Name: reinstatement of drug-seeking in mice using the conditioned place preference paradigm
Uploaded: 2018-06-07T13:00:00
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Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Ministero della salute, servizi sociali e l'uguaglianza. Delegazione del governo per il piano nazionale sulle droghe, progetti di ricerca sulle dipendenze di droga, 2014I007; Ministero dell'economia e competitività (MINECO), Istituto di salute Carlos III, rete di Addictive disordini (RTA) RD12 / 0028/0005 e RD16 / 17/07/00 e Unione europea, FEDER fondi "una manera de hacer Europa" e PSI2014-51847-R.

Tutte le procedure che coinvolgono topi e la loro cura osservanza di leggi nazionali, regionali e locali e i regolamenti, che sono in conformità con la direttiva 2010/63/UE del Parlamento europeo e del Consiglio, del 22 settembre 2010 sulla protezione degli animali utilizzati a fini fini scientifici. L'uso di animali e Comitato a cura dell'Università di Valencia ha approvato il presente protocollo.
1. materiali e set-up per Conditioned Place Preference:
<ol><li>Gestire topi 3 giorni prima ...

Il punto chiave della ricerca di dipendenza droga è lo sviluppo di trattamenti che diminuiscono il desiderio e, di conseguenza, ridurre la vulnerabilità alla ricaduta. Grazie al modello di reintegrazione del paradigma CPP, è possibile studiare l'influenza di diversi fattori ambientali e procedurali che modulano la ricaduta, che è una priorità della ricerca futura. Ci sono alcuni punti importanti da considerare, come il paradigma CPP è un test che è altamente sensibile ai fattori ambientali.
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Il paradigma di Conditioned Place Preference (CPP) offre un modo semplice per valutare la ricompensa condizionata indotta da stimoli diversi1,2ed è stato usato largamente per studiare gli effetti gratificanti condizionati di droghe d'abuso3 . Si basa sul condizionamento pavloviano, valutando il valore motivazionale della droga-collegato di stimoli ambientali per il mantenimento di comportamenti di dipendenza4. In questo modello, stimoli ambientali acquisiscono proprietà secondaria appetitiva (effetti gratificanti condizionati) quando accoppiato con un rinforzo primario3. Ad esempio, un posto inizialmente neutro (ad esempio il colore di uno scomparto nella gabbia CPP) è accoppiato con gli specifici effetti di una droga di abuso durante alcune condizionata sessioni5, mentre un altro vano è associato con l'iniezione di un veicolo. Seguito, condizionata, se l'animale passa più tempo nel vano precedentemente connesso con la droga, si presume che il CPP ha sviluppato3. L'istituzione della preferenza è raggiunta quando l'animale dà un valore positivo per gli stimoli ambientali legati alla droga, che è il rinforzo primario. Di conseguenza, gli animali si esibiranno risposte comportamentali di droga in Cerca in risposta a tali indizi contestuali6. Il modello CPP consente la valutazione delle proprietà gratificanti di sottosoglia dosi del farmaco, indicando se gli animali in una condizione specifica (ad esempio, dopo aver sofferto in precedenza di sconfitta sociale) sono più vulnerabili e sensibili alle dosi che sono non è efficace nel ingenuo animali7.
Il modello CPP è stato utilizzato anche per valutare l'estinzione/reintegrazione come modello animale per studiare la ricaduta3, che è l'obiettivo del presente protocollo. Ci sono tre diverse fasi: acquisizione, estinzione e reintegrazione (Figura 1). Nel modello di reintegrazione CPP, animali prima acquisiscono il CPP per un raggruppamento di droga-accoppiato, e poi si eseguono diverse sessioni di estinzione. Definiamo estinzione come il momento in cui l'animale riduce le risposte comportamentali di approssimazione ad uno stimolo condizionato gratificante che è stato rimosso (ad esempio, la droga)8. Durante le sessioni di estinzione, animali esplorare i compartimenti in assenza del farmaco, in modo che la preferenza acquisita è gradualmente attenuati9. Una questione importante da considerare è che il cambiamento comportamentale che l'animale si presenta durante l'estinzione (la diminuzione progressiva nel tempo trascorso nel vano di droga-accoppiato) può essere a causa di nuovi processi di apprendimento che competono con la precedente risposta istruita, o dovuto ad una diminuzione nello stato interno motivazionale del soggetto3. Infine, il ristabilimento della preferenza posto attraverso gli indizi di contesto o droga sarebbe il nostro modello di ripristino1.
