Name: murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice at JoVE.com

تم دعم هذا العمل، جزئيا، بأبحاث المنح كتسي SC المعاهد الوطنية للصحة/نكر/نكتس-UL1TR000130 (تفوق)، AA022448 (تفوق)، و "مدرسة الصيدلة المؤتمر الصومالي الموحد".

عليها جميع الإجراءات الموضحة هنا برعاية الحيوان المؤسسية واللجان استخدام الحرم الجامعي العلوم الصحية جامعة جنوب كاليفورنيا.
1-الإعداد التجريبية والجمعية
<ol><li>الحصول على جميع المواد الكيميائية قبل بدء الدراسة واللوازم التالية: الفئران، قمم القفص أقفاص/المعادن، الفراش، ا...

<ol>
	<li>Litten, R. Z., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery,+Development,+and+Adoption+of+Medications+to+Treat+Alcohol+Use+Disorder:+Goals+for+the+Phases+of+Medications+Development.">Discovery, Development, and Adoption of Medications to Treat Alcohol Use Disorder: Goals for the Phases of Medications Development.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 40 (7), 1368-1379 (2016).</li><li>Grant, B. F., Dawson, D. A., Stinson, F. S., Chou, S. P., Dufour, M. C., Pickering, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+12-month+prevalence+and+trends+in+DSM-IV+alcohol+abuse+and+dependence:+United+States,+1991-1992+and+2001-2002.">The 12-month prevalence and trends in DSM-IV alcohol abuse and dependence: United States, 1991-1992 and 2001-2002.</a> Drug and Alcohol Dependence. 74 (3), 223-234 (2004).</li><li>Sacks, J. J., Gonzales, K. R., Bouchery, E. E., Tomedi, L. E., Brewer, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National+and+State+Costs+of+Excessive+Alcohol+Consumption.">National and State Costs of Excessive Alcohol Consumption.</a> American Journal of Preventive Medicine. 49 (5), 73-79 (2015).</li><li>Litten, R. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medications+development+to+treat+alcohol+dependence:+a+vision+for+the+next+decade.">Medications development to treat alcohol dependence: a vision for the next decade.</a> Addiction Biology. 17 (3), 513-527 (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Johnson+Medication+Treatment+of+Different+Types+of+Alcoholism.">Johnson Medication Treatment of Different Types of Alcoholism.</a> American Journal of Psychiatry. 167 (6), 630-639 (2010).</li><li>Litten, R. Z., Wilford, B. B., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+medications+for+the+treatment+of+alcohol+use+disorder:+An+evaluation+of+clinical+efficacy+and+safety.">Potential medications for the treatment of alcohol use disorder: An evaluation of clinical efficacy and safety.</a> Substance Abuse. 37 (2), 286-298 (2016).</li><li>Litten, R. Z., Ryan, M. L., Falk, D. E., Reilly, M., Fertig, J. B., Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+Alcohol+Use+Disorder:+Understanding+Mechanisms+to+Advance+Personalized+Treatment.+Alcoholism:+Clinical+and+Experimental.">Heterogeneity of Alcohol Use Disorder: Understanding Mechanisms to Advance Personalized Treatment. Alcoholism: Clinical and Experimental.</a> Research. 39 (4), 579-584 (2015).</li><li>Schuckit, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Genome-Wide+Search+for+Genes+That+Relate+to+a+Low+Level+of+Response+to+Alcohol.">A Genome-Wide Search for Genes That Relate to a Low Level of Response to Alcohol.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 25 (3), 323-329 (2001).</li><li>Batki, S. L., Pennington, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+Personalized+Medicine+in+the+Pharmacotherapy+of+Alcohol+Use+Disorder:+Targeting+Patient+Genes+and+Patient+Goals.">Toward Personalized Medicine in the Pharmacotherapy of Alcohol Use Disorder: Targeting Patient Genes and Patient Goals.</a> American Journal of Psychiatry. 171 (4), 391-394 (2014).</li><li>Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+frameworks+and+mechanistic+aspects+of+alcohol+addiction:+alcohol+addiction+as+a+reward+deficit+disorder.">Theoretical frameworks and mechanistic aspects of alcohol addiction: alcohol addiction as a reward deficit disorder.