Name: murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice at JoVE.com

Bu eser desteklenen, kısmen verir araştırma tarafından SC CTSI NIH/NCRR/NCATS - UL1TR000130 (D.L.D.), AA022448 (D.L.D.) ve USC Eczacılık Okulu.

Burada açıklanan tüm yordamları kurumsal hayvan bakım ve Güney Kaliforniya Üniversitesi Sağlık Bilimleri kampüs kullanımı komiteler tarafından onaylanmıştır.
1. deneysel kurulum ve montaj
<ol><li>Tüm aşağıdaki malzemeleri ve kimyasallar çalışma başlangıcından önce elde etmek: fare, kafes/metal kafes üstleri, yatak takımları, gıda, su, etanol, pipets, sipper başında, shrink sarma, yeni bıçak, ZIP bağları, teyp, Bunsen brülör, ölçek, Far.</li>
	<li>C57B...

<ol>
	<li>Litten, R. Z., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery,+Development,+and+Adoption+of+Medications+to+Treat+Alcohol+Use+Disorder:+Goals+for+the+Phases+of+Medications+Development.">Discovery, Development, and Adoption of Medications to Treat Alcohol Use Disorder: Goals for the Phases of Medications Development.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 40 (7), 1368-1379 (2016).</li><li>Grant, B. F., Dawson, D. A., Stinson, F. S., Chou, S. P., Dufour, M. C., Pickering, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+12-month+prevalence+and+trends+in+DSM-IV+alcohol+abuse+and+dependence:+United+States,+1991-1992+and+2001-2002.">The 12-month prevalence and trends in DSM-IV alcohol abuse and dependence: United States, 1991-1992 and 2001-2002.</a> Drug and Alcohol Dependence. 74 (3), 223-234 (2004).</li><li>Sacks, J. J., Gonzales, K. R., Bouchery, E. E., Tomedi, L. E., Brewer, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National+and+State+Costs+of+Excessive+Alcohol+Consumption.">National and State Costs of Excessive Alcohol Consumption.</a> American Journal of Preventive Medicine. 49 (5), 73-79 (2015).</li><li>Litten, R. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medications+development+to+treat+alcohol+dependence:+a+vision+for+the+next+decade.">Medications development to treat alcohol dependence: a vision for the next decade.</a> Addiction Biology. 17 (3), 513-527 (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Johnson+Medication+Treatment+of+Different+Types+of+Alcoholism.">Johnson Medication Treatment of Different Types of Alcoholism.</a> American Journal of Psychiatry. 167 (6), 630-639 (2010).</li><li>Litten, R. Z., Wilford, B. B., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+medications+for+the+treatment+of+alcohol+use+disorder:+An+evaluation+of+clinical+efficacy+and+safety.">Potential medications for the treatment of alcohol use disorder: An evaluation of clinical efficacy and safety.</a> Substance Abuse. 37 (2), 286-298 (2016).</li><li>Litten, R. Z., Ryan, M. L., Falk, D. E., Reilly, M., Fertig, J. B., Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+Alcohol+Use+Disorder:+Understanding+Mechanisms+to+Advance+Personalized+Treatment.+Alcoholism:+Clinical+and+Experimental.">Heterogeneity of Alcohol Use Disorder: Understanding Mechanisms to Advance Personalized Treatment. Alcoholism: Clinical and Experimental.</a> Research. 39 (4), 579-584 (2015).</li><li>Schuckit, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Genome-Wide+Search+for+Genes+That+Relate+to+a+Low+Level+of+Response+to+Alcohol.">A Genome-Wide Search for Genes That Relate to a Low Level of Response to Alcohol.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 25 (3), 323-329 (2001).</li><li>Batki, S. L., Pennington, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+Personalized+Medicine+in+the+Pharmacotherapy+of+Alcohol+Use+Disorder:+Targeting+Patient+Genes+and+Patient+Goals.">Toward Personalized Medicine in the Pharmacotherapy of Alcohol Use Disorder: Targeting Patient Genes and Patient Goals.