Name: characterization and isolation of mouse primary microglia by density gradient centrifugation
Uploaded: 2018-02-16T13:30:00
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Los siguientes procedimientos han sido aprobados por el Comité de ética Animal en la Universidad de Monash. Se utilizaron ratones C57Bl6/J P3-6 de recién nacido sano para generar resultados representativos.
1. enzimática digestión
Nota: Es importante considerar la esterilidad al aislamiento y cultivo de células primarias. Y asegurando que el ambiente es tan estéril como sea posible, la disección inicial y la cosecha de cerebros murinos pueden completarse fuera...

<ol>
	<li>Volpe, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+injury+in+premature+infants:+a+complex+amalgam+of+destructive+and+developmental+disturbances+(Report).">Brain injury in premature infants: a complex amalgam of destructive and developmental disturbances (Report).</a> Lancet Neurology. 8 (1), 110 (2009).</li><li>Saliba, E., Henrot, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+Mediators+and+Neonatal+Brain+Damage.">Inflammatory Mediators and Neonatal Brain Damage.</a> Biology of the Neonate. 79 (3-4), 224-227 (2001).</li><li>Uwe-Karsten, H., Helmut, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia:+active+sensor+and+versatile+effector+cells+in+the+normal+and+pathologic+brain.">Microglia: active sensor and versatile effector cells in the normal and pathologic brain.</a> Nature Neuroscience. 10 (11), 1387 (2007).</li><li>Cherry, J. D., Olschowka, J. A., O'Banion, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroinflammation+and+M2+microglia:+the+good,+the+bad,+and+the+inflamed.">Neuroinflammation and M2 microglia: the good, the bad, and the inflamed.</a> Journal of neuroinflammation. 11, 98 (2014).</li><li>Michell-Robinson, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+microglia+in+brain+development,+tissue+maintenance+and+repair.">Roles of microglia in brain development, tissue maintenance and repair.</a> Brain. 138 (5), 1138-1159 (2015).</li><li>Guohua, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia/macrophage+polarization+dynamics+in+white+matter+after+traumatic+brain+injury.">Microglia/macrophage polarization dynamics in white matter after traumatic brain injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 33 (12), 1864 (2013).</li><li>Neumann, H., Kotter, M. R., Franklin, R. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Debris+clearance+by+microglia:+an+essential+link+between+degeneration+and+regeneration.">Debris clearance by microglia: an essential link between degeneration and regeneration.</a> Brain. 132 (2), 288-295 (2009).</li><li>Veronique, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M2+microglia+and+macrophages+drive+oligodendrocyte+differentiation+during+CNS+remyelination.">M2 microglia and macrophages drive oligodendrocyte differentiation during CNS remyelination.</a> Nature Neuroscience. 16 (9), 1211 (2013).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia/macrophage+polarization+dynamics+reveal+novel+mechanism+of+injury+expansion+after+focal+cerebral+ischemia.">Microglia/macrophage polarization dynamics reveal novel mechanism of injury expansion after focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 43 (11), 3063 (2012).</li><li>Kigerl, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+two+distinct+macrophage+subsets+with+divergent+effects+causing+either+neurotoxicity+or+regeneration+in+the+injured+mouse+spinal+cord.">Identification of two distinct macrophage subsets with divergent effects causing either neurotoxicity or regeneration in the injured mouse spinal cord.</a> The Journal of Neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 29 (43), 13435 (2009).</li><li>Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+&#945;7+nicotinic+acetylcholine+receptors+drive+a+phospholipase+C/IP3+pathway+and+modulate+the+cell+activation+toward+a+neuroprotective+role.">Microglial &#945;7 nicotinic acetylcholine receptors drive a phospholipase C/IP3 pathway and modulate the cell activation toward a neuroprotective role.</a> Journal of neuroscience research. 83, (2006).</li><li>Bedi, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+multipotent+adult+progenitor+cell+therapy+attenuates+activated+microglial/macrophage+response+and+improves+spatial+learning+after+traumatic+brain+injury.">Intravenous multipotent adult progenitor cell therapy attenuates activated microglial/macrophage response and improves spatial learning after traumatic brain injury.</a> Stem cells translational medicine. 2, (2013).</li><li>Tran, T. A., McCoy, M. K., Sporn, M. B., Tansey, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+synthetic+triterpenoid+CDDO-methyl+ester+modulates+microglial+activities,+inhibits+TNF+production,+and+provides+dopaminergic+neuroprotection.">The synthetic triterpenoid CDDO-methyl ester modulates microglial activities, inhibits TNF production, and provides dopaminergic neuroprotection.</a> Journal of neuroinflammation. 5, 14 (2008).</li><li>Gr&#252;tzkau, A., Radbruch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+but+mighty:+How+the+MACS&#174;-technology+based+on+nanosized+superparamagnetic+particles+has+helped+to+analyze+the+immune+system+within+the+last+20+years.">Small but mighty: How the MACS&#174;-technology based on nanosized superparamagnetic particles has helped to analyze the immune system within the last 20 years.</a> Cytometry Part A. 77A (7), 643-647 (2010).</li><li>Nikodemova, M., Watters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+isolation+of+live+microglia+with+preserved+phenotypes+from+adult+mouse+brain.">Efficient isolation of live microglia with preserved phenotypes from adult mouse brain.</a> Journal of Neuroinflammation. 9, 147-147 (2012).</li><li>Holt, L. M., Olsen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Applications+of+Magnetic+Cell+Sorting+to+Analyze+Cell-Type+Specific+Gene+and+Protein+Expression+in+the+Central+Nervous+System.">Novel Applications of Magnetic Cell Sorting to Analyze Cell-Type Specific Gene and Protein Expression in the Central Nervous System.</a> PLOS ONE. 11 (2), e0150290 (2016).</li><li>Leaw, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amnion+epithelial+cells+rescue+cell+death+via+immunomodulation+of+microglia+in+a+mouse+model+of+perinatal+brain+injury.">Human amnion epithelial cells rescue cell death via immunomodulation of microglia in a mouse model of perinatal brain injury.</a> Stem cell research &amp; therapy. 8 (1), 46 (2017).</li><li>Moujalled, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TDP-43+mutations+causing+amyotrophic+lateral+sclerosis+are+associated+with+altered+expression+of+RNA-binding+protein+hnRNP+K+and+affect+the+Nrf2+antioxidant+pathway.">TDP-43 mutations causing amyotrophic lateral sclerosis are associated with altered expression of RNA-binding protein hnRNP K and affect the Nrf2 antioxidant pathway.</a> Human Molecular Genetics. 26 (9), 1732-1746 (2017).</li></ol>

