Name: mouse adipose tissue collection and processing for rna analysis
Uploaded: 2018-01-31T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA Analysis at JoVE.com

यह काम मधुमेह कनाडा द्वारा समर्थित किया गया था ।

जानवरों के संरक्षण के लिए कनाडा की परिषद द्वारा निर्धारित की देखभाल और प्रयोगात्मक जानवरों के उपयोग के लिए मानकों के अनुरूप प्रक्रियाओं में इस्तेमाल चूहों की देखभाल. सभी प्रक्रियाओं दोस्त अनुसंधान ?...

<ol>
	<li>Guh, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+incidence+of+co-morbidities+related+to+obesity+and+overweight:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">The incidence of co-morbidities related to obesity and overweight: a systematic review and meta-analysis.</a> BMC. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+increases+in+circulating+prorenin+are+not+associated+with+renal+or+cardiac+pathologies.">Chronic increases in circulating prorenin are not associated with renal or cardiac pathologies.</a> Hypertension. 53 (6), 1062-1069 (2009).</li><li>Dusaulcy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-specific+disruption+of+autotaxin+enhances+nutritional+fattening+and+reduces+plasma+lysophosphatidic+acid.">Adipose-specific disruption of autotaxin enhances nutritional fattening and reduces plasma lysophosphatidic acid.</a> J. Lipid Res. 52 (6), 1247-1255 (2011).</li><li>Nakamura, K., Fuster, J. J., Walsh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipokines:+a+link+between+obesity+and+cardiovascular+disease.">Adipokines: a link between obesity and cardiovascular disease.</a> J Cardiol. 63 (4), 250-259 (2014).</li><li>Taylor, S. C., Mrkusich, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+RT-quantitative+PCR:+firsthand+observations+of+implementation+of+minimum+information+for+the+publication+of+quantitative+real-time+PCR+experiments+(MIQE).">The state of RT-quantitative PCR: firsthand observations of implementation of minimum information for the publication of quantitative real-time PCR experiments (MIQE).</a> J Mol Microbiol Biotechnol. 24 (1), 46-52 (2014).</li><li>Hummon, A. B., Lim, S. R., Difilippantonio, M. J., Ried, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+solubilization+of+proteins+after+TRIzol+extraction+of+RNA+and+DNA+from+patient+material+following+prolonged+storage.">Isolation and solubilization of proteins after TRIzol extraction of RNA and DNA from patient material following prolonged storage.</a> Biotechniques. 42 (4), 467-470 (2007).</li></ol>

निंनलिखित HF-आहार खिला, मोटापे से ग्रस्त चूहों के लिए शरीर और सफेद वसा ऊतक वजन में वृद्धि हुई चूहों की तुलना में एक एन आहार खिलाया पाया गया । आरएनए phenol समाधान का उपयोग कर निकाला अच्छी पवित्रता के साथ नमूने ?...

