallel+innovations+in+cis+and+trans.">The evolutionary origination and diversification of a dimorphic gene regulatory network through parallel innovations in cis and trans.</a> PLoS Genet. 11 (4), e1005136 (2015).</li><li>Gompel, N., Prud'homme, B., Wittkopp, P. J., Kassner, V. A., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chance+caught+on+the+wing:+cis-regulatory+evolution+and+the+origin+of+pigment+patterns+in+Drosophila.">Chance caught on the wing: cis-regulatory evolution and the origin of pigment patterns in Drosophila.</a> Nature. 433 (7025), 481-487 (2005).</li><li>Glassford, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-option+of+an+ancestral+Hox-regulated+network+underlies+a+recently+evolved+morphological+novelty.">Co-option of an ancestral Hox-regulated network underlies a recently evolved morphological novelty.</a> Dev. Cell. 34 (5), 520-531 (2015).</li><li>Koshikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancer+modularity+and+the+evolution+of+new+traits.">Enhancer modularity and the evolution of new traits.</a> Fly. 9 (4), 155-159 (2015).</li><li>Koshikawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gain+of+cis-regulatory+activities+underlies+novel+domains+of+wingless+gene+expression+in+Drosophila.">Gain of cis-regulatory activities underlies novel domains of wingless gene expression in Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (24), 7524-7529 (2015).</li><li>McGregor, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+evolution+through+multiple+cis-regulatory+mutations+at+a+single+gene.">Morphological evolution through multiple cis-regulatory mutations at a single gene.</a> Nature. 448 (7153), 587-590 (2007).</li><li>Tanaka, K., Barmina, O., Kopp, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+developmental+mechanisms+underlie+the+evolutionary+diversification+of+Drosophila+sex+combs.">Distinct developmental mechanisms underlie the evolutionary diversification of Drosophila sex combs.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (12), 4764-4769 (2009).</li><li>Werner, T., Koshikawa, S., Williams, T. M., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+novel+wing+colour+pattern+by+the+Wingless+morphogen.">Generation of a novel wing colour pattern by the Wingless morphogen.</a> Nature. 464 (7292), 1143-1148 (2010).</li><li>Wittkopp, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspecific+polymorphism+to+interspecific+divergence:+genetics+of+pigmentation+in+Drosophila.">Intraspecific polymorphism to interspecific divergence: genetics of pigmentation in Drosophila.</a> Science. 326 (5952), 540-544 (2009).</li><li>Lawrence, P. A., Morata, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartments+in+the+wing+of+Drosophila:+a+study+of+the+engrailed+gene.">Compartments in the wing of Drosophila: a study of the engrailed gene.</a> Dev Biol. 50 (2), 321-337 (1976).</li><li>Bainbridge, S. P., Bownes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staging+the+metamorphosis+of+Drosophila+melanogaster.">Staging the metamorphosis of Drosophila melanogaster.</a> J. Embryol. Exp. Morphol. 66, 57-80 (1981).</li><li>Ashburner, M., Golic, K. G., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drosophila: A Laboratory Handbook. , (2005).</li><li>Fukutomi, Y., Matsumoto, K., Agata, K., Funayama, N., Koshikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pupal+development+and+pigmentation+process+of+a+polka-dotted+fruit+fly,+Drosophila+guttifera+(Insecta,+Diptera).">Pupal development and pigmentation process of a polka-dotted fruit fly, Drosophila guttifera (Insecta, Diptera).</a> Dev Genes Evol. 227 (3), 171-180 (2017).</li><li>Koshikawa, S., Fukutomi, Y., Matsumoto, K., Sekimura, T., Nijhout, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+guttifera+as+a+model+system+for+unraveling+color+pattern+formation.">Drosophila guttifera as a model system for unraveling color pattern formation.</a> Diversity and evolution of butterfly wing patterns: an integrative approach. , (2017).</li><li>True, J. R., Edwards, K. A., Yamamoto, D., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+wing+melanin+patterns+form+by+vein-dependent+elaboration+of+enzymatic+prepatterns.">Drosophila wing melanin patterns form by vein-dependent elaboration of enzymatic prepatterns.</a> Curr Biol. 9 (23), 1382-1391 (1999).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Izumitani, H. F., Kusaka, Y., Koshikawa, S., Toda, M. J., Katoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phylogeography+of+the+Subgenus+Drosophila+(Diptera:+Drosophilidae):+evolutionary+history+of+faunal+divergence+between+the+Old+and+the+New+Worlds.">Phylogeography of the Subgenus Drosophila (Diptera: Drosophilidae): evolutionary history of faunal divergence between the Old and the New Worlds.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0160051 (2016).</li><li>Resh, V. H., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Insects. , (2009).</li><li>DeLean, A., Munson, P. J., Rodbard, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+analysis+of+families+of+sigmoidal+curves:+application+to+bioassay,+radioligand+assay,+and+physiological+dose-response+curves.">Simultaneous analysis of families of sigmoidal curves: application to bioassay, radioligand assay, and physiological dose-response curves.</a> Am J Physiol. 235 (2), E97-E102 (1978).</li><li>Robertson, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+metamorphosis+of+Drosophila+melanogaster,+including+an+accurately+timed+account+of+the+principal+morphological+changes.">The metamorphosis of Drosophila melanogaster, including an accurately timed account of the principal morphological changes.</a> J Morphol. 59 (2), 351-399 (1936).</li><li>McKinney, M. L., McNamara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Heterochrony: the evolution of ontogeny. , (1991).</li><li>Hardie, D. C., Gregory, T. R., Hebert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+pixels+to+picograms:+a+beginners'+guide+to+genome+quantification+by+Feulgen+image+analysis+densitometry.">From pixels to picograms: a beginners' guide to genome quantification by Feulgen image analysis densitometry.</a> J Histochem Cytochem. 50 (6), 735-749 (2002).</li><li>Koshikawa, S., Miyazaki, S., Cornette, R., Matsumoto, T., Miura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+size+of+termites+(Insecta,+Dictyoptera,+Isoptera)+and+wood+roaches+(Insecta,+Dictyoptera,+Cryptocercidae).">Genome size of termites (Insecta, Dictyoptera, Isoptera) and wood roaches (Insecta, Dictyoptera, Cryptocercidae).</a> Naturwissenschaften. 95 (9), 859-867 (2008).</li></ol>

