Name: a protocol for laboratory housing of turquoise killifish (nothobranchius furzeri)
Uploaded: 2018-04-11T14:00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri at JoVE.com

Мы благодарим Alessandro Cellerino, Тайрон Genade, Энн Брюне, Сабрина Sharp, Микки Пауэлл, Симоне Keil, Юми Ким, Патрик Смит, Кай Mathar и всех членов Валенцано лаборатории в институте Макса Планка по биологии старения за вклад в различные аспекты текущего протокола животноводства Пецилиевые рыбы с годами.

<ol>
	<li>Valenzano, D. R., Aboobaker, A., Seluanov, A., Gorbunova, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-canonical+aging+model+systems+and+why+we+need+them.">Non-canonical aging model systems and why we need them.</a> EMBO J. 36 (8), 959-963 (2017).</li><li>Harel, I., Brunet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+African+Turquoise+Killifish:+A+Model+for+Exploring+Vertebrate+Aging+and+Diseases+in+the+Fast+Lane.">The African Turquoise Killifish: A Model for Exploring Vertebrate Aging and Diseases in the Fast Lane.</a> Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 80, 275-279 (2015).</li><li>Smith, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+life+span+by+the+gut+microbiota+in+the+short-lived+African+turquoise+killifish.">Regulation of life span by the gut microbiota in the short-lived African turquoise killifish.</a> Elife. 6, (2017).</li><li>Cellerino, A., Valenzano, D. R., Reichard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+the+bush+to+the+bench:+the+annual+Nothobranchius+fishes+as+a+new+model+system+in+biology.">From the bush to the bench: the annual Nothobranchius fishes as a new model system in biology.</a> Biol Rev Camb Philos Soc. 91 (2), 511-533 (2016).</li><li>Kim, Y., Nam, H. G., Valenzano, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+short-lived+African+turquoise+killifish:+an+emerging+experimental+model+for+ageing.">The short-lived African turquoise killifish: an emerging experimental model for ageing.</a> Dis Model Mech. 9 (2), 115-129 (2016).</li><li>Blazek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+intraspecific+divergence+in+life+span+and+aging+of+African+annual+fishes+along+an+aridity+gradient.">Repeated intraspecific divergence in life span and aging of African annual fishes along an aridity gradient.</a> Evolution. 71 (2), 386-402 (2017).</li><li>Terzibasi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+differences+in+aging+phenotype+between+strains+of+the+short-lived+annual+fish+Nothobranchius+furzeri.">Large differences in aging phenotype between strains of the short-lived annual fish Nothobranchius furzeri.</a> PLoS One. 3 (12), e3866 (2008).</li><li>Kirschner, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+of+quantitative+trait+loci+controlling+lifespan+in+the+short-lived+fish+Nothobranchius+furzeri--a+new+vertebrate+model+for+age+research.">Mapping of quantitative trait loci controlling lifespan in the short-lived fish Nothobranchius furzeri--a new vertebrate model for age research.</a> Aging Cell. 11 (2), 252-261 (2012).</li><li>Valenzano, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+loci+associated+with+tail+color+and+sex+determination+in+the+short-lived+fish+Nothobranchius+furzeri.">Mapping loci associated with tail color and sex determination in the short-lived fish Nothobranchius furzeri.</a> Genetics. 183 (4), 1385-1395 (2009).</li><li>Reichwald, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+Sex+Chromosome+Evolution+and+Aging+from+the+Genome+of+a+Short-Lived+Fish.">Insights into Sex Chromosome Evolution and Aging from the Genome of a Short-Lived Fish.</a> Cell. 163 (6), 1527-1538 (2015).</li><li>Valenzano, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+African+Turquoise+Killifish+Genome+Provides+Insights+into+Evolution+and+Genetic+Architecture+of+Lifespan.">The African Turquoise Killifish Genome Provides Insights into Evolution and Genetic Architecture of Lifespan.</a> Cell. 163 (6), 1539-1554 (2015).</li><li>Harel, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+platform+for+rapid+exploration+of+aging+and+diseases+in+a+naturally+short-lived+vertebrate.">A platform for rapid exploration of aging and diseases in a naturally short-lived vertebrate.</a> Cell. 160 (5), 1013-1026 (2015).</li><li>Valenzano, D. R., Sharp, S., Brunet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transposon-Mediated+Transgenesis+in+the+Short-Lived+African+Killifish+Nothobranchius+furzeri,+a+Vertebrate+Model+for+Aging.">Transposon-Mediated Transgenesis in the Short-Lived African Killifish Nothobranchius furzeri, a Vertebrate Model for Aging.</a> G3. 1 (7), 531-538 (2011).</li><li>Harel, I., Valenzano, D. R., Brunet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+genome+engineering+approaches+for+the+short-lived+African+turquoise+killifish.">Efficient genome engineering approaches for the short-lived African turquoise killifish.</a> Nat Protoc. 11 (10), 2010-2028 (2016).</li><li>Polacik, M., Blazek, R., Reichard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+breeding+of+the+short-lived+annual+killifish+Nothobranchius+furzeri.">Laboratory breeding of the short-lived annual killifish Nothobranchius furzeri.</a> Nat Protoc. 11 (8), 1396-1413 (2016).</li><li>Avdesh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regular+care+and+maintenance+of+a+zebrafish+(Danio+rerio)+laboratory:+an+introduction.">Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction.</a> J Vis Exp. (69), e4196 (2012).</li></ol>

