Name: murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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이 작업을 지원 했다, 부분적으로, 연구에 의해 부여 SC CTSI NIH/NCRR/NCATS-UL1TR000130 (D.L.D.), AA022448 (D.L.D.), 그리고 약국의 USC 학교.

여기에서 설명한 모든 절차는 기관 동물 관리 및 남부 캘리포니아 대학 보건 과학 캠퍼스의 사용 위원회에 의해 승인 되었습니다.
1. 실험 설치 및 조립
<ol><li>다음 공급 및 화학 연구를 시작 하기 전에 모든 취득: 쥐, 새 장/금속 케이지 정상, 침구, 음식, 물, 에탄올, pipets, sipper 상판, 수축 포장, 유틸리티 나이프, 우편 넥타이, 테이프, 분 젠 버너, 규모, 전조 등.</li>
	<li>가져올...

<ol>
	<li>Litten, R. Z., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery,+Development,+and+Adoption+of+Medications+to+Treat+Alcohol+Use+Disorder:+Goals+for+the+Phases+of+Medications+Development.">Discovery, Development, and Adoption of Medications to Treat Alcohol Use Disorder: Goals for the Phases of Medications Development.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 40 (7), 1368-1379 (2016).</li><li>Grant, B. F., Dawson, D. A., Stinson, F. S., Chou, S. P., Dufour, M. C., Pickering, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+12-month+prevalence+and+trends+in+DSM-IV+alcohol+abuse+and+dependence:+United+States,+1991-1992+and+2001-2002.">The 12-month prevalence and trends in DSM-IV alcohol abuse and dependence: United States, 1991-1992 and 2001-2002.</a> Drug and Alcohol Dependence. 74 (3), 223-234 (2004).</li><li>Sacks, J. J., Gonzales, K. R., Bouchery, E. E., Tomedi, L. E., Brewer, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National+and+State+Costs+of+Excessive+Alcohol+Consumption.">National and State Costs of Excessive Alcohol Consumption.</a> American Journal of Preventive Medicine. 49 (5), 73-79 (2015).</li><li>Litten, R. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medications+development+to+treat+alcohol+dependence:+a+vision+for+the+next+decade.">Medications development to treat alcohol dependence: a vision for the next decade.</a> Addiction Biology. 17 (3), 513-527 (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Johnson+Medication+Treatment+of+Different+Types+of+Alcoholism.">Johnson Medication Treatment of Different Types of Alcoholism.</a> American Journal of Psychiatry. 167 (6), 630-639 (2010).</li><li>Litten, R. Z., Wilford, B. B., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+medications+for+the+treatment+of+alcohol+use+disorder:+An+evaluation+of+clinical+efficacy+and+safety.">Potential medications for the treatment of alcohol use disorder: An evaluation of clinical efficacy and safety.</a> Substance Abuse. 37 (2), 286-298 (2016).</li><li>Litten, R. Z., Ryan, M. L., Falk, D. E., Reilly, M., Fertig, J. B., Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+Alcohol+Use+Disorder:+Understanding+Mechanisms+to+Advance+Personalized+Treatment.+Alcoholism:+Clinical+and+Experimental.">Heterogeneity of Alcohol Use Disorder: Understanding Mechanisms to Advance Personalized Treatment. Alcoholism: Clinical and Experimental.</a> Research. 39 (4), 579-584 (2015).</li><li>Schuckit, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Genome-Wide+Search+for+Genes+That+Relate+to+a+Low+Level+of+Response+to+Alcohol.">A Genome-Wide Search for Genes That Relate to a Low Level of Response to Alcohol.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 25 (3), 323-329 (2001).</li><li>Batki, S. L., Pennington, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+Personalized+Medicine+in+the+Pharmacotherapy+of+Alcohol+Use+Disorder:+Targeting+Patient+Genes+and+Patient+Goals.">Toward Personalized Medicine in the Pharmacotherapy of Alcohol Use Disorder: Targeting Patient Genes and Patient Goals.</a> American Journal of Psychiatry. 171 (4), 391-394 (2014).</li><li>Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+frameworks+and+mechanistic+aspects+of+alcohol+addiction:+alcohol+addiction+as+a+reward+deficit+disorder.">Theoretical frameworks and mechanistic aspects of alcohol addiction: alcohol addiction as a reward deficit disorder.