Microglia tienen la capacidad de ser pro - y antiinflamatoria, alterada por los estímulos del medio ambiente. Estudios anteriores han demostrado que la modulación de la activación de la microglía puede conferir neuroprotección. Su capacidad para proporcionar protección a las neuronas y reparar lesiones requiere más investigación para la comprensión actual de estas células complejas. Así, aislamiento de alta pureza primaria microglia es una técnica importante y útil. Este es un método relativamente rápido p...

Daño adquirido durante el período de inflamación, hipoxia isquemia y hemorragia perinatal puede tener una serie de secuelas a largo plazo. La teoría de la compleja Fisiopatología de la lesión cerebral perinatal es involucrar a la inflamación y la isquemia con posterior muerte neuronal y axonal1. La respuesta inmunitaria innata desempeña un papel importante en la cascada de eventos que llevan a lesión2.
Microglia, las células inmunes residentes en sistema nervioso central (SNC), son los primeros respondientes a lesiones3. Microglia son tipos de células de plástico con capacidad de ser protector o tóxico, dependiente en el medio ambiente4. Están involucrados en la quimiotaxis, fagocitosis, presentación del antígeno y la producción de citocinas y especies de oxígeno reactivo4,5. Microglia senescente constantemente encuesta sobre el medio ambiente y se activan por la presencia de una sustancia perjudicial o extranjeros4. La activación conduce a una respuesta proinflamatoria, crítica en el CNS protección4. Estos M1 "inflamatorias" fenotipo microglia participan principalmente en la presentación del antígeno y la muerte de patógenos4. A pesar del papel crucial de la respuesta inflamatoria en la neuroprotección, inflamación incontrolada o prolongada puede ser perjudicial y conducir a daño neuronal4. Sin embargo, cuando se expone a ciertos estímulos ambientales, microglia puede exhibir un fenotipo antiinflamatorio. Estos pro-reparadora microglia M2 tienen un papel fundamental en la cicatrización de heridas y reparación6, lanzando una gama de citoquinas y otros mediadores solubles que regular a la baja la inflamación, aumentan la fagocitosis y promover la reparación de4, 7. los papeles de microglia son diversos e incluyen diferenciación de oligodendrocyte conducción durante re-mielinización8, protegiendo las neuronas durante la depleción de oxígeno y glucosa en tiempos modelos9 y promoción de la consecuencia del neurite en 10los modelos de lesión de la médula espinal.
El estudio de estas células gliales representa un aspecto importante en la comprensión y manipulación de la respuesta a la neuroinflamación. El protocolo descrito permite más investigación sobre el potencial terapéutico de la modulación de la microglia en afecciones capensis.
La modulación de la activación microglial hacia un papel neuroprotector se ha observado en una amplia gama de condiciones11,12,13. Por lo tanto, mejorar la comprensión actual y estudiar más la modulación de la activación microglial es crítica, que requieren el uso de varios modelos, incluyendo tanto in vitro como in vivo. In vitro los estudios representan una herramienta importante debido a su mayor eficiencia, menor costo y su capacidad para investigar una población aislada de la célula.
Hay una gama de protocolos descritos en la literatura para el aislamiento de la microglia del cerebro murino, el desafío de producir eficientemente una muestra de alto rendimiento con buena viabilidad y pureza elevada. Utilizado métodos de aislamiento de microglia primaria son por separación magnética y prolongado temblor de cultivos gliales mixtos. A través de la experiencia personal, se encontró que existía un alto grado de desechos celulares que obstruyó la columna magnética. Por lo tanto, se utilizó el siguiente protocolo, que incorpora un paso de centrifugación del gradiente de densidad inicial seguido por la separación magnética de CD11b. El protocolo que se describe a continuación ha sido optimizado para producir una muestra muy pura en cantidad suficiente. Es ventajoso debido a su alta pureza y el corto período de tiempo, uno puede realizar análisis dentro de 2 días sin tener a la cultura durante 2-3 semanas. Potencialmente se puede adaptar este protocolo para el aislamiento de astrocitos murinos primarios.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="929">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">DMEM, low glucose, pyruvate</td>
			<td style="width:133px;">Gibco</td>