Все авторы заявить не конкурирующие интересы финансовых и нефинансовых.

Мы описываем протокол для лабораторных культивирование бирюзовый Пецилиевые рыбы, включая коллекции эмбриона, инкубаторов, а также взрослых рыб жилья, разведения и кормления. Наш протокол предназначен для лабораторий, которые проводят исследования сосредоточены на взрослых рыб, в частности для экспериментальных исследований по вопросам старения и продолжительность жизни. Бирюзовый Пецилиевые рыбы может быть поднят на стандартный данио рерио фонда; Однако важные аспекты разведения Пецилиевые рыбы отличаются от стандартных данио рерио ухода16. Эти изменения включают скорейшего перехода от артемии только диеты диеты дополнена богатой белком крови червя, а также конкретные шаги в инкубации эмбрион, состоящий из жидких и сухих инкубации стадии.
Важнейшие шаги в рамках Протокола включают доставку эмбрионов в диапазоне температур 8-30 ° C. При разведении, плодовитость зависит от питания Частота и качество продуктов питания; Поэтому мы рекомендуем по крайней мере два кормлений в день на разведение емкость для повышения доходности эмбрионов (см. раздел 5.6). Во время отбеливания эмбриона, не распространяется инкубации зародыш в отбеливающий раствор. Это может привести к повреждению яйцо хориона и смертности рост эмбриона. При инкубации эмбрионов с метиленовым синим, не затягивать инкубации готов к Люк эмбрионы дольше, чем 2 недели, как их жизнеспособность будет резко сокращено. Для штриховки бирюзовый Пецилиевые рыбы, низкая температура гуминовые кислоты раствор улучшает штриховки и полное погружение эмбрионов в решении позволяет синхронизированные штриховкой. Не достаточно аэрации во время инкубации результаты в высоких темпов СРЮ не в состоянии заполнить газового пузыря («живот слайдер» фенотипа, см в разделе 5.1).
Ограничение, накладываемое протоколом для разведения включает в себя использование песка субстрата, который создает проблемы для централизованной системы фильтрации и должны быть заменены альтернативными методами в будущем. Возможных вариантов может быть использование данио рерио Животноводство танков. Эмбрион отбеливание может вызвать основных физико химических изменений в яйцо Хорио, которая может привести к измененным Хорион физиологии и инкубационные успех. Постоянное воздействие эмбрионов Метиленовый синий может вызывать долгосрочные изменения в физиологии взрослых рыб. Повышение взрослых рыб в отдельные емкости для выживания когортных исследований может негативно сказаться на поведение рыб и здоровье. Однако Группа жилье для выживания когортных исследований добавляет значительные отягощающих факторов благодаря созданию социального господства и мужской территорий, ведущих к строгим социальной иерархии. Таким образом мы оцениваем, что изоляция мужчин рыбы для выживания исследования является разумным компромиссом. Питание лаборатории Пецилиевые рыбы колоний с живой пищи от ООН контролируемых источников добавлять риск для внешних загрязнений от паразитов и потенциально патогенных микробных сообществ. В будущем должны разрабатываться канал специальных стерильных рыбы.
Будущего совершенствования этот протокол будет сосредоточена на диете управляемой, не живут, который по-прежнему приводит к завершению полового созревания в течение 3-4 недель. В целом наш протокол предлагает доступ к бирюзовой Пецилиевые рыбы Лаборатория культивирования к широким научным сообществом.

