Name: 2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)
Uploaded: 2018-11-29T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum at JoVE.com

हम कैसपर्सकी Hansen, विज्ञान के लिए संस्थान, आर्हस विश्वविद्यालय के लिए पहुंच प्रदान करने और 3 डी echocardiographic अधिग्रहण के लिए इलेक्ट्रॉनिक micromanipulator के साथ सहायता के लिए स्वीकार करना चाहते हैं ।

इस प्रोटोकॉल में किए गए प्रक्रियाओं की देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग के लिए राष्ट्रीय डेनिश कानून के साथ अनुसार थे और प्रयोगों डेनिश राष्ट्रीय पशु प्रयोगों निरीक्षणालय (प्रोटोकॉल # 2015-15-0201-00615) द्व?...

<ol>
	<li>Forouzanfar, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+Global+Burden+of+Ischemic+Heart+Disease.">Assessing the Global Burden of Ischemic Heart Disease.</a> Glob. Heart. 7, 331-342 (2012).</li><li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2014+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2014 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 129, e28-e292 (2014).</li><li>Leferovich, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+adult+MRL+mice.">Heart regeneration in adult MRL mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98, 9830-9835 (2001).</li><li>Leferovich, J. M., Heber-Katz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+scarless+heart.">The scarless heart.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 13, 327-333 (2002).</li><li>Nakada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+induces+heart+regeneration+in+adult+mice.">Hypoxia induces heart regeneration in adult mice.</a> Nature. 541, 222-227 (2017).</li><li>Poss, K. D., Wilson, L. G., Keating, M. 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Genet. 29, 611-620 (2013).</li><li>Gonzalez-Rosa, J. M., Martin, V., Peralta, M., Torres, M., Mercader, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+scar+formation+and+regression+during+heart+regeneration+after+cryoinjury+in+zebrafish.">Extensive scar formation and regression during heart regeneration after cryoinjury in zebrafish.</a> Development. 138, 1663-1674 (2011).</li><li>Schnabel, K., Wu, C. C., Kurth, T., Weidinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+cryoinjury+induced+necrotic+heart+lesions+in+zebrafish+is+associated+with+epicardial+activation+and+cardiomyocyte+proliferation.">Regeneration of cryoinjury induced necrotic heart lesions in zebrafish is associated with epicardial activation and cardiomyocyte proliferation.</a> PLoS One. 6 (4), e18503 (2011).</li><li>Oberpriller, J. O., Oberpriller, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+adult+newt+ventricle+to+injury.">Response of the adult newt ventricle to injury.</a> J. Exp. Zool. 187, 249-260 (1974).</li><li>Witman, N., Murtuza, B., Davis, B., Arner, A., Morrison, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recapitulation+of+developmental+cardiogenesis+governs+the+morphological+and+functional+regeneration+of+adult+newt+hearts+following+injury.">Recapitulation of developmental cardiogenesis governs the morphological and functional regeneration of adult newt hearts following injury.</a> Dev. Biol. 354, 67-76 (2011).</li><li>Gressens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+Mexican+axolotl+(Ambystoma+mexicanum).">An introduction to the Mexican axolotl (Ambystoma mexicanum).</a> Lab Animal. 33, 41-47 (2004).</li><li>Cano-Mart&#237;nez, A., Vargas-Gonz&#225;lez, A., Guarner-Lans, V., Prado-Zayago, E., Le&#243;n-Oleda, M., Nieto-Lima, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+structural+regeneration+in+the+axolotl+heart+(Ambystoma+mexicanum)+after+partial+ventricular+amputation.">Functional and structural regeneration in the axolotl heart (Ambystoma mexicanum) after partial ventricular amputation.</a> Arch. Cardiol. Mex. 80, 79-86 (2010).</li><li>McCusker, C., Gardiner, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+axolotl+model+for+regeneration+and+aging+research:+a+mini-review.">The axolotl model for regeneration and aging research: a mini-review.</a> Gerontology. 57, 565-571 (2011).</li><li>Khattak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+axolotl+(Ambystoma+mexicanum)+husbandry,+breeding,+metamorphosis,+transgenesis+and+tamoxifen-mediated+recombination.">Optimized axolotl (Ambystoma mexicanum) husbandry, breeding, metamorphosis, transgenesis and tamoxifen-mediated recombination.</a> Nat. Protoc. 9, 529-540 (2014).</li><li>Nakamura, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+analysis+of+Baf60c+during+heart+regeneration+in+axolotls+and+neonatal+mice.">Expression analysis of Baf60c during heart regeneration in axolotls and neonatal mice.</a> Develop. Growth Differ. 58, 367-382 (2016).</li><li>Tan, G. X. Y., Jamil, M., Tee, N. G. Z., Zhong, L., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+Reconstruction+of+Chick+Embryo+Vascular+Geometry+Using+Non-Invasive+High-Frequency+Ultrasound+for+Computational+Fluid+Dynamics.">3D Reconstruction of Chick Embryo Vascular Geometry Using Non-Invasive High-Frequency Ultrasound for Computational Fluid Dynamics.</a> Ann. Biomed. Eng. 43, 2780-2793 (2015).</li><li>Ho, S., Tan, G. X. Y., Foo, T. J., Phan-Thien, N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+Dynamics+and+Fluid+Dynamics+of+the+HH25+Chick+Embryonic+Cardiac+Ventricle+as+Revealed+by+a+Novel+4D+High-Frequency+Ultrasound+Imaging+Technique+and+Computational+Flow+Simulations.">Organ Dynamics and Fluid Dynamics of the HH25 Chick Embryonic Cardiac Ventricle as Revealed by a Novel 4D High-Frequency Ultrasound Imaging Technique and Computational Flow Simulations.</a> Ann. Biomed. Eng. , (2017).</li><li>Wasmeier, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+transthoracic+echocardiography+in+small+animals+using+clinical+equipment.">Reproducibility of transthoracic echocardiography in small animals using clinical equipment.</a> Coron. Artery. Dis. 18, 283-291 (2007).</li><li>Thygesen, M. M., Rasmussen, M. M., Madsen, J. G., Pedersen, M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+(2,6-diisopropylphenol)+is+an+applicable+immersion+anesthetic+in+the+axolotl+with+potential+uses+in+hemodynamic+and+neurophysiological+experiments.">Propofol (2,6-diisopropylphenol) is an applicable immersion anesthetic in the axolotl with potential uses in hemodynamic and neurophysiological experiments.</a> Regeneration. 4 (3), (2017).</li></ol>