			<td style="width:344px;">11885084</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Antibiotic-Antimycotic (100X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">DNaseI grade II from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10104159001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Papain from papaya latex, buffered aqeuous solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3125-100mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Fetal Bovine Serum, qualified, heat inactivated</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16140071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Percoll</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Hank&#39;s Balanced Salt Solution (1X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14175-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Hank&#39;s Balanced Salt Solution (10X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14185052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">EasySep Mouse CD11b Positive Selection Kit</td>
			<td>StemCell Technologies</td>
			<td>18770</td>
			<td>EasySep magnet variant</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">EasySep magnet</td>
			<td>StemCell Technologies</td>
			<td>18000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">EasySep Buffer</td>
			<td>StemCell Technologies</td>
			<td>20144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Dulbecco&#39;s Phosphate buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14040182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Trypsin (2.5%) (10X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15090-046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 (Mouse BD Fc Block&#8482;)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Falcon 5mL Round Bottom High Clarity PP Test Tube, with Snap Cap, Sterile</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">175cm&#178; Angled Neck Cell Culture Flask with Vent Cap</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Lipopolysaccharides from Escherichia coli O127:B8</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L5024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">96 Well TC-Treated Microplates size 96 wells, clear, polystyrene, round bottom</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Paraformaldehyde (powder, 95%)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Triton-X</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">Rabbit Anti-Iba1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>01919741&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Goat Anti-Rabbit IgG H&#38;L (Alexa Fluor 488)</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">FACS Antibodies</td>
			<td style="width:133px;">Company</td>
			<td style="width:344px;">Catalog Number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">V450,Rat,Anti-Mouse,CD45,30-F11,RUO</td>
			<td style="width:133px;">BD Biosciences</td>
			<td>560501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">PerCP-Cy5.5 CD11b&#160;</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>45-0112-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:285px;">ZombieNIR</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>423105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">pHrodo Red E. coli BioParticles Conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>P35361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Annexin.V_FITC</td>
			<td>Miltenyi Biotech</td>
			<td>130-093-060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Propodium Iodide solution</td>
			<td>Miltenyi Biotech</td>
			<td>130-093-233</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

characterization and isolation of mouse primary microglia by density gradient centrifugation

Microglia, las células inmunes residentes en el cerebro, son los primeros respondientes a los inflamación o lesiones en el sistema nervioso central. La investigación reciente ha revelado microglia a ser dinámico, capaz de asumir fenotipos pro inflamatorias y antiinflamatorios. Tanto M1 (pro inflamatorio) y M2 fenotipos (pro-reparadora) juego un papel importante en capensis condiciones tales como lesión cerebral perinatal y exposición de diferentes funciones en respuesta a ciertos estímulos ambientales. La modulación de la activación microglial se ha observado para conferir neuroprotección así sugiriendo la microglía puede tener potencial terapéutico en el daño cerebral. Sin embargo, se requiere más investigación para comprender mejor el papel de la microglia en la enfermedad, y este protocolo facilita. El protocolo describe a continuación combina un proceso de centrifugación del gradiente de densidad para reducir desechos celulares, con separación magnética, produciendo una muestra muy pura de las células microgliales primaria que pueden utilizarse para la experimentación in vitro , sin la necesidad de 2 a 3 semanas de cultivo. Además, los pasos de caracterización rendimiento robustos datos funcionales sobre la microglia, ayudando a los estudios para mejorar nuestra comprensión de la polarización y cebado de estas células, que tiene fuertes implicaciones en el campo de la medicina regenerativa.

