Name: 2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)
Uploaded: 2018-11-29T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum at JoVE.com

Kasper Hansen, Bioscience Enstitüsü, Aarhus Üniversitesi 3D ekokardiyografik alımı için erişim ve elektronik micromanipulator ile ilgili yardım sağlamak için kabul etmek istiyoruz.

Bakım ve Laboratuvar hayvanlarının kullanımı için ulusal Danimarka mevzuatı uyarınca bu protokol için yürütülen yordamlar vardı ve deneyler Danimarka ulusal hayvan deneyleri müfettişliği tarafından (iletişim kuralı # 2015-15-0201-00615) kabul edildi.
1. hazırlıkları
<ol><li>Amfibi hazırlamak orta.<ol>
<li>Yüksek kaliteli olmayan kimyasal tedavi musluk suyu amfibi araç olarak uygulanır. Bu kullanılamıyorsa, % 40'Holtfreter ' nın çözümü uygulayın.</li>
		<li>1...

<ol>
	<li>Forouzanfar, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+Global+Burden+of+Ischemic+Heart+Disease.">Assessing the Global Burden of Ischemic Heart Disease.</a> Glob. Heart. 7, 331-342 (2012).</li><li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2014+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2014 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 129, e28-e292 (2014).</li><li>Leferovich, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+adult+MRL+mice.">Heart regeneration in adult MRL mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98, 9830-9835 (2001).</li><li>Leferovich, J. M., Heber-Katz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+scarless+heart.">The scarless heart.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 13, 327-333 (2002).</li><li>Nakada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+induces+heart+regeneration+in+adult+mice.">Hypoxia induces heart regeneration in adult mice.</a> Nature. 541, 222-227 (2017).</li><li>Poss, K. D., Wilson, L. G., Keating, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+zebrafish.">Heart regeneration in zebrafish.</a> Science. 298, 2188-2190 (2002).</li><li>Chablais, F., Veit, J., Rainer, G., Jazwinska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+heart+regenerates+after+cryoinjury+induced+myocardial+infarction.">The zebrafish heart regenerates after cryoinjury induced myocardial infarction.</a> BMC Dev. Biol. 11, 21 (2011).</li><li>Gemberling, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration.">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends. Genet. 29, 611-620 (2013).</li><li>Gonzalez-Rosa, J. M., Martin, V., Peralta, M., Torres, M., Mercader, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+scar+formation+and+regression+during+heart+regeneration+after+cryoinjury+in+zebrafish.">Extensive scar formation and regression during heart regeneration after cryoinjury in zebrafish.</a> Development. 138, 1663-1674 (2011).</li><li>Schnabel, K., Wu, C. C., Kurth, T., Weidinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+cryoinjury+induced+necrotic+heart+lesions+in+zebrafish+is+associated+with+epicardial+activation+and+cardiomyocyte+proliferation.">Regeneration of cryoinjury induced necrotic heart lesions in zebrafish is associated with epicardial activation and cardiomyocyte proliferation.</a> PLoS One. 6 (4), e18503 (2011).</li><li>Oberpriller, J. O., Oberpriller, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+adult+newt+ventricle+to+injury.">Response of the adult newt ventricle to injury.</a> J. Exp. Zool. 187, 249-260 (1974).</li><li>Witman, N., Murtuza, B., Davis, B., Arner, A., Morrison, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recapitulation+of+developmental+cardiogenesis+governs+the+morphological+and+functional+regeneration+of+adult+newt+hearts+following+injury.">Recapitulation of developmental cardiogenesis governs the morphological and functional regeneration of adult newt hearts following injury.