axolotl और अंय गैर-स्तनधारी प्रजातियों में इकोकार्डियोग्राफी वयस्क स्तनधारियों को छोड़कर सभी इकोकार्डियोग्राफी में लाल रक्त कोशिकाओं के nucleated प्रकृति की वजह से स्तनधारी रीढ़ की तुलना में मौलिक अलग डेटा प?...

कोरोनरी हृदय रोग दुनिया भर में1,2मौत का एक प्रमुख कारण है । हालांकि कई तेजी से और ठीक देखते चिकित्सा हस्तक्षेप की वजह से एक रोधगलन जीवित रहने, मानव में कोरोनरी घटनाओं अक्सर अतिवृद्धि, बिजली की खराबी, और दिल की एक कम कार्यात्मक क्षमता के साथ जुड़े scarring fibrotic के लिए नेतृत्व . हृदय ऊतक की अपक्षयी क्षमता की यह कमी स्तनधारियों के बीच साझा किया जाता है और हालांकि स्तनधारी कार्डियक पुनर्जनन के विवादास्पद दावों की सूचना दी गई है, इन विशिष्ट murine उपभेदों के लिए सीमित किया गया है3,4 और हाइपोक्सिया चूहों का इलाज किया5. इस प्रकार, हृदय की अपक्षयी चिकित्सा और जीव विज्ञान के क्षेत्र में आम तौर पर गैर स्तनधारी पशु मॉडल के लिए सीमित करने के लिए आंतरिक दिल की अपक्षयी घटना का अध्ययन है । zebrafish (ढाणियो rerio) पिछले एक दशक में आंतरिक दिल पुनर्जनन6,7,8,9,10 के लिए सबसे अच्छी तरह से चरित्र मॉडल के रूप में स्थापित किया गया है . कारण आसान प्रयोगशाला रखरखाव, एक छोटी पीढ़ी के समय और आणविक उपलब्ध उपकरणों की एक विस्तृत सरणी, zebrafish अच्छी तरह से आनुवंशिक और आणविक तंत्र के लिए एक मॉडल के रूप में अनुकूलित है हृदय विकास और पुनर्जनन अंतर्निहित । हालांकि, zebrafish दिल के मिनट आयाम यह कार्यात्मक मूल्यांकन के लिए कम अनुकूल बनाने के लिए, और जटिल शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं और गैर zebrafish के tetrapod फाइलोजेनी इस प्रजाति में निष्कर्षों के समझदार एक्सट्रपलेशन सीमा, इस प्रकार अंय बड़े tetrapod मॉडल के उपयोग का औचित्य साबित । हड्डीवाला दिल पुनर्जनन के एक से अधिक मॉडल के एक caudate amphibian, पूर्वी ंयूट (Notophthalmus viridescens)11, एक प्रजाति है कि एक मूल्यवान मॉडल12रहता था ।
हाल के वर्षों में एक और caudate amphibian, मैक्सिकन axolotl (mexicanum) के रूप में एक बड़ा दृश्य में प्रवेश किया है (अप करने के लिए शरीर द्रव्यमान के १०० ग्राम) और उच्च प्रयोगशाला अनुकूलनीय पशु मॉडल के एक विस्तृत सरणी के लिए अंग पुनर्जनन फैले विषयों, रीढ़ की हड्डी में चोट, और कार्डिएक पुनर्जनन13,14,15,16,17। axolotl उच्च आवृत्ति इकोकार्डियोग्राफी और दिल की ventral ओर calcified संरचनाओं के अभाव का उपयोग कर दिल पर कार्यात्मक माप के लिए अत्यधिक उत्तरदायी है छवि कलाकृतियों के एक बहुत निचले स्तर के साथ अल्ट्रासाउंड इमेजिंग के लिए अनुमति देता है (ध्वनिक छाया और विशेष रूप से गूंज) की तुलना में calcified उरोस्थि और पसलियों के साथ अंय मॉडल पशुओं में मनाया ।
निंनलिखित प्रोटोकॉल का वर्णन कई विभिंन तरीकों और तैयारी (चित्रा 1, चित्रा 2) दोनों anesthetized में axolotl दिल पर reproducible echocardiographic माप प्राप्त करने के लिए (तीन अलग निश्चेतक लागू: benzocaine, MS-२२२ और propofol) और दो में unanesthetized पशु (चित्रा 3, चित्रा 4, चित्रा 5, चित्रा 6, चित्रा 7, अनुपूरक फाइलें 1-12) और तीन (चित्रा 8, चित्रा 9, अनुपूरक फ़ाइलें 13-14) स्थानिक आयाम. amphibian दिल तीन-चैंबर्ड (दो atria और एक एकल निलय) है । atria एक बड़े साइनस venosus और कांउस वाहीनी बहिर्वाह पथ (चित्रा 2) में निलय खाली द्वारा आपूर्ति कर रहे हैं । चूंकि सबसे अधिक जोर परंपरागत रूप से वेंट्रिकुलर पुनर्जनन पर रखा गया है और atria6,7,8,9,10,11 की वसूली पर कम , 12 , 14 , 17, इस प्रोटोकॉल मुख्य रूप से वेंट्रिकुलर समारोह की माप पर केंद्रित है ।
Amphibian इकोकार्डियोग्राफी साहित्य में अच्छी तरह से वर्णित नहीं है, और 2 डी इस पत्र में वर्णित तरीकों के विकास के लिए सबसे अच्छा एक निश्चित समय और प्रयोगात्मक सेटिंग में धड़कते axolotl दिल की कार्यक्षमता का प्रतिनिधित्व करने की आवश्यकता से प्रेरित किया गया है । इस प्रकार, यहां वर्णित तरीकों दिल अपक्षयी प्रयोगों में लागू कर रहे हैं, जहां कार्डिएक समारोह बार एक पुनर्जनन प्रक्रिया के पाठ्यक्रम पर नजर रखी जा सकती है । इसके अतिरिक्त, तरीकों cardiophysiological प्रयोगों में axolotl पर सामान्य या संशोधित थोड़ा अन्य caudate या अनुरण amphibian मॉडल (जैसे, Xenopus) अवधि के लिए लागू किया जा सकता है । axolotl कई अलग उपभेदों और रंग रूपों में मौजूदहै (जैसे, wildtype, melanoid, सफेद, albino, ग्रीन ट्रांसजेनिक प्रोटीन अभिव्यक्ति