Name: three-dimensional rendering and analysis of immunolabeled, clarified human placental villous vascular networks
Uploaded: 2018-03-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks at JoVE.com

وأيد "مكتب نيويورك التابع للدولة" هذا العمل للأشخاص ذوي العاهات الخلقية والمشيمة تحليلات LLC، نيو روشيل، نيويورك.

هذا البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية لمعهد الدولة لنيويورك "البحوث الأساسية" في لجنة أخلاقيات البحوث البشرية العاهات الخلقية.
1. تشريح شجرة فيلوس
<ol><li>شطف الفورمالين الثابتة أنسجة المشيمة مع الفوسفات مصقول المالحة (PBS)14 لإزالة في الفورمالين ووضعه في طبق بتري ...

<ol>
	<li>Thornburg, K. L., Kolahi, K., Pierce, M., Valent, A., Drake, R., Louey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+features+of+placental+programming.">Biological features of placental programming.</a> Placenta. 48, 47-53 (2016).</li><li>Misra, D. P., Salafia, C. M., Charles, A. K., Miller, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Birth+weights+smaller+or+larger+than+the+placenta+predict+BMI+and+blood+pressure+at+age+7+years.">Birth weights smaller or larger than the placenta predict BMI and blood pressure at age 7 years.</a> J Dev Orig Health Dis. 1 (2), 123-130 (2010).</li><li>Burton, G. J., Fowden, A. L., Thornburg, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+Origins+of+Chronic+Disease.">Placental Origins of Chronic Disease.</a> Physiol Rev. 96 (4), 1509-1565 (2016).</li><li>Srinivasan, A. P., Omprakash, B. O. P., Lavanya, K., Subbulakshmi Murugesan, P., Kandaswamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+prospective+study+of+villous+capillary+lesions+in+complicated+pregnancies.">A prospective study of villous capillary lesions in complicated pregnancies.</a> J Pregnancy. 2014, 193925 (2014).</li><li>Jones, C. J. P., Desoye, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+possible+function+for+placental+pericytes.">A new possible function for placental pericytes.</a> Cells Tissues Organs. 194 (1), 76-84 (2011).</li><li>Maly, A., Goshen, G., Sela, J., Pinelis, A., Stark, M., Maly, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histomorphometric+study+of+placental+villi+vascular+volume+in+toxemia+and+diabetes.">Histomorphometric study of placental villi vascular volume in toxemia and diabetes.</a> Hum Pathol. 36 (10), 1074-1079 (2005).</li><li>Ellery, P. M., Cindrova-Davies, T., Jauniaux, E., Ferguson-Smith, A. C., Burton, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+transcriptional+activity+in+the+syncytiotrophoblast+of+the+human+placenta.">Evidence for transcriptional activity in the syncytiotrophoblast of the human placenta.</a> Placenta. 30 (4), 329-334 (2009).</li><li>Jirkovsk&#225;, M., Kub&#237;nov&#225;, L., Jan&#225;&#269;ek, J., Kal&#225;b, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3-D+study+of+vessels+in+peripheral+placental+villi.">3-D study of vessels in peripheral placental villi.</a> Image Anal Stereol. 26 (3), 165-168 (2011).</li><li>Pearce, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-Based+Modeling+of+Blood+Flow+and+Oxygen+Transfer+in+Feto-Placental+Capillaries.">Image-Based Modeling of Blood Flow and Oxygen Transfer in Feto-Placental Capillaries.</a> PLOS ONE. 11 (10), 0165369 (2016).