</a> American Journal of Psychiatry. 171 (4), 391-394 (2014).</li><li>Koob, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+frameworks+and+mechanistic+aspects+of+alcohol+addiction:+alcohol+addiction+as+a+reward+deficit+disorder.">Theoretical frameworks and mechanistic aspects of alcohol addiction: alcohol addiction as a reward deficit disorder.</a> Current topics in behavioral neurosciences. 13, 3-30 (2013).</li><li>Yoneyama, N., Crabbe, J. C., Ford, M. M., Murillo, A., Finn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voluntary+ethanol+consumption+in+22+inbred+mouse+strains.">Voluntary ethanol consumption in 22 inbred mouse strains.</a> Alcohol. 42 (3), 149-160 (2008).</li><li>Rhodes, J. S., Best, K., Belknap, J. K., Finn, D. A., Crabbe, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+simple+model+of+ethanol+drinking+to+intoxication+in+C57BL/6J+mice.">Evaluation of a simple model of ethanol drinking to intoxication in C57BL/6J mice.</a> Physiology &amp; Behavior. 84 (1), 53-63 (2005).</li><li>Thiele, T. E., Navarro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Drinking+in+the+dark"+(DID)+procedures:+A+model+of+binge-like+ethanol+drinking+in+non-dependent+mice.">"Drinking in the dark" (DID) procedures: A model of binge-like ethanol drinking in non-dependent mice.</a> Alcohol. 48 (3), 235-241 (2014).</li><li>Crabbe, J. C., Spence, S. E., Brown, L. L., Metten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alcohol+preference+drinking+in+a+mouse+line+selectively+bred+for+high+drinking+in+the+dark.">Alcohol preference drinking in a mouse line selectively bred for high drinking in the dark.</a> Alcohol. 45 (5), 427-440 (2011).</li><li>Sprow, G. M., Thiele, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobiology+of+binge-like+ethanol+drinking:+Evidence+from+rodent+models.">The neurobiology of binge-like ethanol drinking: Evidence from rodent models.</a> Physiology &amp; Behavior. 106 (3), 325-331 (2012).</li><li>Neasta, J., Hamida, B., Yowell, Q., Carnicella, S., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+mammalian+target+of+rapamycin+complex+1+signaling+in+neuroadaptations+underlying+alcohol-related+disorders.">Role for mammalian target of rapamycin complex 1 signaling in neuroadaptations underlying alcohol-related disorders.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (46), 20093-20098 (2010).</li><li>Huynh, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+development+of+moxidectin+as+a+novel+therapeutic+for+alcohol+use+disorder.">Preclinical development of moxidectin as a novel therapeutic for alcohol use disorder.</a> Neuropharmacology. 113, 60-70 (2017).</li><li>Egli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+experimental+paradigms+and+animal+models+be+used+to+discover+clinically+effective+medications+for+alcoholism.">Can experimental paradigms and animal models be used to discover clinically effective medications for alcoholism.</a> Addiction Biology. 10 (4), 309-319 (2005).</li><li>Huynh, N., Arabian, N., Lieu, D., Asatryan, L., Davies, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilizing+an+Orally+Dissolving+Strip+for+Pharmacological+and+Toxicological+Studies:+A+Simple+and+Humane+Alternative+to+Oral+Gavage+for+Animals.">Utilizing an Orally Dissolving Strip for Pharmacological and Toxicological Studies: A Simple and Humane Alternative to Oral Gavage for Animals.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), (2016).</li><li>Yardley, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ivermectin+reduces+alcohol+intake+and+preference+in+mice.">Ivermectin reduces alcohol intake and preference in mice.</a> Neuropharmacology. 63 (2), 190-201 (2012).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li></ol>