के साथ सफेद प्रतिदीप्ति), लेकिन इन विशेषताओं की अनुकूलता को प्रभावित नहीं करते वर्णित प्रोटोकॉल के साथ axolotl । विधि यहां वर्णित 3d echocardiographic डेटा प्राप्त करने के लिए spatiotemporal छवि सहसंबंध (STIC) नैदानिक अल्ट्रासाउंड और द्विघात के लिए विकसित की विधि औसत पद्धति का एक संशोधित संस्करण है विकासशील चिकन में पहले वर्णित nucleated लाल रक्त कोशिकाओं18,19युक्त प्रजातियों में कोमल ऊतकों में रक्त speckles के संकेत को बढ़ाने । इस विधि axolotl दिल में हृदय संकुचन और गणना द्रव गतिशीलता के उन्नत मॉडलिंग के लिए अनुमति देता है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1230">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Axolotl (Ambystoma mexicanum)</td>
			<td style="width:147px;">Exoterra GmbH</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td style="width:765px;">All strains (wildtype, melanoid, white, albino, transgenic white with GFP) can be applied for echocardiography</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Vevo 2100</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">Vevo 2100</td>
			<td>High frequency ultrasound system</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">MS700</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">MS700</td>
			<td>50 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MS550s</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS550s</td>
			<td>40 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:147px;">Zeiss</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Benzocain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>94-09-7</td>
			<td>ethyl 4-aminobenzoate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MS-222</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>886-86-2</td>
			<td>ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonic acid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Propofol</td>
			<td>B. Braun Medical A/S</td>
			<td style="width:103px;">NA</td>
			<td>2,6-diisopropylphenol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7647-14-5&#160;</td>
			<td>NaCl</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">10035-04-8</td>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:216px;">Magnesium sulfate heptahydrate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;10034-99-8&#160;</td>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Potassium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7447-40-7</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;67-64-1&#160;</td>
			<td>Propanone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Soft cloth</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of soft cloth measuring appromixately 70 x 55 cm^2 e.g. a dish towel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Styrofoam block</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of Styrofoam block measuring approximately 33 x 27 x 5 cm^3 e.g. a medium sized Styrofoam cooler lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic wrap</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of plastic wrap e.g. food wrap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tape</td>
			<td style="width:147px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:103px;">72359-02</td>
			<td>Leukoplast sleek</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Kimwipes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">Z188956&#160;</td>
			<td>Kimwipes, disposable wipers&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Excel 2010</td>
			<td style="width:147px;">Microsoft</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Excel 2010 or newer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td colspan="2">National Institutes of Health</td>
			<td>ImageJ 1.5e or newer. Rasband, W.S., ImageJ, U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2016.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)

