Name: standardized measurement of nasal membrane transepithelial potential difference (npd)
Uploaded: 2018-09-13T12:30:00
Duration: 9 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference NPD at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי קבוצת העבודה לתפקוד CFTR של ועדת התקינה (רשת ניסויים קליניים, אגודת סיסטיק פיברוזיס האירופית), משאבי המרכז עובד לקבוצת הלאום (הרפוי פיתוח רשת, סיסטיק פיברוזיס קרן). תמיכה נוספת סופק על ידי קרן CF (FY09 קלנסי כדי גרמים) ו- NIH (DK072482 ועד SMR גרמים).

<ol>
	<li>Rosenstein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+a+Cystic+Fibrosis+Diagnosis?.">What is a Cystic Fibrosis Diagnosis?.</a> Clinics in Chest Medicine. 19, 423-441 (1998).</li><li>Rosenstein, B., Cutting, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Diagnosis+of+Cystic+Fibrosis:+A+Consensus+Statement:+Cystic+Fibrosis+Foundation+Consensus+Panel.">The Diagnosis of Cystic Fibrosis: A Consensus Statement: Cystic Fibrosis Foundation Consensus Panel.</a> The Journal of Pediatrics. 132, 589-595 (1998).</li><li>Farrell, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+Cystic+Fibrosis:+Consensus+Guidelines+from+the+Cystic+Fibrosis+Foundation.">Diagnosis of Cystic Fibrosis: Consensus Guidelines from the Cystic Fibrosis Foundation.</a> The Journal of Pediatrics. 181, S4-S15 (2017).</li><li>Mesbahi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+of+CFTR+functional+measurements+and+clinical+improvements+in+cystic+fibrosis+patients+with+non-p.Gly551Asp+gating+mutations+treated+with+ivacaftor.">Changes of CFTR functional measurements and clinical improvements in cystic fibrosis patients with non-p.Gly551Asp gating mutations treated with ivacaftor.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 16, 45-48 (2017).</li><li>Accurso, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sweat+chloride+as+a+biomarker+of+CFTR+activity:+proof+of+concept+and+ivacaftor+clinical+trial+data.">Sweat chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and ivacaftor clinical trial data.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).</li><li>Accurso, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+VX-770+in+Persons+with+Cystic+Fibrosis+and+the+G551D-CFTR+Mutation.">Effect of VX-770 in Persons with Cystic Fibrosis and the G551D-CFTR Mutation.</a> New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).</li><li>Sermet, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+nasal+potential+difference+in+young+children+with+an+equivocal+sweat+test+following+newborn+screening+for+cystic+fibrosis.">Measurement of nasal potential difference in young children with an equivocal sweat test following newborn screening for cystic fibrosis.</a> Thorax. 65 (6), 539-544 (2010).</li><li>Wilschanski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+the+Cystic+Fibrosis+Transmembrane+Regulator+Gene+and+In+vivo+Transepithelial+Potentials.">Mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator Gene and In vivo Transepithelial Potentials.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 174 (7), 787794 (2006).</li><li>Sermet-Gaudelus, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Phenotype+and+Genotype+of+Children+with+Borderline+Sweat+Test+and+Abnormal+Nasal+Epithelial+Chloride+Transport.">Clinical Phenotype and Genotype of Children with Borderline Sweat Test and Abnormal Nasal Epithelial Chloride Transport.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 182 (7), 929-936 (2010).</li><li>De Boeck, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CFTR+biomarkers:+time+for+promotion+to+surrogate+endpoint?.">CFTR biomarkers: time for promotion to surrogate endpoint?.</a> European Respiratory Journal. 14, 38 (2013).</li><li>US CFF-TDN (Cystic Fibrosis Foundation-Therapeutics Development Network) and the ECFS-CTN (European Cystic Fibrosis Society- Clinical Trials Network). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+Operating+Procedure+528.01.">Standard Operating Procedure 528.01.</a> Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD). , (2014).</li><li>Knowles, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+bioelectric+potential+difference+across+respiratory+epithelia+in+CF.">Increased bioelectric potential difference across respiratory epithelia in CF.</a> New England Journal of Medicine. 305 (25), 1489-1493 (1981).</li><li>Solomon, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+international+Randomised+Multicentre+Comparison+of+NPD+Techniques.">An international Randomised Multicentre Comparison of NPD Techniques.</a> Chest. 138, 919-928 (2010).</li><li>Sermet, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloride+Transport+in+Nasal+Ciliated+Cells+of+Cystic+Fibrosis+Heterozygotes.">Chloride Transport in Nasal Ciliated Cells of Cystic Fibrosis Heterozygotes.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171, 1026-1031 (2005).</li><li>Naehrlich, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal+potential+difference+measurements+in+diagnosis+of+cystic+fibrosis:+an+international+survey.">Nasal potential difference measurements in diagnosis of cystic fibrosis: an international survey.