Name: 2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)
Uploaded: 2018-11-29T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum at JoVE.com

カスパー ・ ハンセン、バイオ サイエンス研究所、3 D 心エコー取得へのアクセスと電子のマニピュレーターに援助を提供するためオーフス大学を認識したいと思います。

実験動物の管理と使用の国デンマークの法律に従ってこの議定書の実施手順、実験は、デンマークの国立動物実験局 (プロトコル番号 2015-15-0201-00615) によって承認されました。
1. 準備
<ol><li>ウーパールーパーを準備中。<ol>
<li>アホロートル媒体として非化学的に扱われる質の高い水道水を適用します。このオプションが利用できない場合は、40 %holtfreter のソリューショ?...

<ol>
	<li>Forouzanfar, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+Global+Burden+of+Ischemic+Heart+Disease.">Assessing the Global Burden of Ischemic Heart Disease.</a> Glob. Heart. 7, 331-342 (2012).</li><li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2014+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2014 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 129, e28-e292 (2014).</li><li>Leferovich, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+adult+MRL+mice.">Heart regeneration in adult MRL mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98, 9830-9835 (2001).</li><li>Leferovich, J. M., Heber-Katz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+scarless+heart.">The scarless heart.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 13, 327-333 (2002).</li><li>Nakada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+induces+heart+regeneration+in+adult+mice.">Hypoxia induces heart regeneration in adult mice.</a> Nature. 541, 222-227 (2017).</li><li>Poss, K. D., Wilson, L. G., Keating, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+zebrafish.">Heart regeneration in zebrafish.</a> Science. 298, 2188-2190 (2002).</li><li>Chablais, F., Veit, J., Rainer, G., Jazwinska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+heart+regenerates+after+cryoinjury+induced+myocardial+infarction.">The zebrafish heart regenerates after cryoinjury induced myocardial infarction.</a> BMC Dev. Biol. 11, 21 (2011).</li><li>Gemberling, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration.">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends. Genet. 29, 611-620 (2013).</li><li>Gonzalez-Rosa, J. M., Martin, V., Peralta, M., Torres, M., Mercader, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+scar+formation+and+regression+during+heart+regeneration+after+cryoinjury+in+zebrafish.">Extensive scar formation and regression during heart regeneration after cryoinjury in zebrafish.</a> Development. 138, 1663-1674 (2011).</li><li>Schnabel, K., Wu, C. C., Kurth, T., Weidinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+cryoinjury+induced+necrotic+heart+lesions+in+zebrafish+is+associated+with+epicardial+activation+and+cardiomyocyte+proliferation.">Regeneration of cryoinjury induced necrotic heart lesions in zebrafish is associated with epicardial activation and cardiomyocyte proliferation.</a> PLoS One. 6 (4), e18503 (2011).</li><li>Oberpriller, J. O., Oberpriller, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+adult+newt+ventricle+to+injury.">Response of the adult newt ventricle to injury.</a> J. Exp. Zool. 187, 249-260 (1974).</li><li>Witman, N., Murtuza, B., Davis, B., Arner, A., Morrison, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recapitulation+of+developmental+cardiogenesis+governs+the+morphological+and+functional+regeneration+of+adult+newt+hearts+following+injury.">Recapitulation of developmental cardiogenesis governs the morphological and functional regeneration of adult newt hearts following injury.</a> Dev. Biol. 354, 67-76 (2011).</li><li>Gressens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+Mexican+axolotl+(Ambystoma+mexicanum).">An introduction to the Mexican axolotl (Ambystoma mexicanum).</a> Lab Animal. 33, 41-47 (2004).</li><li>Cano-Mart&#237;nez, A., Vargas-Gonz&#225;lez, A., Guarner-Lans, V., Prado-Zayago, E., Le&#243;n-Oleda, M., Nieto-Lima, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+structural+regeneration+in+the+axolotl+heart+(Ambystoma+mexicanum)+after+partial+ventricular+amputation.">Functional and structural regeneration in the axolotl heart (Ambystoma mexicanum) after partial ventricular amputation.</a> Arch. Cardiol. Mex. 80, 79-86 (2010).</li><li>McCusker, C., Gardiner, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+axolotl+model+for+regeneration+and+aging+research:+a+mini-review.">The axolotl model for regeneration and aging research: a mini-review.</a> Gerontology. 57, 565-571 (2011).</li><li>Khattak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+axolotl+(Ambystoma+mexicanum)+husbandry,+breeding,+metamorphosis,+transgenesis+and+tamoxifen-mediated+recombination.">Optimized axolotl (Ambystoma mexicanum) husbandry, breeding, metamorphosis, transgenesis and tamoxifen-mediated recombination.</a> Nat. Protoc. 9, 529-540 (2014).</li><li>Nakamura, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+analysis+of+Baf60c+during+heart+regeneration+in+axolotls+and+neonatal+mice.">Expression analysis of Baf60c during heart regeneration in axolotls and neonatal mice.</a> Develop. Growth Differ. 58, 367-382 (2016).</li><li>Tan, G. X. Y., Jamil, M., Tee, N. G. Z., Zhong, L., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+Reconstruction+of+Chick+Embryo+Vascular+Geometry+Using+Non-Invasive+High-Frequency+Ultrasound+for+Computational+Fluid+Dynamics.">3D Reconstruction of Chick Embryo Vascular Geometry Using Non-Invasive High-Frequency Ultrasound for Computational Fluid Dynamics.</a> Ann. Biomed. Eng. 43, 2780-2793 (2015).</li><li>Ho, S., Tan, G. X. Y., Foo, T. J., Phan-Thien, N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+Dynamics+and+Fluid+Dynamics+of+the+HH25+Chick+Embryonic+Cardiac+Ventricle+as+Revealed+by+a+Novel+4D+High-Frequency+Ultrasound+Imaging+Technique+and+Computational+Flow+Simulations.">Organ Dynamics and Fluid Dynamics of the HH25 Chick Embryonic Cardiac Ventricle as Revealed by a Novel 4D High-Frequency Ultrasound Imaging Technique and Computational Flow Simulations.</a> Ann. Biomed. Eng. , (2017).</li><li>Wasmeier, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+transthoracic+echocardiography+in+small+animals+using+clinical+equipment.">Reproducibility of transthoracic echocardiography in small animals using clinical equipment.</a> Coron. Artery. Dis. 18, 283-291 (2007).</li><li>Thygesen, M. M., Rasmussen, M. M., Madsen, J. G., Pedersen, M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+(2,6-diisopropylphenol)+is+an+applicable+immersion+anesthetic+in+the+axolotl+with+potential+uses+in+hemodynamic+and+neurophysiological+experiments.">Propofol (2,6-diisopropylphenol) is an applicable immersion anesthetic in the axolotl with potential uses in hemodynamic and neurophysiological experiments.</a> Regeneration. 4 (3), (2017).</li></ol>

