Name: flow cytometry to estimate leukemia stem cells in primary acute myeloid leukemia and in patient-derived-xenografts, at diagnosis and follow up
Uploaded: 2018-03-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado en parte por el francés Asociación Laurette Fugain, LigueContre le cáncer (centro norte), Fondation de France (Comité de leucemia), Oncolille SIRIC e Instituto Nacional del cáncer francés.

Seguimos las normas europeas para el uso de animales para fines científicos. Este estudio fue aprobado por el Comité de ética local (#3097-2015120414583482v3).
1. preparación de la muestra
<ol><li>Recoger de la médula (2 mL) de novo de AML en tubos que contienen el ácido etilendiaminotetracético anticoagulante (EDTA) en una concentración de 1,8 mg / mL de médula ósea.</li>
	<li>Realizar separación de Ficoll, una separación del gradiente de densidad para aislar las célul...

<ol>
	<li>Shlush, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+origins+of+relapse+in+acute+myeloid+leukaemia+to+stem+cells.">Tracing the origins of relapse in acute myeloid leukaemia to stem cells.</a> Nature. , (2017).</li><li>Terwijn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukemic+stem+cell+frequency:+a+strong+biomarker+for+clinical+outcome+in+acute+myeloid+leukemia.">Leukemic stem cell frequency: a strong biomarker for clinical outcome in acute myeloid leukemia.</a> PLoS One. 9 (9), e107587 (2014).</li><li>Jordan, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interleukin-3+receptor+alpha+chain+is+a+unique+marker+for+human+acute+myelogenous+leukemia+stem+cells.">The interleukin-3 receptor alpha chain is a unique marker for human acute myelogenous leukemia stem cells.</a> Leukemia. 14 (10), 1777-1784 (2000).</li><li>van Rhenen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+novel+AML+stem+cell+associated+antigen+CLL-1+aids+in+discrimination+between+normal+and+leukemic+stem+cells.">The novel AML stem cell associated antigen CLL-1 aids in discrimination between normal and leukemic stem cells.</a> Blood. 110 (7), 2659-2666 (2007).</li><li>Bonardi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+proteomics+and+transcriptomics+approach+to+identify+leukemic+stem+cell+(LSC)+markers.">A proteomics and transcriptomics approach to identify leukemic stem cell (LSC) markers.</a> Mol Cell Proteomics. 12 (3), 626-637 (2013).</li><li>Kikushige, Y., Miyamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+TIM-3+as+a+Leukemic+Stem+Cell+Surface+Molecule+in+Primary+Acute+Myeloid+Leukemia.">Identification of TIM-3 as a Leukemic Stem Cell Surface Molecule in Primary Acute Myeloid Leukemia.</a> Oncology. 89, 28-32 (2015).</li><li>Bonnet, D., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+acute+myeloid+leukemia+is+organized+as+a+hierarchy+that+originates+from+a+primitive+hematopoietic+cell.">Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell.</a> Nat Med. 3 (7), 730-737 (1997).</li><li>Kersten, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD45RA,+a+specific+marker+for+leukaemia+stem+cell+sub-populations+in+acute+myeloid+leukaemia.">CD45RA, a specific marker for leukaemia stem cell sub-populations in acute myeloid leukaemia.</a> Brit J Haematol. 173 (2), 219-235 (2016).</li><li>Goardon, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coexistence+of+LMPP-like+and+GMP-like+leukemia+stem+cells+in+acute+myeloid+leukemia.">Coexistence of LMPP-like and GMP-like leukemia stem cells in acute myeloid leukemia.</a> Cancer Cell. 19 (1), 138-152 (2011).</li><li>Ng, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+17-gene+stemness+score+for+rapid+determination+of+risk+in+acute+leukaemia.">A 17-gene stemness score for rapid determination of risk in acute leukaemia.</a> Nature. 540 (7633), 433-437 (2016).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> J. Immunol. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>Roloff, G. W., Lai, C., Hourigan, C. S., Dillon, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Advances+in+the+Measurement+of+Residual+Disease+in+Acute+Myeloid+Leukemia.">Technical Advances in the Measurement of Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia.</a> J Clin Med. 6 (9), (2017).</li><li>Swamydas, S., Lionakis, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+Purification+and+Labeling+of+Mouse+Bone+Marrow+Neutrophils+for+Functional+Studies+and+Adoptive+Transfer+Experiments.">Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments.</a> J Vis Exp. (77), e50586 (2013).</li><li>Gabert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+and+quality+control+studies+of+'real-time'+quantitative+reverse+transcriptase+polymerase+chain+reaction+of+fusion+gene+transcripts+for+residual+disease+detection+in+leukemia+-+a+Europe+Against+Cancer+program.">Standardization and quality control studies of 'real-time' quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction of fusion gene transcripts for residual disease detection in leukemia - a Europe Against Cancer program.</a> Leukemia. 17 (12), 2318-2357 (2003).</li></ol>