Dünya çapında tahminler kadar 76 milyon kişi bir tanı için alkol kullanım bozukluğu (AUD) emri için ölçütlere uyan gösterir. Ne yazık ki, ilaç tedavisi mevcut büyük ölçüde etkisiz ve daha da geliştirilmesi bu klinik nüfus20ihtiyaçlarını dengelemek gereklidir. Bu amaçla, aşağıdaki protokol iki paradigmalar içme en temel kemirgen örnekli tarafından bu çaba kolaylaştırmak amaçlamaktadır: iki şişe Seçmeli (TBC) ve karanlıkta (DID) içme. Her iki model de edimse...

Son 25 yıl önemli çaba alkol kullanım bozukluğu (AUD)1tedavisi için ilaç geliştirme koymak olmuştur. Her ne kadar birçok gelişmeler yaptık, AUD hala önemli halk sağlığı sorunu 18 milyon Amerikalı etkileyen ve üzerinde 220 milyar dolar mal kalır her yıl2,3. Şu anda orada sadece üç ilaçlar FDA onaylı, ampisilin, naltrekson ve acamprosate, tüm bunların klinik ve sınırlı başarı klinik ayarları psikososyal müdahale ile bir araya geldiğinde bile tutarsız sonuçlar vermiştir 4 , 5 , 6 , 7.
Hataları geçerli AUD tedavisinin başlıca nedeni AUD8hànzú doğaya bağlıdır. Çevresel ve genetik faktörlerin AUD gelişimine katkıda iken kalıtsallığı başlangıçlı9riski için yaklaşık 50-%60 oluşturmaktadır. Depresyon tedavisi için benzer, bu yaygın olarak hastalarda AUD her hasta10ihtiyaçlarını karşılamak için tasarlanmış ilaçlar çeşitli gerekir kabul edilir.
Açıkça, zaten zorlu ve zaman tüketmek oluşum ilaç keşif aerodinamik3olsaydı, kolaylaştırılmış olacaktır daha etkili tedaviler için acil bir ihtiyaç vardır. Bu amaçla, aşağıdaki iletişim kuralı AUD11nörobiyolojik temeli incelemek için yaygın olarak kullanılan iki kemirgen içme modellerin preklinik Uygulanabilirlik gösterir. Daha ayrıntılı olarak, burada tanıtılan Yöntem alkol azaltmayı aday bileşikler etkinliğini değerlendirebilir tüketimi "Orta" ve iki şişe seçim (TBC) kullanan ve karanlık (DID) paradigmalar içme "tıkınırcasına içme" senaryoları anılan sıraya göre. Her iki paradigmalar sayede fare sözlü olarak ve de olacak, etanol yutmayın ve bu nedenle yüksek yüz göstermek ve geçerlilik insan alkolizm11bir model olarak inşa edimsel etanol öz yönetim, inceleyin.
TBC alkol, olarak da bilinen özgür seçim, içki içme, tercih veya sosyal içme, çözüm iki şişe ev kafeste sürekli olarak kullanılabilir. Bir şişe su, ve diğer etanol, mademki etanol konsantrasyonu çeşitli seyreltilmiş bir çözüm içerir (Örn., % 5-30 v/v)11,12. Fareler her iki şişe için sürekli erişime sahip ve bu nedenle, ne kadar her şişeden içmeyi tercih edebilirsiniz.
Bu model etanol tercih oranı (tüketilen tüketilen etanol ÷ toplam hacim sıvı hacmi) yanı sıra her fare (g/kg), etanol tüketimi değerlendiriyor. Düzenli olarak içme düzeyleri farklı suşları farelerin veya belirli bir genetik manipülasyon sonra arasında karşılaştırmak için kullanılınır (Örn., gen nakavt veya nakavt) ve kan etanol konsantrasyonları (tarafım) insanlarda bulunan için benzer sonuçlar ne zaman ılımlılık13,14' te içme.
DID yordamda, karanlık döngüsünün başladıktan sonra 3 h ev kafes şişe su bir şişe %20 (v/v) etanol çözüm için bir sınırlı erişim oturum içme ile değiştirilir. İçme oturumları 4 gün üst üste 4 günlük döngüsü, kalıcı 2 h gün 1-3 ve 4 h meydana gelir. Gün 1-3 gün 4 test önce bir alkol-habituation dönemi olarak hizmet vermektedir. Sonuç olarak, fareler güvenilir tarafım ulaşmak için yeterli etanol tüketecektir > 100 mg/dL ve sonuç olarak,13,14,15içme alem olan insanlarda bulunan zehirlenme davranışsal etkileri sergilemek. Su erişimi her zaman dışında içme oturum mevcuttur.
Sınırlı erişim içme birçok varyasyon vardır. Örneğin, aralıklı erişim modeli, fareler iki şişe (bir içeren su ve diğer içeren %20 (v/v) etanol) sadece Pazartesi, Çarşamba ve Cuma hafta içi ve hafta sonları, sırasıyla1624 saat ve 48 h çekilme süresi ile alırsınız. Birkaç hafta sonra aralıklı erişim, fare yavaş yavaş olacak ve gönüllü olarak düzeyleri, sonunda tarafım DID modelde gözlenen için benzer ulaşmak içme yükselmek. DID, ancak, aşırı gibi içme davranışı değerlendirmek için en yaygın olarak kullanılan model gibi görünüyor. Aralıklı içme diğer modelleri mevcut, ancak gıda erişimi kısıtlama güvenmek veya onları daha az temsilcisi gönüllü insan alkol tüketimi16yapar gönüllü kendi kendine Yönetim odası indüklenen artışlar Buhar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1617px;" width="1616">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:483px;">1 L&#160; graduated cylinder</td>
			<td style="width:315px;">VWR</td>
			<td style="width:232px;">https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co</td>
			<td style="width:588px;">To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1 L glass bottle</td>
			<td>Pyrex (Fisher Scientific)</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">100 mL graduated cylinder</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311</td>
			<td>To prepare ethanol solution.</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Analox</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>One potential method of analyzing DID blood samples is by using the analox machine</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ball-bearing sipper tubes</td>
			<td>Ancare Corp.</td>
			<td>http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point</td>
			<td>Length: 2.5 inches, Diameter: 5/16 inches, Model: TD100</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">C57BL/6J Mice</td>
			<td>Jackson lab</td>
			<td>https://www.jax.org/strain/000664</td>
			<td>May also come from internal breeding colony</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">disposable serological pipets</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged</td>
			<td>10 mL, 18 mL, or 25 mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">ethanol, pure, 190 proof (95%), USP, KOPTEC</td>
			<td>Decon Labs (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat gun&#160;</td>
			<td>Master Appliances Corp.</td>
			<td colspan="2">http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">heat shrink tubing</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Diameter: 3/8 inches</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">industrial knife/blade</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">metal cage plate</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">mouse RO water</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
			<td>Should be available through the university/institutional vivarium</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">portable electronic scale</td>
			<td>Ohaus (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">red light headlamp</td>
			<td>nyteBright (Amazon)</td>
			<td>https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&#38;qid=1499591137&#38;sr=8-1-spons&#38;keywords=red+lamp+headlamp&#38;psc=1</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">silicone stoppers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>---</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">thermometer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232</td>
			<td>---</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">weigh boat</td>
			<td>VWR International (VWR)</td>
			<td>https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes</td>
			<td>The lid from a pipete tip box is an appropriate alternative</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine drinking models in the development of pharmacotherapies for alcoholism: drinking in the dark and two-bottle choice