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 13 (1), 24-28 (2014).</li><li>Vermeulen, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal+potential+measurements+on+the+nasal+floor+and+under+the+inferior+turbinate:+Does+it+matter?.">Nasal potential measurements on the nasal floor and under the inferior turbinate: Does it matter?.</a> Pediatric Pulmonology. 46 (2), 145-152 (2011).</li><li>Bronsveld, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perfusate+temperature+on+nasal+potential+difference.">Influence of perfusate temperature on nasal potential difference.</a> European Respiratory Journal. 42, 389-393 (2013).</li><li>Boyle, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multi-center+study+on+the+effect+of+solution+temperature+on+nasal+potential+difference+measurements.">A multi-center study on the effect of solution temperature on nasal potential difference measurements.</a> Chest. 124 (2), 482-489 (2003).</li><li>Solomon, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Multiple+Reader+Scoring+System+for+Nasal+Potential+Difference+Parameters.">A Multiple Reader Scoring System for Nasal Potential Difference Parameters.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 16 (5), 573-578 (2017).</li><li>Beekman, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CFTR+functional+measurements+in+human+models+for+diagnosis,+prognosis+and+personalized+therapy:+Report+on+the+pre-conference+meeting+to+the+11th+ECFS+Basic+Science+Conference,+Malta,+26-29+March+2014.">CFTR functional measurements in human models for diagnosis, prognosis and personalized therapy: Report on the pre-conference meeting to the 11th ECFS Basic Science Conference, Malta, 26-29 March 2014.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 13, 363-372 (2014).</li><li>Accurso, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+VX-770+in+persons+with+cystic+fibrosis+and+the+G551D-CFTR+mutation.">Effect of VX-770 in persons with cystic fibrosis and the G551D-CFTR mutation.</a> New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).</li><li>Wilschanski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ataluren+(PTC124)+treatment+of+nonsense+mutation+cystic+fibrosis.">Chronic ataluren (PTC124) treatment of nonsense mutation cystic fibrosis.</a> European Respiratory Journal. 38, 59-69 (2011).</li><li>Accurso, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sweat+Chloride+as+a+biomarker+of+CFTR+activity:+proof+of+concept+and+Ivacaftor+clinical+trial+data.">Sweat Chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and Ivacaftor clinical trial data.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).</li><li>Rowe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Mechanism+of+the+Cystic+Fibrosis+Transmembrane+Conductance+Regulator+Potentiator+Ivacaftor+in+G551D-mediated+Cystic+Fibrosis.">Clinical Mechanism of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Potentiator Ivacaftor in G551D-mediated Cystic Fibrosis.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 190 (2), 175-184 (2014).</li><li>Boyle, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+CFTR+corrector+lumacaftor+and+a+CFTR+potentiator+(ivacaftor)+for+treatment+of+patients+with+cystic+fibrosis+who+have+a+phe508del+CFTR+mutation:+a+phase+2+randomised+controlled+trial.">A CFTR corrector lumacaftor and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial.</a> The Lancet Respiratory Medicine. 2 (7), 527-538 (2014).</li><li>Schulz, A., Tummler, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-allergic+asthma+as+a+CFTR-related+disorder.">Non-allergic asthma as a CFTR-related disorder.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 15 (5), 641-644 (2016).</li><li>Sloane, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacologic+approach+to+acquired+cystic+fibrosis+transmembrane+conductance+regulator+dysfunction+in+smoking+related+lung+disease.">A pharmacologic approach to acquired cystic fibrosis transmembrane conductance regulator dysfunction in smoking related lung disease.</a> PLoS One. 7 (6), e39809 (2012).</li><li>Bienvenu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystic+Fibrosis+Transmembrane+Conductance+Regulator+Channel+Dysfunction+in+Non-Cystic+Fibrosis+Bronchiectasis.">Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Channel Dysfunction in Non-Cystic Fibrosis Bronchiectasis.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 181 (10), 1078-1083 (2010).</li><li>Werlin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+electrophysiological+characteristics+of+recurrent+acute+pancreatitis.">Genetic and electrophysiological characteristics of recurrent acute pancreatitis.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60 (5), 675-679 (2015).</li><li>Dransfield, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquired+Cystic+Fibrosis+Transmembrane+Conductance+Regulator+Dysfunction+in+the+Lower+Airways+in+COPD.">Acquired Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Dysfunction in the Lower Airways in COPD.</a> Chest. 144 (2), 498-506 (2013).</li></ol>

המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.

In vivo, NPD מספק מדידה ייחודי שניתן לבצע שוב ושוב על בסיס האורך, מדגים כי עם מדידות חוזרות ונשנות, תוצאות דומות האורך הם נצפו על בסיס group-wise ואישי14, 15. יש ראיות חזקות NPD שיש אפליה מעולה תוקף להבחנה CF מן הלא-CF. 25 מחקרים הראו באופן עקבי הבדל משמעותי סטטיסטית ב Cl– ו- Na+ מוליכות בין חולי CF פקדים בריא10. בעוד מספר מדדי שפותחו בעבר להפגין יכולת זו, אנו צופים כי עדכונים חדשים חיוניים בהתחשב standardizations האחרונות של מתודולוגיה7,8.
שינויים ופתרון בעיות
בדיקה זו מחייבת מספר פעולות המפתח כדי להבטיח מדידות מדויקות. זה כולל ההיסט של אלקטרודות וקטטרים לולאה סגורה כדי להבטיח כי המערכת מבצע הסטנדרטים המומלצים. חולים עליך להישאר עדיין ולאחר מדיבור כמו פעולה זו ממזערת חפצים, קטטר dislodgement. זה מקשה את הבדיקה בחולים תורת, הטכניקה דווחה רק במחקר אחד אצל ילדים מתחת 6 שנים של גיל7.
בדיקה מראש של האפיתל האף יש צורך להבטיח כי ישנם בלי הקשה של הלחם או ריר באפיתל, אשר יכול להשפיע על המידות.
מאוד חשוב, יש לציין המיקום של המיקום של הקטטר. הוא הנושא של הדיון. ה-SOP המובאת כאן מנצל מידה תחת turbinate נחותים (IT). המיקום של הקטטר תחת ה-IT סטנדרטית, שנערך ב. multicenter ניסויים, לכן, זוהי הטכניקה המומלצת. מדידה תחת ה-IT מבוצע עם הצנתר צד-חור, אשר עשוי להיות קשה לשמור על קשר איתן עם רירית האף, בעוד להיות בקשר עם הפתרונות. קבוצות אחרות יכול למדוד את המשטרה. על הרצפה האף, אשר קל יותר מבחינה טכנית. חשוב לציין, מיולן (2011) הוכיח כי שתי השיטות הן דומות16.
חומה של הפתרונות נשאר עניין של הויכוח בין17,של מרכזי נתונים, ארה ב ואירופה -18. זה כבר דגלו כי שימוש בפתרונות ב 37 ° C במקום 22 ° C מגביר את התגובה כלוריד סה כ שנצפה על ידי כ 25% ואת התגובה תלוי isoproterenol-כלוריד על ידי כ 95%18. עם זאת, ההתחממות מגדילה השתנות, כפי מוערך על ידי סטיית תקן גדולה יותר של תגובה כלוריד סה כ17. לכן, כמו התחממות הפתרונות הוא גורם נוסף של השתנות, מומלץ לא כדי לחמם את הפתרונות, אלא אם כן נדרש על בסיס מחקר.
יש בעבר בהשוואה שניהם של טכניקות אלקטרודה ומצא כי מערכות אלקטרודה AgCl והן Calomel פעלו באופן דומה זרמי הבזליים ו מגורה נושאים נורמליים13.
מגבלות של הטכניקה
בדיקה זו היא להשתנות בתוך נושא משמעותי. ההשתנות של מניה נפוץ במיוחד בחולים עם תצלומי מעקב לא מוגדר, זה צריך להיות אחראים ליישום אבחון19. גורמים ההשתנות כוללים דלקת חריפה בדרכי הנשימה העליונות, מקיף פוליפים באף, ניתוח סינוס מוקדמת ודלקת הקשורים ל- CF, אשר הירידה שלה ירידה לפרטים, רגישות20,10. בנוסף, פרשנות של תצלומי מעקב עשוי להיות שונה בין הקוראים, למרות הקוראים מומחה להדגים הסכם מעולה של הניקוד כמותית, interpretability CF ו- CF לשרטוטים, מנוגדים עם השתנות משמעותי ב- הביטחון העקיבה19.
השתנות מהותי לעומת ספי משמעותית
מאוד חשוב, ההשתנות פיזיולוגיים של המדידה הוא ניכר, כמופיע ב מחקרים שונים10, כגון CFTR ג'ין הניסויים טיפול שהוכיח את השתנות ניכרים שינויים בכלוריד הכולל הובלה, amiloride בטווח21,22. חתך הרוחב ההערכה עולה כי אפס Cl– פלוס isoproterenol תגובה מעל הסף של-5 ל-7 mV זה שרשם בין CF ו- CF נושאים10.
אנחנו בכל זאת חוסר ידיעה ברורה על ההשלכות של שינוי של פרמטר זה המייצג תיקון CFTR יעילה בניסויים שלב-II עם מחלת שינוי טיפולי. כדי להעריך את התגובה בודדים, בדיקות חוזרות ונשנות ניטור התגובה התערבות עשוי להידרש כדי להבחין בין שינויים משמעותיים של השתנות מהותי. מאוד חשוב, מחקרים עתידיים לטווח ארוך עם מחלת שינוי תרופות צריך להפגין כי שיפור בתפקוד CFTR בקורלציה עם שיפור תוצאות הרלוונטית קלינית או תוצאות הפונדקאית (כגון שיפור FEV1) של CF המחלה. אכן, האחרונות שלב II Ivacaftor הראה כי סימנה תועלת קלינית למרות שיפור קטן הפרשת כלוריד23.
מחקרים כאלה יעזור להקים אם ערך ניתוק של שיפור מוליכות Cl–טרנס-אפיתל ייתכן פרמטר הפונדקאית עבור תועלת קלינית. זה יהיה פרמטר חשוב עבור המנחה את התפתחות CFTR שינוי טיפולי.
משמעות לגבי שיטות קיימות: מבחן זיעה, מדידות הנוכחי מעיים (ICM)
בחולים עם ' בספק ' סיסטיק פיברוזיס, כמו לאומדן זיעה ביניים ריכוז Cl– בין 30 ל- 60 מ מ, ציונים ללא הפרדות צבע NPD סיפק כלי רגישה מאוד לאבחן מטופלים "CF-בסיכוי", "CF-לא סביר"10 . מדידה נוכחית מעיים (ICM), אשר מספק מדידה של ex-vivo של Cl נטו– פלקסים על פני האפיתל רקטלי, גם מאפשר קביעת שיורית CFTR פונקציה עם רגישות גבוהה כי CFTR מאוד מתבטאת אפיתל זו.
בהתחשב בכך שינוי של CFTR פונקציה על ידי CFTR מאפננים, היחס בין השינויים סמן CFTR שונים הוא כרגע לא ברור. אמנם עבודה מבוסס על Ivacaftor נקבע כי המבחן NPD וזיעה נמצאים בקורלציה4, זה לא טרם נקבע אם מדידה במערכת הנשימה הוא מנבא טוב יותר בתוצאה הנשימה מאשר, למשל, הזיעה מבחן24 , 25 או בשינוי ICM. יתר על כן, צירוף סמים גם ייתכן נבדלים efficacies ספציפי שלהם איברים. לגבי NPD, חשוב לציין כי שינויים בתגובה PD ו- amiloride הבזליים להביע התחבורה Na+ , תוך שינויים 0 Cl– והתגובה isoproterenol אקספרס תחבורה Cl– . . זה עדיין שתוקם, איזה מאלה חשוב יותר עבור מחלות amelioration
יישומים עתידיים של טכניקה זו
השימוש בטכניקה זו צפויה מחוץ לשדה CF. מאז טכניקה זו מתאים במיוחד כדי להדגים Na+ ו- Cl– תעלת יונים, ניתן להחיל אותה להפגין תפקוד במחלות דרכי הנשימה, כולל אסטמה26, ברונכיטיס כרונית27, הלא-CF ברונכיאקטזיס28 , דלקת לבלב חוזרת29. בנוסף, שינויים של טכניקה זו שימשו את דרכי הנשימה התחתונה (משטרת) להפגין נמוכה יותר ממוקד איירווייז CFTR תפקוד לקוי של מחלת ריאות חסימתית כרונית (COPD) חולים עם ברונכיטיס כרונית30.
NPD מספק רגיש ויוו סמן של הפונקציה CFTR, אשר יכול לשמש עבור שניהם את האבחנה, גם, ללימודי הוכחה הרעיון במטרה לתקן CFTR ENaC ערוץ פעילות המחקר translational. זה מאפשר הערכה האורך של הפונקציה הטרנס-אפיתל, טומן בחובו הבטחה זו אסטרטגיה עבור רפואה אישית להתאים את מתקן היעילה ביותר עבור כל מטופל עם CF.

