Name: high-resolution respirometry to measure mitochondrial function of intact beta cells in the presence of natural compounds
Uploaded: 2018-01-23T15:00:00
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लेखक सहायक और वैज्ञानिक चर्चा के लिए Tessem और Hancock लैब्स के सदस्यों का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं । लेखकों एंड्रयू Neilson, पीएचडी epicatechin मोनोमर अंश प्राप्त कोको प्रदान करने के लिए (वर्जीनिया टेक) धंयवाद । इस अध्ययन में डायबिटीज एक्शन रिसर्च और एजुकेशन फाउंडेशन से JST को अनुदान का समर्थन मिला ।

1. सेल संस्कृति
<ol><li>संस्कृति INS-1 व्युत्पंन 832/13 बीटा कोशिकाओं RPMI १६४० में 10% भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) के साथ पूरक, 1% पेनिसिलिन-streptomycin, 10 मिमी HEPES, 2 मिमी Glutamine, 1 मिमी सोडियम पाइरूवेट, और ०.०५ मिमी 2-mercaptoethanol9,<sup class="xre...

<ol>
	<li>Mueckler, M., Thorens, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SLC2+(GLUT)+family+of+membrane+transporters.">The SLC2 (GLUT) family of membrane transporters.</a> Mol Aspects Med. 34 (2-3), 121-138 (2013).</li><li>Kahn, S. E., Hull, R. L., Utzschneider, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+linking+obesity+to+insulin+resistance+and+type+2+diabetes.">Mechanisms linking obesity to insulin resistance and type 2 diabetes.</a> Nature. 444 (7121), 840-846 (2006).</li><li>Weir, G. C., Bonner-Weir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Five+stages+of+evolving+beta-cell+dysfunction+during+progression+to+diabetes.">Five stages of evolving beta-cell dysfunction during progression to diabetes.</a> Diabetes. 53 Suppl 3, S16-S21 (2004).</li><li>Strat, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+by+which+cocoa+flavanols+improve+metabolic+syndrome+and+related+disorders.">Mechanisms by which cocoa flavanols improve metabolic syndrome and related disorders.</a> J Nutr Biochem. 35, 1-21 (2016).</li><li>Rowley, T. J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monomeric+cocoa+catechins+enhance+&#946;-cell+function+by+increasing+mitochondrial+respiration.">Monomeric cocoa catechins enhance &#946;-cell function by increasing mitochondrial respiration.</a> J Nutr Biochem. 49, 30-41 (2017).</li><li>Djafarzadeh, S., Jakob, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+Respirometry+to+Assess+Mitochondrial+Function+in+Permeabilized+and+Intact+Cells.">High-resolution Respirometry to Assess Mitochondrial Function in Permeabilized and Intact Cells.</a> J Vis Exp. (120), (2017).</li><li>Reynolds, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+deletion+of+Nr4a1+and+Nr4a3+nuclear+receptors+impedes+mitochondrial+respiration+and+insulin+secretion.">beta-Cell deletion of Nr4a1 and Nr4a3 nuclear receptors impedes mitochondrial respiration and insulin secretion.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 311 (1), E186-E201 (2016).</li><li>Hals, I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+Respiration+in+Insulin-Producing+beta-Cells:+General+Characteristics+and+Adaptive+Effects+of+Hypoxia.">Mitochondrial Respiration in Insulin-Producing beta-Cells: General Characteristics and Adaptive Effects of Hypoxia.</a> PLoS One. 10 (9), e0138558 (2015).</li><li>Ray, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nkx6.1-mediated+insulin+secretion+and+beta-cell+proliferation+is+dependent+on+upregulation+of+c-Fos.">Nkx6.1-mediated insulin secretion and beta-cell proliferation is dependent on upregulation of c-Fos.</a> FEBS Lett. 590 (12), 1791-1803 (2016).</li><li>Schisler, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+human+and+rat+islet+beta-cell+proliferation+with+retention+of+function+by+the+homeodomain+transcription+factor+Nkx6.1.">Stimulation of human and rat islet beta-cell proliferation with retention of function by the homeodomain transcription factor Nkx6.1.</a> Mol Cell Biol. 28 (10), 3465-3476 (2008).