Name: a simple high efficiency protocol for pancreatic islet isolation from mice
Uploaded: 2019-08-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice at JoVE.com

Vi är oerhört tacksamma mot MS Jennifer Munguia för hennes konstnärliga illustration av det schematiska diagrammet. Vi tackar Mr Michael R. Honig på Houstons community Public Radio Station KPFT för hans redaktionella hjälp. Denna studie stöddes av American Diabetes Association #1 -15-BS-177 (YS), och NIH R56DK118334/R01DK118334 (YS). Detta arbete stöddes också av USDA nationella institutet för livsmedel och jordbruk, Hatch projekt 1010840 (YS) och R01 DK095118 (SG).

Alla metoder som beskrivs här har godkänts av djuromsorg och användning kommittén (ACUC) i Texas A & M University. De kirurgiska verktyg som behövs visas i figur 1 och Schematiskt diagram över proceduren visas i figur 2.
1. lösningar
<ol><li>Förbered Hank ' s balanserade saltlösning (HBSS) genom att tillsätta 100 mL 10X HBSS (från lager) till 900 mL destillerat vatten för att tillverka 1 L HBSS (1X).</li>
	<li>Förbered ...

<ol>
	<li>Carter, J. D., Dula, S. B., Corbin, K. L., Wu, R., Nunemaker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+guide+to+rodent+islet+isolation+and+assessment.">A practical guide to rodent islet isolation and assessment.</a> Biological Procedures Online. 11, 3-31 (2009).</li><li>Gotoh, M., Maki, T., Kiyoizumi, T., Satomi, S., Monaco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+isolation+of+mouse+pancreatic+islets.">An improved method for isolation of mouse pancreatic islets.</a> Transplantation. 40 (4), 437-438 (1985).</li><li>O'Dowd, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolation+and+purification+of+rodent+pancreatic+islets+of+Langerhans.">The isolation and purification of rodent pancreatic islets of Langerhans.</a> Methods in Molecular Biology. 560, 37-42 (2009).</li><li>Do, O. H., Low, J. T., Thorn, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lepr(db)+mouse+model+of+type+2+diabetes:+pancreatic+islet+isolation+and+live-cell+2-photon+imaging+of+intact+islets.">Lepr(db) mouse model of type 2 diabetes: pancreatic islet isolation and live-cell 2-photon imaging of intact islets.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (99), e52632 (2015).</li><li>Stull, N. D., Breite, A., McCarthy, R., Tersey, S. A., Mirmira, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+islet+of+Langerhans+isolation+using+a+combination+of+purified+collagenase+and+neutral+protease.">Mouse islet of Langerhans isolation using a combination of purified collagenase and neutral protease.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (67), (2012).</li><li>Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+Differences+in+Islet+Distribution+in+the+Human+Pancreas+-+Preferential+Beta-Cell+Loss+in+the+Head+Region+in+Patients+with+Type+2+Diabetes.">Regional Differences in Islet Distribution in the Human Pancreas - Preferential Beta-Cell Loss in the Head Region in Patients with Type 2 Diabetes.</a> PLOS ONE. 8, (2013).</li><li>Li, D. S., Yuan, Y. H., Tu, H. J., Liang, Q. L., Dai, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+islet+isolation+from+mouse+pancreas.">A protocol for islet isolation from mouse pancreas.</a> Nature Protocols. 4 (11), 1649-1652 (2009).</li><li>Neuman, J. C., Truchan, N. A., Joseph, J. W., Kimple, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+mouse+pancreatic+islet+isolation+and+intracellular+cAMP+determination.">A method for mouse pancreatic islet isolation and intracellular cAMP determination.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (88), e50374 (2014).</li><li>Scharp, D. W., Lacy, P. E., Finke, E., Olack, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-temperature+culture+of+human+islets+isolated+by+the+distention+method+and+purified+with+Ficoll+or+Percoll+gradients.">Low-temperature culture of human islets isolated by the distention method and purified with Ficoll or Percoll gradients.</a> Surgery. 107 (5), e50374 (1987).</li><li>Salvalaggio, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+filtration:+a+simple+and+rapid+new+purification+procedure+that+avoids+ficoll+and+improves+islet+mass+and+function.">Islet filtration: a simple and rapid new purification procedure that avoids ficoll and improves islet mass and function.</a> Transplantation. 74 (66), 877-879 (2002).</li><li>Saliba, Y., Bakhos, J. J., Itani, T., Fares, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+optimized+protocol+for+purification+of+functional+islets+of+Langerhans.">An optimized protocol for purification of functional islets of Langerhans.</a> Laboratory Investigation. 97 (1), 70-83 (2017).</li><li>Pradhan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obestatin+stimulates+glucose-induced+insulin+secretion+through+ghrelin+receptor+GHS-R.">Obestatin stimulates glucose-induced insulin secretion through ghrelin receptor GHS-R.</a> Scientific Reports. 7 (1), 979 (2017).</li><li>Shapiro, A. M. J., Hao, E., Rajotte, R. V., Kneteman, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+yield+of+rodent+islets+with+intraductal+collagenase+and+stationary+digestion--a+comparison+with+standard+technique.">High yield of rodent islets with intraductal collagenase and stationary digestion--a comparison with standard technique.</a> Cell Transplantation. 5 (6), 631-638 (1996).</li></ol>

