Name: combining x-ray crystallography with small angle x-ray scattering to model unstructured regions of nsa1 from s. cerevisiae
Uploaded: 2018-01-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combining X-Ray Crystallography with Small Angle X-Ray Scattering to Model Unstructured Regions of Nsa1 from S. Cerevisiae at JoVE.com

עקיפה הנתונים נאספו ב דרום מזרח אזוריים שיתופי גישה צוות (SER-חתול) 22-ID ו- 22-מוניטור beamlines-מתקדם הפוטון מקור (APS), Argonne National Laboratory. הנתונים SAXS נאספו על הפרעות לקרן החלקיקים SIBYLS-מראש אור מקור (ALS), המעבדה הלאומית לורנס ברקלי. ברצוננו להודות לצוות-הפרעות לקרן החלקיקים SIBYLS על עזרתם עם איסוף נתונים מרחוק ועיבוד. אנחנו אסירי תודה הלאומית המכון למדעי בריאות הסביבה (NIEHS) מסה ספקטרומטר המחקר, קבוצת תמיכה כדי לברר את גבולות התחום חלבון עבודה זו נתמכה על ידי לנו מכון של בריאות מגזר מחקר התכנית הלאומית; המכון הלאומי האמריקאי למדעי בריאות וסביבה (NIEHS) (ZIA ES103247 ל ר א ס) ומכונים הקנדית לחקר בריאות (CIHR, 146626 כדי M.C.P). השימוש APS נתמכה על ידי לנו משרד האנרגיה, משרד המדע, משרד בסיסי אנרגיה למדעים תחת חוזה מס W-31-109-Eng-38. שימוש של מקור אור מתקדם (ALS) נתמכה על ידי מנהל, משרד המדע, משרד בסיסי אנרגיה למדעים, של מחלקת האנרגיה של ארצות הברית תחת חוזה מס דה-AC02-05CH11231. תמיכה נוספת עבור הפרעות לקרן החלקיקים SIBYLS SAXS נובע המכון הלאומי לבריאות פרוייקט מינוס (R01GM105404), יוקרתי מכשור גראנט S10OD018483. כן נרצה להודות אנדריאה הירח ואת ד ר שרה אנדרס. בקריאה ביקורתית של כתב היד הזה.

1. ייצור חלבון רקומביננטי ולטיהור אס 1
<ol><li>Nsa1 ביטוי פלסמיד עיצוב, שיבוט<ol>
<li>לקבל או לרכוש DNA גנומי cerevisiae ס .</li>
		<li>PCR להגביר את רצפי היעד של Nsa1 (Nsa1חליל, שאריות 1-463) ו- C-מסוף נחתך Nsa1 (Nsa1ΔC, שאריות 1-434) עם תחל המתאים באמצעות DNA גנומי מבודד cerevisiae ס ו טמפרטורת ההיתוך של כ 60 ° C עם מ?...

באמצעות פרוטוקול זה, Nsa1 רקומביננטי של cerevisiae ס נוצר ללימודי מבניים על ידי קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן והן SAXS. Nsa1 ומנומסת בתמיסה, גיבש בצורות קריסטל מרובים. במהלך אופטימיזציה של גבישים אלו, התגלה כי קצה קרבוקסילי של Nsa1 היה רגיש פרוטאז השפלה. הרזולוציה הגבוהה, טופס הגבישית האורתורומ?...