</li><li>Tessem, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nkx6.1+regulates+islet+beta-cell+proliferation+via+Nr4a1+and+Nr4a3+nuclear+receptors.">Nkx6.1 regulates islet beta-cell proliferation via Nr4a1 and Nr4a3 nuclear receptors.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (14), 5242-5247 (2014).</li><li>Hobson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aurora+Kinase+A+is+critical+for+the+Nkx6.1+mediated+beta-cell+proliferation+pathway.">Aurora Kinase A is critical for the Nkx6.1 mediated beta-cell proliferation pathway.</a> Islets. 7 (1), e1027854 (2015).</li><li>Draney, C., Hobson, A. E., Grover, S. G., Jack, B. O., Tessem, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cdk5r1+Overexpression+Induces+Primary+beta-Cell+Proliferation.">Cdk5r1 Overexpression Induces Primary beta-Cell Proliferation.</a> J Diabetes Res. 2016, 6375804 (2016).</li><li>Rouse, M., Younes, A., Egan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resveratrol+and+curcumin+enhance+pancreatic+beta-cell+function+by+inhibiting+phosphodiesterase+activity.">Resveratrol and curcumin enhance pancreatic beta-cell function by inhibiting phosphodiesterase activity.</a> J Endocrinol. 223 (2), 107-117 (2014).</li><li>Ma, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+reduces+beta-cell+mitochondria+and+induces+distinct+morphological+abnormalities,+which+are+reproducible+by+high+glucose+in+vitro+with+attendant+dysfunction.">Diabetes reduces beta-cell mitochondria and induces distinct morphological abnormalities, which are reproducible by high glucose in vitro with attendant dysfunction.</a> Islets. 4 (3), 233-242 (2012).</li><li>Chavanelle, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+high-intensity+interval+training+and+moderate-intensity+continuous+training+on+glycaemic+control+and+skeletal+muscle+mitochondrial+function+in+db/db+mice.">Effects of high-intensity interval training and moderate-intensity continuous training on glycaemic control and skeletal muscle mitochondrial function in db/db mice.</a> Sci Rep. 7 (1), 204 (2017).</li><li>Jelenik, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Insulin+Resistance+in+Primary+and+Secondary+Nonalcoholic+Fatty+Liver.">Mechanisms of Insulin Resistance in Primary and Secondary Nonalcoholic Fatty Liver.</a> Diabetes. 66 (8), 2241-2253 (2017).</li><li>Spacek, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose-stimulated+insulin+secretion+of+insulinoma+INS-1E+cells+is+associated+with+elevation+of+both+respiration+and+mitochondrial+membrane+potential.">Glucose-stimulated insulin secretion of insulinoma INS-1E cells is associated with elevation of both respiration and mitochondrial membrane potential.</a> Int J Biochem Cell Biol. 40 (8), 1522-1535 (2008).</li><li>Jezek, J., Dlaskova, A., Zelenka, J., Jaburek, M., Jezek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H2O2-Activated+Mitochondrial+Phospholipase+iPLAgamma+Prevents+Lipotoxic+Oxidative+Stress+in+Synergy+with+UCP2,+Amplifies+Signaling+via+G-Protein-Coupled+Receptor+GPR40,+and+Regulates+Insulin+Secretion+in+Pancreatic+beta-Cells.">H2O2-Activated Mitochondrial Phospholipase iPLAgamma Prevents Lipotoxic Oxidative Stress in Synergy with UCP2, Amplifies Signaling via G-Protein-Coupled Receptor GPR40, and Regulates Insulin Secretion in Pancreatic beta-Cells.</a> Antioxid Redox Signal. 23 (12), 958-972 (2015).</li><li>Johnson, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppressed+insulin+signaling+and+increased+apoptosis+in+CD38-null+islets.">Suppressed insulin signaling and increased apoptosis in CD38-null islets.</a> Diabetes. 55 (10), 2737-2746 (2006).</li></ol>

इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य बरकरार अग्नाशय बीटा कोशिकाओं में श्वसन दर को मापने के लिए उच्च संकल्प respirometry का उपयोग करने के लिए है । इस विधि में वृद्धि हुई ग्लूकोज के स्तर के लिए बीटा सेल प्रतिक्र...