Учитывая короткий промежуток жизни и быстрого жизненного цикла, бирюзовый Пецилиевые рыбы быстро растут как многообещающие новые модели организм в биологии1,2,3. Этот вид характеризуется уникальным жизненного цикла для костистых, состоящий из Эмбриональная диапауза, быстрого полового созревания и продлила жизнь продуктивного этапа4,5. Недавняя работа способствовала изучение биологии этого вида, как в неволе, так и в диких6,7. Бирюзовый Пецилиевые рыбы живут в сезонных пресноводных водоемах формы во время сезона дождей в Африканской Саванны в Зимбабве и Мозамбике. Во время сухого сезона эмбрионы выжить в сухой грязи в отсутствие воды силу стресс устойчивостью жизни этап, называемый диапаузу.
Генетические карты для этого вида были созданные8,9, и недавно их геном была последовательной и собран в10,11. Были разработаны несколько инбредных лаборатории рыбы штаммов, и трансгенез и геном редактирования через ТРИФОСФАТЫ/Cas9 стали доступны в этот вид, де-факто содействие бирюзовый Пецилиевые рыбы как конкурентоспособной Лаборатория позвоночных модельный организм 12,,1314.
Хотя протокол лабораторных уже опубликован для этого вида15, в настоящем протоколе мы разрабатываем полный перечень руководящих принципов экспериментальной лаборатории, которые специально направлены на исследования, которые расследуют старения и выживания. Настоящий Протокол позволяет исследователям уже знакомы с данио рерио и оризии стать разбираются в животноводстве бирюзовый Пецилиевые рыбы, приняв минимальное количество основных корректировок. В то же время этот протокол обеспечивает исследователей без предварительного опыта в животноводстве рыбы с необходимыми инструментами для повышения процветающей колонии бирюзовый Пецилиевые рыбы.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Probe calibration buffer solution pH=7.0</td>
			<td>Roth</td>
			<td>A518.1</td>
			<td>1L buffer solution pH=7.0 to calibrate water system pH-electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Probe calibration buffer solution pH=4.0</td>
			<td>Roth</td>
			<td>P712.1</td>
			<td>1L buffer solution pH=4.0 to calibrate water system pH-electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conductivity standard</td>
			<td>VWR</td>
			<td>83607.260</td>
			<td>500 mL Conductivity standard 1,413 uS/cm to calibrate water system conductivity-electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Easy Strips Test 6in1</td>
			<td>JBL</td>
			<td>2533900</td>
			<td>Test strips for determination chlorine values of system water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia Test</td>
			<td>JBL</td>
			<td>2536500</td>
			<td>Test to determine ammonia content of system water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Sea Salt</td>
			<td>Red Sea</td>
			<td></td>
			<td>22 kg bucket</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydrogen carbonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>27780.360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humic acid</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>53680-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>New HUFA Artemia enrichment</td>
			<td>ZM Systems UK</td>
			<td></td>
			<td>75g bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene blue</td>
			<td>Roth</td>
			<td>AE64.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>31642-1L</td>
			<td>30% (w/w)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cononut fiber</td>
			<td>Dragon</td>
			<td>ZCS010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman paper</td>
			<td>GE healthcare</td>
			<td>3030-690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol pure</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20821.467</td>
			<td>100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica sand</td>
			<td>local pet shop</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artemia Eggs Premium Grade</td>
			<td>Sanders</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bloodworm</td>
			<td>local distributor</td>
			<td></td>
			<td>Poseidon Aquakultur Germany</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTPs solution mix</td>
			<td>Biolabs</td>
			<td>N04472</td>
			<td>10mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taq DNA polymerase</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18038-042</td>
			<td>5U/uL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCR 10x Buffer</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18038-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18038-042</td>
			<td>50mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>S8045-500g</td>
			<td>50mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl, pH=8.0 solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>T2694-1L</td>