心エコー図、ウーパールーパーや他の非哺乳類種で大人の哺乳類を除くすべての脊椎動物の赤血球の核の性質のため哺乳類のエコーとは根本的に異なるデータが得られます。これは、結果、顕著な血信号と血液-組織コントラストはアホロートル心エコー画像などマウスまたは人間の心エコー図と比較して少ない。これできます画像の領域分割未処理の単一フレーム超音波画像上より難...

虚血性心疾患は、死世界中1,2の主要な原因です。人間で虚血性の事件がしばしば肥大、電気の故障、および心の減少機能に関連付けられている線維性瘢痕につながるが、多くは、迅速かつきめ細かな医療介入による心筋梗塞を生き残るため、.心筋組織の再生の潜在性のこの欠乏は哺乳類の間で共有される、哺乳類心筋再生の物議を醸すクレームが報告されているが、これらは特定のマウス由来株3,4に限られていると低酸素状態は、マウス5を扱われます。したがって、心臓の再生医療と生物学の分野は一般に本質的な心の再生現象を研究する非哺乳類動物モデルに限定。ゼブラフィッシュ (動脈分布) 過去 10 年間として確立されている本質的な心の再生6,7,8,9,10 の最もよく特徴付けられたモデル.簡単な実験室のメンテナンス、短い世代時間と、利用可能な分子ツールの広い配列のためゼブラフィッシュは心臓発生と再生および遺伝学的および分子メカニズムのモデルとして適しています。ただし、ゼブラフィッシュ心臓の微小寸法機能の評価のために適していないし複雑な手術と、ゼブラフィッシュの非テトラポッド系統したがってこの種の所見の賢明な外挿を制限他の大きい四肢動物モデルの使用を正当化します。脊椎動物の心臓再生の最も初期のモデルの 1 つだった尾両生類, 東イモリ (Notophthalmus viridescens)11, 残っている貴重なモデル12種。
近年メキシコ アホロートル (A. メキシコマンネングサ) 別尾両生類、大きなシーンに入っている (100 g までの体の質量) と高所適応動物モデル スパニング肢の再生に、再生の分野の広い配列を脊髄損傷、心臓再生13,14,15,16,17。アホロートルは中心部の腹側に石灰化構造の不在は、超音波像のアーチファクト (音響のはるかに低いレベルで、高周波エコーによる心臓の機能の測定にシャドウと特に残響) 石灰化胸骨と肋骨の他のモデル動物での観測より。
次のプロトコルは、いくつかの別の方法と準備 (図 1、図 2) 麻酔の両方でウーパールーパーの心に再現できる心エコー計測について説明します (3 つの異なる麻酔薬を適用します。ベンゾカイン、MS-222、およびプロポ フォール) と 2 つの動物無麻酔 (図 3、図 4、図 5、図 6、図 7、補助ファイル 1-12) と 3 (図 8、図 9、 補助ファイル 13-14) 次元空間。両生類心臓は 3 chambered (2 つの心房、単心室)。大きなウナギ静脈洞によって心房と心室が動脈円錐流出路 (図 2) に注ぐ。最も重点を置いたが伝統的心室再生上に配置、アトリア6,7,8,9,10,11の回復が少ないので,12,14,17、このプロトコルは主に心機能の測定に焦点を当てください。
両生類の心エコー検査はよく文献に記載されている、本稿で説明している 2 D 法の開発によって駆動されている最高を表す必要アホロートル心臓の鼓動の機能与えられた時間と実験の設定で。したがって、ここで説明したメソッドは、心機能が繰り返し再生プロセスにわたって監視できます心臓再生実験に適用されます。さらに、メソッドをアホロートルの cardiophysiological 実験で一般に適用または他の尾または無尾両生類モデル (e.g.,Xenopus) をスパンするわずかに変更できます。アホロートル存在いくつかの異なる系統とカラー バリエーション (例えば、野生型、melanoid、白、アルビノ、緑色蛍光タンパク質の発現と形質転換白)、しかしこれらの特性の互換性を影響しません、記述のプロトコルとウーパールーパー。3 D 心エコーのデータを取得するここで説明する方法は臨床超音波と二次平均法にニワトリに記載されているために開発された時空間画像相関 (STIC) 法の修正版有核赤血球18,19を含む種の軟部組織に血の斑点の信号を強化します。このメソッドは、心筋収縮とウーパールーパーの心の計算の流体力学の高度なモデリングできます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1230">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Axolotl (Ambystoma mexicanum)</td>
			<td style="width:147px;">Exoterra GmbH</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td style="width:765px;">All strains (wildtype, melanoid, white, albino, transgenic white with GFP) can be applied for echocardiography</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Vevo 2100</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">Vevo 2100</td>
			<td>High frequency ultrasound system</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">MS700</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">MS700</td>
			<td>50 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MS550s</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS550s</td>
			<td>40 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:147px;">Zeiss</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Benzocain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>94-09-7</td>
			<td>ethyl 4-aminobenzoate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MS-222</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>886-86-2</td>
			<td>ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonic acid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Propofol</td>
			<td>B. Braun Medical A/S</td>
			<td style="width:103px;">NA</td>
			<td>2,6-diisopropylphenol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7647-14-5&#160;</td>
			<td>NaCl</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">10035-04-8</td>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:216px;">Magnesium sulfate heptahydrate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;10034-99-8&#160;</td>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Potassium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7447-40-7</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;67-64-1&#160;</td>
			<td>Propanone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Soft cloth</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of soft cloth measuring appromixately 70 x 55 cm^2 e.g. a dish towel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Styrofoam block</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of Styrofoam block measuring approximately 33 x 27 x 5 cm^3 e.g. a medium sized Styrofoam cooler lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic wrap</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of plastic wrap e.g. food wrap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tape</td>
			<td style="width:147px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:103px;">72359-02</td>
			<td>Leukoplast sleek</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Kimwipes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">Z188956&#160;</td>
			<td>Kimwipes, disposable wipers&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Excel 2010</td>
			<td style="width:147px;">Microsoft</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Excel 2010 or newer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td colspan="2">National Institutes of Health</td>
			<td>ImageJ 1.5e or newer. Rasband, W.S., ImageJ, U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2016.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)