मोटापा एक विश्वव्यापी महामारी है जो इस प्रकार के रूप में जटिलताओं को जन्म दे सकता है 2 मधुमेह1. आहार-प्रेरित मोटापे से ग्रस्त और आनुवंशिक रूप से संशोधित पशु मॉडल अक्सर मोटापे और उससे जुड़े जटिलताओं में अनुसंधान के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं । परंपरागत रूप से, सफेद वसा ऊतक अतिरिक्त ऊर्जा के लिए एक भंडारण डिब्बे के रूप में जाना जाता है और ज्यादातर लिपिड से बना है, जबकि ब्राउन वसा ऊतक गर्मी में ऊर्जा धर्मांतरित2,3. वसा ऊतक गतिशील है और विस्तार और इस तरह के भोजन के सेवन और शारीरिक गतिविधि के रूप में कई कारकों के आधार पर हटना होगा । इसलिए, इन परिवर्तनों के लिए योगदान कारकों का निर्धारण करने के लिए, पर्याप्त वसा ऊतक संग्रह और हैंडलिंग की आवश्यकता है4।
सफेद वसा ऊतकों के बीच, यह आम तौर पर स्वीकार किया जाता है कि चमड़े के नीचे और आंत में वसा डिपो संरचनात्मक स्थानीयकरण और समारोह2,5जैसे विभिन्न गुण हैं । नतीजतन, विरोधी परिणामों या बड़ी परिवर्तनशीलता से बचने के लिए ध्यान की जरूरत है जब वसा पैड इकट्ठा इन विभिन्न वसा डिपो के बीच पार संदूषण से बचने के लिए लिया जाना है ।
इसके अलावा, वहां तीन प्रमुख चुनौतियों जब आरएनए या चूहों सफेद वसा ऊतक से प्रोटीन अलग कर रहे हैं । सबसे पहले, मोटापे से ग्रस्त चूहों में वसा पैड का संग्रह विभिन्न सफेद वसा डिपो अलग करता है जो सीमा के रूप में एक आसान काम नहीं है, इस तरह के गुर्दे और दिल6के रूप में अन्य अंगों के विपरीत हमेशा स्पष्ट नहीं है. दूसरा, वसा ऊतक के उच्च लिपिड सामग्री के कारण, आरएनए या प्रोटीन अलगाव के दौरान, लिपिड की एक परत शीर्ष पर तैरता है और नमूने के लिए सीधी पहुँच रोकता है । तीसरा, ब्राउन वसा ऊतक या अंय ऊतकों के विरोध के रूप में, सफेद वसा ऊतक काफी कम आरएनए और प्रोटीन सामग्री है और यह प्रमुख चिंता का विषय है जब युवा चूहों का उपयोग कर, चूहों एक सामांय (N) आहार और चूहों जो कम वसा द्रव्यमान की उंमीद कर रहे है खिलाया (यानी KO मॉडल, दवाओं के साथ उपचार, व्यायाम प्रशिक्षण, आदि) 7 , 8.
इसलिए, वसा ऊतक से आरएनए को अलग करने के लिए उपयुक्त विधि का चयन महत्वपूर्ण है. phenol/क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण करने के लिए वैकल्पिक तरीकों वाणिज्यिक किट हैं । वे आम तौर पर एक प्रारंभिक phenol निष्कर्षण कदम पर आधारित है, एक कॉलम9पर आरएनए शुद्धि के बाद । हालांकि, उन किट आम तौर पर कर रहे है और अधिक महंगी और कम उपज के नमूने दे, जबकि आरएनए गुणवत्ता चर सकता है लेकिन कम समय लगता है । हालांकि, phenol समाधान/क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण के लिए सबसे बड़ा लाभ में से एक यहां वर्णित आरएनए, डीएनए, और एक नमूना10से प्रोटीन अलग करने की संभावना है । के बाद से चूहों वसा पैड आम तौर पर छोटे हैं और आरएनए और प्रोटीन की छोटी मात्रा (विशेष रूप से दुबला माउस मॉडल में) दे, इन प्रोटोकॉल डेटा एक एक छोटे से नमूने से बाहर निकल सकते हैं अधिकतम ।
इस पत्र के उद्देश्य के लिए विस्तार से एक विधि के लिए तीन चूहों सफेद वसा ऊतक डिपो से पर्याप्त नमूना संग्रह के रूप में अच्छी तरह से मात्रा और आरएनए अलगाव की गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए वर्णन है । इस प्रोटोकॉल का पालन करके प्राप्त आरएनए वास्तविक समय पीसीआर परख प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इस प्रोटोकॉल संस्कृतिपूर्ण प्राथमिक adipocytes से आरएनए अलगाव के लिए इरादा नहीं है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1003px;" width="1002">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">1 mL seringes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1X TE solution (10 mM Tris-HCl and 1 mM EDTA&#8226;Na2. pH 8.0)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">22 G needles</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">26 G needles</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">75% Ethanol</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Block heater (dry bath)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C2432-500mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dATP&#160;&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dCTP&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dGTP&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">DNase I (1 U/&#181;l)&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EN0521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dTTP&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Faststart Universal SYBR green Master (Rox)</td>
			<td style="width:189px;">Roche</td>
			<td style="width:189px;">4913922001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Faststart universal SYBR green master (Rox) fluorescent dye&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Roche</td>
			<td style="width:189px;">4913914001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Filtered tips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Instrumentarium</td>
			<td>HB275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Gauze</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Hammer</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">High fat rodent diet</td>
			<td>Bio-Serv, Frenchtown, NJ</td>
			<td style="width:189px;">F3282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Isopropanol&#160;</td>
			<td>Laboratoire MAT</td>
			<td>IH-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Leptin forward PCR primer (5&#8217;-GGGCTTCACCCCATTCTGA-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Leptin reverse PCR primer (5&#8217;-GGCTATCTGCAGCACATTTTG-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Liquid nitrogen</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Maxima Reverse Transcriptase (enzyme and 5x buffer)</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EP0742</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nanopure water (referred as ultrapure water)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nitrile examination gloves</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nitrile gloves</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Normal rodent diet</td>
			<td style="width:189px;">Harlan Laboratories, Madison, WI</td>
			<td style="width:189px;">Harlan 2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P1000 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P2 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P20 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P200 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Phenol solution (TRIzol)&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Ambion Life Technologies</td>
			<td style="width:189px;">15598018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Pre-identified aluminium foil</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quartz spectrophotometer cuvette</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rack for PCR tube strips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Racks for RT-PCR tube strips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Random hexamers&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:189px;">58875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:457px;">Real-time PCR Rotor Gene system&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Corbett research</td>
			<td style="width:189px;">RG-3000 Rotor-Gene thermal cycler</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Refrigerated bench-top centrifuge</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RiboLock RNase Inhibitor&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EO0381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free 1.5 mL eppendorf tubes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free 1.5 mL screw cap tubes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RNase-free PCR tube strips (0.2 mL) and caps</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free water&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Hyclone</td>
			<td style="width:189px;">SH30538.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RT-PCR machine</td>
			<td style="width:189px;">Qiagen</td>
			<td style="width:189px;">Rotor-Gene Corbett 3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RT-PCR tube strips (0.1 mL) and caps</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">S16 forward PCR primer (5&#8217;-ATCTCAAAGGCCCTGGTAGC-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">S16 reverse PCR primer (5&#8217; ACAAAGGTAAACCCCGATCG-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Spectrophotometer</td>
			<td style="width:189px;">Biochrom</td>
			<td style="width:189px;">Ultrospec 3100 pro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Stainless steel mortar and pestle</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="77">
			<td height="77" style="height:77px;width:457px;">Surgical pads</td>
			<td style="width:189px;">Home made a foam board wrapped in a disposable absorbent underpad</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Surgical scissors&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Intrumentarium</td>
			<td style="width:189px;">130.450.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Thermal cycler</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Thermal cycler&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Biometra</td>
			<td style="width:189px;">Thermocycler</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Vortex mixer</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Weighing spatula</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse adipose tissue collection and processing for rna analysis