המטרה הכוללת של שיטה זו היא למדוד את הפרש הפוטנציאלים האף (NPD) שמטרתה לחקור יון הטרנס-אפיתל תחבורה in vivo1. טכניקה זו מאפשרת את המדידה של נתרן (Na+) ותחבורה כלוריד (Cl–). NPD שימש ככלי מחקר מאז שנות ה-80 המאוחרות, התקבלה בשנת 1998 הליך האבחון על ידי את הצהרת הסכמה סיסטיק פיברוזיס קרן (תודתם)2 , ב-2017 בהנחיות אבחון של קונצנזוס סיסטיק פיברוזיס קרן (תודתם) 3. אכן, תפקוד ביולוגי CFTR, המהווה הגורם CF, שמעידים בליעת Na+ מוגברת קרום הפסגה, פגם בהפרשת Cl– . מבחן פונקציונלי זה מספק את היתרון של כלי אבחון נוספים כאשר הגנטיקה היא הלא-חד משמעי בחולים עם תוצאות מבחן זיעה ביניים ייווצרו3. אמנם ניתן להשיג מידע זה גם על-ידי מעיים ביופסיות המדידה הנוכחית (ICM), ICM זאת, רק בחנויות כמה מרכזים ברחבי העולם, צריך לקדם סטנדרטיזציה. NPD זמין יותר כ 60 מרכזים הכללית של, יתר על כן, מטרות האפיתל הנשימה זה הוא המיקום המרכזי של המחלה.
בהתחשב את המידע שהמסופק על פעילות CFTR, הוא משמש גם במחקרים הוכחה הרעיון שמטרתה להעריך שיקום תפקודי של חלבון CFTR מאת אפנן טיפולים4,5,6,7, 8. אכן, נתונים ממחקרים עם עריכה mRNA/ג'ין CFTR, CFTR potentiator, מתקן טיפולים, להאיר שינויים משמעותיים Cl– , Na+ תחבורה עם טיפול6,9 ומאשרת כי NPD ניתן נקודת קצה של מגיב בניסויים קליניים. כמו שחסר לנו קליניים נקודות הקצה רגיש מסוגלים לזהות שינוי עדין במצב הקליני של המטופל בטווח הקצר, סמן פרה זה עשוי להיות מאוד אינפורמטיבי. בתחום של טיפולים אפנן CFTR מרחיבה במהירות, אנו זקוקים בדחיפות בדיקות ויוו מסוגלים לקלוט במהירות חומרים פעילים לפני שלב גדול 3 ניסויים10.
הרציונל פיזיולוגיים של הטכניקה מבוססת על מדידת הפרש הפוטנציאלים בין האפיתל דרכי הנשימה בתוך הנחיר תא תת עורית. יון ערוץ פעילות נידונות על ידי מדידת הפרש הפוטנציאלים יציבה בסיסית מירבית (PD), שלו משתנה לאחר חסימת ENaC הקשורים Na+ הקליטה ונהיגה הפרשת Cl– דרך שונה מובילי Cl– הפסגה כולל CFTR. CFTR בתפקוד מוצג על-ידי שינוי מינימלי הפרש הפוטנציאלים על גירוי הפרשת Cl– דרך שביל תלוי המחנה ואת ENaC מוגברת מתווכת הקליטה Na+ כפי שזוהה על-ידי הפרש הפוטנציאלים שליליים יותר בסיסית מענה משופר amiloride. בסיס מכניסטית CF נגד משטרת נורמלי מסוכם באיור1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57006/57006fig1.jpg"> איור 1: איור סיכום של פעילות תעלת יונים. יון (A) פעילות בהדגמה אפיתל בדרכי הנשימה מאוזנת פעילות של ENaC, CFTR במקצועות נורמלי ואובדן (B) של פעילות CFTR, וכתוצאה מכך גדל ENaC מתווכת נתרן תחבורה האופטימיזציות CFTR כלוריד תלויים תחבורה. ENaC: נתרן אפיתל ערוץ, Na+: נתרן, CFTR: וסת transmembrane סיסטיק פיברוזיס, CL–: כלוריד, mV: ואטים, המשטרה: הפרש הפוטנציאלים, דקות: דקה/s <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57006/57006fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
עם זאת, המבחן הזה מדגים כמה מידת ההשתנות הן מדידות חוזרות ונשנות בתוך המטופל באותו והן בקרב מטופלים עם גנוטיפ באותה. . זה בעל חשיבות עליונה כדי להקל על הפרשנות של השינויים לאחר הטיפול אפנן... יתר על כן, אנו עדיין חסרים ספי המאומת להפלות בין CF לנסיינים בריאים. זה יכול להיות באופן חלקי בגלל ההבדלים בין הטכניקות שבהן משתמשים הזמינות של מתקנים רפואיים. לכן, מאמץ בינלאומי ניכר מכוון סטנדרטיזציה של הבדיקה הוא מתמשך. את בנו תודתם-TDN (סיסטיק פיברוזיס קרן-הרפוי פיתוח רשת) והן ECFS-CTN (אירופה סיסטיק פיברוזיס החברה-קלינית ניסויים רשת) יצר את NPD סטנדרטי (SOP) לשימוש בניסויים multicenter ומחקר. עבודה זו משותפת זה התבצעה על ידי CTN TDN הביא שוחד משולב, בינלאומי, ומשלב את המומחיות של CTN ו TDN (2014)11. מאמר זה מציג את הטכניקות פרוטוקול ובדיקה להעסיק NPD לאבחון CF או לניסויים הוכחה הרעיון ביוזמת החוקר. כל מרכז יישום הטכניקה אחראי על היישום לוועדת האתיקה שלה מוסדיים מחקרים האנושית לאישור.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57006/57006fig2.jpg"> איור 2: תיאור סכמטי של כל מומלץ NPD ההתקנה. הערה ההגדרה המומלצת מוצג, כולל משאבות זלוף רציפים, הגדרת סדרה 4-עצור-זין. ה-SOP מוצגים חיבורי ספציפיות ודוגמאות של רכיבים. (דיאגרמת שינוי בהיתר מן שלמה, G.M. בחזה, 201013) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57006/57006fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
ניסיוני זרימת המותווה איור 2, לפיה NPD נמדד בין הגשר לחקר ממוקם על אפיתל משטח והפניה הגשר ממוקם בחלל תת עורית, מחוברות אלקטרודות, גבוהה-עכבה מד מתח.
זו מובטחת באמצעות 2 מערכות שונות: ישנם 2 הפניה מקובל אלקטרודה setups: (i) מאוזן Ag/AgCl אלקטרודות, גשר בקרם רל (א) מחובר החלל התת עורית על ידי שחיקה קלה או (ii) רווי calomel half-cells של אגר מלא 22 עד 24-מחט בקוטר הציג subcutaneously. הקשר אל רירית האף מופעלת על ידי צנתר לומן כפול. לומן אחד הוא מלא עם אגר או אק ג קרם ומחובר האלקטרודה מדידה, השני מאפשר זלוף אל רירית האף של פתרונות שונים.
הקצה של הצנרת לחקר מונחת על גבי רירית מערכת הנשימה תחת נחות האף turbinate (איור 3).
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57006/57006fig3.jpg"> איור 3: השמה של חקר אבובים על רירית מערכת הנשימה- (א) תצוגה חיצונית מראה השמה. (B) תצוגה Rhinoscopic הוכחת השמה. דיאגרמה (C) המציין את מיקום אנטומי עבור מיקום הצנתר. המשטרה: הפרש הפוטנציאלים
ללמוד תגובת משטרת מספר תרופות, הפתרונות superfusion מיושמים באמצעות לומן השני של הקטטר. ישנם מספר שלבים מרכזיים לגבי התנהלות מדידות NPD, אשר מפורטים להלן בפרוטוקול, מן הכנה ראשונית באמצעות ניתוח נתונים והכנה.
לאחר ההכנה של פתרונות, אלקטרודות, לבדיקת איכות נאותה של אלקטרודות, קטטרים מאפשרת התנהלות בסיסי של המבחן. מדידות הבזליים נעשים לאורך turbinate, והנחות המאפשרת בחירה של המקום הטוב ביותר למדידה, בדרך כלל זה עם מדידה השלילית ביותר. לאחר מכן perfusions רציפים לקבוע Na+ (ENaC) ו- Cl– (תלויי-CFTR) יון השטף דרך שינוי המתח על פני האפיתל האף.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>KD Scientific infusion pump (or equivalent &#8211; such as programmable infusion pumps provided by the institution/hospital)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerlab 4/30</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BMA-200 AC/DC portable bioamplifier</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IS0-Z isolation headstage for BMA-200</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows compatible PC - Minimum requirements of Windows XP or higher</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AD Instruments software: GLP Client V6 (Windows) or higher</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECG electrode (ground for study subject)</td>
			<td>Hospital standard</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mini calomel reference electrodes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-620-79</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride KCl, Granular &#8211; USP, formula weight 76, qty: 500 gm</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile container (such as specimen collection container , or similar) to be used for KCl calomel bath, with holes cut in lid to hold electrodes in place. (If not provided by electrode manufacturer.)</td>
			<td>Hospital standard</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 electrodes: Ag/AgCl 8 mm TP electrode</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td>UNSHLD-EL258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 Ag/AgCl electrodes, B0194, plug 4 mm</td>