הריבוזומים הם מכונות ribonucleoprotein גדול לבצע את התפקיד החיוני של mRNA לתרגם חלבונים בתאים חיים לכל. הריבוזומים מורכבים subunits שני המיוצרים בתהליך מורכב כינה ריבוזום להן1,2,3,4. ריבוזום האיקריוטים הרכבה מסתמך על הסיוע של מאות הרכבה ribosomal חיוני גורמים2,3,5. Nsa1 (Nop7 הקשורים 1) הוא גורם הרכבה ריבוזום האיקריוטים נדרשת במיוחד עבור ההפקה של יחידת משנה ribosomal גדול6, הוא ידוע כ/כפי WD-חזור המכילה 74 (WDR74) באורגניזמים גבוה7. WDR74 הוכח הדרושות הבלסטוציסט היווצרות עכברים8, יזם WDR74 הוא לעתים קרובות מוטציה בתאי סרטן9. עם זאת, תפקוד ואת מנגנוני מדויק של Nsa1/WDR74 בהרכבה ריבוזום הם עדיין אינו מודע לקיומם. כדי להתחיל לחשוף את התפקיד של Nsa1/WDR74 במהלך ההבשלה האיקריוטים ריבוזום, בוצעו מספר ניתוחים מבניים, לרבות קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן, זווית קטנה רנטגן פיזור (SAXS)10.
קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן, תהודה מגנטית גרעינית (NMR) ספקטרוסקופיה, מיקרוסקופ אלקטרוני, ו SAXS הם כולם חשובים טכניקות לימוד מבנה macromolecular. גודל, צורה, זמינות, יציבות של מקרומולקולות השפעות שיטת ביולוגיה מבנית אשר מקרומולקולה מסוים יהיה עדיף מתאים, אולם שילוב טכניקות מרובות באמצעות גישה כביכול "היברידי" הופכת כלי מועיל יותר ויותר11. בפרט קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן ו- SAXS הם חזקים משלימים שיטות לקביעת מבנית של מקרומולקולות12.
קריסטלוגרפיה מספק הבראבה ברזולוציה גבוהה, מולקולות קטנות ועד מכונות הסלולר גדול כגון הריבוזום, הוביל לפריצות רבות בהבנה של פונקציות ביולוגיות של חלבונים ועוד מקרומולקולות13. יתר על כן, תכנון תרופות מבוססות-מבנה רתמות הכוח של קריסטל מבנים עבור עגינה מולקולרית על ידי שיטות חישובית, הוספת ממד ביקורתי סמים בגילוי ופיתוח14. למרות את תחולתן רחבה, מערכות גמיש ומבולבלת הן מאתגרות כדי להעריך על-ידי קריסטלוגרפיה מאז קריסטל האריזה יכול להיות יופרע או מפות צפיפות אלקטרונים עשוי להיות חלקי או באיכות ירודה. לעומת זאת, SAXS היא פתרון ומבוססי ברזולוציה נמוכה מבניים גישה מסוגל לתאר את מערכות גמיש החל לולאות המתוסבכים טרמיני חלבונים ממהותם המתוסבכים12,15,16. בהתחשב שהוא תואם למגוון רחב של חלקיקים גדלים12, SAXS יכולות לפעול בסינרגיה עם קריסטלוגרפיה כדי להרחיב את טווח השאלות הביולוגיות זה ניתן לטפל על ידי מחקרים מבנית.
Nsa1 מתאים לגישה המבנית היברידית מכיוון שהוא מכיל תחום WD40 בנוי היטב ואחריו פונקציונלי, אך גמיש קרבוקסילי אשר אינה נוטה שיטות קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן. הבא הוא פרוטוקול עבור שכפול, ביטוי, טיהור של cerevisiae ס Nsa1 לקביעת מבנה היברידי על ידי קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן, SAXS. פרוטוקול זה ניתן להתאים ללמוד את מבנה של חלבונים אחרים המורכב מעובדים בשילוב של אזורים מסודרת ומבולבלת.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Molecular Cloning of Nsa1</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMBP2 parallel vector</td>
			<td>Sheffield et al, Protein Expression and Purification 15, 34-39 (1999)</td>
			<td></td>
			<td>We used a modified version of pMBP2 which included an N-terminal His-tag (pHMBP)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. cerevisiae genomic DNA</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>204508D-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primers for cloning Nsa1</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SC_Nsa1_FLFw</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td>CGC CAA AGG CCT 
			ATGAGGTTACTAGTCAGCTGTGT 
			GGATAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SC_Nsa1_FLRv</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td>AATGCAGCGGCCGCTCAAATTTT 
			GCTTTTCTTACTGGCTTTAGAAGC 
			AGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SC_Nsa1_DeltaCFw</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td>GGGCGCCATGGGATCCATGAGG 
			TTACTAGTCAGCTGTGTGG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SC_Nsa1_DeltaCRv</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td>GATTCGAAAGCGGCCGCTTAAAC 
			CTTCCTTTTTTGCTTCCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Protein Production and Purification of Nsa1</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli BL21 (DE3) Star Cells</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C601003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMBP- NSA1 and various truncations</td>
			<td>Lo et al., 2017</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Selenomethionine</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD12-503B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG, Dioxane-Free</td>
			<td>Promega</td>
			<td>V3953</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA Free Protease Inhibitor Cocktail</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>4693159001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Caledon Laboratory Chemicals</td>
			<td>7560-1-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Buffer, 1 M pH7.5</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>RGF-3340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15514-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>beta-mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M6250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1M Imidazole, pH 8.0</td>
			<td>Teknova</td>
			<td>I6980-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Talon Affinity Resin</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>635503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra 15 mL Centrifugal Filter (MWCO 10K)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>UFC901024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HiLoad 16/600 Superdex 200 Prep Grade Gel Filtration Column</td>
			<td>GE-Healthcare</td>
			<td>28989335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEV Protease</td>
			<td>Prepared by NIEHS Protein Expression Core</td>
			<td>Expression plasmid provided by NCI (Tropea et al. Methods Mol Biology, 2009)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-15% Mini-PROTEAN TGX Precast Protein Gels</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>456-8056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystallization, Proteolytic Screening</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal Screen</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal Screen 2</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salt Rx</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Index&#160; Screen</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEG/Ion Screen</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>JCSG+</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD1-37</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wizard Precipitant Synergy&#160;</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD15-PS-T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swissci 96-well 3-drop UVP sitting drop plates</td>
			<td>TTP Labtech</td>
			<td>4150-05823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3inch Wide Crystal Clear Sealing Tape</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR4-506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proti-Ace Kit</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEG 1500</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD2-100-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEG 400</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD2-100-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES/sodium hydroxide pH 7.5</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD2-011-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Citrate tribasic</td>
			<td>Molecular Dimensions</td>
			<td>MD2-100-127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 mm x 0.22 mm Siliconized Coverslides</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR3-231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Well Plates with sealant (VDX Plate with Sealant)</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR3-172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;18 mM Mounted Nylon Loops (0.05 mm to 0.5 mM)</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR4-945, HR4-947, HR4-970, HR4-971</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seed Bead Kit</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Crystal Caps</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR4-779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Cryo Wand</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR4-729</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryogenic Foam Dewar</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR4-673</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal Puck System</td>
			<td>MiTeGen</td>
			<td>M-CP-111-021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Full Skirt 96 well Clear Plate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10011-228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AxyMat Sealing Mat</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10011-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UVEX-m</td>
			<td>JAN Scientific, Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop Lite Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo-Fisher</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Robot</td>
			<td>TTP Labtech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software/Websites</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HKL2000</td>
			<td>Otwinoski and Minor, 1997</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenix</td>
			<td>Adams et al., 2010</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coot</td>
			<td>Emsley et al., 2010</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATSAS</td>
			<td>Petoukhov et al., 2012</td>
			<td></td>
			<td>https://www.embl-hamburg.de/biosaxs/atsas-online/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scatter</td>
			<td>Rambo and Tainer, 2013</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pymol</td>
			<td>The PyMOL Molecular Graphics System, Version 1.8 Schr&#246;dinger, LLC.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BUNCH</td>
			<td>Petoukhov and Svergun, 2005</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CRYSOL</td>
			<td>Svergun et al, 1995</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMUS</td>
			<td>Konarev et al, 2003</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EOM</td>
			<td>Tria et al, 2015</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combining x-ray crystallography with small angle x-ray scattering to model unstructured regions of nsa1 from s. cerevisiae

