Name: a simple high efficiency protocol for pancreatic islet isolation from mice
Uploaded: 2019-08-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice at JoVE.com

Vi er meget taknemmelige for fru Jennifer Munguia for hendes kunstneriske illustration af det skematiske diagram. Vi takker hr. Michael R. Honig på Houstons community Public Radio Station KPFT for hans redaktionelle assistance. Denne undersøgelse blev støttet af American diabetes Association #1-BS-177 (YS) og NIH R56DK118334/R01DK118334 (YS). Dette arbejde blev også støttet af USDA National Institute of Food and Agriculture, Hatch Project 1010840 (YS) og R01 DK095118 (SG).

Alle metoder, der er beskrevet her, er blevet godkendt af Udvalget for dyrepasning og-anvendelse (ACUC) fra Texas A & M University. De kirurgiske værktøjer skal vises i figur 1 , og skematisk diagram af proceduren er vist i figur 2.
1. løsninger
<ol><li>Forbered Hank's afbalancerede salt opløsning (HBSS) ved at tilsætte 100 mL 10X HBSS (fra lager) til 900 mL destilleret vand for at lave 1 L HBSS (1X).</li>
	<li>Forbered STOP op...

<ol>
	<li>Carter, J. D., Dula, S. B., Corbin, K. L., Wu, R., Nunemaker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+guide+to+rodent+islet+isolation+and+assessment.">A practical guide to rodent islet isolation and assessment.</a> Biological Procedures Online. 11, 3-31 (2009).</li><li>Gotoh, M., Maki, T., Kiyoizumi, T., Satomi, S., Monaco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+isolation+of+mouse+pancreatic+islets.">An improved method for isolation of mouse pancreatic islets.</a> Transplantation. 40 (4), 437-438 (1985).</li><li>O'Dowd, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolation+and+purification+of+rodent+pancreatic+islets+of+Langerhans.">The isolation and purification of rodent pancreatic islets of Langerhans.</a> Methods in Molecular Biology. 560, 37-42 (2009).</li><li>Do, O. H., Low, J. T., Thorn, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lepr(db)+mouse+model+of+type+2+diabetes:+pancreatic+islet+isolation+and+live-cell+2-photon+imaging+of+intact+islets.">Lepr(db) mouse model of type 2 diabetes: pancreatic islet isolation and live-cell 2-photon imaging of intact islets.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (99), e52632 (2015).</li><li>Stull, N. D., Breite, A., McCarthy, R., Tersey, S. A., Mirmira, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+islet+of+Langerhans+isolation+using+a+combination+of+purified+collagenase+and+neutral+protease.">Mouse islet of Langerhans isolation using a combination of purified collagenase and neutral protease.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (67), (2012).</li><li>Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+Differences+in+Islet+Distribution+in+the+Human+Pancreas+-+Preferential+Beta-Cell+Loss+in+the+Head+Region+in+Patients+with+Type+2+Diabetes.">Regional Differences in Islet Distribution in the Human Pancreas - Preferential Beta-Cell Loss in the Head Region in Patients with Type 2 Diabetes.</a> PLOS ONE. 8, (2013).</li><li>Li, D. S., Yuan, Y. H., Tu, H. J., Liang, Q. L., Dai, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+islet+isolation+from+mouse+pancreas.">A protocol for islet isolation from mouse pancreas.</a> Nature Protocols. 4 (11), 1649-1652 (2009).</li><li>Neuman, J. C., Truchan, N. A., Joseph, J. W., Kimple, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+mouse+pancreatic+islet+isolation+and+intracellular+cAMP+determination.">A method for mouse pancreatic islet isolation and intracellular cAMP determination.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (88), e50374 (2014).</li><li>Scharp, D. W., Lacy, P. E., Finke, E., Olack, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-temperature+culture+of+human+islets+isolated+by+the+distention+method+and+purified+with+Ficoll+or+Percoll+gradients.">Low-temperature culture of human islets isolated by the distention method and purified with Ficoll or Percoll gradients.</a> Surgery. 107 (5), e50374 (1987).</li><li>Salvalaggio, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+filtration:+a+simple+and+rapid+new+purification+procedure+that+avoids+ficoll+and+improves+islet+mass+and+function.">Islet filtration: a simple and rapid new purification procedure that avoids ficoll and improves islet mass and function.</a> Transplantation. 74 (66), 877-879 (2002).</li><li>Saliba, Y., Bakhos, J. J., Itani, T., Fares, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+optimized+protocol+for+purification+of+functional+islets+of+Langerhans.">An optimized protocol for purification of functional islets of Langerhans.</a> Laboratory Investigation. 97 (1), 70-83 (2017).</li><li>Pradhan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obestatin+stimulates+glucose-induced+insulin+secretion+through+ghrelin+receptor+GHS-R.">Obestatin stimulates glucose-induced insulin secretion through ghrelin receptor GHS-R.</a> Scientific Reports. 7 (1), 979 (2017).</li><li>Shapiro, A. M. J., Hao, E., Rajotte, R. V., Kneteman, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+yield+of+rodent+islets+with+intraductal+collagenase+and+stationary+digestion--a+comparison+with+standard+technique.">High yield of rodent islets with intraductal collagenase and stationary digestion--a comparison with standard technique.</a> Cell Transplantation. 5 (6), 631-638 (1996).</li></ol>