			<td>SLE Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Signacreme&#174; Conductive Electrode Cream</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Parker Labs ref # 17-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin abrasion device</td>
			<td>PROMED Feeling</td>
			<td>Ref 374901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hi Di 541 M, Diamond tipped dental burrs</td>
			<td>Ash Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson PE 50 tubing</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>427411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson PE 90 tubing</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>427421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silastic tubing, 0.062&#8221; ID, 0.095&#8221; OD</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>508-007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropore Surgical Tape Paper (25 mm x 9.1 m)</td>
			<td>3M</td>
			<td>1530-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marquat double lumen catheter Length: 80 cm; Outer diameter: 2.5 mm; Internal diameter of the channels: 0.8 mm; Distance of the side-holes to the tip: 2 mm. EU label Agreement for NPD: I0202US</td>
			<td>Marquat</td>
			<td>I0202US</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1&#34; X 10 yards silk tape</td>
			<td>3M Durapore</td>
			<td>1538-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV extension tubing (30&#34;, 50/box)</td>
			<td>International Limited</td>
			<td>IMN30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Three-way stopcock (50/box)</td>
			<td>Medex</td>
			<td>MX5311L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile syringe filters (ANOTOP 25 sterile 50pk; 0.22-micron or smaller filters; or equivalent)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-926-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson Intramedic Luer stub adapter (20G, for connection to PE90 if using nasal catheter produced at study site)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>427564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson 23G, 0.75&#8221; Vacutainer (&#8220;butterfly&#8221;) needles (0.6 x 19 mm; 50U/box) (for connection to PE50) if using nasal catheter produced at study site)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>367283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson Syringe 60 ml without needle Luer-Lok tip (40/Box)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Becton Dickinson Syringe 10 ml without needle Luer-Lok tip (100/Box</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single use sterile wipes (per institutional availability)</td>
			<td>Hospital standard</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% EtOH (1 pint), Aaper Alcohol and Chemical Co. catalog number NC9274019 (or equivalent)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning single use sterile bottle-top filters, 0.22 &#956;m pore size (0.15 &#8211; 1.0 litre volumes acceptable)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>430624</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffer Cert Ph 10.00 (1L Sn04332) &#8211; for pH meter calibration</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffer Cert Ph 4.00 (1L Sn04327) &#8211; for pH meter calibration</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffer Cert Ph 7.00 (500 ml Sn04328) &#8211; for pH meter calibration</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable underpads (Blue Pads; 23&#34;X36&#34; 150/Box; or equivalent per hospital standard)</td>
			<td>SureCare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23G, 0.75&#8221; Vacutainer &#8220;butterfly&#8221; needles (0.6x19 mm; 50U/box)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>367283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Laboratories Agar (Noble 100g 0142-15-2; or equivalent)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Welch Allyn Rhinoscope 71000-C (or equivalent)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Welch Allyn Convertible Handle Battery 72300 (or equivalent) OR Otoscope with battery</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Head and chin rest (or equivalent; optional)</td>
			<td>Richmond Products, Inc</td>
			<td>629R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Static Dissipative Anti-Fatigue Matting&#160; (or equivalent)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>No. 791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>REAGENTS FOR SOLUTIONS MIXED ON SITE</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride, Granular &#8211; USP NaCl</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 58; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride CaCl2&#8226;2H2O &#8211; USP</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 147; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride Hexahydrate Crystal, MgCl2&#8226;6H2O &#8211; USP</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 203; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate Dibasic, Anhydrous, Granular, K2HPO4 &#8211; USP</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 174; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate Monobasic Crystals &#8211; NF (KH2PO4)</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 136; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Gluconate- USP (monosodium salt)</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 218; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Gluconate &#8211; USP (Anhydrous Powder)</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 430; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Gluconate- USP (Anhydrous)</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 234; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate Heptahydrate &#8211; USP MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 246; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amiloride HCl &#8211; USP</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 302; Size: 5gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#8217;-Triphosphate (ATP) (Disodium salt)</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 551; Size: 5gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride, Hexahydrate, Crystal &#8211; USP MgCl2&#8226;6H2O</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 203; Size: 500 gm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-distilled water (ddH2O)</td>
			<td>Hospital Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: NA; Size: 1 L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoproterenol HCL Injection - USP 1 mg/5 ml ampule</td>
			<td>Hospital Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: 248; Size: single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Injection, USP or Ringers Irrigation</td>
			<td>Hospital Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Formula Weight: NA; Size: 5 L</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardized measurement of nasal membrane transepithelial potential difference (npd)