कोरोनरी हृदय रोग का एक परिणाम के रूप में कार्डियक खराबी एक बड़ी चुनौती है, और दिल के लिए अपक्षयी चिकित्सा उच्च मांग में हैं । ऐसे zebrafish और समंदर के रूप में कुछ मॉडल प्रजातियों कि आंतरिक हृदय पुनर्जनन मानव रोगियों के लिए भविष्य में अपक्षयी चिकित्सा के लिए वादा पकड़ में सक्षम हैं । cardioregenerative प्रयोगों के परिणाम का मूल्यांकन करने के लिए यह जरूरी है कि हार्ट फंक्शन पर नजर रखी जा सके. axolotl समन्दर (mexicanum) एक अच्छी तरह से अपक्षयी जीव विज्ञान प्राप्त आकार है कि कार्डियक समारोह के मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है में मॉडल प्रजातियों की स्थापना का प्रतिनिधित्व करता है । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य इकोकार्डियोग्राफी का उपयोग कर axolotl में कार्डियक फंक्शन को मापने के लिए reproducibly तरीकों को स्थापित करना है । विभिन्न निश्चेतक के आवेदन (benzocaine, MS-२२२, और propofol) का प्रदर्शन किया है, और दोनों anesthetized और unanesthetized axolotls में दो आयामी (2d) echocardiographic डेटा का अधिग्रहण बताया गया है । 2d इकोकार्डियोग्राफी के तीन आयामी (3 डी) दिल अस्पष्टता और माप की मनोवाद से ग्रस्त कर सकते हैं, और इस घटना को कम करने के लिए एक ठोस विधि, अर्थात् इंट्रा/अंतर-ऑपरेटर/प्रेक्षक विश्लेषण, मापने के लिए और इस पूर्वाग्रह को कम करने के लिए है प्रदर्शन. अंत में, एक बहुत ही उच्च spatiotemporal संकल्प और स्पष्ट रक्त से ऊतक कंट्रास्ट के साथ धड़कता axolotl दिल के 3 डी echocardiographic डेटा प्राप्त करने के लिए विधि वर्णित है । कुल मिलाकर, इस प्रोटोकॉल आवश्यक तरीके प्रदान करने के लिए हृदय समारोह और मॉडल शरीर रचना विज्ञान का मूल्यांकन करना चाहिए, और axolotl में प्रवाह गतिशीलता अल्ट्रासाउंड इमेजिंग का उपयोग दोनों अपक्षयी जीवविज्ञान और सामांय शारीरिक प्रयोगों में अनुप्रयोगों के साथ ।

axolotl में Intrapericardial स्थान पशु के आकार पर निर्भर है । छोटे जानवरों (2-20 जी, 7-15 सेमी) pericardial द्रव की एक अतिरिक्त (इकोकार्डियोग्राफी में अंधेरा दिखने) बड़ा यौन परिपक्व जानवरों में जबकि कार्डियक कक्षों के आ...