हम यहां ुपाल चरणों की परिभाषा के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन, विस्तृत अवलोकन के लिए puparium को हटाने, ुपाल चरणों की अवधि को मापने, और D. guttiferaमें एक शाखा पर काले धब्बे की तीव्रता का माप । इन प्रोटोकॉल कई Drosophila और ?...

Drosophila के रूपात्मक लक्षण के कुछ प्रजातियों के बीच विविध रहे है1,2,3,4,5। हम कैसे रूपात्मक विविधता इन morphologies की पीढ़ी के तंत्र की तुलना से उठता है के सवाल का दृष्टिकोण कर सकते हैं । इस तरह के morphologies के उदाहरण हैं लार्वा trichomes, वयस्क सेक्स कंघी, बाहरी जननांग तंत्र, उदर रंजकता, और पंख रंजकता6,7,8,9, 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15. वयस्कों के बीच रूपात्मक मतभेदों का अध्ययन करने के लिए, अवलोकन और ुपाल चरणों का विश्लेषण महत्वपूर्ण हैं, क्योंकि वयस्क लक्षण के भाग्य देर लार्वा चरणों में निर्धारित किया जाता है और ुपाल अवधि के दौरान बाद morphogenesis आय.
विकासात्मक जीवविज्ञान अध्ययन में Drosophila melanogaster, "घंटे APF" (ुपाल गठन के बाद घंटे) आम तरीका है एक ुपाल मंच16से संकेत मिलता है । यह प्रणाली ुपाल गठन के बाद निरपेक्ष समय कार्यरत है और दिनचर्या के प्रयोगों के लिए बहुत सुविधाजनक है । हालांकि, विकास की गति कोषस्थों के बीच अलग हो सकता है, और मामूली आनुवंशिक, epigenetic या microenvironmental मतभेदों से प्रभावित हो सकता है, और इसलिए ुपाल गठन के बाद एक ही निरपेक्ष समय होने की गारंटी नहीं है कि कोषस्थों एक ही हैं विकासात्मक अवस्था । कई मामलों में, रूपात्मक सुविधाओं द्वारा परिभाषित चरणों कई व्यक्तियों की तुलना के लिए बेहतर कर रहे हैं । विशेष रूप से, प्रजातियों के बीच एक तुलना सटीक मचान और इसी (मुताबिक़) चरणों के बीच तुलना की आवश्यकता है ।
Bainbridge और Bownes17 मान्यता प्राप्त 20 ुपाल चरणों (P1 to P15 (ii)) के आधार पर रूपात्मक Drosophila melanogaster की कोषस्थों सुविधाओं पर आधारित है । इस मचान रूपात्मक विकास मचान के सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया प्रणाली है18। पिछले एक अध्ययन में, हम विंग रंजकता अध्ययन19के लिए एक आधार स्थापित करने के लिए Drosophila guttifera के ुपाल मचान प्रदर्शन किया । D. guttifera अपने पंखों पर एक काले पोल्का डॉट पैटर्न है और विंग रंजकता गठन20के लिए मॉडल प्रजातियों में से एक है । हालांकि हम रूपात्मक Bainbridge और ' Bownes अनुसंधान17में वर्णित मानदंडों को भेजा, हम सीधे धारावाहिक प्रेक्षणों19, के बजाय Bainbridge और मंच अवधि के Bownes ' आकलन का उपयोग कर के स्तर की अवधि मापा से मनाया आवृत्ति । यहां हम ुपाल मचान और Fukutomi एट अल19में प्रयुक्त Drosophila के ुपाल चरणों की अवधि के माप की विधि का वर्णन ।
विंग रंजकता के विकास तंत्र का अध्ययन करने के लिए, हमें पता है जब ुपाल या वयस्क चरणों में रंजकता होता है की जरूरत है । Fukutomi एट अल. विंग छवियों की छवि विश्लेषण द्वारा ुपाल और वयस्क चरणों के दौरान रंजकता की 19 मात्रा ऑप्टिकल घनत्व (ODs) । Drosophila पंखों की रंजकता काले मेलेनिन21के संचय के कारण होने लगा है । ODs, ग्रे-स्केल इमेजेस और ImageJ सॉफ्टवेयर (https://imagej.nih.gov/ij/) के ठहराव के लिए22 का इस्तेमाल किया गया । पहचान और स्पॉट विशिष्ट रंजकता (ΔOD) यों तो, हम एक स्थान के अंदर आयुध डिपो से एक स्थान के बाहर आयुध डिपो घटाना । इस विधि को प्रतिलिपि और उद्देश्य बनाने के लिए, आयुध डिपो की माप के स्थान को पंख की नसों के रूप में उपयोग करके निर्धारित किया जाना चाहिए । इस आलेख में, हम विस्तार में Drosophila guttiferaमें विंग रंजकता के ठहराव की इस विधि का वर्णन ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Drosophila guttifera</td>
			<td>The Drosophila Species Stock Center at the U.C. San Diego</td>
			<td>15130-1971.10</td>
			<td>Drosophila guttifera, a fruit fly species used in this article</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic vial</td>
			<td>Hightech</td>
			<td>MKC-30</td>
			<td>Plastic vial, for fly stock maintenance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buzz plugs vial and bottle closures for glass vials</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AS-271</td>
			<td>Cellulose plug, for fly stock maintenance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White soft sugar</td>
			<td>Mitsui Sugar</td>
			<td>J-500g</td>
			<td>White soft sugar, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn flour</td>
			<td>Nippon Flour Mills</td>
			<td>F</td>
			<td>Corn flour, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn grits - C</td>
			<td>Nippon Flour Mills</td>