Una evaluación precisa y reproducible de membrana o marcadores citoplasmáticos por citometría de flujo requiere que opciones se verifican cada día para la alineación óptica, buen funcionamiento del sistema neumático, sensibilidad óptica y normalización con perlas de calibración.
Detección de poblaciones celulares de la ráfaga en AML mediante análisis de citometría de flujo multi-paramétricos CD90 y CD45RA es un método relativamente simple y confiable. Un paso fundamental en est...

Leucemia mieloide aguda (AML) es la causa más común de mortalidad asociada a la leucemia. Inicialmente, la LMA es una enfermedad clonal de las células madre hematopoyéticas (HSC) caracterizado por la detención de la diferenciación, la posterior acumulación de células de la ráfaga y la producción de elementos hematopoyéticos funcionales. Recientemente, heterogeneidad clonal de la población de células de la ráfaga se ha establecido básicamente utilizando estrategias de secuenciación (NGS) de próxima generación y que muestra la existencia de la evolución intra clonal del tumor las células1.
Heterogeneidad se extiende a la presencia de células leucémicas (LSC). Se presume que este compartimiento celular dinámica evoluciona para superar distintas presiones de selección impuestas durante el tratamiento y la progresión de la leucemia. LSC, por tanto, debían ser resistentes a los regímenes quimioterapéuticos actuales y mediar la recaída de la enfermedad, con profundas implicaciones clínicas2. Se han descrito diversos marcadores para caracterizar la LSC como CD1233, 1 CLL4, CD975 o TIM-36. El CD34 + CD38-compartimiento de células de la ráfaga se considera para ser enriquecidos para LSC7 pero también incluye HSC normal. CD90 y CD45RA expresión aplicada a CD34 + CD38-compartimiento (P6) (figura 1) permite para segregar varias etapas de precursores hematopoyéticos normales y malignas8. En concreto, normales CD34 + CD38-CD90 + CD45RA-HSCs, multipotentes progenitores (MPP) como CD34 + CD38-CD90dimCD45RA-células CD34 + CD38-CD90-CD45RA + células progenitoras multipotentes linfoide preparado (LMPP) pueden determinarse en la mayoría de AML casos8 ,9. La intensidad de fluorescencia media (IFM) de CD38 es particularmente importante a considerar dentro del compartimiento de la célula de CD34 +. Debido a intensidad de CD38 define sus tres compartimentos celulares nuevos: CD38 negativo (P6), CD38 dim (P7) y CD38 brillante (P8) (figura 1). El MFI de CD38 puede determinarse utilizando hematogones o células plasmáticas como control positivo interno, estas células expresan fuertemente CD38.
El modelo de ratónnulo (NSG) inmunodeficiente NOD/SCID/IL2Rγc es ampliamente utilizado para el engraftment de normal y humanos malignos hematopoyéticos células10,11. Xenotrasplante serie ensayos se utilizan para validar experimentalmente la función LSC o HSC. Estos estudios han sido ampliamente analizados por métodos de secuenciación a gran escala. Sin embargo, poco se sabe sobre el immunophenotype LSC y HSC de la población de la ráfaga AML engrafted en ratones NSG en comparación con la LMA primaria (figura 2).
Los números de LSC son inherentemente bajos así, identificación y cuantificación de LSC son desafiantes y el método descrito aquí puede utilizarse como un análisis de citometría de flujo en el diagnóstico y seguimiento clínico hasta evaluar la respuesta de la quimioterapia (como LSC residual puede causar recaída AML). La presencia de LSC puede indicar positivo enfermedad residual mínima (Milirutherford). Hasta la fecha, MRD monitoreo en AML en su mayoría dependen de métodos moleculares (es decir, RT-PCR, NGS)10,12. Sin embargo, en este protocolo se detecta expresión de la proteína simultáneo de varios marcadores HSC/LSC (CD34, CD38, CD45RA, CD90) en las células primarias de la ráfaga de AML humano por citometría de flujo multiparamétrico2,8,9. Esta combinación de anticuerpos que puede ser aplicada en cualquier laboratorio de citometría de flujo estándar y este análisis MRD de flujo es particularmente interesante cuando MRD por reacción en cadena de polimerasa en tiempo real (RT-PCR) no es posible, es decir, si la leucemia específica molecular los marcadores no son detectables en la muestra diagnóstico de AML. Además, este protocolo, es complementario a las técnicas moleculares más sensibles de MRD, como su objetivo es detectar y cuantificar las células progenitoras hematopoyéticas anormales que representa una característica funcional de la célula (figura 3).
Mostramos cómo cuantificar tres poblaciones hematopoyéticas progenitoras y el compartimiento supuesto de LSC con diferente grado de maduración mediante citometría de flujo con anticuerpos disponibles en la mayoría de los laboratorios clínicos. Además, confirmó la presencia de estos compartimentos celulares en correspondientes paciente-derivado-xenoinjertos (PDX) y en el tratamiento de seguimiento.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1146">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:363px;">Pancoll</td>
			<td style="width:189px;">PAN-Biotech</td>
			<td style="width:128px;">P04-60500</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="75">
			<td height="75" style="height:75px;">RBC Lysis Buffer (10x)</td>
			<td>Ozyme</td>
			<td>BLE420301</td>
			<td style="width:467px;">RBC Lysis solution A : 8.29 g of NH4Cl + 0.037 g of Na2EDTA in 100 mL of sterile H2O and RBC Lysis solution B: 1 g of KHCO3 in 100 mL of sterile H2O</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">NOD/SCID/IL2R&#947;cnull&#160; (NSG)&#160; mice</td>
			<td>JACKSON LABORATORY</td>
			<td>Stock No: 005557</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">PBS</td>
			<td>Gibco by life technologies</td>
			<td>14190-144</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">AutoMACS Running Buffer &#8211; MACS Separation Buffer</td>
			<td>MACS Buffer Miltenybiotec</td>
			<td>130-091-221</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD36-FITC (clone FA6-152, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>PN IM0766U</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD33-PC5.5 (clone D3HL60.251, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B36289</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD90-APC (clone 5E10)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>328114</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD19-ECD (clone J3-119, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A07770</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD34-AA700 (clone 581, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B92417</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD45RA-APC-H7 (clone HI100)&#160;</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>560674</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD38-Pacific Blue (clone LSI98-4-3, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B92396</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD45-KO (clone J.33, Iotest)</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B36294</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD3-PE</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>IM1451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD20-PE</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A07747</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-CD123-PC7</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B13647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Flow-Set</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A63492</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Flow-Check</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A63493</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Navios</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>DS-14644A</td>
			<td style="width:467px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">LSR Fortessa X20</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">CST BD</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>655051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">FacsFlow&#160;</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>336911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-hCD45-FITC</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>BLE304006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Anti-mCD45-APC</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>BLE103112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">EasySep human PE selection kit</td>
			<td>Stem Cell Technologies</td>
			<td>18000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">EasySep&#160; magnet&#160;</td>
			<td>Stem Cell Technologies</td>
			<td>18551</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