אנו מתארים מדידה מתוקננת של הפרש הפוטנציאלים האף (NPD). בטכניקה זו, סיסטיק פיברוזיס מוליכות transmembrane הרגולטור (CFTR) ובפונקציה ערוץ (ENaC) נתרן אפיתל המפוקחים על-ידי שינוי מתח על פני האפיתל באף לאחר superfusion של פתרונות המשנים תעלת יונים פעילות. זה יהיה זמין על-ידי מדידת הפרש הפוטנציאלים בין תא תת עורית של אפיתל דרכי הנשימה בתוך הנחיר, ניצול קטטר עם אפי נחות turbinate.
הבדיקה מאפשרת מדידת המתח בסיסית יציבה והשינויים רצופים מתח נטו לאחר זלוף של 100 מיקרומטר amiloride, מעכב של Na+ התחדשות של תמיסת רינגר; פתרון ללא כלוריד המכיל amiloride כדי נסיעה כלוריד הפרשת ו- 10 מיקרומטר isoproterenol ב פתרון כלוריד-חופשית עם amiloride כדי לעורר את מחזורי אדנוזין monophosphate (מחנה)-כלוריד התלויים מוליכות הקשורים CFTR.
טכניקה זו יש את היתרון של הממחיש את המאפיינים אלקטרופיזיולוגיות של שני רכיבי מפתח לבסס את הידרציה של הנוזל פני דרכי הנשימה של אפיתל בדרכי הנשימה, ENaC, CFTR. לכן, זה כלי מחקר שימושי עבור שלב 2 והוכחת קונספט ניסויים של סוכנים שכוונו CFTR ופעילות ENaC לטיפול של מחלות ריאה סיסטיק פיברוזיס (CF). זה גם תהליך מעקב מפתח להקים CFTR תפקוד כאשר בדיקות גנטיות ובדיקות זיעה דו-משמעית. שלא כמו זיעה כלוריד, המבחן הוא יחסית יותר זמן רב ויקר. זה דורש גם מפעיל הכשרה ומומחיות לערוך את הבדיקה באופן יעיל. השתנות אינטר - ו intra - subject דווח בטכניקה זו במיוחד במקצועות צעירים או לא משתף פעולה. כדי לסייע עם חשש זה, פרשנות שופרה באמצעות אלגוריתם לאחרונה המאומת.