</a> Dev. Biol. 354, 67-76 (2011).</li><li>Gressens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+Mexican+axolotl+(Ambystoma+mexicanum).">An introduction to the Mexican axolotl (Ambystoma mexicanum).</a> Lab Animal. 33, 41-47 (2004).</li><li>Cano-Mart&#237;nez, A., Vargas-Gonz&#225;lez, A., Guarner-Lans, V., Prado-Zayago, E., Le&#243;n-Oleda, M., Nieto-Lima, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+structural+regeneration+in+the+axolotl+heart+(Ambystoma+mexicanum)+after+partial+ventricular+amputation.">Functional and structural regeneration in the axolotl heart (Ambystoma mexicanum) after partial ventricular amputation.</a> Arch. Cardiol. Mex. 80, 79-86 (2010).</li><li>McCusker, C., Gardiner, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+axolotl+model+for+regeneration+and+aging+research:+a+mini-review.">The axolotl model for regeneration and aging research: a mini-review.</a> Gerontology. 57, 565-571 (2011).</li><li>Khattak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+axolotl+(Ambystoma+mexicanum)+husbandry,+breeding,+metamorphosis,+transgenesis+and+tamoxifen-mediated+recombination.">Optimized axolotl (Ambystoma mexicanum) husbandry, breeding, metamorphosis, transgenesis and tamoxifen-mediated recombination.</a> Nat. Protoc. 9, 529-540 (2014).</li><li>Nakamura, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+analysis+of+Baf60c+during+heart+regeneration+in+axolotls+and+neonatal+mice.">Expression analysis of Baf60c during heart regeneration in axolotls and neonatal mice.</a> Develop. Growth Differ. 58, 367-382 (2016).</li><li>Tan, G. X. Y., Jamil, M., Tee, N. G. Z., Zhong, L., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+Reconstruction+of+Chick+Embryo+Vascular+Geometry+Using+Non-Invasive+High-Frequency+Ultrasound+for+Computational+Fluid+Dynamics.">3D Reconstruction of Chick Embryo Vascular Geometry Using Non-Invasive High-Frequency Ultrasound for Computational Fluid Dynamics.</a> Ann. Biomed. Eng. 43, 2780-2793 (2015).</li><li>Ho, S., Tan, G. X. Y., Foo, T. J., Phan-Thien, N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+Dynamics+and+Fluid+Dynamics+of+the+HH25+Chick+Embryonic+Cardiac+Ventricle+as+Revealed+by+a+Novel+4D+High-Frequency+Ultrasound+Imaging+Technique+and+Computational+Flow+Simulations.">Organ Dynamics and Fluid Dynamics of the HH25 Chick Embryonic Cardiac Ventricle as Revealed by a Novel 4D High-Frequency Ultrasound Imaging Technique and Computational Flow Simulations.</a> Ann. Biomed. Eng. , (2017).</li><li>Wasmeier, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+transthoracic+echocardiography+in+small+animals+using+clinical+equipment.">Reproducibility of transthoracic echocardiography in small animals using clinical equipment.</a> Coron. Artery. Dis. 18, 283-291 (2007).</li><li>Thygesen, M. M., Rasmussen, M. M., Madsen, J. G., Pedersen, M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+(2,6-diisopropylphenol)+is+an+applicable+immersion+anesthetic+in+the+axolotl+with+potential+uses+in+hemodynamic+and+neurophysiological+experiments.">Propofol (2,6-diisopropylphenol) is an applicable immersion anesthetic in the axolotl with potential uses in hemodynamic and neurophysiological experiments.</a> Regeneration. 4 (3), (2017).</li></ol>

Amfibi ve diğer memeli olmayan türler ekokardiyografinin yeri kırmızı kan hücreleri yetişkin memeliler dışında tüm omurgalılarda çekirdekli doğası nedeniyle memeli ekokardiyografi daha temelde farklı veri verir. Bu belirgin kan sinyal ve kan doku kontrast amfibi ekokardiyografik görüntüleri Örneğin, fare veya insan ekokardiyografi ile karşılaştırıldığında daha az olur. Bu görüntü segmentasyonu işlenmemiş tek kare ultrason görüntüleri üzerinde kan dokusundan ayırt etmek zor ...