Somministrare un'iniezione di adescamento del farmaco associato, è possibile ripristinare la preferenza, che è considerata un ristabilimento dell'approssimazione per gli indizi contestuali. Reintegrazione di adescamento del farmaco si verifica a causa della memoria persistente degli effetti piacevoli della droga, che ha indotto assetati e motiva gli animali a cercare gli stimoli ambientali legati alla ricompensa.
Alcuni vantaggi del modello reintegrazione CPP sono che la procedura sia non-invasiva (in contrasto con il self-administration, che richiede un intervento chirurgico), poco costoso e semplice. Inoltre, questo modello ha una validità di buon criterio, in quanto imita bene ciò che avviene in esseri umani10,11, inducendo la reintegrazione con gli stimoli che inducono la ricaduta, come ri-esposizione al farmaco12,13 o 14di sforzo.
Ci sono altre tecniche come l'estinzione – modello di reintegrazione di autosomministrazione endovenosa. Qui, gli animali premere una leva per amministrare la droga, che permette la valutazione della risposta dell'operatore dell'animale, compulsività e motivazione14,15,16. Il vantaggio principale del CPP rispetto alle procedure di auto-amministrazione è che la reintegrazione di CPP è considerato per riflettere la riattivazione del valore incentivo-motivazionale degli stimoli contesto accoppiato con la droga, che consiste della ricomparsa dell'approccio comportamento al contesto17. Inoltre, non-droga stimoli, quali stress, possono anche indurre la reintegrazione18,19. Ad esempio, uno studio di autosomministrazione non descritto effetti sul ripristino dell'assunzione dell'eroina in ratti dopo un piede scossa o ritenuta stress20. Autori hanno discusso che era infruttuoso, perché tali fattori di stress sono stati testati all'esterno della camera di autosomministrazione in un contesto diverso. Al contrario, quando si utilizza il modello CPP di reintegrazione, c'era un chiaro ristabilimento del CPP indotta da morfina dopo l'utilizzo di fattori di stress stessi e applicata in un contesto diverso a quello del CPP e in tempi diversi (0 e 15 min dopo lo stress di esposizione)18 .
Diversi studi in letteratura hanno dimostrato modi diversi di droga e reintegrazione indotta da stress. Da un lato, reintegrazione farmaco-indotta è stata segnalata in ratti ed in topi facendo uso di morfina5,21,22,23, cocaina24,25, anfetamina26, 27, etanolo28,29e30di 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA). D'altra parte, l'esposizione allo stress può essere un fattore determinante nella vulnerabilità all'abuso di droga. Lo stress è noto per aumentare gli effetti gratificanti della droga7,31,32 e il loro ruolo nella ricaduta è affermata33,34. Ad esempio, sconfitta nelle interazioni sociali con un conspecifico reintegra morfina e cocaina CPP18,19. Inoltre, gli animali esposti a ripetuta sconfitta sociale sono più vulnerabili agli effetti gratificanti condizionati di sottosoglia dosi di cocaina e ripristinare la preferenza con dosi molto basse di cocaina7.
Applicazione del modello reintegrazione CPP è un modo utile e sensibile per valutare la vulnerabilità alla ricaduta negli animali e permette la valutazione di diverse sottili manipolazioni ambientali, che sono i principali trigger che minacciano la ricaduta umana, come reintegrazione indotta da farmaci o stress.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>MONPRE 2Z software</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine hydrochloride</td>
			<td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animals: mice of the OF1 outbred strain</td>
			<td>Charles River, Barcelona Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Diet- Teklad Global Diet 2014</td>
			<td>Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)</td>
			<td></td>
			<td>13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High fat diet TD.06415</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reinstatement of drug-seeking in mice using the conditioned place preference paradigm