Epithelia דרכי הנשימה נורמלית, Na+ הקליטה הוא הפעילות תחבורה ראשי יון. דרכי הנשימה שלילי השטח הפרש הפוטנציאלים ביחס interstitium התוצאה. זלוף של amiloride חוסם הערוץ ENaC מוביל הפרש הפוטנציאלים פחות שלילי. לאחר מכן, superfusion של Cl–-פתרון חינם יוצר הדרגתי כימי לקלרנית-, אשר יוצר הפרש הפוטנציאלים שליליים יותר ומפעיל כל למעליות Cl– , כולל CFTR. Isoproterenol, אשר מגביר את מחנה תאיים, מגביר הפרשת Cl– על ידי הפעלת במיוחד CFTR ומגבירה עוד יותר מהפרש הפוטנציאלים.
לעומת זאת, בנושאים CF, נעדר או לא מתפקדת תוצאות CFTR ENaC מוגברת מתווכת Na+ הקליטה12. כתוצאה מכך, ההבדל פוטנציאליים בסיסית הוא יותר שלילי. דפולריזציה נצפתה עם היישום של amiloride הוא גדול יותר, הואיל מינימלי או לא חל שינוי מהפרש הפוטנציאלים על גירוי הפרשת Cl– דרך מסלולים תלויה CFTR. זה ניתן לראות את לשרטוטים נציג באיור 8, מציג לעומת 'בריא' 'CF' לשרטוטים.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57006/57006fig8.jpg"> איור 8: נציג לשרטוטים של הנושא 'בריא' ואת הנושא עם CF. המשטרה: הפרש הפוטנציאלים, ΔAmiloride: דלתא amiloride, /Iso 0 Cl––: נמוך כלוריד: השינוי ב- PD בין השלמת הפתרון #2 פתרון #4 זלוף, S1-S4: שלבים 1-4, הקו הירוק על גרפים A ו- B מציינים את NPD עקיבה ושחור חיצים מציינים את ההבדל בין הפרש הפוטנציאלים