İskemik kalp hastalığı, ölüm dünya çapında1,2önde gelen nedenidir. Her ne kadar çok hızlı ve ince ayar tıbbi müdahale nedeniyle akut miyokard infarktüsü hayatta, insanlarda iskemik olaylar genellikle fibrotik hipertrofisi, elektrik arıza ve kalp azalmış bir fonksiyonel kapasite ile ilişkili yara izi için yol . Bu eksikliği kalp doku rejeneratif potansiyel memeliler arasında paylaşılır ve her ne kadar tartışmalı talepleri memeli kardiyak rejenerasyon bildirilmiştir, bunlar belirli fare suşları3,4 ' e sınırlı olmuştur ve hipoksi fareler5tedavi. Böylece, kardiyak rejeneratif tıp ve biyoloji alanında sigara memeli hayvan modelleri iç kalp rejeneratif olayları incelemek için genellikle sınırlıdır. Zebra balığı (Danio rerio) son on yılda iç kalp rejenerasyon6,7,8,9,10 için en iyi karakterize model olarak kurulmuştur . Kolay laboratuvar bakım, kısa oluşturma süresi ve moleküler araçları geniş bir dizi nedeniyle zebra balığı de kalp geliştirme ve yenileme altta yatan genetik ve moleküler mekanizmaları için bir model olarak adapte olduğunu. Ancak, zebra balığı kalp dakika boyutları yapmak o daha az işlevsel değerlendirme için uygun ve karmaşık cerrahi prosedürler ve zebra balığı olmayan sevgilin phylogeny böylece bu tür bulgular mantıklı ekstrapolasyon sınırlar diğer büyük tetrapod modelleri kullanımını haklı. Omurgalı kalp rejenerasyon ilk modellerinden birini kaudat amfibi, Doğu newt (Notophthalmus viridescens)11, değerli model12kalır bir tür oldu.
Sahne başka bir kaudat amfibi, Meksika amfibi (A. mexicanum) son yıllarda büyük bir girmiştir (ilâ 100 g vücut kitle) ve laboratuvar uyarlanabilir hayvan modeli rejeneratif disiplinleri uzuv rejenerasyon, kapsayan geniş bir dizi için son derece Medulla Spinalis Yaralanmalarında ve kardiyak rejenerasyon13,14,15,16,17. Amfibi yüksek frekans ekokardiyografi kullanarak kalp üzerinde fonksiyonel ölçümler için son derece uysal ve kalp ventral tarafta kalsifiye yapıları yokluğu ultrason çok daha düşük seviyede resim eserler (Akustik ile görüntüleme sağlar gölgeleme ve yankı özellikle) daha kalsifiye göğüs kemiğinde ve kaburga ile diğer modeli hayvanlarda gözlenen.
Birkaç farklı yöntem ve amfibi kalp anestezi hem de tekrarlanabilir ekokardiyografik ölçümler elde etmek için hazırlıklar (Şekil 1, resim 2) aşağıdaki protokolünü açıklar (üç farklı anestezi uygulanıyor: benzokain, MS-222 ve propofol) ve anestezisiz iki hayvanlarda (3 rakam, 4 rakam, 5 rakam, 6 rakam, 7 rakam, Ek dosyaları 1-12) ve üç (Şekil 8, 9 rakam, Ek dosyaları 13-14) mekansal boyutları. Üç Odalı amfibi kalbidir (iki kulakçık ve bir tek ventrikül). Kulakçık büyük bir Sinüs Venozus tarafından sağlanır ve ventrikül konus arteriosus çıkım yolu (Şekil 2) boşaltır. Çoğu vurgu geleneksel olarak ventriküler rejenerasyon yerleştirilir ve kulakçık6,7,8,9,10,11 kurtarma daha az olduğu , 12 , 14 , 17, bu protokolü esas ölçümler ventrikül fonksiyonunun odaklanır.
Amfibi ekokardiyografi iyi literatürde tarif değil ve bu yazıda açıklanan 2B Yöntem geliştirme tahrik tarafından en iyi temsil gerek amfibi kalbi işlevselliğini verilen deneysel ayarı ve saatte. Böylece, yöntem tanımlamak burada nerede kardiyak fonksiyon sürekli bir yenilenme süreci boyunca izlenebilir kalp rejeneratif deneylerde tabidir. Ayrıca, yöntemleri genel olarak cardiophysiological deneylerde amfibi üzerinde uygulanan veya diğer kaudat veya anuran amfibi modelleri (e.g.,Xenopus) yayılmasını biraz değiştirilmiş. Amfibi birkaç farklı suşları ve renk çeşitleri (Örneğin, wildtype, melanoid, beyaz, albino, transgenik beyaz yeşil floresans protein ifadesi ile), ancak bu özellikleri uyumluluğunu etkiler mi var amfibi açıklanan protokol ile. 3D ekokardiyografik verisini almak için burada açıklanan yöntemi için geliştirilen klinik ultrason ve gelişmekte olan tavuk için daha önce açıklanan yöntemi ortalama ikinci dereceden kronolojik zamanmekansal görüntü korelasyon (STIC) tekniği, değiştirilmiş bir sürümüdür çekirdekli kırmızı kan hücreleri18,19içeren türler içinde yumuşak dokularda kan speckles sinyal geliştirmek. Bu yöntem, kardiyak kasılma ve hesaplanan akışkanlar dinamiği amfibi kalbinde gelişmiş modellenmesi için sağlar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1230">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Axolotl (Ambystoma mexicanum)</td>