Denne protokol omfatter kollagenase perfusion og fordøjelse, efterfulgt af rensning af Holme. De mest kritiske trin i denne protokol er effektiv injektion og komplet perfusion af bugspytkirtlen1,4,7. Leveringsmetoden i denne protokol gør det muligt for enzymet at krydse de anatomiske veje for bedre at fordøje det exokrine væv omkring Holme1. Hertil kommer, at denne teknik er velegnet til komplet ford?...

Der er to fælles metoder i litteraturen for bugspytkirtlen ø isolation. Man kræver excising bugspytkirtlen og terninger det i små stykker ved hjælp af kirurgisk saks, og derefter fordøje det i en kollagenase løsning1,2,3. En anden mere præcis metode er at bruge nettet af kanaler til stede i bugspytkirtlen til at indføre fordøjelsessystemet enzym. Følgende steder er blevet brugt til fordøjelseskanalen enzym injektion: krydset af galde og cystisk kanal, galdeblæren i den fælles galdegang, eller den fælles galde kanalen selv1,4,5. Det er kendt, at Holme ikke er jævnt fordelt i bugspytkirtlen; milt-regionen indeholder de fleste Holme6. Mens den anden metode ved hjælp af anatomiske veje til at levere fordøjelsesenzymer giver mulighed for en mere komplet perfusion af bugspytkirtlen, herunder splenisk region, denne procedure kræver ofte fastspænding eller suturering af ampulla af Vater, der er teknisk Udfordrende. Med hensyn til ø rensning, flere tæthed gradienter, samt celle sier og magnetisk retraktion er blevet brugt til at rense Holme3,7. Udnyttelsen af disse gradienter kan være tidskrævende og Ficoll gradienter kan resultere i giftige skader af Holme8.
Den nuværende protokol er bygget på den metode, der er beskrevet af Li et al.7, med yderligere ændringer tilføjet baseret på erfaringerne fra os selv og andre1,4. De mest kritiske trin i vores protokol er fastspænding af den fælles galdegang nær leveren ende, indsprøjtning kollagenase P via ampulla af Vater at fordøje den exokrine væv, og derefter ved hjælp af en ryster vandbad til at fremskynde fordøjelsen mekanisk1, 4,7. Efterfølgende anvendes en "STOP"-løsning for at hæmme yderligere fordøjelse af Holme; HBSS bruges til at vaske den resterende kollagenase P og STOP opløsning. Da Ficoll-metoden blev brugt til at rense humane Holme, blev udbyttet rapporteret at være dobbelt så store som Holme med større funktionel kapacitet (f. eks. insulinsekretion) sammenlignet med brugen af Percoll gradienter9. Men, undersøgelser har sat spørgsmålstegn ved brugen af ficoll gradient på grund af dens toksiske virkning på Holme1,10. Det er blevet rapporteret, at den Histuigennemsigtige gradient giver optimal rensning kinetik for mus ø isolation, som giver gode udbytte af høj kvalitet Holme med enklere trin og lavere omkostninger1. I vores protokol, Histuigennemsigtig-1077 bruges til at rense Holme fra andre resterende væv8,11. De høstede Holme kan dyrkes i komplet RPMI-1640 medier, eller direkte udnyttet i RNA/protein kvantitation.
Vores protokol, ved hjælp af en kombination af kollagenase P fordøjelse og en enkelt gradient rensning trin, er enklere end andre offentliggjorte protokoller. Vores metode kræver ikke krævende kirurgiske indgreb og har blot et par enkle trin. Endnu vigtigere, denne protokol konsekvent producerer et godt udbytte af høj kvalitet funktionelle Holme (250-350/mus) som vi rapporterede12.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309657</td>
			<td>Hoding collagenase P</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-396</td>
			<td>Holding skin of mouse to aid incision procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z168696</td>
			<td>Holding tissues during pancreas removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>B13B16A</td>
			<td>To anaesthetize mice prior surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>30-2041</td>
			<td>Used for islet culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G. &#189; inch needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td>For penetration of Ampulla of vater to deliver Collagenase P - this guage is used as it fits well in most CBDs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml tube</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-658</td>
			<td>Holding digested pancreatic tissue, collagenase P, and purified islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbent pads with waterproof moisture barrier</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82020-845</td>
			<td>To absorb blood from syurgical procesdudes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R with swing bucket and deceleration capability</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5811FJ478114</td>
			<td>Use for pelleting tissues, pellet is formed at bottom of conical tube - swing bucket centrifuge is needed. Also the decelaration feature is important to form the gradient layers.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase P- 1g</td>
			<td>Roche Diagnostics</td>
			<td>11249002001</td>
			<td>For digestion of exocrine pancreas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved surgical scissors</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>13-804-21</td>
			<td>For cutting open mouse abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZX16</td>
			<td>Used for identification of key anatomical structures to accurately deliver collagenase into pancreas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s Balanced Salt Solution 10x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>20-023-CV</td>
			<td>Washing cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histopaque-1077</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>RNBF5100</td>
			<td>For gradient formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>Leeds</td>
			<td>LR92240</td>
			<td>Enhancing visibility of microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNaseZap</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>AM9780</td>
			<td>For removing RNase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 Media w/o L-Glutamine</td>
			<td>Corning</td>
			<td>15-040-CV</td>
			<td>Culturing Islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schwartz micro serrefines (Microvascular clamp)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18052-01</td>
			<td>Clamping common bile duct and hepatic artery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaking waterbath</td>
			<td>Boekel/Grant</td>
			<td>8R0534008</td>
			<td>Important for mechanical digestion of exocrine tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small surgical scissors</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-578</td>
			<td>Cuttitng tissue that atached to pancreas</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple high efficiency protocol for pancreatic islet isolation from mice