			<td>GC</td>
			<td>Corn grits - C, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar powder</td>
			<td>Matsuki Kanten Sangyo</td>
			<td>No.602</td>
			<td>Agar powder, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry beer yeast</td>
			<td>Asahi Food &#38; Healthcare</td>
			<td>Y2A</td>
			<td>Dry beer yeast, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butyl p-hydroxybenzoate</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>06327-02</td>
			<td>Butyl p-hydroxybenzoate, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Wako</td>
			<td>057-00456</td>
			<td>Ethanol, for standard cornmeal/sugar/yeast/agar food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat bottom microtube</td>
			<td>Ina Optica</td>
			<td>CF-0150</td>
			<td>1.5 mL microtube, for collecting pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CAPSULEFUGE</td>
			<td>Tomy</td>
			<td>PMC-060</td>
			<td>Mini microcentrifuge, for collecting pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilized Schale NB</td>
			<td>Sansei Medical</td>
			<td>01-013</td>
			<td>Plastic Petri dish (diameter 90 mm x height 15 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serum tube rack</td>
			<td>Iwaki</td>
			<td>9796-050</td>
			<td>Used as a moist chamber, for observation of pupa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Falcon Easy-Grip tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353001</td>
			<td>Plastic Petri dish (diameter 35 mm x height 10 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon standard tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td>Plastic Petri dish (diameter 60 mm x height 15 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Push-pin</td>
			<td>Kokuyo</td>
			<td>51233709</td>
			<td>Push-pin, for making pinholes on the microtube lid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZX16</td>
			<td>Stereomicroscope, for morphological observation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>DSE-330-A</td>
			<td>Digital camera, for imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NICETACK double sided tape</td>
			<td>Nichiban</td>
			<td>NW-15SF</td>
			<td>Double sided tape, for removing puparium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11252-20</td>
			<td>Forceps, for removing puparium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Van Gogh VISUAL Paint brush</td>
			<td>Talens Japan</td>
			<td>GWVR-#5/0</td>
			<td>Paint brush, for removing puparium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner CELLSTAR 12 well cell culture plate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>665-180</td>
			<td>12-well cell culture plate, for measuring durations of pupal periods</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-01665</td>
			<td>NaCl, for PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>285-14</td>
			<td>KCl, for PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4&#183;12H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02835</td>
			<td>Na2HPO4&#183;12H2O, for PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>28721-55</td>
			<td>KH2PO4, for PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stepped Neutral Density (ND) Filter 0.04 - 3.0</td>
			<td>Edmund Optics</td>
			<td>64-384</td>
			<td>Stepped density filter, for calibration of pigmentation measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ software</td>
			<td>NIH</td>
			<td>1.8.0-101</td>
			<td>ImageJ software, for measurement of intensity of black spots on a wing (https://imagej.nih.gov)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FINE FROST glass slide</td>
			<td>Matsunami Glass Ind</td>
			<td>FF-001</td>
			<td>Glass slide, for measurement of intensity of black spots on a wing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Square microscope cover glass 18 x 18</td>
			<td>Matsunami Glass Ind</td>
			<td>C018181</td>
			<td>Cover slip, for measurement of intensity of black spots on a wing</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for staging pupal periods and measurement of wing pigmentation of drosophila guttifera