</a> Current topics in behavioral neurosciences. 13, 3-30 (2013).</li><li>Yoneyama, N., Crabbe, J. C., Ford, M. M., Murillo, A., Finn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voluntary+ethanol+consumption+in+22+inbred+mouse+strains.">Voluntary ethanol consumption in 22 inbred mouse strains.</a> Alcohol. 42 (3), 149-160 (2008).</li><li>Rhodes, J. S., Best, K., Belknap, J. K., Finn, D. A., Crabbe, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+simple+model+of+ethanol+drinking+to+intoxication+in+C57BL/6J+mice.">Evaluation of a simple model of ethanol drinking to intoxication in C57BL/6J mice.</a> Physiology &amp; Behavior. 84 (1), 53-63 (2005).</li><li>Thiele, T. E., Navarro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Drinking+in+the+dark"+(DID)+procedures:+A+model+of+binge-like+ethanol+drinking+in+non-dependent+mice.">"Drinking in the dark" (DID) procedures: A model of binge-like ethanol drinking in non-dependent mice.</a> Alcohol. 48 (3), 235-241 (2014).</li><li>Crabbe, J. C., Spence, S. E., Brown, L. L., Metten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alcohol+preference+drinking+in+a+mouse+line+selectively+bred+for+high+drinking+in+the+dark.">Alcohol preference drinking in a mouse line selectively bred for high drinking in the dark.</a> Alcohol. 45 (5), 427-440 (2011).</li><li>Sprow, G. M., Thiele, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobiology+of+binge-like+ethanol+drinking:+Evidence+from+rodent+models.">The neurobiology of binge-like ethanol drinking: Evidence from rodent models.</a> Physiology &amp; Behavior. 106 (3), 325-331 (2012).</li><li>Neasta, J., Hamida, B., Yowell, Q., Carnicella, S., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+mammalian+target+of+rapamycin+complex+1+signaling+in+neuroadaptations+underlying+alcohol-related+disorders.">Role for mammalian target of rapamycin complex 1 signaling in neuroadaptations underlying alcohol-related disorders.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (46), 20093-20098 (2010).</li><li>Huynh, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+development+of+moxidectin+as+a+novel+therapeutic+for+alcohol+use+disorder.">Preclinical development of moxidectin as a novel therapeutic for alcohol use disorder.</a> Neuropharmacology. 113, 60-70 (2017).</li><li>Egli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+experimental+paradigms+and+animal+models+be+used+to+discover+clinically+effective+medications+for+alcoholism.">Can experimental paradigms and animal models be used to discover clinically effective medications for alcoholism.</a> Addiction Biology. 10 (4), 309-319 (2005).</li><li>Huynh, N., Arabian, N., Lieu, D., Asatryan, L., Davies, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilizing+an+Orally+Dissolving+Strip+for+Pharmacological+and+Toxicological+Studies:+A+Simple+and+Humane+Alternative+to+Oral+Gavage+for+Animals.">Utilizing an Orally Dissolving Strip for Pharmacological and Toxicological Studies: A Simple and Humane Alternative to Oral Gavage for Animals.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), (2016).</li><li>Yardley, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ivermectin+reduces+alcohol+intake+and+preference+in+mice.">Ivermectin reduces alcohol intake and preference in mice.</a> Neuropharmacology. 63 (2), 190-201 (2012).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li></ol>

전세계 추정으로 76 백만 명 영장 진단 알코올 사용 장애 (AUD)에 대 한 기준을 충족 나타냅니다. 불행히도, 현재 사용할 수 있는 제약 치료는 크게 효과적 이며 추가 개발이 임상 인구20의 요구를 오프셋 하는 데 필요한. 이 위해 다음 두 패러다임을 마시는 가장 기본적인 설치류의 예증으로이 노력을 촉진을 목표로 프로토콜: 2 병 선택 (TBC)과 어둠 (DID)에 마시는. 두 모델 모두 에탄?...