</li><li>Plitman Mayo, R., Olsthoorn, J., Charnock-Jones, D. S., Burton, G. J., Oyen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+modeling+of+the+structure-function+relationship+in+human+placental+terminal+villi.">Computational modeling of the structure-function relationship in human placental terminal villi.</a> J Biomech. 49 (16), 3780-3787 (2016).</li><li>Mayhew, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stereological+perspective+on+placental+morphology+in+normal+and+complicated+pregnancies.">A stereological perspective on placental morphology in normal and complicated pregnancies.</a> J Anat. 215 (1), 77-90 (2009).</li><li>Teasdale, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+changes+in+the+functional+structure+of+the+human+placenta+in+relation+to+fetal+growth:+a+morphometric+study.">Gestational changes in the functional structure of the human placenta in relation to fetal growth: a morphometric study.</a> Am J Obstet Gynecol. 137 (5), 560-568 (1980).</li><li>Richardson, D. S., Lichtman, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clarifying+Tissue+Clearing.">Clarifying Tissue Clearing.</a> Cell. 162 (2), 246-257 (2015).</li><li>Dulbecco, R., Vogt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque+formation+and+isolation+of+pure+lines+with+poliomyelitis+viruses.">Plaque formation and isolation of pure lines with poliomyelitis viruses.</a> J Exp Med. 99 (2), 167-182 (1954).</li><li>Gill, J. S., Salafia, C. M., Grebenkov, D., Vvedensky, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+oxygen+transport+in+human+placental+terminal+villi.">Modeling oxygen transport in human placental terminal villi.</a> J Theor Biol. 291, 33-41 (2011).</li><li>Plitman Mayo, R., Charnock-Jones, D. S., Burton, G. J., Oyen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+modeling+of+human+placental+terminal+villi.">Three-dimensional modeling of human placental terminal villi.</a> Placenta. 43, 54-60 (2016).</li></ol>

وأقر "المجلس استعراض المؤسسية" جمع الأنسجة فيلوس المشيمية للتثبيت الفورمالين من الانتخابية إنهاء الحمل. قبل الإجراءات التي أجريت، استعراضاً موجزاً للسجل الطبي أشار إلى سن الأمهات، التكافؤ، وأكد عدم وجود أي الطبية الأساسية (مثلارتفاع ضغط الدم، والسكري ومرض الذئبة) أو الجنين (الشذوذ ?...

فهمنا للمشيمة النامية وعن الأمراض، محدودة إلى حد كبير، الاستدلال على العلاقات المكانية بين الزوائد المتاخمة والشعيرات الدموية الواردة المستمدة من أقسام النسيجي. في هذه الدراسة، تناولنا هذه المسألة بوضع الوسائل اللازمة لتوليد اﻷداءات ثلاثية الأبعاد (3D) للشبكات الشعرية المشيمة البشرية التي تصلح لإجراء تحليلات لميزات الشبكة الشعرية (مثل المنطق التفريعي، صلابة). للقيام بذلك جمعنا بين تلطيخ إيممونوفلوريسسينت مع اثنين من المنتجات إزالة الأنسجة التجارية، فيسيكول-1 وفيسيكول-2 (المشار إليها أدناه كحل-1 والحل-2).
المشيمة البشرية مجمع واسعة من الأوعية الدموية التي تقع في مجال التفاعل بين الدم إينتيرفيلوس الأم والجنين النامي. تمتد خارجاً من أن الإدراج في لوحة المشيمة، الحبل السري وفروع في شبكة من الشرايين والاوردة التي تتشعب لتغطية سطح المشيمة مع وضع شبكة الأوعية الدموية. تحقق غاياتها ثم تخترق أسفل الداخلية أو عمق القرص المشيمة حيث يخضع لعدة أجيال أكثر التفريع وينتهي في الزوائد الطرفية وشبكاتها الشعرية الواردة، الموقع لتبادل الغازات، المواد الغذائية، والأيضية النفايات بين دم الأم والجنين.