अग्नाशय के बीटा कोशिका के प्राथमिक उद्देश्य ग्लूकोज प्रेरित इंसुलिन स्राव के माध्यम से प्रणाली normoglycemia बनाए रखने के लिए है. बीटा कोशिकाओं को काफी हद तक कम अपनत्व, उच्च क्षमता ग्लूकोज ट्रांसपोर्टर GLUT2 (ग्लूकोज ट्रांसपोर्टर 2, कश्मीरएम १६.७ मिमी)1के कारण परिचालित ग्लूकोज में शारीरिक परिवर्तन भावना. के रूप में संचार ग्लूकोज का स्तर वृद्धि, इस उच्च क्षमता कम आत्मीयता ट्रांसपोर्टर बीटा सेल के भीतर intracellular ग्लूकोज में एक आनुपातिक वृद्धि की सुविधा. ग्लूकोज glycogen के माध्यम से metabolized है, टीसीए चक्र (tricarboxylic एसिड चक्र) और mitochondrial श्वसन ऊंचा सेलुलर एटीपी (adenosine ट्राइफॉस्फेट) के स्तर में जिसके परिणामस्वरूप. ऊंचा एटीपी एकाग्रता ब्लॉक एटीपी संवेदनशील कश्मीर+ चैनलों, झिल्ली ध्रुवीकरण में जिसके परिणामस्वरूप. झिल्ली ध्रुवीकरण वोल्टेज gated Ca के उद्घाटन का कारण बनता है2 + चैनलों और पुटिका बाध्य इंसुलिन granules के बाद रिलीज2. बीटा कोशिका शिथिलता प्रकार की एक बानगी है 2 मधुमेह (T2D), और परिणाम में कमी आई और खराब नियंत्रित इंसुलिन स्राव और अंततः बीटा सेल मौत3. तंत्र है कि बनाए रखने या बीटा सेल समारोह में सुधार T2D के लिए एक इलाज के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है ।
अध्ययनों से अग्नाशय बीटा सेल4पर स्वाभाविक रूप से होने वाले संयंत्र आधारित यौगिकों के लाभकारी प्रभाव का प्रदर्शन किया है । इन यौगिकों बढ़ती बीटा कोशिका प्रसार, अस्तित्व, या ग्लूकोज प्रेरित इंसुलिन स्राव के माध्यम से अपने प्रभाव हो सकता है. एक उदाहरण के रूप में, हाल के अध्ययनों से प्रदर्शन किया है कि monomeric epicatechin बढ़ती mitochondrial श्वसन के माध्यम से ग्लूकोज प्रेरित इंसुलिन स्राव को बढ़ाता है और सेलुलर एटीपी स्तर में वृद्धि5. इसलिए, समझ कैसे इन यौगिकों कार्यात्मक बीटा सेल बड़े पैमाने पर वृद्धि कर सकते है इन यौगिकों संभावित चिकित्सकीय के रूप में लाभ उठाने के लिए महत्वपूर्ण है ।
सेलुलर श्वसन उपकरणों की एक संख्या के माध्यम से मापा जा सकता है । एक उच्च संकल्प आत्मशोधन का उपयोग एक permeabilized या बरकरार सेल जनसंख्या6के लिए रासायनिक संग्राहक के अनुमापन के लिए अनुमति देता है । इस उपकरण विभिंन यौगिकों के अलावा, विभिंन सांद्रता पर अनुमति देता है, इस प्रकार जानकारी की एक विस्तृत सरणी दे रही है ।
ग्लूकोज चयापचय और बीटा सेल समारोह के बीच अंतरंग संबंध को देखते हुए, सेलुलर श्वसन की माप महत्वपूर्ण हैं. सेलुलर श्वसन की माप या तो permeabilized या बरकरार बीटा कोशिकाओं का उपयोग किया जा सकता है, लाभ और कमियां7,8के अपने स्वयं के सेट होने के साथ । जबकि बीटा कोशिकाओं के permeabilization एक इलेक्ट्रॉन परिवहन श्रृंखला के विभिन्न पहलुओं को मापने के लिए अनुमति देता है, यह ऐसा करता है के बिना बीटा कोशिका, ग्लूकोज और चयापचय में श्वसन उत्प्रेरण के लिए तंत्र का संबंध है. इसलिए, unpermeabilized बीटा सेल श्वसन का उपयोग एक बहुत ही उपयोगी तकनीक को विभिंन ग्लूकोज के स्तर के लिए बीटा कोशिकाओं की प्रतिक्रिया का निर्धारण, readout के रूप में ऑक्सीजन की खपत का उपयोग कर रहा है ।
इस तकनीक का उद्देश्य बरकरार INS-1 व्युत्पंन 832/13 बीटा कोशिकाओं में ऑक्सीजन की खपत को मापने के लिए है । यह तकनीक हमें ग्लूकोज की स्थिति (२.५ mm ग्लूकोज) के साथ ही stimulatory ग्लूकोज की स्थिति (१६.७ mm ग्लूकोज) unstimulatory करने के लिए बीटा कोशिकाओं की प्रतिक्रिया निर्धारित करने की अनुमति देता है । जबकि unpermeabilized कोशिकाओं को व्यक्तिगत रूप से जटिल मैं, द्वितीय या इलेक्ट्रॉन परिवहन श्रृंखला के III परीक्षण करने की अनुमति नहीं है, तकनीक जटिल चतुर्थ निषेध के साथ काम माप की अनुमति करता है (Oligomycin एक), कुछ श्वसन (FCCP-Carbonyl साइनाइड- 4-(trifluoromethoxy) phenylhydrazone), और पूरी तरह से बाधित श्वसन (Antimycin A) । यह अध्ययन बरकरार unpermeabilized अग्नाशय बीटा कोशिकाओं में श्वसन को मापने की प्रभावकारिता को दर्शाता है, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से दो स्वाभाविक रूप से होने वाली यौगिकों के प्रभाव, monomeric epicatechin और curcumin, बीटा सेल श्वसन पर.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>O2k Core: Oxygraph-2k</td>