지난 25 년 동안, 플러스 상당한 노력 알코올 사용 장애 (AUD)1의 치료를 위해 약물을 개발 하는 쪽으로 넣어 왔다. 비록 많은 발전 한 AUD 여전히 남아 중요 한 공중 위생 문제 이상의 18 백만 미국인에 영향을 미치는 220 십억 달러 이상 비용이 매년2,3. 현재 3 FDA 승인 약품, disulfiram, naltrexone, 그리고 acamprosate, 임상 시험 및 한정 된 성공 조차 병원 설정에서 사회 심리적인 내정간섭과 결합 될 때 일관성 없는 결과 굴복 했다 모두는 있다 4 , 5 , 6 , 7.
현재 AUD 치료의 실패에 대 한 주요 이유는 AUD8의 이기종 특성에 연결 된다. 환경 및 유전적 요인 AUD의 발전에 기여, 동안 상속 가능성 발병9의 위험의 약된 50-60%를 차지 한다. 우울증의 치료와 마찬가지로, 그것은 널리 허용 AUD 고통 받아 환자 환자 각10의 요구에 맞게 맞춤형 약물의 다양 한 필요 합니다.
명확 하 게, 보다 효과적인 치료 약물 발견의 이미 힘든 시간이 걸리는 과정 간소화3경우 촉진 될 것 이라고 위한 긴급 한 필요가 있다. 이 위해 다음 프로토콜 두 설치류 마시는 모델 널리 AUD11의 neurobiological 기초를 검사 하는 데 사용의 임상 적용을 보여줍니다. 여기 소개 하는 방법 알콜을 감소에서 후보 화합물의 효능을 평가할 수 있습니다 좀 더 구체적으로, "중간"와 "마시는 파티" 시나리오 2 병 선택 (TBC)을 활용 하 고 어두운 (DID) 패러다임에서 마시는 소비 각각. 두 패러다임 검사 비 조작 에탄올 자기 관리, 그것에 의하여 쥐 구두로 고 지에서 에탄올을 섭취 및 따라서 높은 얼굴을 설명 및 유효 인간의 알코올 중독11의 모델을 구성 합니다.
TBC 음주, 일컬어 자유 선택 음주, 음주, 환경 설정 또는 사회적 음주, 솔루션의 두 병 홈 장에 지속적으로 사용할 수 있습니다. 한 병 들어 물, 그리고 에탄올, 에탄올의 농도 변화 될 수 있다 그것에 의하여의 희석된 솔루션을 포함 (예., 5-30 %v / v)11,12. 쥐 두 병 계속 액세스할 수 있고 따라서 얼마나 마시는 각 병에서 선택할 수 있습니다.
이 모델은 에탄올 선호 비율 (에탄올 소비 ÷ 총 볼륨 액체 소모의 볼륨) 뿐만 아니라 각 마우스 (g/kg)의 에탄올 소비를 평가 합니다. 그것은 정기적으로 또는 특정 유전자 조작 후 쥐의 다른 긴장에서 음주 레벨을 비교 하는 (예., 유전자 녹아웃 또는 최저) 및 혈액 에탄올 농도 (BECs) 인간에서 무엇을 발견 비슷한 결과 때 적당히13,14에서 음주.
DID 절차, 어두운 주기의 시작 후 3 h 물 홈 케이지 병 마시는 세션 제한 된 액세스에 대 한 20% (v/v) 에탄올 솔루션의 병으로 교환 됩니다. 마시는 세션 하루에 4 연속 4 일 주기, 1-3 일 지속 2 h 4 h로 발생합니다. 일 1-3 주 4에 테스트 하기 전에 알코올 요법이 니 기간 역할을 합니다. 따라서, 마우스 안정적으로 BECs 달성 하기 위해 충분 한 에탄올 소비 > 100 mg/dL와 그 결과,13,,1415마시는 binge는 인간에서 발견 하는 중독의 행동 효과 전시. 물 접근은 항상 마시는 세션 이외에 사용할 수 있습니다.
제한 된 액세스 술의 몇몇 변이가 있다. 예를 들어 간헐적으로 액세스 모델에서 마우스 받을 두 병 (1 개의 포함 물과 다른 포함 20% (v/v) 에탄올) 월요일, 수요일, 그리고 금요일에만 평일 및 주말, 각각1624 시간 및 48 h 철수 기간. 간헐적인 액세스의 몇 주 후 쥐 조금씩 하 고 자발적으로 결국 달성 BECS 무엇 DID 모델에서 관찰은 비슷한 수준의 음주를 확대 시킨다. 그러나 DID,, 파티 같은 마시는 행동을 평가 하기 위해 가장 일반적으로 사용 모델에 나타납니다. 간헐적으로 마시는 다른 모델 존재 하지만 그들은 음식에 대 한 액세스를 제한에 의존 하거나 증기 챔버 유발 증가 그들에 게 자발적인 인간의 알코올 소비16의 더 적은 대표를 시키는 자발적인 자기 관리.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1617px;" width="1616">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:483px;">1 L&#160; graduated cylinder</td>
			<td style="width:315px;">VWR</td>
			<td style="width:232px;">https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co</td>
			<td style="width:588px;">To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1 L glass bottle</td>
			<td>Pyrex (Fisher Scientific)</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">100 mL graduated cylinder</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Analox</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>One potential method of analyzing DID blood samples is by using the analox machine</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ball-bearing sipper tubes</td>
			<td>Ancare Corp.</td>
			<td>http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point</td>
			<td>Length: 2.5 inches, Diameter: 5/16 inches, Model: TD100</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">C57BL/6J Mice</td>
			<td>Jackson lab</td>
			<td>https://www.jax.org/strain/000664</td>
			<td>May also come from internal breeding colony</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">disposable serological pipets</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged</td>
			<td>10 mL, 18 mL, or 25 mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ethanol, pure, 190 proof (95%), USP, KOPTEC</td>
			<td>Decon Labs (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat gun&#160;</td>
			<td>Master Appliances Corp.</td>
			<td colspan="2">http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat shrink tubing</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Diameter: 3/8 inches</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">industrial knife/blade</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">metal cage plate</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">mouse RO water</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">portable electronic scale</td>
			<td>Ohaus (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">red light headlamp</td>
			<td>nyteBright (Amazon)</td>
			<td>https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&#38;qid=1499591137&#38;sr=8-1-spons&#38;keywords=red+lamp+headlamp&#38;psc=1</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">silicone stoppers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">thermometer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">weigh boat</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes</td>
			<td>The lid from a pipete tip box is an appropriate alternative</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice

알코올 사용 장애 (AUD)와 주요 문제는 보다 더 약된 76 백만 사람들 전세계 진단 기준에 부합. 현재의 치료는 크게 효과가 정신 결합 하는 경우에 개입, 높은에 의해 분명 것으로 재발 율 3 FDA 승인 약품에 제한 됩니다. 따라서, 더 새로운 치료에 대 한 검색 중요 한 공중 보건 목표를 나타냅니다. 이 위해 다음 프로토콜 리드 안티 알코올 화합물의 임상 효능을 평가 하기 위해 두 가지 간단한 설치류 마시는 모델 활용: 2 병 선택 (TBC)과 어둠 (DID)에 마시는. 전 적당히 자발적인에 쥐를 유도 하는 동안 자발적인 음료를 쥐 술자리를 모방 하는 짧은 기간에 많은 양의 알코올 소비 수 있습니다. 이러한 패러다임의 둘 다의 간단 하 고 높은 처리량 특성 약리 에이전트의 신속한 심사에 대 한 또는 식별 특정 자발적인 마시는 행동 하는 쥐의 긴장에 대 한 허용.

다음 대표 조사에서 사회 음주는 모델링 2 병 선택 (TBC) 패러다임을 사용 하 여. 간단히, 마우스 중 하나는 물, 그리고 다른 10% (v/v) 에탄올 솔루션을 포함 하는 솔루션의 2 개의 병에 접근을 했다. 과목 이후 분할 되었고 균등 하 게 할당 약물 치료 그룹, moxidectin (MOX) 염 분 제어 대에 각 그룹 에탄올 섭취 수준을 최소한 변이의 평균 것입니다.
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Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice

알코올 중독에 대 한 Pharmacotherapies의 개발 모델을 마시는 murine: 어둡고 2 병 선택에 마시는

알코올 사용 장애 (AUD) 주요 국가 건강 문제가 고 더 효과적인 치료법의 개발이 환자 인구의 요구를 오프셋 하는 데 필요한. 이 위해 다음 프로토콜 리드 안티 알코올 화합물의 임상 효능을 평가 하기 위해 두 가지 간단한 설치류 마시는 모델을 활용 합니다.