</a> Current topics in behavioral neurosciences. 13, 3-30 (2013).</li><li>Yoneyama, N., Crabbe, J. C., Ford, M. M., Murillo, A., Finn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voluntary+ethanol+consumption+in+22+inbred+mouse+strains.">Voluntary ethanol consumption in 22 inbred mouse strains.</a> Alcohol. 42 (3), 149-160 (2008).</li><li>Rhodes, J. S., Best, K., Belknap, J. K., Finn, D. A., Crabbe, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+simple+model+of+ethanol+drinking+to+intoxication+in+C57BL/6J+mice.">Evaluation of a simple model of ethanol drinking to intoxication in C57BL/6J mice.</a> Physiology &amp; Behavior. 84 (1), 53-63 (2005).</li><li>Thiele, T. E., Navarro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Drinking+in+the+dark"+(DID)+procedures:+A+model+of+binge-like+ethanol+drinking+in+non-dependent+mice.">"Drinking in the dark" (DID) procedures: A model of binge-like ethanol drinking in non-dependent mice.</a> Alcohol. 48 (3), 235-241 (2014).</li><li>Crabbe, J. C., Spence, S. E., Brown, L. L., Metten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alcohol+preference+drinking+in+a+mouse+line+selectively+bred+for+high+drinking+in+the+dark.">Alcohol preference drinking in a mouse line selectively bred for high drinking in the dark.</a> Alcohol. 45 (5), 427-440 (2011).</li><li>Sprow, G. M., Thiele, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobiology+of+binge-like+ethanol+drinking:+Evidence+from+rodent+models.">The neurobiology of binge-like ethanol drinking: Evidence from rodent models.</a> Physiology &amp; Behavior. 106 (3), 325-331 (2012).</li><li>Neasta, J., Hamida, B., Yowell, Q., Carnicella, S., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+mammalian+target+of+rapamycin+complex+1+signaling+in+neuroadaptations+underlying+alcohol-related+disorders.">Role for mammalian target of rapamycin complex 1 signaling in neuroadaptations underlying alcohol-related disorders.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (46), 20093-20098 (2010).</li><li>Huynh, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+development+of+moxidectin+as+a+novel+therapeutic+for+alcohol+use+disorder.">Preclinical development of moxidectin as a novel therapeutic for alcohol use disorder.</a> Neuropharmacology. 113, 60-70 (2017).</li><li>Egli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+experimental+paradigms+and+animal+models+be+used+to+discover+clinically+effective+medications+for+alcoholism.">Can experimental paradigms and animal models be used to discover clinically effective medications for alcoholism.</a> Addiction Biology. 10 (4), 309-319 (2005).</li><li>Huynh, N., Arabian, N., Lieu, D., Asatryan, L., Davies, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilizing+an+Orally+Dissolving+Strip+for+Pharmacological+and+Toxicological+Studies:+A+Simple+and+Humane+Alternative+to+Oral+Gavage+for+Animals.">Utilizing an Orally Dissolving Strip for Pharmacological and Toxicological Studies: A Simple and Humane Alternative to Oral Gavage for Animals.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), (2016).</li><li>Yardley, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ivermectin+reduces+alcohol+intake+and+preference+in+mice.">Ivermectin reduces alcohol intake and preference in mice.</a> Neuropharmacology. 63 (2), 190-201 (2012).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li></ol>

في جميع أنحاء العالم تشير التقديرات إلى أن ما يصل إلى 76 مليون شخص تفي بمعايير تبرر إجراء تشخيص لاضطرابات استخدام الكحول (أسترالي). ولسوء الحظ، العلاجات الدوائية المتوفرة حاليا غير فعالة إلى حد كبير وزيادة تطوير ضروري لمقابلة احتياجات هذا السكان السريرية20. وتحقيقا لهذه الغاية...