			<td>1M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl 37%</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>H1758-500mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquatic housing system</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td></td>
			<td>Central filtration equipped aquatic system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish tanks</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td></td>
			<td>volume: 0.8L, 2.8L, 9.5L; equipped with baffles, fry mesh and lids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89032-100</td>
			<td>model 5000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microbiological incubator</td>
			<td>Thermo Scientific, Heratherm</td>
			<td>50125882</td>
			<td>model IMC18; for storage embryos in the liquid phase, set to t=27-28&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooling Incubator</td>
			<td>Binder</td>
			<td>9020-0209</td>
			<td>model KT115; for storage embryos in the solid phase, set to t=27-28&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hatching incubator</td>
			<td>Thermo Scientific, Heratherm</td>
			<td>51028114</td>
			<td>model OGS180; for embryos hatching, set to t=27-28&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>model M80</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breeding sand/hatching boxes</td>
			<td>Roth</td>
			<td>1598.1</td>
			<td>1000mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1473</td>
			<td>92x16mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL Conical tube</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL Conical tube</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Plastic Pasteur pipette</td>
			<td>Roth</td>
			<td>EA71.1</td>
			<td>2mL; For fish feeding with bloodworms, or embryos selection cut off the tip to open 3-4mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipette</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>86.1689.001</td>
			<td>50mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Henke Sass Wolf</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td>10mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal strainer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>fineness &#60;1mm; for embryos collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>0508-5/45-PO</td>
			<td>type5/45; for embryos transfer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25L Brine shrimps hatcher</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>ZHBS25</td>
			<td>main hatcher</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500mL Brine shrimps hatcher</td>
			<td>JBL</td>
			<td>6106100</td>
			<td>model Artemio 1; backuo hatcher</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow-mesh fish nets</td>
			<td>JBL</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sand beaker</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BURK7102-5000</td>
			<td>5000mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brine shrimps separation beaker</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BURK7102-2000</td>
			<td>2000mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic zipper bag</td>
			<td>Roth</td>
			<td>P279.2</td>
			<td>for dead fish storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetboy</td>
			<td>Integra</td>
			<td>155000</td>
			<td>model Pipetboy acu2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>P-Lab</td>
			<td>P701605</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air tubing</td>
			<td>www.zajac.de</td>
			<td>AQ380</td>
			<td>4-6 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1L Glass bottle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>215-1595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2L Glass bottle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>215-1596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500mL Squeeze bottle</td>
			<td>Roth</td>
			<td>K665.1</td>
			<td>for fish feeding with brine shrimps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>120 micron brine shrimps strainer</td>
			<td>Florida Aqua Farms</td>
			<td>BB-PC2</td>
			<td>for brine shrimps/bloodworm collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Finish filter socks</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>MFVB025C</td>
			<td>25 micron</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Central filtration fish housing system</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Aquaneering, Techniplast, Aquatic Habitats, Aqua Schwarz</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for laboratory housing of turquoise killifish (nothobranchius furzeri)

