Name: mouse adipose tissue collection and processing for rna analysis
Uploaded: 2018-01-31T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA Analysis at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pelo Canadá de Diabetes.

Cuidados dos ratos usados nos procedimentos respeitadas as normas para o cuidado e o uso de animais experimentais, fixado pelo Conselho canadense para a protecção dos animais. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de uso no centro de pesquisa de CHUM e cuidado do Animal de universidade.
1. necropsia e coleta de tecido adiposo de ratos masculinos
<ol><li>Fazer grupos experimentais, de acordo com os objectivos do estudo. Neste estudo, as amostras foram coletadas de dois grupos ...

<ol>
	<li>Guh, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+incidence+of+co-morbidities+related+to+obesity+and+overweight:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">The incidence of co-morbidities related to obesity and overweight: a systematic review and meta-analysis.</a> BMC. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+increases+in+circulating+prorenin+are+not+associated+with+renal+or+cardiac+pathologies.">Chronic increases in circulating prorenin are not associated with renal or cardiac pathologies.</a> Hypertension. 53 (6), 1062-1069 (2009).</li><li>Dusaulcy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-specific+disruption+of+autotaxin+enhances+nutritional+fattening+and+reduces+plasma+lysophosphatidic+acid.">Adipose-specific disruption of autotaxin enhances nutritional fattening and reduces plasma lysophosphatidic acid.</a> J. Lipid Res. 52 (6), 1247-1255 (2011).</li><li>Nakamura, K., Fuster, J. J., Walsh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipokines:+a+link+between+obesity+and+cardiovascular+disease.">Adipokines: a link between obesity and cardiovascular disease.</a> J Cardiol. 63 (4), 250-259 (2014).</li><li>Taylor, S. C., Mrkusich, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+RT-quantitative+PCR:+firsthand+observations+of+implementation+of+minimum+information+for+the+publication+of+quantitative+real-time+PCR+experiments+(MIQE).">The state of RT-quantitative PCR: firsthand observations of implementation of minimum information for the publication of quantitative real-time PCR experiments (MIQE).</a> J Mol Microbiol Biotechnol. 24 (1), 46-52 (2014).</li><li>Hummon, A. B., Lim, S. R., Difilippantonio, M. J., Ried, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+solubilization+of+proteins+after+TRIzol+extraction+of+RNA+and+DNA+from+patient+material+following+prolonged+storage.">Isolation and solubilization of proteins after TRIzol extraction of RNA and DNA from patient material following prolonged storage.</a> Biotechniques. 42 (4), 467-470 (2007).</li></ol>

Seguir HF-dieta alimentar, ratos obesos foram encontrados para ter aumentado o corpo e os pesos de tecido adiposo branco em comparação com ratos alimentados com uma dieta de N. RNA extraído usando solução de fenol rendeu amostras com boa pureza. Leptina é uma adipokine primeiramente produzido pelo tecido adiposo e é conhecida por correlacionar-se positivamente com a massa gorda16. Como esperado, a expressão de RNAm de leptina aumentou em ratos obesos em concomitância com sua massa gorda.<...