Alcohol Use Disorder (AUD) is a major problem with more than an estimated 76 million people worldwide meeting the diagnostic criteria. Current treatments ...

이 패러다임의 전반적인 목표는 알코올 사용 장애의 설치류 모델을 사용 하 여 잠재적인 안티 알코올 약물의 효과 평가 하는. 알코올 사용 장애는 주요 공중 보건 위기를 나타냅니다. 현재 치료는 효과가 없으며 지속적인 전임상 연구가 필요합니다.우리의 프로토콜은 우리가 잠재적 인 치료의 안전성과 유용성을 평가하고 장애 자체의 기본 신경 생물학을 살펴 볼 수 있습니다. 분젠 버너에 유틸리티 나이프를 가열하여 절차를 시작합니다. 이 칼을 사용하여 플라스틱 18 밀리리터 세리컬 피펫의 상단과 하단 끝에서 약 1 인치를 잘라냅니다.다음으로 파이펫을 열총 으로 데우십시오. 파이펫의 하단 끝에 볼 베어링 시퍼 튜브를 삽입합니다. 그런 다음 시판되는 수축 랩 건을 사용하여 수축 랩으로 시퍼 튜브를 제자리에 밀봉하십시오.실리콘 스토퍼로 다른 개구부를 캡. 동물 습관의 경우, 도착 시, 침대, 음식 및 물과 금속 그리드 케이지 상단표준 폴리 카보네이트 폴리 설폰 케이지에 단일 집 각 마우스. 1 주일 단일 하우징 의 4 일째에 시작, 측정 하고 마우스의 매일 몸과 음식 무게를 기록.반월 상 연골의 가장 높은 지점을 기록하기 위해, 반전 된 병과 함께 에칭을 사용하여 물 섭취를 측정합니다. 지난 3일 동안의 평균에서 물 섭취량이 플러스 또는 마이너스 10%로 안정화되면 TBC 또는 DID로 에탄올 접근을 시작합니다. TBS를 수행하기 위해 1, 000 밀리리터에 10%에탄올 용액을 194.7 밀리리터의 105.3 밀리리터를 894.7 밀리리터의 물에 추가하여 철저히 흔들어 줍니다.에탄올이 빠르게 증발한다는 점을 감안할 때, 일주일에 두 번 솔루션을 교체하십시오. TBC 의 첫날, 각 케이지에, 두 개의 물 병 중 하나를 비우고 갓 준비 에탄올 용액으로 가장자리에 채우기. 에탄올과 물은 시각적으로 구별되기 어렵다는 점을 감안할 때 해당 내용물로 병에 명확하게 라벨을 붙입니다.필요에 따라 물병에 더 많은 솔루션을 추가하십시오. 그런 다음 병을 케이지에 다시 배치하여 캡이 단단히 닫혀 있고 주화에서 기포 또는 누출이 없는지 확인합니다. 공기가 병을 탈출 할 수 있도록 병에 도청하여 기포를 제거합니다.사용 이력있는 장소 선호도 관련 음주 활동에 미치는 영향을 보정하기 위해 매일 병의 위치를 번갈아 가며. 에탄올 섭취량 수준을 기록하고 10%에탄올 섭취량과 선호도 비율을 분석합니다. 에탄올 섭취량이 안정됨에 따라, 매일 측정 루틴 동안 각 마우스에 단일 제어 인회간 주사를 투여하여 마우스를 주입하는 데 익숙해집니다.가변성이 낮은 에탄올 기준선이 다시 설정되면, 모든 그룹이 대략 유사한 평균 에탄올 섭취 값을 갖도록 에탄올 섭취 값을 사용하여 마우스를 제어 및 실험 그룹으로 나눕니다. 매일 약물 을 치료 시작, 급성 또는 멀티 데이 기간 동안. DID를 수행하기 위해, 예약 된 에탄올 액세스의 매일, 물 볼륨, 음식 섭취및 체중에 대한 측정을 기록하고 약물 복용을 수행합니다.화합물이 음주 기간 동안 최대 뇌 농도에 접근되도록 약물의 약동학에 따라 선택되는 광 주기 동안 미리 선택된 시간 동안 이를 수행한다. 다음으로, 1, 000 밀리리터에 20%에탄올 용액을 190개의 교정 곡물 에탄올210.5밀리리터를 789.5 밀리리터의 물에 추가하여 준비합니다. 그런 다음 철저히 흔들어 주세요.음주 세션이 시작되기 전에 에탄올 병을 채우면 DID가 시작되자마자 물병을 알코올 병으로 교체할 수 있습니다. 전체 DID 세션 동안, 동물을 방해하지 않는 빨간색 조명 헤드 램프를 사용합니다. 빛 주기 전에 어두운 주기로 3 시간 시작 될 예정 이다 DID 음주 세션의 시작, 각 마우스에 대 한 물의 볼륨을 기록.그런 다음 각 물병을 20% 에탄올 용액병으로 교체하고 시작 에탄올 볼륨을 기록합니다. 