الإهانات إلى شبكة الشعيرات الدموية المشيمية خلال التنمية عواقب دائمة على صحة الجنين والرضع حديثي الولادة و الكبار الناشئة 1،،من23. ونظرا للأمراض المرتبطة بالحمل مثل الإجهاض، وتقييد النمو داخل الرحم، 4،السكري مقدمات الارتعاج والأمهات5،6 هناك قيمة عالية على وضع أساليب لقياس و توصيف الشبكات الشعرية فيلوس المشيمة. حاجز رئيسي أن شبكات الأوعية الدموية المشيمية تشمل طائفة واسعة من النطاق. يمكن أن تكون شبكات الأوعية الدموية السطحية كبيرة كما 4-5 مم في القطر. الشعيرات الدموية فيلوس المحطة الطرفية يتم بناء على أمر من 10-20 ميكرومتر في القطر؛ تحتوي المشيمة على أكثر من 300 كيلومتر من الأوعية الدموية 7. وفي الوقت الحاضر، هناك تقنيات سهلة الاستخدام وسريعة القليلة التي يمكن التقاط هذه النهايات من حجم السفينة. وحتى الآن، يمكن أن يصبح سوى عدد صغير من الزوائد بالفحص المجهري. على سبيل المثال، جيركوفسكا et al. ركز على الزوائد المشيمية في الأجل، الجمع بين الفحص المجهري [كنفوكل] مع أقسام الضوئية المسلسل على 1 ميكرومتر فترات تم الحصول عليها من 120 ميكرومتر سميكة الأقسام؛ لا توجد بيانات عن عدد العينات التي درست ولا إحصاءات قدمت 8. وحددت هياكل الشعرية، وملامح من الزوائد والشعيرات الدموية كانت مرسومة باليد، مع وسم تصديرها لتحليل الصور. بينما الكتاب مناقشة المترتبة على نتائجها "شبكة الأوعية الدموية فيلوس المتزايد"، هذه الاستنتاجات إشكالية عندما فقط "مصطلح" (36 + الأسبوع الحملي العمر) درس الأنسجة. وبالمثل، مايو كلينيك etلام وبيرس et al. تعتمد على الأنسجة من نفس الفئة العمرية، لهذه المحاكاة لنقل الدم تدفق والأكسجين، ولكن تحليلاتها محدودة لمدة قليلة فقط، الزوائد الطرفية 9،10 . كما طبق ستيريولوجي لدراسة هيكل السفن فيلوس. ولكن مرة أخرى، انصب التركيز عموما على الحمل فيما بعد تسليم الرضع قوبلن مع واحد أو أكثر الحمل مضاعفات 11،12.
حتى وقت قريب، الفحص المجهري [كنفوكل] اقتصر على التصوير إلى أعماق الأنسجة من 100-200 ميكرون بسبب امتصاص إثارة والانبعاثات من الأسفار ب الأنسجة السطحية 13 . على الرغم من إزالة الأنسجة والأنسجة ثلاثية الأبعاد قد وصفت على نطاق واسع في الأدب، وهناك أساليب عديدة لانسجة تطهير العديد غير صالحة للاستخدام مع الأنسجة بشكل عام، كما أنهم لا رجعة فيه الضرر مورفولوجيا الخلوية من خلال هايبرهيدريشن لإزالة الدهون أو البروتينات. ولذلك، من غير الممكن للتحقق من أن هذه النتائج إرشادية للأنسجة نفسها ولا التحف من تجهيز بينما الأنسجة لدينا عملية مسح تقنية عكسها قادرة على التحقق من صحة ضد الأنسجة التقليدية. إزالة الأنسجة عموما ينطوي على إحدى الطرق الرئيسية الثلاث: 1) مطابقة موحدة للانكسار (RI) لمكونات الأنسجة بغمر في حلول مطابقة ري، الذي يزيل بعثرة الخفيفة التراكمية تسبب من لينسينج بسبب استمرار تقلب ري منخفضة (cytosol) ومكونات ري (بروتين/الدهون) عالية؛ 2) إزالة مكونات المادة الدهنية عن طريق التضمين في المائية واستخدام التفريد/نشر لإزالة مكونات الدهون؛ 3) توسيع هيكل البروتين للسماح بزيادة تغلغل المذيبات لتشجيع التوحيد ري 13/تمسخ. في حين أن هذه النهج يمكن أن تجعل الأنسجة شفافة وتسمح بتمثيل ثلاثي الأبعاد للمؤشرات الحيوية توليد، هذه تمثيلات ثلاثية الأبعاد ذات قيمة السريرية مشكوك فيها كما أنها تشكل تحديا لتحديد ما إذا كانت هذه الصور يدل على خصائص الأنسجة أو أنسجة تطهير العملية. من ناحية أخرى، نظراً للأنسجة لدينا مسح عكسها يمكن تطبيق معيار النسيجي و/أو إيمونوهيستوتشيميستري للنسيج نفسه تقييم ما إذا كانت التعديلات الهامة سريرياً.