Utilizando los métodos descritos aquí, poblaciones puras de microglia pueden ser aisladas y pueden estar listas para la caracterización mediante el análisis FACS y en vitro . Con 18 animales se pueden utilizar hasta por cull, con un rendimiento esperado de aproximadamente 450.000-600.000 las células microgliales. Es crucial confirmar primero la pureza de las células aisladas, y para ello análisis FACS fue realizada por la coloración de los dos marcadores CD45 y CD11b. ide...

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Characterization and Isolation of Mouse Primary Microglia by Density Gradient Centrifugation

Caracterización y aislamiento de Microglia primarios de ratón por centrifugación de gradiente de densidad

Se presenta un protocolo para el aislamiento de primaria microglia del cerebro murino. Esta técnica ayuda a promover la comprensión actual de condiciones neurológicas. Centrifugación de gradiente de densidad y separación magnética se combinan para producir suficiente rendimiento de una muestra muy pura. Además, describiremos los pasos para la caracterización de la microglia.

Microglia, the resident immune cells in the brain, are the first responders to inflammation or injury in the central nervous system. Recent research has ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient

Preparación de Synaptoneurosomes de ratón con una corteza discontinua de Percoll-sacarosa gradiente de densidad

Synaptoneurosomes (SNs) are obtained after homogenization and fractionation of mouse brain cortex. They are resealed vesicles or isolated terminals that ...

Investigación

Neurociencias

Preparation of Synaptic Plasma Membrane and Postsynaptic Density Proteins Using a Discontinuous Sucrose Gradient

Preparación de sináptica Membrana plasmática y proteínas postsináptica densidad utilizando un gradiente discontinuo de sacarosa

Neuronal subcellular fractionation techniques allow the quantification of proteins that are trafficked to and from the synapse. As originally described in ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Baja densidad primaria del hipocampo Neurona Cultura

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility

El aislamiento magnético rápida y refinado CD11b de la microglia primaria con mayor pureza y versatilidad

Microglia are the primary responders to central nervous system insults; however, much remains unknown about their role in regulating neuroinflammation. ...

Isolation and RNA Extraction of Neurons, Macrophages and Microglia from Larval Zebrafish Brains

Aislamiento y extracción de ARN de las neuronas, macrófagos y Microglia de cerebros de larvas de pez cebra

To gain a detailed understanding of the role of different CNS cells during development or the establishment and progression of brain pathologies, it is ...

Rapid and Specific Immunomagnetic Isolation of Mouse Primary Oligodendrocytes

Aislamiento Inmunomagnética rápida y específica de los oligodendrocitos primarios de ratón

The efficient and robust isolation and culture of primary oligodendrocytes (OLs) is a valuable tool for the in vitro study of the development of ...

Isolation of Region-specific Microglia from One Adult Mouse Brain Hemisphere for Deep Single-cell RNA Sequencing

Aislamiento de microglia específica de la región del hemisferio cerebral de un ratón adulto para la secuenciación profunda del ARN de una sola célula

As resident macrophages in the central nervous system, microglia actively control brain development and homeostasis, and their dysfunctions may drive ...

Magnetic Isolation of Microglial Cells from Neonate Mouse for Primary Cell Cultures

Aislamiento magnético de células microgliales de ratones neonatos para cultivos celulares primarios

Microglia, as brain resident macrophages, are fundamental to several functions, including response to environmental stress and brain homeostasis. ...

Primary Cultures of Rat Astrocytes and Microglia and Their Use in the Study of Amyotrophic Lateral Sclerosis

Cultivos primarios de astrocitos de rata y microglia y su uso en el estudio de la esclerosis lateral amiotrófica

This protocol demonstrates how to prepare primary cultures of glial cells, astrocytes, and microglia from the cortices of Sprague Dawley rats and how to ...

Isolation of Mouse Primary Microglia by Magnetic-Activated Cell Sorting in Animal Models of Demyelination

Aislamiento de la microglía primaria del ratón mediante clasificación celular activada magnéticamente en modelos animales de desmielinización

Microglia, the resident innate immune cells in the brain, are the primary responders to inflammation or injury in the central nervous system (CNS). ...