마지막 에탄올 볼륨을 읽고 4 일째에 1~3시간, 4시간 후에 음주 세션이 끝날 때 최종 에탄올 볼륨을 기록합니다. 그런 다음 20%에탄올 섭취량을 분석합니다.그 후 에탄올 병을 물병으로 교체하고 물량을 기록합니다. 이 수치는 에탄올 섭취 및 선호도에 킬로그램당 5 밀리그램에서 Moxidectin의 급성 투여량의 효과에 대한 평가를 보여줍니다. 1회 용량의 Moxidectin은 전 산화탄소 주사와 비교하여 45%를 초과하는 알코올 섭취량을 현저히 감소시켰으며, 30%10%에탄올 섭취와 선호도를 초과하는 선호도는 MOX 치료 직후 에탄올 섭취량과 선호도가 현저히 낮게 유지된다.여기서, 음주는 DID 절차를 사용하여 모델링되었다. 마우스는 4일째에 확립된 기준선 20%에탄올로 1일부터 4일까지 식염수 투여되었다. 두 번째 주간 주기의 1~3일에, 모든 마우스는 또 다른 매일 식염수 주입을 수신했습니다.3일째부터 에탄올 섭취 값은 마우스를 킬로그램당 5밀리그램또는 식염수로 1회 주사를 받은 두 그룹으로 분할하는 데 사용하였다. 다음 주, 모든 마우스는 1일부터 4일까지 매일 식염수 주사를 받았고, 에탄올 섭취량은 4일째에 다시 측정되었다. MOX의 급성 투여는 분석되었고, 약물 전 주사에 비해 54%를 초과하는 알코올 섭취량을 현저히 감소시키고 있는 것으로 나타났다.이 프로토콜을 사용하는 미래의 실험은 잠재적 인 약물의 메커니즘, 주입 및 독성을 평가하고 현재 치료 옵션과 관련하여 그 효과를 평가하기 위해 수행해야합니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Murine 아일릿 절연 및 Subcapsular 신장 이식을위한 방법

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

연구

의학

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

같은 자폐증과 정신 분열증과 같은 일반적인 장애에 드 노보 변이를 식별하는 전략

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

세분화 및 Murine 비만 모델에서 지방 볼륨 측정 X 선 계산된 Tomography를 사용하여

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic 폐 이식의 Murine 모델에 Obliterative Bronchiolitis의 개발

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

재 협착의 연구에 대한 경동맥 스텐트 시술의 쥐과 모형

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

오디오 기반의 가상 게임 환경의 개발은 맹인의 탐색 기술을 지원하는

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

마우스 Aortocaval 누관의 기술적 측면

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Collection and Extraction of Saliva DNA for Next Generation Sequencing

차세대 시퀀싱에 대한 수집 및 타액 DNA의 추출

The preferred source of DNA in human genetics research is blood, or cell lines derived from blood, as these sources yield large quantities of high quality ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

마우스 신장 이식 : 동종 이식 거부의 모델

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

치수의의 평가에 대한 직접 펄프 캐핑 모델의 개발 상처 치유와 마우스의 수복 상아질 형성

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...