A obesidade é uma epidemia mundial que pode levar a complicações, tais como o tipo 2 diabetes1. Modelos animais induzida por dieta obesos e geneticamente modificados são frequentemente usados para investigação em obesidade e suas complicações associadas. Tradicionalmente, o tecido adiposo branco é conhecido como um compartimento de armazenamento para o excesso de energia e é principalmente composto de lipídios enquanto marrom tecido adiposo converte energia em calor2,3. Tecido adiposo é dinâmico e irá expandir e encolher dependendo de vários fatores tais como a ingestão de alimentos e atividade física. Portanto, para determinar os fatores que contribuem para essas alterações, manipulação e coleta adequada de tecido adiposo são necessários4.
Entre os brancos os tecidos adiposos, é geralmente aceite que os depósitos de gordura subcutâneos e viscerais possuem diferentes propriedades como localização anatômica e função2,5. Por conseguinte, para evitar resultados conflitantes ou grande variabilidade, atenção deve ser tomado para evitar a contaminação cruzada entre estes depósitos de gordura diferentes quando coletando almofadas de gordura.
Além disso, existem três grandes desafios quando isolando RNA ou proteína do tecido adiposo de ratos brancos. Primeiro, coletar almofadas de gordura em ratos obesos não é uma tarefa fácil como a fronteira que separa diferentes depósitos de gordura brancos nem sempre é clara, em contraste com outros órgãos como rins e coração6. Em segundo lugar, por causa do alto teor lipídico do tecido adiposo, durante o isolamento do RNA ou proteína, uma camada de lipídios flutua no topo e impede o acesso direto à amostra. Em terceiro lugar, em vez de marrom tecido adiposo ou outros tecidos, tecido adiposo branco tem consideravelmente mais baixo conteúdo de RNA e proteína e isso é de grande preocupação quando usando ratos jovens, ratos alimentados com uma dieta normal de (N) e ratos que deverão tem baixas gordura massas (ou seja, KO modelos, tratamento com medicamentos, exercem, treinamento, etc.) 7 , 8.
Portanto, escolher o método apropriado para isolar o RNA do tecido adiposo é crítico. Métodos alternativos para extração fenol/clorofórmio são jogos comerciais. Eles normalmente são baseados em uma etapa de extração do fenol inicial, seguida de purificação de RNA em uma coluna de9. No entanto, esses kits são tipicamente mais caros e dar amostras de rendimento mais baixo, enquanto a qualidade do RNA pode ser variável mas são menos demorados. No entanto, uma das maiores vantagens para extração de solução/clorofórmio fenol descrito aqui é a possibilidade de isolar o DNA, RNA e proteína de uma única amostra10. Desde almofadas de gordura de ratos são geralmente pequenas e dar uma quantidade pequena de RNA e proteínas (especialmente em modelos do rato magra), estes protocolos maximizam os dados um pode tirar uma pequena amostra.
O objetivo deste trabalho é descrever detalhadamente um método para garantir a coleta de amostra adequada de depósitos de tecido adiposo branco três ratos, bem como a quantidade e a qualidade da isolação do RNA. RNA obtido seguindo este protocolo pode ser usado para realizar ensaios PCR em tempo real. Este protocolo não se destina para isolamento de RNA de adipócitos primários culturas.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1003px;" width="1002">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">1 mL seringes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1X TE solution (10 mM Tris-HCl and 1 mM EDTA&#8226;Na2. pH 8.0)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">22 G needles</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">26 G needles</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">75% Ethanol</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Block heater (dry bath)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C2432-500mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dATP&#160;&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dCTP&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dGTP&#160;&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">DNase I (1 U/&#181;l)&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EN0521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">dTTP&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">R0171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Faststart Universal SYBR green Master (Rox)</td>
			<td style="width:189px;">Roche</td>
			<td style="width:189px;">4913922001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Faststart universal SYBR green master (Rox) fluorescent dye&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Roche</td>
			<td style="width:189px;">4913914001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Filtered tips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Instrumentarium</td>
			<td>HB275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Gauze</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Hammer</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">High fat rodent diet</td>
			<td>Bio-Serv, Frenchtown, NJ</td>
			<td style="width:189px;">F3282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Isopropanol&#160;</td>
			<td>Laboratoire MAT</td>
			<td>IH-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Leptin forward PCR primer (5&#8217;-GGGCTTCACCCCATTCTGA-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Leptin reverse PCR primer (5&#8217;-GGCTATCTGCAGCACATTTTG-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Liquid nitrogen</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Maxima Reverse Transcriptase (enzyme and 5x buffer)</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EP0742</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nanopure water (referred as ultrapure water)</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nitrile examination gloves</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Nitrile gloves</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">Normal rodent diet</td>
			<td style="width:189px;">Harlan Laboratories, Madison, WI</td>
			<td style="width:189px;">Harlan 2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P1000 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P2 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P20 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">P200 pipetman</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Phenol solution (TRIzol)&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Ambion Life Technologies</td>
			<td style="width:189px;">15598018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Pre-identified aluminium foil</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quartz spectrophotometer cuvette</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rack for PCR tube strips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Racks for RT-PCR tube strips</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Random hexamers&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:189px;">58875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:457px;">Real-time PCR Rotor Gene system&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Corbett research</td>
			<td style="width:189px;">RG-3000 Rotor-Gene thermal cycler</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Refrigerated bench-top centrifuge</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RiboLock RNase Inhibitor&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Thermo scientific</td>
			<td style="width:189px;">EO0381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free 1.5 mL eppendorf tubes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free 1.5 mL screw cap tubes</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RNase-free PCR tube strips (0.2 mL) and caps</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RNase-free water&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Hyclone</td>
			<td style="width:189px;">SH30538.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RT-PCR machine</td>
			<td style="width:189px;">Qiagen</td>
			<td style="width:189px;">Rotor-Gene Corbett 3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">RT-PCR tube strips (0.1 mL) and caps</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">S16 forward PCR primer (5&#8217;-ATCTCAAAGGCCCTGGTAGC-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:457px;">S16 reverse PCR primer (5&#8217; ACAAAGGTAAACCCCGATCG-3&#8217;) 10 uM</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Spectrophotometer</td>
			<td style="width:189px;">Biochrom</td>
			<td style="width:189px;">Ultrospec 3100 pro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Stainless steel mortar and pestle</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="77">
			<td height="77" style="height:77px;width:457px;">Surgical pads</td>
			<td style="width:189px;">Home made a foam board wrapped in a disposable absorbent underpad</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Surgical scissors&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Intrumentarium</td>
			<td style="width:189px;">130.450.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Thermal cycler</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Thermal cycler&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Biometra</td>
			<td style="width:189px;">Thermocycler</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Vortex mixer</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Weighing spatula</td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td style="width:189px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse adipose tissue collection and processing for rna analysis