Drosophila की विविध प्रजातियों (फल मक्खी) विकास के तंत्र और आनुवंशिक परिवर्तन के लिए जिंमेदार बदलाव के अध्ययन के लिए अवसर प्रदान करते हैं । विशेष रूप से, वयस्क मंच एक विशिष्ट तुलना के लिए रूपात्मक लक्षण का एक समृद्ध स्रोत है, पंख रंजकता तुलना सहित । प्रजातियों के बीच विकासात्मक मतभेदों का अध्ययन करने के लिए, विस्तृत अवलोकन और उचित मचान सटीक तुलना के लिए आवश्यक हैं । यहाँ हम ुपाल समय और एक पोल्का-बिंदीदार फल मक्खी में विंग रंजकता के ठहराव के मचान के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन, Drosophila guttifera. सबसे पहले, हम विस्तृत रूपात्मक अवलोकन और morphologies के आधार पर ुपाल चरणों की परिभाषा के लिए विधि का वर्णन । इस विधि में puparium को हटाने के लिए एक तकनीक शामिल है, जो pupa का बाहरी chitinous मामला है, ुपाल morphologies का विस्तृत अवलोकन करने में सक्षम है । दूसरा, हम परिभाषित ुपाल चरणों की अवधि को मापने के लिए विधि का वर्णन । अंत में, हम डिजिटल छवियों और ImageJ सॉफ्टवेयर का उपयोग कर छवि विश्लेषण के आधार पर विंग रंजकता के ठहराव के लिए विधि का वर्णन । इन तरीकों के साथ, हम ुपाल चरणों के दौरान वयस्क लक्षण के विकास की प्रक्रिया की तुलना के लिए एक ठोस आधार स्थापित कर सकते हैं ।