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2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum

यहां हम दो आयामी और तीन axolotl समन्दर (Ambystoma mexicanum), दिल पुनर्जनन में एक मॉडल प्रजातियों के धड़कन दिल के आयामी छवि अधिग्रहण के लिए इकोकार्डियोग्राफी प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । इन तरीकों को एक उच्च spatiotemporal संकल्प पर कार्डियक फंक्शन के अनुदैर्ध्य मूल्यांकन के लिए अनुमति देते हैं ।

2d और 3d इकोकार्डियोग्राफी में Axolotl (Ambystoma Mexicanum)

Cardiac malfunction as a result of ischemic heart disease is a major challenge, and regenerative therapies to the heart are in high demand. A few model ...

यह विधि पुनर्योजी क्षेत्र में महत्वपूर्ण प्रश्नों के उत्तर देने में मदद कर सकती है, जैसे कि मायोकार्डियल चोट के बाद कार्डियक पुनर्जनन कैसे आगे बढ़ता है। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह एक्सोलोटल में कार्डियक फ़ंक्शन का उच्च रिज़ॉल्यूशन, नॉनइनवेसिव और दोहराने योग्य मूल्यांकन प्रदान करता है। इसके अतिरिक्त, इस विधि को अन्य उभयचर मॉडल जीवों, जैसे न्यूट्स और ज़ेनोपस पर भी लागू किया जा सकता है।एक होंठ के आकार के जानवर के बिस्तर में एक एनेस्थेटाइज्ड एक्सोलोटल सुपिन की स्थिति के साथ शुरू करें। जब माध्यम जोड़ा जाता है, तो जानवर तैर जाएगा, इसलिए इसे ढीले रबर बैंड के साथ सुरक्षित किया जाना चाहिए। इसके बाद, बिस्तर को मध्यम युक्त एनेस्थेटिक्स से भरें ताकि छाती तीन से पांच मिलीमीटर गहरी हो।यदि केवल बी-मोड, रंग-डॉप्लर मोड और पल्स-वेव डॉप्लर मोड डेटा का उपयोग करके, तो एक्सोलोटल इस प्रक्रिया के लिए सतर्क हो सकता है। इस स्थिति में, एक झूला में प्रवण जानवर की स्थिति, और इसे आगे बढ़ने से पहले 30 से 60 मिनट के लिए तनाव से उबरने दें। सफेद या एल्बिनो जानवरों के लिए, ट्रांसड्यूसर को रखने में मदद करने के लिए एक ठंडा प्रकाश स्रोत तैयार करें।ट्रांसड्यूसर के लिए, जानवर के द्रव्यमान के आधार पर या तो 40 या 50-हर्ट्ज मॉडल का उपयोग करें। फिर, ट्रांसड्यूसर अल्ट्रासाउंड जेल तैयार करें, और डेटा एकत्र करने के साथ आगे बढ़ें। वक्ष क्षेत्र में जानवर के मिडलाइन पर अल्ट्रासाउंड ट्रांसड्यूसर की स्थिति के साथ शुरू करें, और इसकी लंबी धुरी के समानांतर।वेंट्रिकल का एक छोटा सा हिस्सा, जो वक्ष गुहा में दाईं ओर तैनात है, वेंट्रिकुलर डायस्टोल पर फ्रेम में दिखाई देना चाहिए। दोनों अटरिया का एक बड़ा हिस्सा भी दिखाई देना चाहिए, जैसा कि साइनस वेनोस होना चाहिए। इन संरचनाओं को डायस्टोल या सिस्टोल दृश्य में पहचाना जाना चाहिए।इसके बाद, वेंट्रिकुलर लॉन्ग-एक्सिस व्यू प्राप्त करने के लिए ट्रांसड्यूसर एक से तीन मिलीमीटर दाईं ओर अनुवाद करें। अंततः, सही स्थिति तब प्राप्त होती है जब अंत-सिस्टोल वेंट्रिकल का क्रॉस-सेक्शनल क्षेत्र अपने अधिकतम पर होता है। सही 2डी अल्ट्रासाउंड माप ट्रांसड्यूसर की सही स्थिति पर अत्यधिक निर्भर हैं।ट्रांसड्यूसर प्लेसमेंट का सावधानीपूर्वक अभ्यास करें और व्यक्तिपरकता को कम करने के लिए अंतर-ऑपरेटर विश्लेषण करें। अब, बी-मोड में, कम से कम तीन कार्डियक चक्र ों को न्यूनतम 50 फ्रेम प्रति सेकंड पर प्राप्त करें। सामान्य इमेजिंग मोड या कार्डियोलॉजी मोड का उपयोग करने के बीच चुनें।