קביעת המבנה באורך מלא של ריבוזום הרכבה גורם Nsa1 של האפייה (cerevisiae ס) הוא מאתגר בגלל סדר, פרוטאז יציב קרבוקסילי של החלבון. כתב יד זה מתאר את השיטות לטיהור Nsa1 רקומביננטי של cerevisiae ס עבור ניתוח מבנה על ידי קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן והן SAXS. קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן היה מנוצל כדי לפתור את המבנה של המחשבים N-מסוף WD40 ומסודרת של Nsa1 ולאחר מכן SAXS שימש כדי לפתור את המבנה של C-הסופית של Nsa1 בתמיסה. פתרון פיזור הנתונים נאספו מ- Nsa1 באורך מלא בתמיסה. Amplitudes פיזור תיאורטי חושבו מתוך מבנה הגביש ברזולוציה גבוהה של התחום WD40 ולאחר מכן שילוב של גוף קשיח ומודלים ab initio חשף את קצה קרבוקסילי של Nsa1. באמצעות גישה זו היברידית שוחזר המבנה רבעוני של החלבון כולו. השיטות המובאות כאן צריך להיות חלים באופן כללי מצפני היברידית מבניים לחלבונים אחרים מורכבת תערובת של תחומים מובנים ולא מובנים.

Nsa1 היה PCR מוגבר מ- DNA גנומי cerevisiae ס ו subcloned לתוך וקטור המכיל תג קירבה x 6-היסטידין N-מסוף ואחריו MBP, אתר פרוטאז ' אס '. Nsa1 הפך לתוך e. coli BL21(DE3) כדוריות, תפוקה גבוהה של חלבון ביטוי התקבלו בעקבות אינדוקציה עם IPTG וצמיחה 25 ° c בלילה (איור 1 א'). Nsa1 הייתה זיקה-מטוהר?...

Watch this Scientific Journal Video about Combining X-Ray Crystallography with Small Angle X-Ray Scattering to Model Unstructured Regions of Nsa1 from S. Cerevisiae at JoVE.com

Combining X-Ray Crystallography with Small Angle X-Ray Scattering to Model Unstructured Regions of Nsa1 from S. Cerevisiae

שיטה זו מתאר את שיבוט, הביטוי, ואת טיהור של Nsa1 רקומביננטי לקביעת מבנה על ידי קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן, רנטגן זווית קטנה פיזור (SAXS), והוא רלוונטי לניתוח המבני היברידית של חלבונים אחרים שניהם הורו, מגרה תחומים.