			<td style="width:147px;">Exoterra GmbH</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td style="width:765px;">All strains (wildtype, melanoid, white, albino, transgenic white with GFP) can be applied for echocardiography</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Vevo 2100</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">Vevo 2100</td>
			<td>High frequency ultrasound system</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">MS700</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td style="width:103px;">MS700</td>
			<td>50 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MS550s</td>
			<td style="width:147px;">Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS550s</td>
			<td>40 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:147px;">Zeiss</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Benzocain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>94-09-7</td>
			<td>ethyl 4-aminobenzoate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MS-222</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>886-86-2</td>
			<td>ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonic acid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Propofol</td>
			<td>B. Braun Medical A/S</td>
			<td style="width:103px;">NA</td>
			<td>2,6-diisopropylphenol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7647-14-5&#160;</td>
			<td>NaCl</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">10035-04-8</td>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:216px;">Magnesium sulfate heptahydrate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;10034-99-8&#160;</td>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Potassium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;7447-40-7</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">&#160;67-64-1&#160;</td>
			<td>Propanone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Soft cloth</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of soft cloth measuring appromixately 70 x 55 cm^2 e.g. a dish towel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Styrofoam block</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of Styrofoam block measuring approximately 33 x 27 x 5 cm^3 e.g. a medium sized Styrofoam cooler lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic wrap</td>
			<td style="width:147px;">N/A</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Any piece of plastic wrap e.g. food wrap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tape</td>
			<td style="width:147px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:103px;">72359-02</td>
			<td>Leukoplast sleek</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Kimwipes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">Z188956&#160;</td>
			<td>Kimwipes, disposable wipers&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Excel 2010</td>
			<td style="width:147px;">Microsoft</td>
			<td style="width:103px;">N/A</td>
			<td>Excel 2010 or newer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td colspan="2">National Institutes of Health</td>
			<td>ImageJ 1.5e or newer. Rasband, W.S., ImageJ, U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2016.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