			<td>Oroboros Instruments</td>
			<td>10000-02</td>
			<td>Instrument for high-resolution respirometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DatLab 6 Program</td>
			<td>Oroboros Instruments</td>
			<td>27141-01</td>
			<td>Computer program for analysing high-reolution respirometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INS-1 832/13 cell line</td>
			<td>Duke University Medical Center</td>
			<td>NONE</td>
			<td>Beta cell line, gift from Dr. Christopher Newgard</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curcumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C7727</td>
			<td>Pre-treatment of beta cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocoa epicatechin monomer</td>
			<td>Virginia Polytechnic Institute and State University</td>
			<td>NONE</td>
			<td>Pre-treatment of beta cells, gift from Dr. Andrew Neilson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R8758</td>
			<td>832/13 beta cell media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30071.03</td>
			<td>832/13 beta cell media component</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4458</td>
			<td>832/13 beta cell media component</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3662</td>
			<td>832/13 beta cell media component/ 1x SAB Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine</td>
			<td>Caisson</td>
			<td>GLL01</td>
			<td>832/13 beta cell media component</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8636</td>
			<td>832/13 beta cell media component</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M3148</td>
			<td>832/13 beta cell media component</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S271</td>
			<td>Component of 10x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9541</td>
			<td>Component of 10x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5655</td>
			<td>Component of 10x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2643</td>
			<td>Component of 10x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose Solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8769</td>
			<td>Component of 1x SAB buffer, chemical for respiration assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5670</td>
			<td>Component of 1x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35% BSA Solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7979</td>
			<td>Component of 1x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Component of 1x SAB buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>459844</td>
			<td>Washing Oxygraph O2k Chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligomycin A</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>O4876</td>
			<td>Chemicals for respiration assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FCCP</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C2920</td>
			<td>Chemicals for respiration assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anitmycin A</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8674</td>
			<td>Chemicals for respiration assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BCA Protein Kit</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>23225</td>
			<td>For determining protein concentration</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-resolution respirometry to measure mitochondrial function of intact beta cells in the presence of natural compounds