Pancreasøer, også kaldet Holme af Langerhans, er en klynge af endokrine celler, der producerer hormoner til glukose regulering og andre vigtige biologiske funktioner. Holme består primært af fem typer af hormon-secernerende celler: α celler udskiller Glucagon, β celler udskiller insulin, δ celler udskiller somatostatin, ε celler udskiller Ghrelin, og PP celler udskiller pancreas polypeptid. 60 til 80% af cellerne i Holme er β-celler, som er den vigtigste cellepopulation til at studere insulinsekretionen. Pancreasøer er et afgørende model system til at studere ex vivo insulinsekretion. Erhvervelse af høj kvalitet Holme er af stor betydning for diabetes forskning. De fleste Islet isolation procedurer kræver teknisk vanskeligt at få adgang til stedet for kollagenase injektion, barske og komplekse fordøjelse procedurer, og multiple tæthed gradient rensning trin. Dette papir har en simpel High Yield mus Islet isolation metode med detaljerede beskrivelser og realistiske demonstrationer, der viser følgende specifikke trin: 1) injektion af kollagenase P ved ampulla af Vater, et lille område, der tilmelder sig bugspytkirtlen kanalen og den fælles galdegang, 2) enzymatisk fordøjelse og mekanisk adskillelse af exokrine bugspytkirtlen, og 3) et enkelt gradient rensningstrin. Fordelene ved denne metode er injektion af fordøjelsesenzymer ved hjælp af den mere tilgængelige ampulla af Vater, mere komplet fordøjelse ved hjælp af en kombination af enzymatiske og mekaniske tilgange, og en enklere enkelt gradient rensning trin. Denne protokol producerer ca. 250 — 350 Holme pr. mus; og holme er velegnede til forskellige ex vivo-undersøgelser. Mulige forbehold af denne procedure er potentielt beskadigede Holme på grund af enzymatisk fordøjelse og/eller forlænget gradient inkubation, som alle kan i vid udstrækning undgås ved omhyggelig ad begrundelse af inkubationstiden.