虚血性心疾患により心臓の故障は大きな課題と心に再生治療は、高需要。ゼブラフィッシュと本質的な心を再生できるは、サンショウウオなど、いくつかのモデル種は、人間の患者、将来の再生治療のための約束を保持します。Cardioregenerative 実験の結果を評価するため、心臓機能を監視できることが不可欠です。アホロートル サラマンダー (A. メキシコマンネングサ) は、サイズを達成するため心機能の評価、再生の生物学の確立モデル種を表します。このプロトコルの目的アホロートル エコーによる心機能を再現性をもって測定する方法を確立することです。異なる麻酔 (プロポ フォール、MS-222、ベンゾカイン) のアプリケーションは、示されて、麻酔と無麻酔ウーパールーパーは絶滅の二次元 (2 D) 心エコー法によるデータの取得を説明しました。三次元 (3 D) 心の 2 D 心エコー検査は不正確さから苦しむことができるし、主観測定と堅実な方法すなわち内/間 operator/オブザーバー分析、測定、このバイアスを最小にするから、この現象を軽減するためには、示した。最後に、顕著な血液-組織コントラストと非常に高い時空間分解能でウーパールーパー心臓の 3 D 心エコー データを集録する方法を説明します。全体的にみて、このプロトコル心機能とモデルの解剖を評価するための必要なメソッドを提供し、超音波画像を用いた再生生物学で一般的な生理学的な実験アプリケーション アホロートルにおけるダイナミクスの流れ。

アホロートルの心膜内領域は動物のサイズに依存しています。(2-20 g、7-15 cm) のより小さい動物が心嚢液 (暗い心エコー法で表示される) を取り巻く心臓チャンバー室に、心膜内の大部分を占める大きな性的に成熟した動物 (> 20 g、> 15 cm) で、超過分があります。スペース。アホロートル心観心エコーの代表的な結果を得るのため最善の概要を提供するために (10 g、10 cm)...

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2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum

アホロートル サラマンダー (アホロートル メキシコマンネングサ)、心臓再生のモデル動物の心臓の鼓動の二次元および三次元イメージ獲得のため心エコー検査プロトコルをご紹介します。高時空間分解能で心機能の縦断的評価を可能にするこれらのメソッド。

ウーパールーパー (アホロートル メキシコマンネングサ) で 2 D および 3 D 心エコー検査

Cardiac malfunction as a result of ischemic heart disease is a major challenge, and regenerative therapies to the heart are in high demand. A few model ...