Detta protokoll omfattar kollagenas perfusion och matsmältning, följt av rening av kobbar. De mest kritiska stegen i detta protokoll är effektiv injektion och fullständig perfusion av bukspottkörteln1,4,7. Leveransmetoden för detta protokoll tillåter enzymet att korsa de anatomiska rutterna för att bättre smälta den exokrina vävnaden som omger holmar1. Dessutom är denna teknik väl lämpad fö...

Det finns två vanliga metoder i litteraturen för bukspottskörteln ö isolering. Man kräver excising bukspottkörteln och tärning det i små bitar med hjälp av kirurgisk sax, och sedan smälta det i en kollagenase lösning1,2,3. En annan mer exakt metod är att använda nätverket av kanaler som finns i bukspottkörteln att införa matsmältningsorganen enzym. Följande platser har använts för mag enzym injektion: korsningen av galla och cystisk kanal, gallblåsan i gallgången, eller den gemensamma gallgången själv1,4,5. Det är känt att holnor inte är jämnt fördelade i bukspottkörteln; mjälten regionen innehåller de mest öar6. Medan den andra metoden med anatomiska vägar för att leverera matsmältningsenzymer möjliggör en mer komplett perfusion av bukspottkörteln, inklusive mjälten regionen, detta förfarande kräver ofta fastspänning eller suturering av ampulla av Vater som är tekniskt Utmanande. När det gäller ö rening, flera densitet gradienter, samt cell silar och magnetisk retraktion har använts för att rena öarna3,7. Utnyttjandet av dessa gradienter kan vara tidskrävande och Ficoll gradienter kan resultera i giftiga skador av öar8.
Det nuvarande protokollet bygger på den metod som beskrivs av Li et al.7, med ytterligare modifieringar som läggs till baserat på upplevelsen av oss självaoch andra1,4. De mest kritiska stegen i vårt protokoll är fastspänning av den gemensamma gallgången nära levern slutet, injicera kollagenase P via ampulla av Vater att smälta den exokrina vävnaden, och sedan använda en skakning vattenbad att påskynda matsmältningen mekaniskt1, 4,7. Därefter används en "stopplösning" för att hämma ytterligare nedbrytning av kobbar. HBSS används för att tvätta bort kvarvarande kollagenase P-och stopplösning. När Ficoll-metoden användes för att rena humana öar rapporterades avkastningen vara dubbelt så stor som holarna med större funktionell förmåga (t. ex. insulinsekretion) jämfört med användning av Percoll-lutningar9. Studier har dock ifrågasatt användningen av Ficoll gradient på grund av dess toxiska effekt på holmar1,10. Det har rapporterats att Histopaque gradient ger optimal rening kinetik för mus ö-isolering, som ger god avkastning av högkvalitativa öar med enklare steg och lägre kostnad1. I vårt protokoll används Histopaque-1077 för att rena öar från annan kvarvarande vävnad8,11. De skördade holarna kan odlas i komplett RPMI-1640 media, eller direkt utnyttjas i RNA/proteinkvantifiering.
Vårt protokoll, med hjälp av en kombination av kollagenase P matsmältningen och en enda gradient reningssteg, är enklare än andra publicerade protokoll. Vår metod kräver inte krävande kirurgiska ingrepp och har bara några enkla steg. Ännu viktigare är att detta protokoll konsekvent ger en bra avkastning av hög kvalitet funktionella öar (250-350/mus) som vi rapporterade12.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309657</td>
			<td>Hoding collagenase P</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-396</td>
			<td>Holding skin of mouse to aid incision procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z168696</td>
			<td>Holding tissues during pancreas removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>B13B16A</td>
			<td>To anaesthetize mice prior surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>30-2041</td>
			<td>Used for islet culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G. &#189; inch needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td>For penetration of Ampulla of vater to deliver Collagenase P - this guage is used as it fits well in most CBDs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml tube</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-658</td>
			<td>Holding digested pancreatic tissue, collagenase P, and purified islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbent pads with waterproof moisture barrier</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82020-845</td>
			<td>To absorb blood from syurgical procesdudes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R with swing bucket and deceleration capability</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5811FJ478114</td>
			<td>Use for pelleting tissues, pellet is formed at bottom of conical tube - swing bucket centrifuge is needed. Also the decelaration feature is important to form the gradient layers.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase P- 1g</td>
			<td>Roche Diagnostics</td>
			<td>11249002001</td>
			<td>For digestion of exocrine pancreas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved surgical scissors</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>13-804-21</td>
			<td>For cutting open mouse abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZX16</td>
			<td>Used for identification of key anatomical structures to accurately deliver collagenase into pancreas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s Balanced Salt Solution 10x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>20-023-CV</td>
			<td>Washing cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histopaque-1077</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>RNBF5100</td>
			<td>For gradient formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>Leeds</td>
			<td>LR92240</td>
			<td>Enhancing visibility of microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNaseZap</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>AM9780</td>
			<td>For removing RNase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 Media w/o L-Glutamine</td>
			<td>Corning</td>
			<td>15-040-CV</td>
			<td>Culturing Islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schwartz micro serrefines (Microvascular clamp)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18052-01</td>
			<td>Clamping common bile duct and hepatic artery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaking waterbath</td>
			<td>Boekel/Grant</td>
			<td>8R0534008</td>
			<td>Important for mechanical digestion of exocrine tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small surgical scissors</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-578</td>
			<td>Cuttitng tissue that atached to pancreas</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple high efficiency protocol for pancreatic islet isolation from mice