Il presente protocollo descrive la preferenza di posto condizionata (CPP) come modello di ricaduta nella tossicodipendenza. In questo modello, gli animali sono addestrati prima di acquisire una preferenza di posto condizionata in un vano di droga-accoppiato, e dopo il test post-condizionata, eseguono diverse sessioni per estinguere la preferenza stabilita. Il CPP consente la valutazione degli effetti gratificanti condizionati dei suggerimenti relativi alla tutela dell'ambiente da farmaci. Quindi, l'estinto CPP può essere ripristinato robustamente dall'amministrazione non contingente di una dose di innesco della droga e dall'esposizione a stimoli stressanti. Entrambi i metodi verranno spiegati qui. Quando l'animale reinitiates la risposta comportamentale, è considerato una reintegrazione della ricompensa condizionata hanno avuto luogo.
I principali vantaggi di questo protocollo sono che è non invasivo, poco costoso e semplice con criteri di buona validità. Inoltre, permette lo studio di diverse manipolazioni ambientali, come lo stress o la dieta, che possa modulare la ricaduta nella droga che cercano di comportamenti. Tuttavia, una limitazione è che, se il ricercatore si propone di esplorare la motivazione ed effetti di rinforzo primari del farmaco, deve essere completato con le procedure di auto-amministrazione, quanto coinvolgono operante risposte degli animali.

In primo luogo, risultati rappresentativi dalla reintegrazione indotta da stress e adescamento sono mostrati nella Figura 7 utilizzando topi del maschio adulto OF1.
I dati nella Figura 7a-b che rappresenta il tempo trascorso nella droga-accoppiato comparti in pre- e Post-C prova sono stati analizzati con un misure ripetute ANOVA con giorni variabile ent...

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Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Questo protocollo descrive la preferenza di posto condizionata (CPP) come modello di ricaduta. Questa procedura permette di misurare di ricaduta in animali da laboratorio, considerando l'impatto della droga-collegato di stimoli ambientali come desiderio e ricaduta nelle persone dedite di astensione è attualmente al centro dei programmi di trattamento di abuso di droga.

Reintegrazione di droga in Cerca nei topi utilizzando il paradigma di Conditioned Place Preference

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

Research

JoVE Journal

Behavior

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

La Task Congruenza crossmodali come un mezzo per ottenere una misura comportamentale Obiettivo della mano di gomma Illusion Paradigma

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Ricerca

Comportamento

Stereotaxic Microinjection of Viral Vectors Expressing Cre Recombinase to Study the Role of Target Genes in Cocaine Conditioned Place Preference

Microiniezione stereotassica di vettori virali che esprimono Cre ricombinasi per studiare il ruolo di geni bersaglio in cocaina condizionata place preference

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Preferenza Grasso: un modello Novel of Eating Comportamento in Rats

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Una Procedura di osservare Context-indotta Rinnovo pavloviano condizionata alcol-seeking comportamento in Rats

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

Valutazione della cocaina indotta sensibilizzazione comportamentale e conditioned place preference nei topi

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

Posizionare e risposta apprendimento nel campo aperto Torre Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

Esaminando Richiamo Memoria in prima e seconda infanzia Utilizzando il suscitato imitazione Paradigma

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Pavloviano Training Approach condizionati in Rats

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

Using Eye Movements Recorded in the Visual World Paradigm to Explore the Online Processing of Spoken Language

Utilizzando i movimenti di occhio registrati nel paradigma mondo visivo per esplorare l'elaborazione Online di lingua parlata

In a typical eye tracking study using the visual world paradigm, participants' eye movements to objects or pictures in the visual workspace are recorded ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

Un protocollo di Conditioned Place Preference per l'incubazione di Craving nei ratti di misura

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...