इसके बाद, जानवर की लंबी धुरी के साथ ट्रांसड्यूसर का अनुवाद करें जब तक कि वेंट्रिकल का केंद्र स्क्रीन के बीच में न हो जाए। फिर, मिडवेंट्रिकुलर शॉर्ट-एक्सिस व्यू प्राप्त करने के लिए ट्रांसड्यूसर 90 डिग्री दक्षिणावर्त घुमाएं। इस स्थिति से, हृदय की लंबी धुरी के साथ ट्रांसड्यूसर का अनुवाद करके वेंट्रिकल के गोलाकार आकार का मूल्यांकन करें।फिर, लंबी धुरी विमान में ट्रांसड्यूसर वापस करें, और एक अलिंद लंबी-धुरी दो-कक्ष दृश्य प्राप्त करने के लिए इसे मिडलाइन की ओर वापस अनुवाद करें। सही स्थिति तब हासिल की जाती है जब अंत-सिस्टोल अटरिया के क्रॉस-सेक्शनल क्षेत्र उनके मैक्सिमा पर होते हैं, और दो अटरिया संयुक्त रूप से बाईं ओर लगभग 45 डिग्री झुकाते समय नंबर आठ की रूपरेखा ग्रहण करते हैं। इसके बाद बी-मोड इमेज कलेक्ट करें।आगे बढ़ने के लिए, ट्रांसड्यूसर को दाईं ओर तब तक अनुवाद करें जब तक कि बहिर्वाह पथ दिखाई न दे। वेंट्रिकुलर एंड-सिस्टोल दृश्य सही है जब बहिर्वाह का व्यास अपने सबसे बड़े पर होता है, और जब, मध्य इंजेक्शन के दौरान, बहिर्वाह के प्रवेश द्वार पर दो अर्धउमनर वाल्व दिखाई देते हैं। इस दृश्य से, डॉप्लर इमेजिंग का उपयोग करके वेग और प्रवाह माप बनाया जा सकता है।कार्डियक इंजेक्शन के दौरान बहिर्वाह पथ में रक्त प्रवाह वेग को मैप करने के लिए रंग-डॉप्लर मोड लागू करें। इसके बाद, वेंट्रिकुलर दृश्य में रक्त प्रवाह की कल्पना करने के लिए कलर-डॉप्लर इमेजिंग और पावर-डॉप्लर इमेजिंग लागू करें, और एट्रियल व्यू में भी ऐसा ही करें। इसके बाद, ट्रांसड्यूसर की ओर सीधे चलने वाले बहिर्वाह पथ में अधिकतम रक्त वेग के स्थान पर निर्देशित रंग-डॉप्लर मोड का उपयोग करें।जब बहिर्वाह ट्रांसड्यूसर के लिए पूरी तरह से लंबवत नहीं होता है, तो छवि को 45 डिग्री तक सही करने के लिए बीम कोण और कोणीय सुधार लागू करें। इसके बाद, पल्स-वेव डॉप्लर मोड में वेग-टाइम डेटा एकत्र करें। हृदय चक्र के किसी भी चरण के दौरान सर्पिल वाल्व बहिर्वाह के दृश्य को ओवरलैप करना चाहिए।कम से कम तीन हृदय चक्रों से डेटा एकत्र करें। फिर, ट्रांसड्यूसर को स्थानांतरित किए बिना, कम से कम तीन हृदय चक्रों से बी-मोड में डेटा प्राप्त करें। इसके बाद, केवल एनेस्थेटाइज्ड जानवरों के लिए, जानवर को 90 डिग्री घुमाएं ताकि जानवर का दाहिना हिस्सा ऊपर की ओर आ सके, और ट्रांसड्यूसर को तिरछे पैरा-गिल दृश्य में ले जाएं, बस समानांतर और पीछे फैला हुआ गिल के लिए।यह दृश्य बहिर्वाह पथ में रक्त प्रवाह वेग का एक वैकल्पिक माप प्रदान करता है। बहिर्वाह पथ लगभग 45 डिग्री पर नीचे चल रहा होना चाहिए, और अटरिया इंजेक्शन के दौरान बहिर्वाह पथ के नीचे दिखाई देना चाहिए। अंत में, पल्स-वेव डॉप्लर मोड पर स्विच करें और आउटफ्लो ट्रैक्ट में ट्रांसड्यूसर से भागने वाले अधिकतम रक्त वेग को देखने के लिए ट्रांसड्यूसर की स्थिति करें।आवश्यकतानुसार, ट्रांसड्यूसर के बहिर्वाह लंबवत बनाने के लिए बीम कोण और कोणीय सुधार के 45 डिग्री तक का उपयोग करें। फिर, पल्स-वेव डॉप्लर मोड में और बी-मोड में पहले की तरह ही स्थिति से डेटा एकत्र करें। 3डी अधिग्रहण में कुछ समय लगता है, इसलिए एक्सोलोटल को एनेस्थेटाइज्ड किया जाना चाहिए।