この方法は、心筋損傷後の心臓再生の進行など、再生分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、それは、アキソロテルの心機能の高解像、非侵襲的、および反復可能な評価を提供することです。さらに、この方法は、イニュートやキセノプスなどの他の両生類モデル生物にも適用できます。唇の形をした動物のベッドに麻酔付きのアキソロトル・スピンを配置することから始めます。培地が加えられると、動物が浮かんでしまうので、緩いゴムバンドで固定する必要があります。次に、胸郭が3〜5ミリメートルの深さになるように麻酔薬を含む培地でベッドを満たします。Bモード、カラードップラーモード、パルス波ドップラーモードデータのみを使用している場合は、この手順に対してアキソロトルを警告することができます。この状況では、動物をハンモックに置き、30〜60分間ストレスから回復させてから進めます。白またはアルビノ動物の場合は、トランスデューサーを配置するのに役立つ冷たい光源を用意してください。トランスデューサの場合は、動物の質量に応じて40ヘルツまたは50ヘルツモデルを使用します。次いで、トランスデューサ超音波ゲルを調製し、データ収集を進める。超音波トランスデューサを胸部領域の動物の正中線に配置し、その長い軸に平行に配置することから始めます。胸腔の右側に位置する心室のごく一部は、心室側座にフレーム内に現れるべきである。両方のアトリアの大部分も、静脈内毒症のように見えるはずです。これらの構造は、収縮期または収縮期図で識別可能であるべきである。次に、トランスデューサを1〜3ミリメートル右に変換し、心室長軸図を得る。最終的には、端収縮性心室の断面積が最大であるとき、正しい位置が達成される。正しい2D超音波測定は、トランスデューサの正しい位置に大きく依存しています。トランスデューサの配置を細心の注意を払って実践し、オペレータ間解析を行い、主観を最小限に抑えます。今、Bモードでは、少なくとも毎秒50フレームで少なくとも3つの心周期を取得する。一般的な画像モードまたは心臓病モードを使用するかを選択します。次に、心室の中心が画面の中央になるまで、動物の長軸に沿ってトランスデューサを翻訳します。次に、トランスデューサを時計回りに90度回転させて、中室短軸図を得ます。この位置から、心の長い軸に沿ってトランスデューサを変換して心室の円形を評価する。次に、トランスデューサを長軸平面に戻し、それを正軸方向に戻して、心房長軸2部屋ビューを得る。正しい位置は、端収縮性心房の断裂領域が最大である場合に達成され、2つのアトリアが左に約45度傾いたときに8番の輪郭を仮定する。次に、Bモード画像を収集します。続行するには、流出管が表示されるまでトランスデューサを右に移動します。心室端収縮期図は、流出の直径が最大の場合に正しく、そして、中注入の間に、流出の入り口にある2つの半ルミナー弁が見える場合である。このビューから、速度および流量の測定はドップラーのイメージ投射を使用して行うことができる。色ドップラーモードを適用して、心臓注射中に流出管の血流速度をマッピングします。次に、色ドップラーイメージングとパワードップラーイメージングを適用して、心室ビューで血流を可視化し、心房ビューでも同様に行います。次に、トランスデューサに向かって直接走る流出管の最大の血液速度の位置に向けられた色ドップラーモードを使用する。流出がトランスデューサに完全に垂直でない場合は、ビーム角度と角度補正を適用して、画像を最大45度補正します。次に、パルス波ドップラーモードで速度時間データを収集します。