Pankreasöarna, även kallade Langerhanska öar, är ett kluster av endokrina celler som producerar hormoner för glukos reglering och andra viktiga biologiska funktioner. Kobbar består främst av fem typer av hormonutsöndra celler: α-celler utsöndrar glukagon, β-celler utsöndrar insulin, δ-celler utsöndrar somatostatin, ε-celler utsöndrar ghrelin och PP-celler utsöndrar pankreaspolypeptid. 60 till 80% av cellerna i kobbar är β-celler, som är den viktigaste cellpopulationen för att studera insulinsekretion. Pankreasöar är ett viktigt modellsystem för att studera ex vivo insulinsekretion. Att förvärva högkvalitativa öar är av stor betydelse för diabetesforskningen. De flesta ö isolering förfaranden kräver tekniskt svårt att få tillgång till platsen för kollagenase injektion, hårda och komplexa rötning förfaranden, och flera densitet lutning rening steg. Detta papper har en enkel hög avkastning mus ö isolering metod med detaljerade beskrivningar och realistiska demonstrationer, som visar följande specifika steg: 1) injektion av kollagenas P vid ampulla av Vater, ett litet område som förbinder bukspottskörteln kanalen och den gemensamma gallgången, 2) enzymatisk matsmältning och mekanisk separation av exokrina bukspottkörteln, och 3) en enda gradient reningssteg. Fördelarna med denna metod är injektion av matsmältnings enzym med hjälp av mer tillgängliga ampulla av Vater, mer fullständig matsmältning med kombinationen av enzymatiska och mekaniska metoder, och en enklare enkelgradient rening steg. Detta protokoll producerar cirka 250 — 350 öar per mus; och holvar lämpar sig för olika ex vivo-studier. Möjliga förbehåll för detta förfarande är potentiellt skadade öar på grund av enzymatisk matsmältning och/eller långvarig gradient inkubation, som alla kan i stort sett undvikas genom noggrann annons motivering av inkubationstiden.