للماضي 25 بالإضافة إلى سنوات، وضعت جهدا كبيرا نحو تطوير أدوية لعلاج اضطرابات استخدام الكحول (AUD)1. على الرغم من أن العديد من تقدم، أسترالي لا يزال مشكلة رئيسية لصحة العامة، التي تؤثر على الأميركيين ما يزيد على 18 مليون، وتكلف ما يزيد على مبلغ 220 بیلیون سنوياً2،3. يوجد حاليا ثلاثة فقط الأدوية التي وافقت عليها إدارة الأغذية والعقاقير، ديسولفيرام، نالتريكسون، واكامبروسيت، كل هذه قد أسفرت عن نتائج غير متناسقة في التجارب السريرية ونجاحاً محدودا حتى عندما جنبا إلى جنب مع التدخل النفسي الاجتماعي في إعدادات عيادة 4 , 5 , 6 , 7.
سبب الرئيسي لفشل العلاج أسترالي الحالي يرتبط بطبيعة ايربان أسترالي8. بينما تسهم العوامل البيئية والوراثية على حد سواء لتنمية أسترالي، حسابات التوريث لما يقدر 50-60 ٪ من خطر ظهور9. مشابهة لعلاج الاكتئاب، فإنه مقبول على نطاق واسع أن المرضى الذين يعانون من أسترالي سوف تحتاج إلى مجموعة متنوعة من الأدوية التي صممت خصيصا لتلبية احتياجات كل مريض10.
ومن الواضح أن هناك حاجة ملحة لعلاجات أكثر فعالية سيتيسر إذا كانت عملية شاقة بالفعل وتستغرق وقتاً طويلاً لاكتشاف المخدرات مبسطة3. وتحقيقا لهذه الغاية، يوضح البروتوكول التالي انطباق هذين النموذجين الشرب القوارض المستخدمة على نطاق واسع لدراسة أساس العصبية الحيوية AUD11الإكلينيكية. وبشكل أكثر تحديداً، طريقة عرض هذه الوثيقة يمكن تقييم كفاءة المركبات المرشحة في الحد من الكحول الاستهلاك في كل من "المعتدلين" وسيناريوهات "حفلة شرب" استخدام الخيار الثاني--زجاجة (TBC) وشرب في النماذج (DID) الظلام، على التوالي. دراسة كلا نماذج الإدارة الذاتية الإيثانول هواء غير فعال، حيث الفئران يبتلع الإيثانول شفويا وفي الإرادة، وذلك توضيح الوجه عالية وبناء صحة كنموذج لإدمان الكحول البشرية11.
في TBC الشرب، ويعرف أيضا باسم حرية اختيار الشرب، وتفضيل شرب، أو الشرب الاجتماعي، زجاجتين من الحل متوفرة بشكل مستمر في قفص المنزل. زجاجة واحدة على المياه، وأخرى تحتوي على حل مخفف من الإيثانول، حيث يمكن أن تختلف تركيز الإيثانول (على سبيل المثال-، 5-30% v/v)11،12. الفئران من الوصول المستمر إلى كلا زجاجات، وذلك، يمكن اختيار كم تشرب من كل زجاجة.
ويقيم هذا النموذج استهلاك الإيثانول كل الماوس (غرام/كغ)، فضلا عن نسبة تفضيل الإيثانول (حجم الإيثانول المستهلكة ÷ إجمالي حجم السائل المستهلكة). يتم استخدامه بشكل روتيني لمقارنة مستويات مياه الشرب عبر سلالات مختلفة من الفئران، أو بعد تلاعب بالجينات محددة (على سبيل المثال.، خروج المغلوب الجينات أو ضربة قاضية) والنتائج في تركيزات الإيثانول الدم (بكس) مماثلة لما هو موجود في البشر عندما الشرب في الاعتدال13،14.
في الإجراء فعلت، ح 3 بعد بدء دورة الظلام، يتم تبادل زجاجة قفص المنزلية للمياه مع زجاجة من 20% (v/v) الإيثانول الحل لوصول محدود شرب الدورة. تحدث دورات مياه الشرب كدورة 4 أيام متتالية ودائم ح 2 في 1-3 أيام وح 4 يوم 4. 1-3 أيام بمثابة فترة تعود الكحول قبل إجراء الاختبار في يوم 4. ونتيجة لذلك، الفئران موثوق سوف تستهلك الإيثانول ما يكفي لبلوغ بكس > 100 ملغ/دل، ونتيجة لذلك تظهر الآثار السلوكية للتسمم التي وجدت في البشر التي حفلة الشرب13،،من1415. الحصول على الماء متاح في جميع الأوقات عدا دورة مياه الشرب.