2d and 3d echocardiography in the axolotl (ambystoma mexicanum)

İskemik kalp hastalığı sonucunda kalp arıza büyük bir sorun olduğunu ve yüksek talep kalbine rejeneratif tedaviler vardır. Zebra balığı ve içsel kalp yenilenme yeteneğine semenderler gibi bir kaç modeli tür insan hastalar için gelecekteki rejeneratif tedaviler için sözü tutun. Cardioregenerative deneyler sonucu değerlendirmek için kalp fonksiyonunu takip edilebilir zorunludur. Amfibi semender (A. mexicanum) Biyolojide kardiyak fonksiyon değerlendirme için izin veren boyutları ulaşmak rejeneratif köklü modeli tür temsil eder. Bu iletişim kuralının amacını tekrarlanarak kardiyak patolojilerin ekokardiyografi ile değerlendirilmesi amfibi işlevinde ölçmek için yöntemleri oluşturmaktır. Farklı anestezi (benzokain, MS-222 ve propofol) uygulanması gösterdi ve imzalat ve unanesthetized axolotls iki boyutlu (2D) ekokardiyografik verilerinde edinimi açıklanmıştır. Üç boyutlu (3D) kalbin 2D ekokardiyografi-ebilmek ıstırap çekmek--dan tutarsızlık ve öznellik ölçümler ve bu fenomen sağlam bir yöntem, yani içi/arası-operator/gözlemci analiz ölçmek ve bu önyargı en aza indirmek için hafifletmek için olduğunu gösterdi. Son olarak, amfibi kalbi çok yüksek bir kronolojik zamanmekansal çözünürlükte ve belirgin kan doku kontrast ile 3D ekokardiyografik verileri elde etmek için bir yöntem açıklanır. Genel olarak, bu iletişim kuralı, kardiyak fonksiyon ve modeli anatomi değerlendirmek için gerekli yöntemleri sağlamak ve genel fizyolojik deneyler ve rejeneratif biyoloji uygulamaları ile ultrason Imaging'i kullanma amfibi dinamiklerini akış.

Intrapericardial uzayda amfibi hayvan boyutuna bağlıdır. Daha küçük hayvanlar (2-20 g, 7-15 cm) daha büyük cinsel olgun hayvanlar (> 20 g, > 15 cm) intrapericardial çoğunu odaları yer alacak, ancak kalp odaları perikardiyal sıvı (ekokardiyografinin yeri karanlık görünür) çevresindeki aşırı olacak alanı. Amfibi kalp ekokardiyografik sayısı temsilcisi sonuçlar için en iyi genel bakış sağlamak için daha küçük bir hayvan (10 g, 10 cm) Şe...

Watch this Scientific Journal Video about 2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum at JoVE.com

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum

Burada ekokardiyografi protokolleri kalbi amfibi semender (Ambystoma mexicanum), kalp yeniden oluşturma işlemi bir modeli türler, iki boyutlu ve üç boyutlu görüntü edinimi için mevcut. Bu yöntemler ile kardiyak fonksiyonların yüksek bir kronolojik zamanmekansal çözünürlükte boyuna değerlendirilmesi için olanak sağlar.

Amfibi (Ambystoma Mexicanum) 2D ve 3D ekokardiyografinin yeri

Cardiac malfunction as a result of ischemic heart disease is a major challenge, and regenerative therapies to the heart are in high demand. A few model ...