Watch this Scientific Journal Video about Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference NPD at JoVE.com

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference NPD

כאן, אנו מציגים פרוטוקול מתוקננים כדי למדוד את הפרש הפוטנציאלים האף (NPD). סיסטיק פיברוזיס מוליכות transmembrane הרגולטור (CFTR) ותפקוד ערוץ (ENaC) נתרן אפיתל מוערכות על-ידי שינוי המתח על פני האפיתל באף לאחר superfusion של פתרונות המשנים את פעילות הערוץ יון, מתן מדד התוצאה.

מדידה מתוקננת של ההבדל Transepithelial פוטנציאל ממברנה האף (NPD)

We describe a standardized measurement of nasal potential difference (NPD). In this technique, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD)

Absorption of Nasal and Bronchial Fluids: Precision Sampling of the Human Respiratory Mucosa and Laboratory Processing of Samples

ספיגת נוזלים באף ובסימפונות: דגימה מדויקת של רירית מערכת הנשימה האנושית, מעבדה בעיבוד של דגימות

The methods of nasal absorption (NA) and bronchial absorption (BA) use synthetic absorptive matrices (SAM) to absorb the mucosal lining fluid (MLF) of the ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

טכניקה סטנדרטית של שסתום אבי העורקים השרשה מחדש עבור שסתום ממעט אבי העורקים שורש חלופי

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Generation of Human Nasal Epithelial Cell Spheroids for Individualized Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Study

דור של תאי אפיתל באף אדם Spheroids למחקר הרגולטור מוליכות Transmembrane תגובותיהם סיסטיק פיברוזיס

While the introduction of Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) modulator drugs has revolutionized care in Cystic Fibrosis (CF), the ...

A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation

וזמינותו מבוססי Cytometry זרימה מודדים פוטנציאל ממברנה מיטוכונדריאלי של תאי שריר הלב לאחר היפוקסיה/Reoxygenation

Timely and efficient reperfusion of the occluded coronary artery is the best strategy for decreasing myocardial infarct size in patients with a ST-segment ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

שיטת החלוקה של מיקרו-אלקטרודה להקלטת פוטנציאל ממברנה מעורק מוחי אמצעי של קאננולוב

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

DIPLOMA Approach for Standardized Pathology Assessment of Distal Pancreatectomy Specimens

הגישה דיפלומה עבור הערכה מפתולוגיה סטנדרטית של מריתה דגימות

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is one of the most lethal malignant cancers. A minority (20%) of PDACs are found in the pancreatic body and tail. ...

Standardized Model of Ventricular Fibrillation and Advanced Cardiac Life Support in Swine

מודל מתוקננת של פרוזדורים המוח ותמיכה מתקדמים בחיים הלב בחזירים

Cardiopulmonary resuscitation after cardiac arrest, independent of its origin, is a regularly encountered medical emergency in hospitals as well as ...

Standardized Histomorphometric Evaluation of Osteoarthritis in a Surgical Mouse Model

מתוקננת הערכה היסטראורמטרית של אוסטיאוארתריטיס במודל עכבר כירורגי

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, ...

Culture and Imaging of Human Nasal Epithelial Organoids

תרבית והדמיה של אורגנואידים אפיתל האף האנושיים

Individualized therapy for cystic fibrosis (CF) patients can be achieved with an in vitro disease model to understand baseline Cystic Fibrosis ...

Collection, Expansion, and Differentiation of Primary Human Nasal Epithelial Cell Models for Quantification of Cilia Beat Frequency

איסוף, הרחבה והתמיינות של מודלים ראשוניים של תאי אפיתל באף אנושי לכימות תדירות פעימות הריסונים

Measurements of cilia function (beat frequency, pattern) have been established as diagnostic tools for respiratory diseases such as primary ciliary ...