इसे होंठ के आकार के जानवरों के बिस्तर में रीढ़ रखें। इसे रबर बैंड के साथ सुरक्षित करें, और एक संवेदनाहारी युक्त अल्ट्रासाउंड माध्यम के तीन से पांच मिलीमीटर में अपनी छाती की सतह को जलमग्न करें। 3 डी अधिग्रहण के दौरान आंदोलन बाद के पुनर्निर्माण के लिए हानिकारक हैं।यदि जानवर 3 डी अल्ट्रासाउंड अधिग्रहण के दौरान चलता है, तो प्रक्रिया को शुरू से ही दोहराया जाना चाहिए। इसके बाद, वक्ष क्षेत्र में मिडलाइन पर ट्रांसड्यूसर की स्थिति रखें, और इसे लंबी धुरी के समानांतर एक धनु 3 डी रिकॉर्डिंग के लिए रखें, या ट्रांसवरसल 3 डी रिकॉर्डिंग के लिए लंबी धुरी के लिए ऑर्थोगोनल। फिर, ट्रांसड्यूसर को बीमा करने के लिए अनुवाद करें कि पूरे कार्डियक क्षेत्र को बाद के 3 डी कैप्चर में कवर किया जाता है।इसे इन-प्लेन आयाम और आउट-ऑफ-प्लेन आयाम दोनों में ले जाएं। इमेजिंग मोड के लिए, यदि जानवर की हृदय गति प्रति मिनट 20 और 60 बीट्स के बीच है, तो सामान्य इमेजिंग मोड का चयन करें। अन्यथा कार्डियोलॉजी मोड चुनें।लाइट बंद कर दें। अब, कच्चे बी-मोड छवि में, 2D लाभ को उस स्तर पर समायोजित करें जहां शारीरिक संरचनाएं मुश्किल से पहचानने योग्य हैं। इससे अंतिम पुनर्निर्माण में सिग्नल-टू-शोर अनुपात बढ़ेगा ।फिर, जेड-स्टेप या स्लाइस मोटाई का आकार तय करें। अब, एक समय में ट्रांसड्यूसर वन जेड-स्टेप का अनुवाद करें, प्रत्येक जेड-स्टेप पर 1, 000 फ्रेम युक्त रिकॉर्डिंग ले जब तक कि पूरे हृदय क्षेत्र को कवर नहीं किया गया है। वर्णित तकनीक का उपयोग करके 10-ग्राम, 10 सेंटीमीटर एक्सोलोटल का 2डी इकोकार्डियोग्राफिक विश्लेषण किया गया था।लंबी धुरी दृश्य एक अच्छा प्रारंभिक बिंदु प्रदान की है । मिडलाइन प्लेन में साइनस वेनोसस, अटरिया और वेंट्रिकल के कुछ हिस्से दिखाई देते थे । वेंट्रिकुलर प्लेन को देखने से वेंट्रिकल को गोलाकार और अत्यधिक ट्रैबेटेड दिखाया गया ।एट्रियल प्लेन में अटरिया ज्यादा अनियमित और बमुश्किल ट्रैबेटेड दिखाई दिए । बहिर्वाह पथ का केंद्र वेंट्रिकल के केंद्र के करीब है। लंबी धुरी से पल्स-वेव डॉप्लर का उपयोग करके हृदय चक्र के माप और तिरछे पैरा-गिल विमान से कुछ पृष्ठभूमि शोर था।वेग समय अभिन्न के माप बनाते समय यह शोर बढ़ गया था। कलर- डॉप्लर और पावर डॉप्लर इमेजिंग ने हार्ट मैंबर्स के जरिए फ्लो पैटर्न दिखाया। विचार वेंट्रिकल से, अटरिया से, और बहिर्वाह पथ से संभव थे।3डी इकोकार्डियोग्राफी भी की गई। दिल के इस मल्टीप्लानर व्यू में कई उपयोग हैं, जैसे सतह और वॉल्यूम पुनर्निर्माण, या विभाजन और 3 डी मॉडल का उत्पादन। इस वीडियो को देखने के बाद आपको इस बात की अच्छी समझ होनी चाहिए कि एक्सोलोटल में 2डी और 3डी इकोकार्डियोग्राफी कैसे करें ।एक बार महारत हासिल होने के बाद, 2डी अल्ट्रासाउंड तकनीक प्रति पशु पांच मिनट से भी कम समय में की जा सकती है, यदि इसे ठीक से किया जाता है, जबकि 3 डी अधिग्रहण प्रति पशु एक घंटे तक ले सकता है। इस प्रक्रिया के बाद, हृदय संरचना और शरीर रचना विज्ञान से संबंधित अतिरिक्त सवालों के जवाब देने के लिए हृदय निष्कर्षण और हिस्ट्रोलॉजी जैसे अन्य तरीकों का प्रदर्शन किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl (Ambystoma Mexicanum)