Bu yöntem, miyokardiyal yaralanma sonrasında kardiyak rejenerasyonun nasıl ilerlediği gibi rejeneratif alandaki anahtar soruların yanıtlatımına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı axolotl kardiyak fonksiyon yüksek çözünürlük, noninvaziv ve tekrarlanabilir değerlendirme sağlar. Ayrıca, bu yöntem de newts ve kenopus gibi diğer amfibi model organizmalar, uygulanabilir.Dudak şeklindeki bir hayvan yatağında anestezik axolotl supine konumlandırma ile başlayın. Orta eklendiğinde, hayvan yüzer, bu yüzden gevşek lastik bantlar ile güvenli olmalıdır. Daha sonra, toraks 3-5 milimetre derinliğinde olacak şekilde anestezi içeren orta ile yatak doldurun.Sadece B-modu, renk-Doppler modu ve darbe dalgası Doppler modu verileri kullanıyorsanız, aksiyolbu yordam için uyarı olabilir. Bu durumda, bir hamakta eğilimli hayvan pozisyon ve devam etmeden önce 30 ila 60 dakika boyunca stresten kurtarmak sağlar. Beyaz veya albino hayvanlar için, transdüser yer yardımcı olmak için hazır bir soğuk ışık kaynağı var.Bir dönüştürücü için, hayvanın kütlesine bağlı olarak 40 veya 50-hertz modeli kullanın. Sonra, transdüser ultrason jel hazırlamak ve veri toplama ile devam edin. Ultrason transdüserini torasik bölgede bulunan ve uzun eksenine paralel olarak hayvanın orta çizgisine konumlandırmaya başlayın.Ventrikül küçük bir kısmı, torasik kavite sağa konumlandırılmış, ventriküler diastole de çerçeve içinde görünmelidir. Sinüs venöz gibi her iki atria büyük bir kısmı da görünür olmalıdır. Bu yapılar diastole veya systole görünümünde tanımlanabilir olmalıdır.Sonra, ventriküler uzun eksenli görünümü elde etmek için transdüseri 1-3 milimetre sağa çevirin. Sonuç olarak, son systole ventrikül kesit alanı maksimum olduğunda doğru konuma ulaşılır. Doğru 2D ultrason ölçümleri transdüserin doğru konumlandırılmasına son derece bağlıdır.Transdüser yerleşimini titizlikle uygulayın ve öznelliği en aza indirmek için operatörler arası analiz yapın. Şimdi, B modunda, saniyede en az 50 kare en az üç kardiyak döngüleri elde. Genel görüntüleme modunu veya kardiyoloji modunu kullanma arasında seçim yapın.Daha sonra, ventrikül merkezi ekranın ortasında olana kadar hayvanın uzun ekseni boyunca dönüştürücü çevirin. Daha sonra, orta ventriküler kısa eksenli görünümü elde etmek için transdüser 90 derece saat yönünde döndürün. Bu konumdan, kalbin uzun ekseni boyunca transdüser çevirerek ventrikül dairesel şeklini değerlendirmek.Daha sonra dönüştürücünün uzun eksen düzlemine döndürülmesi ve atriyal uzun eksenli iki bölmeli bir görünüm elde etmek için orta hatta geri çevirin. Doğru pozisyon, son systole atrianın kesit alanları maksatlarında olduğunda elde edilir ve iki atria birleşince sola doğru 45 derece eğildiğinde sekiz rakamının ana hatlarını üstlenir. Ardından, B modu görüntüleri toplayın.Devam etmek için, çıkış yolu görünene kadar dönüştürücü sağa çevirin. Ventriküler uç systole görünümü, çıkış çapı en büyük olduğunda doğrudur ve orta enjeksiyon sırasında, yarı luminar vanalardan ikisi, çıkış girişinde görünür olduğunda. Bu görünümden, hız ve akış ölçümleri Doppler görüntüleme kullanılarak yapılabilir.Kardiyak enjeksiyon sırasında çıkış yollarında kan akışı hızları haritalamak için renk-Doppler modunu uygulayın. Daha sonra, ventriküler görünümde kan akışını görselleştirmek için renk-Doppler görüntüleme ve güç-Doppler görüntüleme uygulayın ve atriyal görünümde aynı şeyi. Daha sonra, doğrudan transdüser doğru çalışan çıkış yolu maksimum kan hızı konumuna yönelik renk-Doppler modu kullanın.