अंय ऊतकों की तुलना में, सफेद वसा ऊतक एक काफी कम आरएनए और ऐसे वास्तविक समय पीसीआर और पश्चिमी दाग के रूप में बहाव अनुप्रयोगों के लिए प्रोटीन सामग्री है, क्योंकि यह ज्यादातर लिपिड शामिल हैं । वसा ऊतक नमूनों से आरएनए अलगाव भी चुनौतीपूर्ण है के रूप में अतिरिक्त कदम इन लिपिड से बचने के लिए आवश्यक हैं । यहाँ, हम चूहों से तीन शारीरिक विभिन्न सफेद वसा ऊतकों को इकट्ठा करने के लिए एक प्रक्रिया प्रस्तुत करते हैं, इन नमूनों की प्रक्रिया और आरएनए अलगाव प्रदर्शन करने के लिए. हम आगे वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग सीडीएनए और जीन अभिव्यक्ति प्रयोगों के संश्लेषण का वर्णन । इसके द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल पशु के बाल और वसा पैड पर रक्त के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पार-ऊतक संग्रह के दौरान अलग मोटी पैड के बीच संदूषण से संक्रमण की कमी की अनुमति देता है । यह भी पर्याप्त मात्रा और आरएनए निकाली की गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए अनुकूलित किया गया है. इस प्रोटोकॉल को व्यापक रूप से किसी भी माउस मॉडल के लिए लागू किया जा सकता है जहां वसा ऊतक नमूनों को नियमित प्रयोग के लिए आवश्यक है जैसे वास्तविक समय पीसीआर लेकिन प्राथमिक adipocytes सेल संस्कृति से अलगाव के लिए इरादा नहीं है ।