وهناك العديد من الاختلافات للشرب الوصول المحدود. على سبيل المثال، في نموذج access متقطعة، الفئران تلقي اثنان زجاجات (المياه التي تحتوي على واحد والايثانول الأخرى التي تحتوي على 20% (v/v)) إلا في يوم الاثنين والأربعاء والجمعة مع فترة انسحاب ح 24 و 48 ساعة خلال أيام الأسبوع وعطلات نهاية الأسبوع، على التوالي16. بعد عدة أسابيع من الوصول المتقطع، الفئران تدريجيا وتصعيد طوعا شرب مستويات، في نهاية المطاف تحقيق بيكس مشابهة لما يلاحظ في طراز فعلت. ومع ذلك، فعلت، يبدو أن النموذج الأكثر شيوعاً لتقييم سلوك نهم مثل مياه الشرب. توجد نماذج أخرى للشرب متقطعة، لكنها تعتمد على تقييد إمكانية الوصول إلى الغذاء أو بخار الدائرة الناجمة عن الزيادات في الإدارة الذاتية الطوعية، مما يجعلها أقل تمثيلاً ل استهلاك الكحول البشرية الطوعية16.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1617px;" width="1616">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:483px;">1 L&#160; graduated cylinder</td>
			<td style="width:315px;">VWR</td>
			<td style="width:232px;">https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co</td>
			<td style="width:588px;">To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1 L glass bottle</td>
			<td>Pyrex (Fisher Scientific)</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">100 mL graduated cylinder</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Analox</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>One potential method of analyzing DID blood samples is by using the analox machine</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ball-bearing sipper tubes</td>
			<td>Ancare Corp.</td>
			<td>http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point</td>
			<td>Length: 2.5 inches, Diameter: 5/16 inches, Model: TD100</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">C57BL/6J Mice</td>
			<td>Jackson lab</td>
			<td>https://www.jax.org/strain/000664</td>
			<td>May also come from internal breeding colony</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">disposable serological pipets</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged</td>
			<td>10 mL, 18 mL, or 25 mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ethanol, pure, 190 proof (95%), USP, KOPTEC</td>
			<td>Decon Labs (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat gun&#160;</td>
			<td>Master Appliances Corp.</td>
			<td colspan="2">http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat shrink tubing</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Diameter: 3/8 inches</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">industrial knife/blade</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">metal cage plate</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">mouse RO water</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">portable electronic scale</td>
			<td>Ohaus (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">red light headlamp</td>
			<td>nyteBright (Amazon)</td>
			<td>https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&#38;qid=1499591137&#38;sr=8-1-spons&#38;keywords=red+lamp+headlamp&#38;psc=1</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">silicone stoppers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">thermometer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">weigh boat</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes</td>
			<td>The lid from a pipete tip box is an appropriate alternative</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice

اضطرابات استخدام الكحول (AUD) مشكلة رئيسية مع أكثر من ما يقدر ب 76 مليون شخص في جميع أنحاء العالم الوفاء بمعايير التشخيص. العلاجات الحالية تقتصر على الأدوية وافقت إدارة الأغذية والعقاقير الثلاثة التي غير فعالة إلى حد كبير حتى عندما جنبا إلى جنب مع النفسية الانتكاس التدخل، كما يتضح من الارتفاع معدل. على هذا النحو، والبحث عن علاجات أكثر رواية تمثل هدفا هاما في مجال صحة العامة. وتحقيقا لهذه الغاية، تستخدم البروتوكول التالي نموذجين الشرب القوارض بسيطة لتقييم فعالية الإكلينيكية لمركبات الكحول المضادة الرصاص: اختيار اثنين--زجاجة (الدرن)، وشرب في الظلام (DID). السابق يسمح للفئران للشرب الطوعية في الاعتدال بينما يدفع الأخير الفئران للتبرعات تستهلك كمية كبيرة من الكحول في فترة قصيرة أن يحاكي السمر. تسمح طبيعة بسيطة وعالية الإنتاجية لكل من هذه النماذج للفحص السريع لوكلاء الدوائية أو لتحديد سلالات فئران الذي يحمل بعض السلوك الطوعية مياه الشرب.