Korrekt slutförandet av detta förfarande kräver viss förståelse av mus anatomi i bukhålan. Detta möjliggör korrekt identifiering av ampulla av Vater och fastspänning av den gemensamma gallgången. Hela proceduren tar normalt 1 – 2 h. Det är effektivare att isolera öar från 4 – 6 möss samtidigt, så att flera prover kan centrifugeras tillsammans. Tiden för ö-plockning varierar beroende på antalet öar och effektiviteten i matsmältningen; Det kan ta ungefär en timme att plocka 250 – 350 öar från 1...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice at JoVE.com

A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice

Detta ö-isolerings protokoll beskrev en ny väg av kollagenasinjektion för att smälta den exokrina vävnaden och en förenklad gradient förfarande för att rena kobbar från möss. Det handlar om enzymatisk matsmältning, gradient separation/rening, och Islet handplockning. Lyckad isolering kan ge 250 – 350 hög kvalitet och fullt fungerande öar per mus.

En enkel hög verkningsgrad protokoll för bukspottskörteln ö isolering från möss

Pancreatic islets, also called the Islets of Langerhans, are a cluster of endocrine cells which produces hormones for glucose regulation and other ...

Detta protokoll kräver användning av en enda densitet gradient gör det betydligt mindre arbetsintensiva och mer kostnadseffektivt jämfört med mer komplexa konventionella holme isolering metoder. Den största fördelen med detta protokoll är att enzymet levereras direkt till bukspottkörteln vilket resulterar i en förstärkt vävnadsspjälvslutning och ökad holmeutbyte. Börja med att tejpa musens lemmar i ryggläge och spruta kroppen med 70%etanol.Använda coverglass tlyktor och böjda kirurgiska sax, göra en cirka tre centimeter horisontell buken hud snitt och dra öppna huden för att exponera bukväggen. Gör en tre till fyra centimeter vertikalt snitt på buken bukhinnan att helt exponera bukspottkörteln och placera musen under en dissekera mikroskop. Tryck leverloben superiorly att exponera gallgången som visas som en blekrosa rör och försiktigt flytta tarmarna från höger ländryggen och iliaca regionen till höger om bukhålan att exponera gallgången och leverartären.Använd Schwartz mikroserrefiner för att noggrant klämma fast den gemensamma gallgången så nära levern som möjligt och identifiera ampulla av Vater som ligger vid duodenal papilla och som bildas av förening av bukspottskörteln kanalen och den gemensamma gallgången. Med hjälp av mikro Adson-tänjningar för att dra den gemensamma gallgången lärs ut, sätt in en 30 gauge halvtumnål fäst vid en tre milliliter spruta som innehåller tre milliliter nyberedda kollagena P lösning i ampulla av Vater trycka nålen i kanalen parallellt med kärlet för ungefär en fjärdedel av längden på kärlet. När nålen är på plats, stabilisera nålen med mikro Adson-tlyktor och långsamt och stadigt injicera tre milliliter av kollagenas P-lösning i kanalen.Injektionen anses framgångsrik om huvud, hals, kropp, och svans regioner i bukspottkörteln är helt uppblåsta. Korrekt inträde i ampulla och kanylering av den gemensamma gallgången är avgörande för en lyckad matsmältningsskörd. Piercing av duktalväggarna minskar effekten av isoleringen.Med hjälp av böjda och mikro Adson-tång, dra försiktigt ut den uppblåsta bukspottkörteln börjar vid mjälten och fortsätter mot magen och längs tolvfingertarmen. Placera sedan bukspottkörteln i en 50 milliliter matsmältningsrör som innehåller tre milliliter iskall kollagenas P lösning. För att skörda holmarna, använd först fin kirurgisk sax för att hugga bukspottkörteln i tre till fem sekunder innan du placerar röret i en 37 graders Celsius vattenbad på 100 till 120 rotationer per minut i 12 till 13 minuter.Vid slutet av inkubationen, skaka försiktigt röret i ca 30 sekunder för att störa vävnaden tills lösningen är homogen som bekräftas av fina sandliknande bukspottskörtelvävnadspartiklar. Så snart vävnaden har smält, placera röret på is och tillsätt 40 milliliter iskallt stopp lösning för att avsluta den enzymatiska reaktionen. Efter att försiktigt störa pelleten, snurra ner den smälta vävnaden i en svängande hink centrifug följt av två centrifugeringar med 20 milliliter färsk stopplösning per tvätt.Efter den sista tvätten, resuspend pelleten i 40 milliliter iskall HBSS för tre ytterligare tvättar, resuspending pelleten i fem milliliter av rumstemperatur densitet lutningslösning efter den sista tvätten. Vortexa röret kort vid låg hastighet tills lösningen homogeniseras innan du lägger ytterligare fem milliliter av rumstemperatur densitet lutning till röret. Använd nu en 10 milliliterpipett för att försiktigt och långsamt lägga till 10 milliliter rumstemperatur HBSS till röret på ett droppvist sätt för att möjliggöra bildandet av en gradient och använda en svängig hinkcentrifug för att isolera cellpopulationerna genom densitetsgradientseparation.I slutet av centrifugeringen, använd en 10 milliliter pipett förvåt med kall HBSS för att samla fem till 10 milliliter av holmeskiktet mellan densitetsgradienten och HBSS. Överför holmarna till ett nytt 50 milliliterrör som innehåller 20 milliliter färsk iskall HBSS och samla in cellerna genom centrifugering i en svängig hinkcentrifug. Aspirera noggrant alla utom de tre sista milliliter av supernatanten utan att störa pelleten och tvätta skären minst tre gånger till med 20 milliliter färsk HBSS per tvätt.Efter den sista tvätten, byt ut supernatanten mot fyra milliliter på 37 grader Celsius RMPI 1640 medium och snurra försiktigt röret för att rubba pelleten. Häll omedelbart holmarna i en 100 millimeter petriskål och tvätta röret med fem milliliter färskt RPMI 1640 medium för att samla eventuella kvarvarande holmar pooling tvätten med de andra holmarna. Använd sedan ett dissekeringmikroskop och en 20 mikroliterpipetsspets för att plocka friska sfäriska eller avlånga gyllenbruna holmar med en slät yta från petriskålen för överföring till en ny petriskål som innehåller 10 milliliter komplett RPMI 1640 medium.När alla holmar har samlats in, placera holmarna i en steril inkubator på 37 grader Celsius och 5% koldioxid i befuktad luft över natten. Bra friska holmar verkar ha en jämn rund form medan dåliga skadade holmar uppvisar ojämna kanter. Osmält exokrin vävnad är genomskinlig i utseende och visar en oregelbunden form.En korrekt kannulation och fördelning av kollagenas P-enzymet kan bekräftas av en inflation av den splenic delen av bukspottkörteln. Inkubation över natten i låg glukos media kan prime holmarna för en glukos-stimulerad insulinutsöndring assay på följande dag möjliggör insikt i insulin sekretoriska kapacitet holmar.