उच्च संकल्प respirometry अलग mitochondria, कोशिकाओं और ऊतकों की ऑक्सीजन की खपत की माप के लिए अनुमति देता है । बीटा कोशिकाओं को उन्नत ग्लूकोज सांद्रता के जवाब में इंसुलिन स्राव के माध्यम से रक्त शर्करा के स्तर को नियंत्रित करने से शरीर में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. इंसुलिन स्राव ग्लूकोज चयापचय और mitochondrial श्वसन द्वारा नियंत्रित किया जाता है । इसलिए, बरकरार बीटा सेल श्वसन को मापने के लिए मधुमेह के लिए एक इलाज के रूप में बीटा सेल समारोह में सुधार करने में सक्षम होना आवश्यक है । बरकरार 832/13 INS-1 व्युत्पंन बीटा कोशिकाओं का उपयोग हम सेलुलर श्वसन पर ग्लूकोज एकाग्रता में वृद्धि के प्रभाव को मापने कर सकते हैं । इस प्रोटोकॉल हमें उपस्थिति या विभिंन यौगिकों की अनुपस्थिति में बीटा सेल श्वसन उपाय करने के लिए, एक बरकरार सेल श्वसन पर दिया यौगिकों के प्रभाव का निर्धारण करने की अनुमति देता है । यहाँ हम दो स्वाभाविक रूप से होने वाली यौगिकों के प्रभाव का प्रदर्शन, monomeric epicatechin और curcumin, कम (२.५ मिमी) या उच्च ग्लूकोज (१६.७ मिमी) की स्थिति की उपस्थिति के तहत बीटा सेल श्वसन पर. इस तकनीक को अलग ग्लूकोज सांद्रता की उपस्थिति में बरकरार बीटा सेल श्वसन पर विभिन्न यौगिकों के प्रभाव का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।

इन-1 832/13 बीटा कोशिकाओं है कि तैयार है और प्रोटोकॉल में वर्णित के रूप में काटा जाता है विभिंन रासायनिक हस्तक्षेप (चित्र1a) के आधार पर ऑक्सीजन की खपत में मॉडुलन प्रदर्शित करेगा । जब ग्लूकोज एकाग्?...

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High-resolution Respirometry to Measure Mitochondrial Function of Intact Beta Cells in the Presence of Natural Compounds

उच्च संकल्प respirometry का उपयोग कर बरकरार 832/13 बीटा कोशिकाओं पर प्राकृतिक यौगिकों की उपस्थिति में mitochondrial श्वसन के लिए ग्लूकोज मध्यस्थता परिवर्तन के प्रभाव को मापने के लिए इस प्रोटोकॉल का लक्ष्य है.

उच्च संकल्प Respirometry प्राकृतिक यौगिकों की उपस्थिति में बरकरार बीटा कोशिकाओं के Mitochondrial समारोह को मापने के लिए

High-resolution respirometry allows for the measurement of oxygen consumption of isolated mitochondria, cells and tissues. Beta cells play a critical role ...

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