في التحقيقات التالية الممثل، شرب الاجتماعية كان على غرار استخدام نموذج اختيار اثنين--زجاجة (الدرن). باختصار، كان الفئران الوصول إلى زجاجتين من الحل، الواردة منها المياه، والآخر حل إيثانول 10% (v/v). تم بعد ذلك تقسيم المواضيع والمعينة بالتساوي إلى جماعات المخدرات العلاج، موك...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice at JoVE.com

Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice

الفاري شرب النماذج في وضع فارماكوثيرابيس لإدمان الكحول: شرب في اختيار الظلام واثنين--زجاجة

اضطرابات استخدام الكحول (AUD) مشكلة صحية وطنية كبرى ومطلوب تطوير علاجات أكثر فعالية لمواجهة احتياجات السكان هذا المريض. وتحقيقا لهذه الغاية، تستخدم البروتوكول التالي نموذجين الشرب القوارض بسيطة لتقييم فعالية الإكلينيكية لمركبات الكحول المضادة الرصاص.

Alcohol Use Disorder (AUD) is a major problem with more than an estimated 76 million people worldwide meeting the diagnostic criteria. Current treatments ...

الهدف العام لهذا النموذج هو تقييم فعالية المخدرات المضادة للكحولية المحتملة باستخدام نماذج القوارض من اضطراب تعاطي الكحول. يمثل اضطراب تعاطي الكحول أزمة صحية عامة كبرى. العلاجات الحالية غير فعالة، وهناك حاجة إلى البحوث الجارية قبل السريرية.يسمح لنا بروتوكولنا بتقييم سلامة وفائدة العلاج المحتمل وكذلك إلقاء نظرة على البيولوجيا العصبية الأساسية للاضطراب نفسه. بدء الإجراء عن طريق تسخين سكين فائدة على الموقد Bunsen. باستخدام هذا السكين، وقطع ما يقرب من شبر واحد من أعلى وأسفل نهايات من ماصات بلاستيكية 18 ملليلتر المصلية.المقبل دافئة ماصة تحت بندقية الحرارة. إدراج الكرة تحمل أنبوب رشق في نهاية الجزء السفلي من ماص. ثم باستخدام بندقية التفاف انكماش المتاحة تجاريا، وختم أنبوب sipper في مكان مع التفاف تقليص.كاب قبالة افتتاح الأخرى مع سدادة السيليكون. لتعود الحيوانات، عند الوصول، منزل واحد كل فأر في قفص البولي البولي البوليفين القياسية مع الفراش والغذاء والماء وأعلى قفص الشبكة المعدنية. ابتداء من اليوم الرابع من أسبوع واحد السكن التأقلم، وقياس وتسجيل الجسم الماوس اليومية والوزن الغذائي.قياس كمية المياه باستخدام النقوش جنبا إلى جنب مع زجاجة مقلوب، لتسجيل أعلى نقطة من الغضروف المفصلي. مرة واحدة وقد استقر تناول المياه إلى زائد أو ناقص 10٪ تقلب من متوسط الأيام الثلاثة الماضية، تبدأ الوصول الإيثانول مع إما TBC أو DID. لإجراء TBS، وإعداد 10٪ من محلول الإيثانول في 1،000 ملليلتر عن طريق إضافة 105.3 ملليلتر من 190 الايثانول الحبوب واقية إلى 894.7 ملليلتر من الماء، ثم يهزها تماما.وبالنظر إلى أن الإيثانول يتبخر بسرعة، استبدال الحل مرتين في الأسبوع. في اليوم الأول من TBC، في كل قفص، فارغة واحدة من اثنين من زجاجات المياه وملئه إلى حافة مع محلول الإيثانول الطازجة. وبالنظر إلى أن الإيثانول والماء من الصعب أن تكون مميزة بصريا، وتسمية بوضوح الزجاجات مع محتوياتها المقابلة.إضافة المزيد من حل لزجاجة المياه حسب الحاجة. ثم ضع الزجاجة مرة أخرى في القفص ، مع التأكد من أن الغطاء مغلق بشكل آمن ويخلو من أي فقاعات هواء أو تسرب من صنبور. إزالة أي فقاعات الهواء عن طريق التنصت ببساطة على زجاجة بحيث الهواء يمكن الهروب من الزجاجة.بالتناوب موقف من زجاجة كل يومين لتصحيح مكان مشروط التفضيل التأثيرات ذات الصلة في نشاط الشرب. سجل مستوى تناول الإيثانول وتحليل 10٪ من تناول الإيثانول ونسبة التفضيل. بمجرد أن أصبح تناول الإيثانول مستقرًا ، إدارة حقن داخل الصفتون تحكم واحد لكل فأرة أثناء روتين القياس اليومي ، لتعتاد الماوس على الحقن.مرة واحدة خط أساس الإيثانول مع انخفاض تقلب قد تم تأسيسها، تقسيم الفئران إلى مجموعات التحكم والتجريبية باستخدام قيم تناول الإيثانول بحيث جميع المجموعات لديها تقريبا متوسط متوسط قيم المدامول الإيثانول. تبدأ الدوّاية اليوميّة، إما لمدة حادة أو عدّة أيام. لإجراء DID، في كل يوم من أيام الوصول إلى الإيثانول المجدول، تسجيل القياسات لحجم المياه، وتناول الطعام ووزن الجسم، وإجراء الجرعات الدوائية.