שילוב קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן עם זווית קטנה פיזור קרני רנטגן ליצור מודל לא מובנה מחוזות Nsa1 של Cerevisiae ס

Determination of the full-length structure of ribosome assembly factor Nsa1 from Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) is challenging because of the ...

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Combining X-Ray Crystallography with Small Angle X-Ray Scattering to Model Unstructured Regions of Nsa1 from S. Cerevisiae

Characterization of Glycoproteins with the Immunoglobulin Fold by X-Ray Crystallography and Biophysical Techniques

אפיון של Glycoproteins עם הקיפול בנוגדנים על ידי קריסטלוגרפיה באמצעות קרני רנטגן וטכניקות ביופיזיקלי

Glycoproteins on the surface of cells play critical roles in cellular function, including signalling, adhesion and transport. On leukocytes, several of ...

Contrast-Matching Detergent in Small-Angle Neutron Scattering Experiments for Membrane Protein Structural Analysis and Ab Initio Modeling

Contrast-Matching Detergent in Small-Angle Neutron Scattering Experiments for Membrane Protein Structural Analysis and Ab Initio Modeling

התאמת ניגודיות דטרגנט בניסויים פיזור ניוטרון זווית קטנה עבור ניתוח מבנה של חלבון ממברנה ומודלים Initio אלב

The biological small-angle neutron scattering instrument at the High-Flux Isotope Reactor of Oak Ridge National Laboratory is dedicated to the ...

Structural Studies of Macromolecules in Solution using Small Angle X-Ray Scattering

לימודי המבנית של מקרומולקולות בפתרון באמצעות פיזור קרני רנטגן זווית קטנה

Protein-protein interactions involving proteins with multiple globular domains present technical challenges for determining how such complexes form and ...

Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization

Ion Exchange Chromatography IEX Coupled to Multi-angle Light Scattering MALS for Protein Separation and Characterization

יונים כרומטוגרפיה (IEX) מצמידים מרובה זווית פיזור אור (MALS) עבור חלבון הפרדה ואפיון

Ion-exchange chromatography with multi-angle light scattering (IEX-MALS) is a powerful method for protein separation and characterization. The combination ...

Characterization of Proteins by Size-Exclusion Chromatography Coupled to Multi-Angle Light Scattering (SEC-MALS)

Characterization of Proteins by Size-Exclusion Chromatography Coupled to Multi-Angle Light Scattering SEC-MALS

אפיון של חלבונים לפי גודל כרומטוגרפיה הדרה מצמידים לפיזור אור רב זווית (SEC-דוליטל)

Analytical size-exclusion chromatography (SEC), commonly used for the determination of the molecular weight of proteins and protein-protein complexes in ...

An All-in-one Sample Holder for Macromolecular X-ray Crystallography with Minimal Background Scattering

מחזיק מדגם All-in-one עבור קריסטלוגרפיה Macromolecular X-ray עם פיזור רקע מינימלי

Macromolecular X-ray crystallography (MX) is the most prominent method to obtain high-resolution three-dimensional knowledge of biological macromolecules. ...

Cell Culture on Silicon Nitride Membranes and Cryopreparation for Synchrotron X-ray Fluorescence Nano-analysis

תרבות התא על ממברנות הסיליקון נידהר וקריופיקציה עבור סינכרוטרון X-ray פלואורסצנטית ננו-ניתוח

Very little is known about the distribution of metal ions at the subcellular level. However, those chemical elements have essential regulatory functions ...

X-Ray Crystallography to Study the Oligomeric State Transition of the Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050

X-Ray Crystallography to Study the Oligomeric State Transition of the Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050

קריסטלוגרפיה רנטגן כדי ללמוד את המעבר המדינה אוליגומרית של Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050

The M42 aminopeptidases form functionally active complexes made of 12 subunits. Their assembly process appears to be regulated by their metal ion ...

Fixed Target Serial Data Collection at Diamond Light Source

איסוף נתונים טוריים של יעד קבוע במקור אור יהלום

Serial data collection is a relatively new technique for synchrotron users. A user manual for fixed target data collection at I24, Diamond Light Source is ...

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

תנועתיות של מולקולות בודדות ואשכולות של קינסין-5 Cin8 דו-כיווני מטוהרים מתאי S. cerevisiae

The mitotic bipolar kinesin-5 motors perform essential functions in spindle dynamics. These motors exhibit a homo-tetrameric structure with two pairs of ...