Research

JoVE Journal

Biology

Murine Pancreatic Islet Isolation

Murina Pancreatic Islet Isolation

Neutrophil Isolation Protocol

Neutrofila Isolering Protokoll

Neutrophil polymorphonuclear granulocytes (PMN) are the most abundant leukocytes in humans and among the first cells to arrive on the site of inflammatory ...

Human Pancreatic Islet Isolation: Part I: Digestion and Collection of Pancreatic Tissue

Mänskliga Pancreatic Islet Isolering: Del I: Matsmältning och Insamling av pankreas vävnad

Management of Type 1 diabetes is burdensome, both to the individual and society, costing over 100 billion dollars annually. Despite the widespread use of ...

Human Pancreatic Islet Isolation: Part II: Purification and Culture of Human Islets

Mänskliga Pancreatic Islet Isolering: Del II: Rening och kultur för mänskliga Islets

Isolation of Stem Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts

Isolering av stamceller från mänskliga xenografter Pankreascancer

Cancer stem cells (CSCs) have been identified in a growing number of malignancies and are functionally defined by their ability to undergo self-renewal ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

Ett enkelt protokoll för att extrahera hemocyter från Wild Larver

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

A Method for Mouse Pancreatic Islet Isolation and Intracellular cAMP Determination

En metod för mus bukspottkörtel Islet Isolering och intracellulär cAMP Fastställande

Uncontrolled glycemia is a hallmark of diabetes mellitus and promotes morbidities like neuropathy, nephropathy, and retinopathy. With the increasing ...

Pancreatic Islet Embedding for Paraffin Sections

Bukspottskörteln Islet inbäddning för Paraffin avsnitt

Experiments using isolated pancreatic islets are important for diabetes research, but islets are expensive and of limited abundance. Islets contain a ...

Imaging Calcium Dynamics in Subpopulations of Mouse Pancreatic Islet Cells

Avbildning Kalciumdynamik i subpopulationer av mus bukspottskörteln ö-celler

Pancreatic islet hormones regulate blood glucose homeostasis. Changes in blood glucose induce oscillations of cytosolic calcium in pancreatic islet cells ...