Çıkış transdüser tamamen dik olmadığında, 45 dereceye kadar görüntü düzeltmek için bir ışın açısı ve açısal düzeltme uygulayın. Ardından, darbe dalgası Doppler modunda hız-zaman verilerini toplayın. Kardiyak döngünün hiçbir fazı sırasında spiral kapak çıkış görünümü örtüşmelidir.En az üç kardiyak döngüden veri toplayın. Daha sonra, transdüseri hareket ettirmeden, en az üç kardiyak döngüden B modunda veri elde edin. Daha sonra, sadece anesteziye sahip hayvanlar için, hayvanı 90 derece döndürün, böylece hayvanın sağ kısmı yukarı bakacak ve transdüseri eğik para-gill görünümüne, sadece paralel ve çıkıntılı solungaçlara doğru hareket ettirin.Bu görünüm, çıkış yollarında kan akışı hızıalternatif bir ölçüm sunuyor. Çıkış yolu yaklaşık 45 derece aşağı doğru çalışıyor olmalı, ve atria enjeksiyon sırasında çıkış yolu altında görünmelidir. Son olarak, darbe dalgası Doppler moduna geçin ve transdüseri, çıkış sistemindeki transdüserden kaçan maksimum kan hızını görmek için konumlandırın.Gerektiğinde, transdüsere dik çıkış yapmak için 45 dereceye kadar ışın açısı ve açısal düzeltme kullanın. Daha sonra, darbe dalgası Doppler modunda ve B modunda daha önce olduğu gibi aynı konumdan veri toplamak. 3D edinimi biraz zaman alır, bu yüzden axolotl anestezi olmalıdır.Dudak şeklindeki hayvan yatağına supine yerleştirin. Kauçuk bantlarla sabitle ve göğüs yüzeyini 3-5 milimetrelik ultrason ortamına batırın. 3D edinim sırasında ki hareketler sonraki yeniden yapılandırmaya zarar verir.Hayvan 3D ultrason alımı sırasında hareket ederse, işlem baştan tekrarlanmalıdır. Daha sonra, transdüseri torasik bölgede orta çizgiüzerinde yerleştirin ve sagittal 3D kayıt için uzun eksene paralel olarak yerleştirin veya transversal 3D kayıt için uzun eksene ortogonal yerleştirin. Daha sonra, tüm kardiyak bölgenin sonraki 3D yakalama kaplı alır emin olmak için dönüştürücü çevirin.Hem düzlem içi boyutta hem de düzlem dışı boyutta hareket ettirin. Görüntüleme modu için, eğer hayvanın kalp hızı dakikada 20 ile 60 arasındaysa, genel görüntüleme modunu seçin. Aksi takdirde, kardiyoloji modunu seçin.Işığı kapat. Şimdi, ham B-modu görüntüde, 2B kazancı anatomik yapıların zar zor tanınabilir olduğu bir seviyeye ayarlayın. Bu son rekonstrüksiyonlarda sinyal-gürültü oranını artıracaktır.Ardından, Z adımının veya dilim kalınlığının boyutuna karar verin. Şimdi, transdüserbir seferde bir Z-adım çevirin, tüm kardiyak bölge kapsanakadar her Z-adımda 1.000 kare içeren bir kayıt alarak. Açıklanan teknik kullanılarak 10 gram, 10 santimetre axolotl'un 2Boyutlu ekokardiyografik analizi yapıldı.Uzun eksenli görünüm iyi bir başlangıç noktası sağladı. Orta hat düzleminde sinüs venöz, atria ve ventrikül parçaları saptandi. Ventrikül düzleminin görüntülenmesi ventrikülün küresel ve yüksek oranda trabeküle olduğunu gösterdi.Atriyal düzlemde, atria daha düzensiz ve zar zor trabeculated ortaya çıktı. Çıkış yolu merkezi ventrikül merkezine yakındır. Uzun eksenden ve eğik para-solungaç düzleminden darbe dalgaDoppler kullanılarak kardiyak döngü ölçümleri bazı arka plan gürültüsü vardı.Hız zaman integralinin ölçümlerini yaparken bu gürültü aşılabilirdi. Renk-Doppler ve güç-Doppler görüntüleme kalp odaları ile akış deseni gösterdi. Ventrikülden, atriyadan ve çıkış sisteminden manzaralar mümkün.3D ekokardiyografi de yapıldı. Kalbin bu çok programlı görünümü, yüzey ve hacim rekonstrüksiyonları veya segmentasyon ve 3D modellerin üretimi gibi birçok kullanıma sahiptir. Bu videoyu izledikten sonra, axolotl 2D ve 3D ekokardiyografi gerçekleştirmek için nasıl iyi bir anlayışa sahip olmalıdır.Bir kez hakim, 2D ultrason tekniği hayvan başına beş dakikadan az yapılabilir, düzgün yapılırsa, 3D edinimi hayvan başına bir saat kadar sürebilir ise. Bu işlemden sonra kalp yapısı ve anatomi ile ilgili ek soruları cevaplamak için kalp ekstraksiyonu ve histoloji gibi diğer yöntemler de uygulanmaktadır.