D. guttifera की ुपाल अवधि को 17 चरणों (p1-P15 (ii) में विभाजित कर दिया गया है; तीन प्रतिनिधि चरणों (p1, P5-6, P10) की छवियां चित्रा 3दर्शाई गई हैं, और सभी 17 अवस्थाएं चित्रा 4में सचित्र हैं) । हा?...

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Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera

ुपाल समय और Drosophila guttifera की विंग रंजकता की माप मचान के लिए प्रोटोकॉल वर्णित हैं । स्टैगिंग और रंजकता के ठहराव वयस्क लक्षण के विकासात्मक तंत्र का अध्ययन करने और विशेषता के विकास के एक विशिष्ट तुलना सक्षम करने के लिए एक ठोस आधार प्रदान करते हैं ।

ुपाल समय और Drosophila guttifera के पंख रंजकता की माप मचान के लिए तरीके

Diversified species of Drosophila (fruit fly) provide opportunities to study mechanisms of development and genetic changes responsible for evolutionary ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera

High-resolution Measurement of Odor-Driven Behavior in Drosophila Larvae

गंध ड्रोसोफिला लार्वा में संचालित व्यवहार की उच्च संकल्प मापन

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

ड्रोसोफिला लार्वा के NMJ से Synaptic क्षमता रिकॉर्डिंग के लिए electrophysiological तरीके

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

के लाइव विच्छेदन ड्रोसोफिला भ्रूण एंटीबॉडी धुंधला द्वारा उत्परिवर्ती संग्रह स्क्रीनिंग के लिए सुव्यवस्थित तरीके

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Laser Microdissection Applied to Gene Expression Profiling of Subset of Cells from the Drosophila Wing Disc

Laser Microdissection Applied to Gene Expression Profiling of Subset of Cells from the Drosophila Wing Disc

लेजर Microdissection से कोशिकाओं के सबसेट के जीन अभिव्यक्ति रूपरेखा लागू करने के लिए ड्रोसोफिला विंग डिस्क

Heterogeneous nature of tissues has proven to be a limiting factor in the amount of information that can be generated from biological samples, ...

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

ड्रोसोफिला पोटा संबंधी पेट immunohistochemistry

The Drosophila pupal abdomen is an established model system for the study of epithelial morphogenesis and the development of sexually dimorphic ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

उम्र के मापन में<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

उड़ान प्रदर्शन का सही और तेजी से मापन के लिए एक बेहतर तरीका में<em&gt; ड्रोसोफिला</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Imaging Through the Pupal Case of Drosophila melanogaster

Imaging Through the Pupal Case of Drosophila melanogaster

की पोटा संबंधी मामले के माध्यम से इमेजिंग<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

The longstanding use of Drosophila as a model for cell and developmental biology has yielded an array of tools. Together, these techniques have enabled ...

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

मेटाबोलिक दर के मापन में<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; Respirometry का उपयोग

Metabolic disorders are a frequent problem affecting human health. Therefore, understanding the mechanisms that regulate metabolism is a crucial ...

Ex vivo Culture of Drosophila Pupal Testis and Single Male Germ-line Cysts: Dissection, Imaging, and Pharmacological Treatment

Ex vivo Culture of Drosophila Pupal Testis and Single Male Germ-line Cysts: Dissection, Imaging, and Pharmacological Treatment

विच्छेदन, इमेजिंग, और औषधीय उपचार: ड्रोसोफिला पोटा संबंधी वृषण और एकल पुरुष रोगाणु लाइन अल्सर के पूर्व vivo संस्कृति

During spermatogenesis in mammals and in Drosophila melanogaster, male germ cells develop in a series of essential developmental processes. This includes ...