flow cytometry to estimate leukemia stem cells in primary acute myeloid leukemia and in patient-derived-xenografts, at diagnosis and follow up

Leucemia mieloide aguda (AML) es heterogénea y si no se trata, la enfermedad fatal. Es la causa más común de mortalidad asociada a la leucemia en adultos. Inicialmente, la LMA es una enfermedad de las células madre hematopoyéticas (HSC) caracterizado por la detención de la diferenciación, la posterior acumulación de células de la ráfaga de la leucemia y la producción de elementos hematopoyéticos funcionales. Heterogeneidad se extiende a la presencia de células de la leucemia (LSC), con esta dinámica celular compartimiento evolucionando para superar distintas presiones de selección impuestas durante el tratamiento y la progresión de la leucemia. Para definir la población de la LSC, la adición de CD90 y CD45RA permite la discriminación de HSCs normales y progenitores multipotentes dentro del compartimiento de células CD34 + CD38. Aquí, describimos un protocolo para detectar la expresión simultánea de varios marcadores LSC putativos (CD34, CD38, CD45RA, CD90) en las células primarias de la ráfaga de AML humana mediante citometría de flujo multiparamétrico. Además, mostramos cómo cuantificar tres poblaciones progenitoras y una supuesta población de LSC con el aumento del grado de maduración. Se confirmó la presencia de estas poblaciones en paciente correspondientes-derivado-xenoinjertos. Este método de detección y cuantificación de LSC putativo pueden usarse para el seguimiento clínico de la respuesta de la quimioterapia (ej., enfermedad residual mínima), como LSC residual puede causar recaída AML.