Korrekt færdiggørelse af denne procedure kræver en vis forståelse af mus anatomi i bughulen. Dette giver mulighed for korrekt identifikation af ampulla af Vater og Fastspænding af den fælles galdegang. Hele proceduren tager normalt 1 – 2 h. Det er mere effektivt at isolere Holme fra 4 – 6 mus på samme tid, så flere prøver kan centrifugeres sammen. Tiden for ø-plukning varierer, afhængigt af antallet af Holme og effektiviteten af fordøjelsen; Det kan tage cirka en time at plukke 250-350 Holme fra 1 mus.</p...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice at JoVE.com

A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice

Denne ø-isolations protokol beskrev en ny rute for kollagenase-injektion for at fordøje det exokrine væv og en forenklet gradient procedure for at rense Holme fra mus. Det involverer enzymatisk fordøjelse, gradient separation/rensning, og ø håndplukning. Vellykket isolation kan give 250 – 350 høj kvalitet og fuldt funktionelle Holme per mus.

En simpel højeffektiv protokol til den pankreatiske ø-isolation fra mus

Pancreatic islets, also called the Islets of Langerhans, are a cluster of endocrine cells which produces hormones for glucose regulation and other ...

Denne protokol kræver brug af en enkelt tæthedsgradient, hvilket gør den betydeligt mindre arbejdskrævende og mere omkostningseffektiv sammenlignet med mere komplekse konventionelle lerisolationsmetoder. Den største fordel ved denne protokol er, at enzymet leveres direkte til bugspytkirtlen resulterer i en forbedret væv fordøjelse og øget ø udbytte. Begynd med at tape lemmerne af musen i liggende position og sprøjtning kroppen med 70% ethanol.Brug dækglas sslag og buede kirurgiske saks, gøre en cirka tre centimeter vandret abdominal hud snit og trække åbne huden for at afsløre bugvæggen. Lav en tre til fire centimeter lodret snit på abdominal bughinde til fuldt ud at udsætte bugspytkirtlen og placere musen under en dissekere mikroskop. Skub leverlappen overlegent at udsætte galdegang, der vises som en lyserød rør og forsigtigt flytte tarmene fra højre lænde og iliaca region til højre for bughulen til at udsætte galdegang og leverpulsåren.Brug Schwartz mikro serrefines til omhyggeligt klemme den fælles galdegang så tæt på leveren som muligt og identificere ampulla af Vater, som er placeret på den duodenal papilla og dannet af foreningen af pancreas kanalen og den fælles galdegang. Brug mikro Adson kraftpind til at trække den fælles galdegang lært, indsætte en 30 gauge halv-tommer nål fastgjort til en tre milliliter sprøjte, der indeholder tre milliliter frisklavet kollagenase P opløsning i ampulla af Vater skubbe nålen ind i kanalen parallelt med fartøjet i omkring en fjerdedel af længden af fartøjet. Når nålen er på plads, stabilisere nålen med mikro Adson scepincet og langsomt og støt injicere tre milliliter kollagen P opløsning i kanalen.Injektionen anses for vellykket, hvis hoved, hals, krop, og hale regioner i bugspytkirtlen er fuldt oppustet. Korrekt adgang til ampulla og cannulation af den fælles galdegang er afgørende for en vellykket fordøjelseshøst. Piercing de ductal vægge reducerer effekten af isolation.Brug buede og mikro Adson kraftang, forsigtigt trække de oppustede bugspytkirtlen starter ved milten og fortsætter mod maven og langs duodenum. Derefter anbringes bugspytkirtlen i et 50 milliliter fordøjelsesrør indeholdende tre milliliter iskold kollagenase P-opløsning. At høste holme, første brug fine kirurgiske saks til at hugge bugspytkirtlen i tre til fem sekunder, før du placerer røret i en 37 grader Celsius vandbad ved 100 til 120 rotationer i minuttet i 12 til 13 minutter.Ved slutningen af inkubationen, forsigtigt ryste røret i ca 30 sekunder for at forstyrre vævet, indtil opløsningen er homogen som bekræftet af fine sand-lignende pancreas væv partikler. Så snart vævet er fordøjet, skal røret anbringes på is og tilsættes 40 milliliter iskold stopopløsning for at afslutte den enzymatiske reaktion. Efter forsigtigt at forstyrre pellet, drej ned fordøjet væv i en svingende spand centrifuge efterfulgt af to centrifugeringer med 20 milliliter frisk stop opløsning per vask.Efter den sidste vask opsaltning pellet i 40 milliliter iskold HBSS for tre yderligere vasker, resuspending pellet i fem milliliter rumtemperaturtæthed gradient opløsning efter den sidste vask. Vortex røret kortvarigt ved lav hastighed, indtil opløsningen er homogeniseret, før der tilsættes yderligere fem milliliter rumtemperaturtæthedsgradient til røret. Brug nu en 10 milliliter pipette til forsigtigt og langsomt at tilføje 10 milliliter rumtemperatur HBSS til røret på en dråbemæssig måde for at tillade dannelsen af en gradient og bruge en svingende spand centrifuge til at isolere cellepopulationerne ved tæthedsgradientadseparation.Ved centrifugeringsafslutningen anvendes en 10 milliliterpipette, der er for våd med kold HBSS, til at indsamle fem til 10 milliliter af ølaget mellem massefyldegradienten og HBSS. Øerne overføres til et nyt 50 milliliterrør med 20 milliliter frisk iskold HBSS, og cellerne opsamres ved centrifugering i en svingende spandcentrifuge. Inspirer forsigtigt alle, men de sidste tre milliliter af supernatanten uden at forstyrre pellet og vask holmene mindst tre gange mere med 20 milliliter frisk HBSS per vask.Efter den sidste vask erstattes supernatanten med fire milliliter på 37 grader Celsius RMPI 1640 medium og hvirvle forsigtigt røret for at løsne pellet. Hæld straks holmene i en 100 millimeter petriskål og vask straks røret med fem milliliter frisk RPMI 1640 medium til at indsamle eventuelle resterende holme, der samler vasken sammen med de andre holme. Brug derefter et dissektionmikroskop og en 20 mikroliterpipettespids til at plukke sunde sfæriske eller aflange gyldenbrune holme med en glat overflade fra petriskålen til overførsel til en ny petriskål indeholdende 10 milliliter komplet RPMI 1640-medium.Når alle holmene er indsamlet, skal holmene i en steril inkubator på 37 grader Celsius og 5% kuldioxid i befugtet luft natten over. Gode sunde holme synes at have en glat rund form, mens dårlige beskadigede øer udviser ru kanter. Ufordøjet eksokrinisk væv er gennemskinneligt i udseende og viser en uregelmæssig form.En ordentlig cannulation og fordeling af kollagenase P enzym kan bekræftes af en inflation af milten del af bugspytkirtlen. Overnight inkubation i lavglukose medier kan prime holmene for en glukose-stimuleret insulin sekretion assay på den følgende dag giver indsigt i insulin sekretoriske kapacitet af holmene.