心臓サイクルの段階の間に、スパイラル弁は流出のビューと重なるべきである。少なくとも3つの心周期からデータを収集する。次いで、トランスデューサを移動させることなく、少なくとも3つの心周期からBモードでデータを取得する。次に、麻酔動物の場合のみ、動物の右の部分が上向きになるように動物を90度回転させ、トランスデューサーを斜めのパラギルビューに移動します。このビューは流出路の血流速度の代替測定を提供する。流出路は約45度で下方に走っており、アトリアは注入中に流出管の下に現れるべきである。最後に、パルス波ドップラーモードに切り替え、トランスデューサを配置して、流出管内のトランスデューサから逃げ出す最大の血液速度を表示します。必要に応じて、最大 45 度のビーム角度と角度補正を使用して、流出をトランスデューサに対して垂直にします。次に、パルス波ドップラーモードとBモードで、以前と同じ位置からデータを収集します。3Dの取得には時間がかかるので、アキソロテルは麻酔をしなければなりません。唇の形をした動物のベッドにスピンを置きます。ゴムバンドで固定し、麻酔薬を含む超音波媒体の3〜5ミリメートルにその胸部表面を沈めます。3D取得中の動きは、その後の再建に有害です。3D超音波取得中に動物が移動する場合、手順は最初から繰り返す必要があります。次に、トランスデューサを胸部領域の正中線に配置し、矢状3D記録のために長軸に平行に配置するか、または横3D記録のために長い軸に直交する。次に、トランスデューサを変換して、心臓領域全体が後続の3Dキャプチャで覆われるようにします。面内寸法と面外寸法の両方で移動します。イメージングモードの場合、動物の心拍数が毎分20〜60拍の場合は、一般的なイメージングモードを選択します。それ以外の場合は、心臓病モードを選択します。ライトを消します。今、生のBモード画像では、解剖学的構造がほとんど認識できないレベルに2Dゲインを調整します。これにより、最終的な再構築における信号対雑音比が増加します。次に、Z ステップまたはスライスの厚さのサイズを決定します。さて、トランスデューサを一度に1つのZステップで翻訳し、心臓領域全体が覆われるまで各Zステップで1,000フレームを含む記録を取る。10グラム、10センチメートルのアキソロテルの2D心エコー分析を、記載された技術を用いて行った。長軸ビューは良い出発点を提供しました。中線面は、正気静脈、心房、心室の一部を示した。心室面を見て、心室は球状で高度に線維化されることを示した。心房面では、心房はより不規則に見え、かろうじてトラベキュリに見えた。流出管の中心は心室の中心に近い。長軸からのパルス波ドップラーと斜めのパラギル面からの心周期の測定は、いくつかのバックグラウンドノイズを有していた。このノイズは、速度時間を一体化する際に克服可能でした。カラードップラーおよびパワードップラーイメージングは、心臓室を通るフローパターンを示した。心室、心房、流出路からの眺めが可能であった。3D心エコー撮影も行った。この心臓のマルチ平面図には、サーフェスとボリュームの再構築、3D モデルのセグメンテーションと生成など、多くの用途があります。このビデオを見た後、あなたはアキソロテルで2Dと3D心エコー検査を行う方法をよく理解しているはずです。一度習得すると、2D超音波技術は、それが適切に行われる場合、動物あたり5分未満で行うことができますが、3D取得は動物あたり最大1時間かかることがあります。この手順に従って、心臓の構造および解剖学に関連する追加の質問に答えるために、心臓抽出および組織学のような他の方法を行うことができる。