necropsy प्रक्रिया के बाद, तीन सफेद वसा ऊतकों और एकत्र चूहों के दो समूहों (एन और HF आहार खिलाया चूहों) से भारित किया गया । जैसा कि उंमीद थी, HF आहार पर चूहों अंतिम शरीर के वजन और वजन N आहार पर littermates की तुलन?...

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Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA Analysis

आरएनए विश्लेषण के लिए माउस वसा ऊतक संग्रह और प्रसंस्करण

इस पेपर का उद्देश्य एक कदम दर कदम प्रक्रिया को चूहों से अलग सफेद वसा ऊतकों को इकट्ठा करने के लिए, वसा के नमूनों की प्रक्रिया और आरएनए निकालने के लिए प्रस्तुत है ।

Compared to other tissues, white adipose tissue has a considerably less RNA and protein content for downstream applications such as real-time PCR and ...

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Experimental Design for Laser Microdissection RNA-Seq: Lessons from an Analysis of Maize Leaf Development

लेजर Microdissection शाही सेना seq के लिए प्रायोगिक डिजाइन: मक्का पत्तियों के विकास के एक विश्लेषण से सबक

Genes with important roles in development frequently have spatially and/or temporally restricted expression patterns. Often these gene transcripts are not ...

An Efficient Method for the Isolation of Highly Purified RNA from Seeds for Use in Quantitative Transcriptome Analysis

मात्रात्मक Transcriptome विश्लेषण में उपयोग के लिए बीज से उच्च शुद्ध शाही सेना के अलगाव के लिए एक कारगर तरीका

Plant seeds accumulate large amounts of storage reserves comprising biodegradable organic matter. Humans rely on seed storage reserves for food and as ...

Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs

स्तनधारी mRNAs पर अनुवाद दीक्षा परिसर गठन का Toeprinting विश्लेषण

Translation initiation is the rate-limiting step of protein synthesis and represents a key point at which cells regulate their protein output. Regulation ...

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) Strategy

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture CARIC Strategy

पर कब्जा और क्लिक करें रसायन-सहायता प्राप्त आरएनए-interactome कैप्चर (CARIC) रणनीति का उपयोग करके आरएनए बाइंडिंग प्रोटीन की पहचान

A comprehensive identification of RNA-binding proteins (RBPs) is key to understanding the posttranscriptional regulatory network in cells. A widely used ...

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

जीसी-एमएस थर्मल डेकोर्पशन सैंपलिंग के लिए हेडस्पेस अस्थिर संग्रह तकनीक का उपयोग करके पुष्प खुशबू वोलेटाइल्स का रैपिड कलेक्शन

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

Studying RNA Interactors of Protein Kinase RNA-Activated during the Mammalian Cell Cycle

स्तनधारी कोशिका चक्र के दौरान सक्रिय प्रोटीन काइनेज आरएनए के आरएनए इंटरएक्टर्स का अध्ययन

Protein kinase RNA-activated (PKR) is a member of the innate immune response proteins and recognizes the double-stranded secondary structure of viral ...

Rapid and Cost-Effective RNA Extraction of Rat Pancreatic Tissue

चूहा अग्नाशय के ऊतकों की तेजी से और लागत प्रभावी आरएनए निष्कर्षण

Regardless of the extraction method, optimized RNA extraction of tissues and cell lines are carried out in four stages: 1) homogenization, 2) effective ...

RNA Blot Analysis for the Detection and Quantification of Plant MicroRNAs

प्लांट माइक्रोआरएनए का पता लगाने और क्वांटिफिकेशन के लिए आरएनए दाग विश्लेषण

MicroRNAs (miRNAs) are a class of endogenously expressed non-coding, ~21 nt small RNAs involved in the regulation of gene expression in both plants and ...