Alkol kullanım bozukluğu (AUD) ile önemli bir sorun daha fazla dünya çapında tanı ölçütlerine yaklaşık 76 milyon kişi. Mevcut tedaviler bile psikososyal ile birlikte yüksek tarafından belirgin olduğu gibi müdahale, nüks oranı büyük ölçüde etkisiz üç FDA onaylı ilaçlar için sınırlıdır. Bu nedenle, daha yeni tedaviler için arama bir önemli halk sağlığı hedefi temsil eder. Bu amaçla, aşağıdaki protokol kurşun Anti-alkol bileşikler preklinik etkinliğini değerlendirmek için iki basit kemirgen içme modeller kullanır: iki şişe seçim (TBC) ve karanlıkta (DID) içme. Eski fare ikinci fareler için gönüllü ikna ederken aşırıya kaçmadan gönüllü içecek alkol büyük miktarda içki taklit eden kısa bir süre içinde tüketmek sağlar. Bu paradigmalar her ikisi de basit ve yüksek üretilen iş doğası farmakolojik ajanların hızlı tarama için veya belirli gönüllü içme davranışı sergilemek fareler suşları tanımlamak için izin verir.

Aşağıdaki temsilcisi araştırmalarda sosyal içme iki şişe seçim (TBC) paradigması kullanarak örnek alınarak tasarlanmıştır. Kısaca, fareler ve bunlardan biri su ve diğer bir % 10 (v/v) etanol çözüm bulunan çözüm, iki şişe erişimi vardı. Konular daha sonra bölünmüş ve her grup varyasyon az miktarda etanol alımı düzeyleriyle ortalama böylece eşit olarak uyuşturucu tedavi grupları, moxidectin (MOX) serum fizyolojik kontrol, vs atanan.
<p class="jove_c...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice at JoVE.com

Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice

Fare modelleri sağaltımı geliştirme alkolizm için içme: karanlık ve iki şişe seçiminde içme

Alkol kullanım bozukluğu (AUD) büyük bir ulusal sağlık sorunu ve daha etkili tedaviler gelişimi bu hasta nüfusun ihtiyaçlarını karşılamak için gerekli. Bu amaçla, aşağıdaki protokol kurşun Anti-alkol bileşikler preklinik etkinliğini değerlendirmek için iki basit kemirgen içme modelleri kullanır.