Comparado a outros tecidos, tecido adiposo branco tem um teor consideravelmente menos RNA e proteína para aplicações a jusante, tais como a PCR em tempo real e Western Blot, desde que em sua maioria contém lipídios. Isolamento de RNA a partir de amostras de tecido adiposo é também um desafio como etapas adicionais são necessárias para evitar esses lipídios. Aqui, apresentamos um procedimento para coletar três anatomicamente diferentes brancos adiposo tecidos de ratos, para processar estas amostras e realizar o isolamento de RNA. Podemos descrever a síntese do cDNA e gene experimentos de expressão usando PCR em tempo real. O protocolo descrito por este meio permite a redução da contaminação de cabelo e sangue nas almofadas de gordura, bem como a contaminação cruzada entre diferentes almofadas de gordura durante a coleta de tecido do animal. Ele também foi otimizado para garantir adequada quantidade e qualidade do RNA extraído. Este protocolo pode ser amplamente aplicado a qualquer modelo de rato onde as amostras de tecido adiposo são necessárias para experimentos de rotina, tais como a PCR em tempo real, mas não deve ser isolada da cultura de células primárias de adipócitos.

Após o processo de necropsia, os três tecidos adiposo brancos foram coletados e ponderados de dois grupos de ratos (N e HF dieta-alimentou ratos). Como esperado, os ratos na dieta de HF tinham aumentado de peso final e ganho de peso em comparação com littermates dieta N (tabela 1). Estas observações foram acompanhadas por mais do que um aumento de 2 vezes no peso da PGF, PRF e SCF em ratos obesos em comparação com aqueles na dieta de N.
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Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA Analysis

Coleção de tecido adiposo de mouse e processamento para análise de RNA

O objetivo deste trabalho é apresentar um procedimento passo a passo para coletar os diferentes tecidos adiposo brancos de ratos, processar as amostras de gordura e extrair o RNA.

Compared to other tissues, white adipose tissue has a considerably less RNA and protein content for downstream applications such as real-time PCR and ...

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Experimental Design for Laser Microdissection RNA-Seq: Lessons from an Analysis of Maize Leaf Development

Projeto Experimental de Laser Microdissecção RNA-Seq: Lições de uma análise do desenvolvimento foliar do milho

Genes with important roles in development frequently have spatially and/or temporally restricted expression patterns. Often these gene transcripts are not ...

Bioquímica

An Efficient Method for the Isolation of Highly Purified RNA from Seeds for Use in Quantitative Transcriptome Analysis

Um método eficiente para o isolamento de ARN altamente purificada a partir de sementes para Utilização em Análise Quantitativa do transcriptoma

Plant seeds accumulate large amounts of storage reserves comprising biodegradable organic matter. Humans rely on seed storage reserves for food and as ...

Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs

Análise de Toeprinting de formação do complexo iniciação tradução de mRNAs mamíferos

Translation initiation is the rate-limiting step of protein synthesis and represents a key point at which cells regulate their protein output. Regulation ...

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) Strategy

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture CARIC Strategy

Captura e identificação de proteínas de ligação de RNA usando clique química assistida RNA-interactome capturam estratégia (CARIC)

A comprehensive identification of RNA-binding proteins (RBPs) is key to understanding the posttranscriptional regulatory network in cells. A widely used ...

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

Coleção rápida de voláteis florais da fragrância usando uma técnica da coleção do volatile do Headspace para a amostragem térmica da desorção de GC-MS

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

Studying RNA Interactors of Protein Kinase RNA-Activated during the Mammalian Cell Cycle

Estudando o RNA interactianos de proteína quinase RNA-ativado durante o ciclo celular dos mamíferos

Protein kinase RNA-activated (PKR) is a member of the innate immune response proteins and recognizes the double-stranded secondary structure of viral ...

Rapid and Cost-Effective RNA Extraction of Rat Pancreatic Tissue

Extração rápida e econômica do RNA do tecido pancreático de rato

Regardless of the extraction method, optimized RNA extraction of tissues and cell lines are carried out in four stages: 1) homogenization, 2) effective ...

RNA Blot Analysis for the Detection and Quantification of Plant MicroRNAs

Análise de blot de RNA para detecção e quantificação de MicroRNAs vegetais

MicroRNAs (miRNAs) are a class of endogenously expressed non-coding, ~21 nt small RNAs involved in the regulation of gene expression in both plants and ...