Aquí presentamos un método para determinar las poblaciones progenitoras en muestras de médula ósea de humanos normales y malignas. Recogió la médula ósea y el bazo de un éxito PDX y realizar citometría de flujo multiparamétrico, como se describe anteriormente. Se compararon varias subpoblaciones de células de la ráfaga entre la muestra del paciente diagnóstico y PDX correspondiente y particularmente, el compartimiento del progenitor de CD34 + CD38, notablemente enriquecidas en LSC putativo. Hemos encontrado ...

Watch this Scientific Journal Video about Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up at JoVE.com

Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up

Contorneamos un protocolo para detectar la expresión simultánea de marcadores de células madre de leucemia en las células de la leucemia mieloide aguda primaria por citometría de flujo. Mostramos cómo cuantificar tres poblaciones progenitoras y una supuesta población de LSC con el aumento del grado de maduración. Se confirmó la presencia de estas poblaciones en paciente correspondientes-derivado-xenoinjertos.

Citometría de flujo para estimar las células madre de leucemia la leucemia mieloide aguda primaria y el paciente-derivado-xenoinjertos, diagnóstico y seguimiento hasta

Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous, and if not treated, fatal disease. It is the most common cause of leukemia-associated mortality in ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Comprehensive Protocol to Sample and Process Bone Marrow for Measuring Measurable Residual Disease and Leukemic Stem Cells in Acute Myeloid Leukemia

General protocolo muestra y médula de proceso para medir enfermedad Residual medible y células leucémicas en la leucemia mieloide aguda

Response criteria in acute myeloid leukemia (AML) has recently been re-established, with morphologic examination utilized to determine whether patients ...

Investigación

Investigación sobre el cáncer

Preparation of Primary Acute Lymphoblastic Leukemia Cells in Different Cell Cycle Phases by Centrifugal Elutriation

Preparación de las células de la leucemia linfoblástica aguda primaria en diferentes fases de la célula por elutriación centrífugo

The ability to synchronize cells has been central to advancing our understanding of cell cycle regulation. Common techniques employed include serum ...

Isolation and Characterization of Tumor-initiating Cells from Sarcoma Patient-derived Xenografts

Aislamiento y caracterización de células que inician tumores a partir de xenoinjertos derivados del paciente de sarcoma

The existence and importance of tumor-initiating cells (TICs) have been supported by increasing evidence during the past decade. These TICs have been ...

A Chromatin Immunoprecipitation Assay to Identify Novel NFAT2 Target Genes in Chronic Lymphocytic Leukemia

Un ensayo de inmunoprecipitación de cromatina para identificar los Genes Diana de novela NFAT2 en leucemia linfocítica crónica

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is characterized by the expansion of malignant B cell clones and represents the most common leukemia in western ...

Assessment of the Metabolic Profile of Primary Leukemia Cells

Evaluación del perfil metabólico de las células leucémicas primarias

The metabolic requirement of cancer cells can negatively influence survival and treatment efficacy. Nowadays, pharmaceutical targeting of metabolic ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

Análisis citométrico de flujo de especies de oxígeno reactivo mitocondrial en células hematopoyéticas de la muriña y células progenitoras y leucemia impulsada por MLL-AF9

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Subcellular Fractionation of Primary Chronic Lymphocytic Leukemia Cells to Monitor Nuclear/Cytoplasmic Protein Trafficking

Fraccionamiento subcelular de células de leucemia linfocítica crónica primaria para monitorear el tráfico de proteínas nucleares/citoplasmáticas

Nuclear export of macromolecules is often deregulated in cancer cells. Tumor suppressor proteins, such as p53, can be rendered inactive due to aberrant ...

Testing Targeted Therapies in Cancer using Structural DNA Alteration Analysis and Patient-Derived Xenografts

Pruebas de terapias dirigidas en cáncer mediante análisis de alteración estructural del ADN y xenoinjertos derivados del paciente

We present here an integrative approach for testing efficacy of targeted therapies that combines the next generation sequencing technolo-gies, therapeutic ...

Two Flow Cytometric Approaches of NKG2D Ligand Surface Detection to Distinguish Stem Cells from Bulk Subpopulations in Acute Myeloid Leukemia

Dos Enfoques Citométricos De Flujo De La Detección De Superficie Del Ligando NKG2D Para Distinguir Las Células Madre De Las Subpoblaciones A Granel En La Leucemia Mieloide Aguda

Within the same patient, absence of NKG2D ligands (NKG2DL) surface expression was shown to distinguish leukemic subpopulations with stem cell properties ...

Intra-Peritoneal Transplantation for Generating Acute Myeloid Leukemia in Mice

Trasplante intraperitoneal para la generación de leucemia mieloide aguda en ratones

There is an unmet need for novel therapies to treat acute myeloid leukemia (AML) and the associated relapse that involves persistent leukemia stem cells ...