Transthoracic Echocardiography in Mice

चूहे में Transthoracic इकोकार्डियोग्राफी

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

उच्च आवृत्ति उच्च संकल्प इकोकार्डियोग्राफी: Ischemia reperfused murine दिल में गैर इनवेसिव Myocardial तनाव, सिकुड़ना और Mitral regurgitation की दोहराया उपाय पर पहले साक्ष्य

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Murine इकोकार्डियोग्राफी और अल्ट्रासाउंड इमेजिंग

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Murine Fetal Echocardiography

Murine भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध का एक खरगोश मॉडल में भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी और स्पंदित लहर डॉपलर अल्ट्रासाउंड

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl

अपक्षयी Axolotl में एक Microsurgical Laminectomy के माध्यम से भ्रम स्पाइनल कॉर्ड चोट

The purpose of this study is to establish a standardized and reproducible regenerative blunt spinal cord injury model in the axolotl (Ambystoma ...

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy (PRRT): 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy PRRT: 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

पेप्टाइड-रिसेप्टर रेडियोन्यूक्लाइड थेरेपी (पीआरआरटी): 2डी प्लानर इमेज और हाइब्रिड 2डी + 3डी SPECT/CT Image विधियों के लिए एक संपूर्ण शरीर डोसिमेट्री प्रोटोकॉल

Peptide-receptor-radionuclide-therapy (PPRT) is a targeted therapy that combines a short-range energy radionuclide with a substrate with high specificity ...

Morphological and Functional Assessment of the Right Ventricle Using 3D Echocardiography

3 डी इकोकार्डियोग्राफी का उपयोग करके दाएं वेंट्रिकल का रूपात्मक और कार्यात्मक मूल्यांकन

Traditionally, it was believed that the right side of the heart has a minor role in circulation; however, more and more data suggest that right ...

Time-Resolved, Dynamic Computed Tomography Angiography for Characterization of Aortic Endoleaks and Treatment Guidance via 2D-3D Fusion-Imaging

Time-Resolved, Dynamic Computed Tomography Angiography for Characterization of Aortic Endoleaks and Treatment Guidance via 2D-3D Fusion-Imaging

महाधमनी Endoleaks और 2D-3D संलयन-इमेजिंग के माध्यम से उपचार मार्गदर्शन के लक्षण वर्णन के लिए समय-हल, गतिशील परिकलित टोमोग्राफी एंजियोग्राफी

In the United States, more than 80% of all abdominal aortic aneurysms are treated by endovascular aortic aneurysm repair (EVAR). The endovascular approach ...

Hemodynamic Precision in the Neonatal Intensive Care Unit using Targeted Neonatal Echocardiography

Targeted neonatal echocardiography (TnECHO) refers to the use of comprehensive echocardiographic evaluation and physiologic data to obtain accurate, ...