Alcohol Use Disorder (AUD) is a major problem with more than an estimated 76 million people worldwide meeting the diagnostic criteria. Current treatments ...

Bu paradigmanın genel amacı, alkol kullanım bozukluğunun kemirgen modellerini kullanarak potansiyel bir anti-alkol ilacının etkinliğini değerlendirmektir. Alkol kullanımı bozukluğu büyük bir halk sağlığı krizini temsil eder. Mevcut tedaviler etkisizdir ve devam eden klinik öncesi araştırmalara ihtiyaç vardır.Protokolümüz, potansiyel bir tedavinin güvenliğini ve yararını değerlendirmemize ve hastalığın altında yatan nörobiyolojiye bakmamızı sağlar. Bunsen brülör bir yardımcı bıçak ısıtarak prosedüre başlayın. Bu bıçağı kullanarak, plastik 18 mililitre serolojik pipet üst ve alt uçlarından kabaca bir inç kesti.Sonra bir ısı tabancası altında pipet Sıcak. Bilyalı rulman tüpünü pipetin alt ucuna yerleştirin. Sonra ticari olarak kullanılabilir bir shrink şal tabancası kullanarak, shrink şal ile yerine sipper tüp mühür.Diğer açıklığı silikon durdurucuyla kapatın. Hayvan alışkanlığı için, varışta, yatak, gıda ve su ve metal ızgara kafes üst ile standart polikarbonat polisülfone kafes her fare. Bir hafta tek konut iklimlendirme dördüncü günden itibaren, ölçmek ve farenin günlük vücut ve gıda ağırlıkları kaydedin.Menisküsenin en yüksek noktasını kaydetmek için ters şişenin yanında gravürleri kullanarak su alımını ölçün. Su alımı son üç günün ortalamasından artı veya eksi %10 değişkenliğe sabitlendikten sonra, TBC veya DID ile etanol erişimine başlayın. TBS yapmak için, 105.3 mililitre 190 geçirmez tane etanol ekleyerek 105.3 mililitre su 894.7 mililitre% 10 etanol çözeltisi hazırlamak, sonra iyice sallayın.Etanolhızlı buharlaşır göz önüne alındığında, haftada iki kez çözelti değiştirin. TBC'nin ilk gününde, her kafeste, iki su şişesinden birini boşaltın ve taze hazırlanmış etanol çözeltisi ile ağzına kadar doldurun. Etanol ve suyun görsel olarak ayırt edilmesinin zor olduğu göz önüne alındığında, şişeleri ilgili içerikleriyle açıkça etiketleyin.Su şişesine gerektiği gibi daha fazla çözelti ekleyin. Daha sonra şişeyi kafese geri yerleştirin, kapağın güvenli bir şekilde kapalı olduğundan ve herhangi bir hava kabarcığı veya sızdırıştan yoksun olduğundan emin olun. Hava şişe kaçabilirsiniz, böylece sadece şişe dokunarak herhangi bir hava kabarcıkları çıkarın.Şişenin pozisyonunu her gün, içme faaliyetinde şartlı yer tercihi ile ilgili etkilerin düzeltilmesi için alternatif olarak yerleştirin. Kayıt etanol alım seviyesi ve% 10 etanol alımı ve tercih oranını analiz. En kısa sürede etanol alımı istikrarlı hale gelmiştir, enjeksiyon için fare alışmak için, günlük ölçüm rutin sırasında her fareye tek bir kontrol intraperitoneal enjeksiyon uygulayın.Düşük değişkenliğe sahip bir etanol bazalçizgisi yeniden kurulduktan sonra, fareleri kontrol ve deney gruplarına bölün ve tüm gruplar kabaca benzer ortalama etanol alım değerlerine sahip olacak şekilde etanol alım değerlerini kullanarak kontrol ve deneysel gruplara bölün. Akut veya çok günlük süre için günlük ilaç dozlandırmaya başlayın. DID yapmak için, planlanan etanol erişim her gün, su hacmi, gıda alımı ve vücut ağırlığı için ölçümleri kaydetmek ve ilaç dozlama gerçekleştirmek.Bileşik içme döneminde maksimum beyin konsantrasyonu yaklaşıyor, böylece ilacın farmakokinetiği uyarınca seçilen ışık döngüsü sırasında önceden seçilmiş bir süre içinde gerçekleştirin. Daha sonra, 789,5 mililitre