قم بإجراء ذلك خلال فترة محددة مسبقًا خلال دورة الضوء التي يتم اختيارها وفقًا لمستحضرات التجميل الدوائية للدواء بحيث يقترب المركب من الحد الأقصى لتركيز الدماغ خلال فترة الشرب. المقبل، وإعداد 20٪ من محلول الإيثانول في 1، 000 ملليلتر عن طريق إضافة 210.5 ملليلتر من 190 الايثانول الحبوب واقية إلى 789.5 ملليلتر من الماء. ثم يهز تماما.ملء زجاجة الإيثانول قبل بدء جلسة الشرب بحيث بمجرد أن يبدأ DID، يمكن ببساطة أن يتم استبدال زجاجة المياه مع زجاجة الكحول. خلال جلسة DID بأكملها، استخدم مصباح اضاءة أحمر للضوء لعدم إزعاج الحيوان. في بداية جلسة الشرب DID ، والتي من المقرر أن تبدأ ثلاث ساعات في الدورة المظلمة قبل دورة الضوء ، وتسجيل حجم الماء لكل فأرة.ثم استبدال كل زجاجة مياه مع زجاجة من 20٪ من محلول الإيثانول وتسجيل حجم الإيثانول بدءا. قراءة وتسجيل مجلد الإيثانول النهائي ساعتين في وقت لاحق في نهاية جلسة الشرب في أيام واحدة من خلال ثلاث وأربع ساعات في وقت لاحق في اليوم الرابع. ثم تحليل 20٪ من تناول الإيثانول.في وقت لاحق، استبدال زجاجة الإيثانول مع زجاجة المياه وحجم المياه قياسية. ويبين هذا الرقم تقييم آثار الجرعة الحادة من الأكسيدين بمعدل خمسة ملليغرام في الكيلوغرام على تناول الإيثانول وتفضيله. جرعة واحدة من moxidectin خفضت بشكل كبير تناول الكحول في ما يزيد على 45٪ مقارنة مع حقن ما قبل الموكسيداتين وتفضيل ما يزيد على 30٪ 10٪ تناول الإيثانول وتفضيل على حد سواء تبقى أقل بكثير من المالحة في اليوم الذي يلي مباشرة العلاج MOX.هنا ، تم تصميم شرب الشراهة باستخدام إجراء DID. أدارت فئران كان المالحة على أيام واحدة من خلال أربعة مع خط أساس 20٪ الإيثانول يُنشأ في اليوم أربعة. في الأيام الأولى من خلال ثلاثة من الدورة الأسبوعية الثانية، تلقت جميع الفئران حقنة ملحية يومية أخرى.ثم استخدمت قيم تناول الإيثانول من اليوم الثالث لتقسيم الفئران إلى مجموعتين تلقيا فيما بعد إما حقنة واحدة من الأكسيدين بخمسة ملليغرام في الكيلوغرام أو المالحة في اليوم الرابع. في الأسبوع التالي، تلقت جميع الفئران حقن ملحية يومية في الأيام الأولى إلى أربعة وتم قياس تناول الإيثانول مرة أخرى في اليوم الرابع. تم تحليل الإدارة الحادة لمكاتد الـ MOX ووجدت أنها خفضت بشكل كبير تناول الكحول بما يزيد عن 54٪ مقارنة بحقن ما قبل المخدرات.نضع في اعتبارنا أن التجارب المستقبلية باستخدام هذا البروتوكول يجب أن يتم لتقييم آلية, الزلاجة والسمية من المخدرات المحتملة وكذلك لتقييم فعاليتها فيما يتعلق بخيارات العلاج الحالية.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

وهناك طريقة لعزل جزيرة الفئران تحت المحفظة وزراعة الكلى

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

استراتيجية لتحديد الطفرات دي نوفو في الاضطرابات الشائعة مثل التوحد والفصام

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

تجزئة والقياس من وحدات تخزين الدهون في الفئران نماذج السمنة عن طريق الأشعة السينية التصوير المقطعي

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

تطوير النزلات الشعبية مسد في نموذج الفئران من زرع الرئة Orthotopic

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

نموذج الفئران من زرع دعامات في الشريان السباتي لدراسة عودة التضيق

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

تطوير بيئة المستندة إلى الصوت الألعاب الافتراضية للمساعدة في مهارات التنقل في مكفوفين

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

الجوانب الفنية للناسور أبهري أجوفي ماوس

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Collection and Extraction of Saliva DNA for Next Generation Sequencing

جمع واستخراج الحمض النووي من اللعاب لتسلسل الجيل القادم

The preferred source of DNA in human genetics research is blood, or cell lines derived from blood, as these sources yield large quantities of high quality ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

الماوس زرع الكلى: نماذج من طعم خيفي رفض

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

تطوير نموذج متوجا اللب مباشرة لتقييم اللب الجروح وتشكيل إصلاحي العاج في الفئران

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...