Research

JoVE Journal

Medicine

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl (Ambystoma Mexicanum)

Transthoracic Echocardiography in Mice

マウスにおける経胸壁心エコー

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

高周波高分解能心エコー検査：虚血 - 再灌流マウス心臓における心筋ストレイン、収縮性、および僧帽弁閉鎖不全の非侵襲的な反復測定に関する最初の証拠

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

マウス心エコー検査と超音波イメージング

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Murine Fetal Echocardiography

ネズミの胎児心エコー検査

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

胎児心エコー検査と子宮内発育制限のウサギモデルにおけるパルス波ドップラー超音波

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl

再生軸切除における微小外科ラミネクトミーによる挫傷脊髄損傷

The purpose of this study is to establish a standardized and reproducible regenerative blunt spinal cord injury model in the axolotl (Ambystoma ...

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy (PRRT): 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy PRRT: 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

ペプチド受容体放射性核種療法のための全身線種測定プロトコル(PRRT):2D平面画像とハイブリッド2D+3D SPECT/CT画像法

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Morphological and Functional Assessment of the Right Ventricle Using 3D Echocardiography

3次元心エコー検査を用いた右心室の形態学的・機能的評価

Traditionally, it was believed that the right side of the heart has a minor role in circulation; however, more and more data suggest that right ...

Time-Resolved, Dynamic Computed Tomography Angiography for Characterization of Aortic Endoleaks and Treatment Guidance via 2D-3D Fusion-Imaging

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大動脈内漏れの特性評価と2D-3D融合イメージング による 治療ガイダンスのための時間分解、動的コンピュータ断層撮影血管造影

In the United States, more than 80% of all abdominal aortic aneurysms are treated by endovascular aortic aneurysm repair (EVAR). The endovascular approach ...

Hemodynamic Precision in the Neonatal Intensive Care Unit using Targeted Neonatal Echocardiography

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