suya 190 geçirmez tane etanol 210,5 mililitre ekleyerek 1, 000 mililitre%20 etanol çözeltisi hazırlayın. Sonra iyice sallayın.En kısa sürede DID başlar gibi, su şişesi sadece alkol şişesi ile değiştirilebilir böylece içme oturumu başlamadan önce etanol şişesi doldurun. Tüm DID oturumu sırasında, hayvanı rahatsız etmemek için kırmızı ışıkfarı kullanın. Işık döngüsünden önce karanlık döngüye üç saat başlaması planlanan DID içme seansının başlangıcında, her fare için su hacmini kaydedin.Sonra% 20 etanol çözeltisi bir şişe ile her su şişesi değiştirin ve başlangıç etanol hacmi kaydedin. Son etanol hacmini iki saat sonra içme seansının sonunda birinci ile üç ve dört saat sonra dördüncü gün arasında okuyun ve kaydedin. Sonra% 20 etanol alımını analiz edin.Daha sonra, su şişesi ve kayıt su hacmi ile etanol şişe değiştirin. Bu rakam, akut moksitktin dozunun kilogram başına beş miligram olan etanol alımı ve tercihi üzerine yaptığı etkilerin değerlendirilmesini göstermektedir. Moksitktin tek bir doz önemli ölçüde aşan alkol alımını azalttı 45%pre-moxidectin enjeksiyonları ve tercih aşan 30%10 etanol alımı ve tercih her ikisi de önemli ölçüde tuzlu hemen ertesi gün MOX tedavisi nin ardından daha düşük kalır.Burada, alem içme DID prosedürü kullanılarak modellenmiştir. Farelere ilk günden 4'e kadar olan günlerde salin verildi ve dördüncü günde taban çizgisi %20 etanol oluşturuldu. İkinci haftalık döngünün birinci ile üç arasında olduğu günlerde, tüm farelere bir günlük tuzlu enjeksiyon daha yapıldı.Üçüncü günden itibaren etanol alım değerleri daha sonra daha sonra kilogram başına beş miligram veya dördüncü gün tuzlu ya moxidectin bir enjeksiyon alınan iki gruba fareler bölmek için kullanılmıştır. Ertesi hafta, tüm fareler gün bir ile dört arasında günlük tuzlu enjeksiyonları alınan ve etanol alımı yine dördüncü gün ölçüldü. MOX'un akut uygulaması analiz edildi ve uyuşturucu öncesi enjeksiyonlara kıyasla alkol alımını %54'ü aşan ölçüde azalttığı saptandı.Bu protokolü kullanarak gelecekteki deneylerin potansiyel bir ilacın mekanizmasını, dozlama ve toksisitesini değerlendirmek ve mevcut tedavi seçenekleriyle ilgili etkinliğini değerlendirmek için yapılması gerektiğini unutmayın.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

Ortak Bozuklukları de Novo Mutasyonlar, otizm ve şizofreni gibi tanımlayın Bir Strateji

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

Segmentasyon ve Mürin Obezite Modelleri Yağ Hacimleri ölçümü X-ray Bilgisayarlı Tomografi Kullanımı

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

Ses tabanlı Sanal Oyun Ortamı Geliştirilmesi Kör Navigasyon Becerileri ile Yrd etmek

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Fare Aortocaval Fistül Teknik Yönleri

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Collection and Extraction of Saliva DNA for Next Generation Sequencing

Yeni Nesil dizinleri için Toplama ve Tükrük DNA çıkarımı

The preferred source of DNA in human genetics research is blood, or cell lines derived from blood, as these sources yield large quantities of high quality ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Fare Böbrek Transplantasyonu: Allogreft Reddi Modelleri

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

Pulpa Değerlendirilmesi için Doğrudan Selüloz-kapatma Modelinin Geliştirilmesi Yara İyileşmesi ve Farelerde Onarım dentin oluşumu

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...