Research

JoVE Journal

Medicine

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl (Ambystoma Mexicanum)

Transthoracic Echocardiography in Mice

Fareler de Transtorasik Ekokardiyografi

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Yüksek frekanslı Yüksek çözünürlüklü Ekokardiyografi: İskemi-Reperfüze murin Kalp Miyokard Strain, kontraktilite ve Mitral Yetmezliğinde Non-invaziv Tekrarlanan Ölçüm İlk Kanıt

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Murin Ekokardiyografi ve Ultrasonik Görüntüleme

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Murine Fetal Echocardiography

Mürin Fetal Ekokardiyografi

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl

Rejeneratif Axolotl'da Mikrocerrahi Laminektomi Ile Kontüzyon Omurilik Yaralanması

The purpose of this study is to establish a standardized and reproducible regenerative blunt spinal cord injury model in the axolotl (Ambystoma ...

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy (PRRT): 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

A Whole Body Dosimetry Protocol for Peptide-Receptor Radionuclide Therapy PRRT: 2D Planar Image and Hybrid 2D+3D SPECT/CT Image Methods

Peptit-Reseptör Radyonüklid Tedavisi (PRRT) için Tüm Vücut Dozimetri Protokolü : 2D Düzlemsel Görüntü ve Hibrid 2D+3D SPECT/BT Görüntü Yöntemleri

Peptide-receptor-radionuclide-therapy (PPRT) is a targeted therapy that combines a short-range energy radionuclide with a substrate with high specificity ...

Morphological and Functional Assessment of the Right Ventricle Using 3D Echocardiography

3D Ekokardiyografi ile Sağ Ventrikülün Morfolojik ve Fonksiyonel Değerlendirmesi

Traditionally, it was believed that the right side of the heart has a minor role in circulation; however, more and more data suggest that right ...

Time-Resolved, Dynamic Computed Tomography Angiography for Characterization of Aortic Endoleaks and Treatment Guidance via 2D-3D Fusion-Imaging

Time-Resolved, Dynamic Computed Tomography Angiography for Characterization of Aortic Endoleaks and Treatment Guidance via 2D-3D Fusion-Imaging

Aort Endoleaks'in Karakterizasyonu için Zaman Çözümlenmiş, Dinamik Bilgisayarlı Tomografi Anjiyografisi ve 2D-3D Füzyon-Görüntüleme ile Tedavi Rehberliği

In the United States, more than 80% of all abdominal aortic aneurysms are treated by endovascular aortic aneurysm repair (EVAR). The endovascular approach ...

Hemodynamic Precision in the Neonatal Intensive Care Unit using Targeted Neonatal Echocardiography

Targeted neonatal echocardiography (TnECHO) refers to the use of comprehensive echocardiographic evaluation and physiologic data to obtain accurate, ...