Развитие практики земледелия в лаборатории-модель рыб, используемых для экспериментальных целей извлекла большую пользу из создания ссылок рыбы модели систем, таких как данио рерио и оризии. В последние годы возникающих рыбы – бирюзовый Пецилиевые рыбы (Nothobranchius furzeri) – была принята растущее количество исследовательских групп в областях биологии старения и экологии. С неволе продолжительность жизни 4-8 месяцев этот вид shortest-lived позвоночных, поднятые в неволе и позволяет научное сообщество теста – в короткое время – экспериментальных мероприятий, которые могут привести к изменению скорости старения и продолжительность жизни. Учитывая уникальный биологии этого вида, характеризуется Эмбриональная диапауза, взрывных полового созревания, отмеченные морфологических и поведенческих половой диморфизм - и их сравнительно короткий взрослой жизни - ad hoc земледелия практики находятся в срочных спроса. Этот протокол сообщает набор ключевых животноводства мер, которые позволяют оптимальное бирюзовый Пецилиевые рыбы уход лаборатории, позволяя научное сообщество принять этот вид как модель мощного лабораторных животных.

Бирюзовый Пецилиевые рыбы правильного хозяйствования приводит медиана выживаемости колеблется от 12-18 недель в ГРЗ деформации (например, рис. 4A). Вариации медиана выживаемости зависит от диеты, частота кормления и жилищных условий температуры. Результаты бедных животноводства в кривых выживания представляя более ранней смертности и повторяющихся, внезапных капель выживание на протяжении времени, характеризуется несколько точек перегиба (рис. 4B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57073/57073fig1.jpg"> Рисунок 1: представитель эмбриональной стадии развития с соответствующими инкубации субстрата. (A) свеже собранных эмбрионов, инкубировали в раствор метиленового синего в инкубаторе на 28 ° C. (B) эмбрионов, готовы к переходу на твердом носителе, либо фильтр бумага или кокосового волокна. (C) эмбрионов готовы быть вылупились, отображение типичных Золотой ирисов. Линейки шкалы равно 1 мм. <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57073/57073fig1large.jpg" target="_blank">пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57073/57073fig2.jpg"> Рисунок 2: этапы бирюзовый Пецилиевые рыбы после инкубационного развития. <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57073/57073fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57073/57073fig3.jpg"> Рисунок 3: представитель рыбы ID тега для рыб от стадии 3 года. <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57073/57073fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57073/57073fig4.jpg"> Рисунок 4: представитель выживания кривой для 70 мужчин бирюзовый Пецилиевые рыбы. (A) типичными выживания кривая для лаборатории рейз бирюзовый Пецилиевые рыбы. (B) Сравнение кривых выживания, полученных из рыбы, поднятые в условиях оптимального земледелия (черный) и бедных животноводства (красный и синий). Пунктирная красная горизонтальная линия показывает 50% выживания, пересекающихся кривая выживания на средний срок (указан на оси x). <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57073/57073fig4large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>ID</td>
			<td colspan="2">Форвард грунтовка</td>
			<td colspan="2">Обратный грунтовка</td>
			<td>Размер диапазона (bp)</td>
		</tr>
<tr>
<td>* NfuSU0007</td>
			<td colspan="2">GGCTAAGCCTTGCTGACAGA</td>
			<td colspan="2">CAGGGAGCTGAAAACCTCAG</td>
			<td>166 - 214</td>
		</tr>
<tr>
<td>* NfuSU0010</td>
			<td colspan="2">CGCAGTCTGATCAAATCGTGT</td>
			<td colspan="2">TGTTTGAAGGTTCACATTCATTATC</td>
			<td>220 - 272</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0016</td>
			<td colspan="2">CATGGCTAAACCGTGATGAA</td>
			<td colspan="2">GAAGGACGCCAGCTATGAAG</td>
			<td>209 - 240</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0022</td>
			<td colspan="2">AACACAGCTCTCGTAAGGAGGTA</td>
			<td colspan="2">TTCAGACTTGTCTTACTACCATGTTT</td>
			<td>198 - 238</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0027</td>
			<td colspan="2">TCCAGCTGAATCGGTAATGA</td>
			<td colspan="2">AAACTCGAGGGTGCAATCTG</td>
			<td>164 - 226</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0049</td>
			<td colspan="2">CTGGACAAAGTGCCAATCAC</td>
			<td colspan="2">CTCCCACAGTCCCAAAACAT</td>
			<td>196 - 197</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0050</td>
			<td colspan="2">CCAGAATGAACAATACTCAGATCAA</td>
			<td colspan="2">GCAGCTTAGTTTAATGATATCACAATG</td>
			<td>252 - 295</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuSU0060</td>
			<td colspan="2">CTAGCCACTCCCCTGGTTTA</td>
			<td colspan="2">CCGTCACGATGTGCTGATAC</td>
			<td>216 - 248</td>
		</tr>
<tr>
<td>NfuFLI0030</td>
			<td colspan="2">CAGAAGCTAAAGGCCAGACG</td>
			<td colspan="2">GGGAAACAATAGGGAACCAC</td>
			<td>174 - 205</td>
		</tr>
<tr>
<td>* NfuFLI0091</td>
			<td colspan="2">ACGCTGACTCTACCCAGTC</td>
			<td colspan="2">CTGCCTGCTACTGACAATG</td>
			<td>355 - 373</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">* - секс определение маркеров</td>
		</tr>
</tbody></table>Таблица 1: Генотипирования Праймеры для идентификации напряжения.