Research

JoVE Journal

Biology

Murine Pancreatic Islet Isolation

Neutrophil Isolation Protocol

Neutrophil polymorphonuclear granulocytes (PMN) are the most abundant leukocytes in humans and among the first cells to arrive on the site of inflammatory ...

Human Pancreatic Islet Isolation: Part I: Digestion and Collection of Pancreatic Tissue

Management of Type 1 diabetes is burdensome, both to the individual and society, costing over 100 billion dollars annually. Despite the widespread use of ...

Human Pancreatic Islet Isolation: Part II: Purification and Culture of Human Islets

Isolation of Stem Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts

Cancer stem cells (CSCs) have been identified in a growing number of malignancies and are functionally defined by their ability to undergo self-renewal ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

En enkel protokol til Udpakning hæmocytter fra Wild Larver

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

A Method for Mouse Pancreatic Islet Isolation and Intracellular cAMP Determination

Metode til mus pancreasø Isolation og intracellulære cAMP Bestemmelse

Uncontrolled glycemia is a hallmark of diabetes mellitus and promotes morbidities like neuropathy, nephropathy, and retinopathy. With the increasing ...

Pancreatic Islet Embedding for Paraffin Sections

Pancreas Islet indlejring for paraffinsnit

Experiments using isolated pancreatic islets are important for diabetes research, but islets are expensive and of limited abundance. Islets contain a ...

Imaging Calcium Dynamics in Subpopulations of Mouse Pancreatic Islet Cells

Imaging calcium dynamik i subpopulationer af mus bugspytkirtel ø-celler

Pancreatic islet hormones regulate blood glucose homeostasis. Changes in blood glucose induce oscillations of cytosolic calcium in pancreatic islet cells ...