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri at JoVE.com

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

Лаборатория корпус из бирюзы, которую Пецилиевые рыбы может масштабироваться до дома и эффективно поднять тысячи отдельных рыб в централизованной воды система фильтрации, используя ту же инфраструктуру, используемые для стандартных данио рерио зал. Здесь мы подробно список стандартизированных процедур, которые позволяют эффективно Пецилиевые рыбы обслуживания.

Протокол для лабораторных жилья из бирюзы Пецилиевые рыбы (Nothobranchius furzeri)

The development of husbandry practices in non-model laboratory fish used for experimental purposes has greatly benefited from the establishment of ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish (Nothobranchius furzeri)

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

Протокол Mosquito воспитание (А. gambiae)

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Neutrophil Isolation Protocol

Нейтрофилов Изоляция протокола

Neutrophil polymorphonuclear granulocytes (PMN) are the most abundant leukocytes in humans and among the first cells to arrive on the site of inflammatory ...

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia (SCG)

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG

Протокол для культивирования симпатических нейронов крысы из верхних шейных ганглиев (SCG)

The superior cervical ganglia (SCG) in rats are small, glossy, almond-shaped structures that contain sympathetic neurons.  These neurons provide ...

A Protocol for the Production of KLRG1 Tetramer

Протокол Производство KLRG1 тетрамер

Killer cell lectin-like receptor G1 (KLRG1) is a type II transmembrane glycoprotein inhibitory receptor belonging to the C type lectin-like superfamily. ...

A Protocol for Computer-Based Protein Structure and Function Prediction

Протокол для компьютерных Структура белка и функции прогнозирования

Genome sequencing projects have ciphered millions of protein sequence, which require knowledge of their structure and function to improve the ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Регулярный уход и обслуживание данио рерио (<em&gt; Данио рерио</em&gt;) Лаборатория: введение

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

A Protocol for Phage Display and Affinity Selection Using Recombinant Protein Baits

Протокол для фагов и Affinity выделение с помощью рекомбинантного белка Приманки

Using  recombinant phage as a scaffold to present various protein portions encoded by  a directionally cloned cDNA library to immobilized bait molecules ...

SIVQ-LCM Protocol for the ArcturusXT Instrument

SIVQ-НОК Протокол о ArcturusXT инструмент

SIVQ-LCM is a new methodology that automates and streamlines the more traditional, user-dependent laser dissection process.&#160;It aims to create an ...

Laboratory Protocol for Genetic Gut Content Analyses of Aquatic Macroinvertebrates Using Group-specific rDNA Primers

Лаборатория протокол для генетических кишки содержание анализа водных макробеспозвоночных использование конкретных групп рДНК грунтовки

Analyzing food webs is essential for a better understanding of ecosystems. For example, food web interactions can undergo severe changes caused by the ...