تقدم هذه الدراسة تحليلاً لعينات فيلوس القاصي 47 التي تم الحصول عليها من إجمالي 23 سريرياً العادية والانتخابية إنهاء الحمل بين 9-23 إتمام أسبوعا من الحمل والشحنتين العادي المدى الكامل. وقد مكن الفلورة وسم تروفوبلست والجهاز إجراء تحليل كمي والآلي من تغييرات في شبكات الأوعية الدموية فيلوس وتعقيدها.
مع هذا البروتوكول، ونحن عزل وتحليل الزوائد الطرفية وشبكاتها الشعرية على نطاق لا يمكن سابقا. وسيحدد هذا النهج، عند تطبيقها على تطوير شبكة فيلوس والشعرية عبر الحمل تلك الخصائص التي هي الأساس لولادة طفل سليم. عند تطبيقها على دراسات لحالات الحمل معقدة، فإنه سيوضح أيضا عند وكيفية تعديل الأمراض المشيمية الأشجار فيلوس والشبكات الشعرية أنها غمد، وكيف هذه تؤثر على رفاه الجنين.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1277px;" width="1277">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:435px;">10% Formaldehyde solution (w/v) in aqueous phosphate buffer</td>
			<td style="width:199px;">Macron Fine Chemicals</td>
			<td style="width:127px;">H-121-08</td>
			<td style="width:517px;">General fixation agent, ready to use formula, use caution as vapors are toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scalpel blades</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">08-916-5B No. 11</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scalpel</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">08-913-5</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine forceps</td>
			<td style="width:199px;">Electron Microscopy Services</td>
			<td style="width:127px;">78354-119</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro Tube (1.7 mL)</td>
			<td style="width:199px;">PGC Scientifics</td>
			<td style="width:127px;">505-201</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:199px;">Sigma</td>
			<td style="width:127px;">D8537</td>
			<td style="width:517px;">PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pipette</td>
			<td style="width:199px;">VWR</td>
			<td style="width:127px;">52947-948</td>
			<td style="width:517px;">disposable, 3ml transfer pipette</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:199px;">Boehriner Mannheim</td>
			<td style="width:127px;">789 704</td>
			<td style="width:517px;">Dilute to 0.1% from stock</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Goat Serum</td>
			<td style="width:199px;">Gibco</td>
			<td style="width:127px;">16210-064</td>
			<td style="width:517px;">Dilute to 2% in PBS solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse monoclonial anti-ck7 Keratin 7 Ab-2 (Clone OV-TL 12/30)</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">MS-1352-RQ</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rabbit Anti-CD31 antibody</td>
			<td style="width:199px;">Abcam</td>
			<td style="width:127px;">ab28364</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">green emitting (520 nm) fluorochrome&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:127px;">A11017</td>
			<td style="width:517px;">Alexa-Fluor 488</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">infrared emitting (652 nm) fluorochrome</td>
			<td style="width:199px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:127px;">A21072</td>
			<td style="width:517px;">Alexa Fluor 633</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;">Ethanol alcohol 200 proof</td>
			<td style="width:199px;">Pharmco-Aaper</td>
			<td style="width:127px;">111000200</td>
			<td style="width:517px;">Dilute down to lower concentrations using PBS as needed</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Solution-1</td>
			<td style="width:199px;">Visikol Inc.</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:517px;">Visikol Histo-1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Solution-2</td>
			<td style="width:199px;">Visikol Inc.</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:517px;">Visikol Histo-2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Skyes-Moore chambers</td>
			<td style="width:199px;">BellCo Glass Inc.</td>
			<td style="width:127px;">P/N 1943-11111</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">25 gauge needle</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">14-826AA</td>
			<td style="width:517px;">BD Precision Glide Needes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">14-823-40</td>
			<td style="width:517px;">BD disposable syringe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PDMS silicon sheets</td>
			<td style="width:199px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:127px;">P/N 578T31</td>
			<td style="width:517px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">confocal microscope</td>
			<td style="width:199px;">Nikon Inc.</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:517px;">Nikon C1 Confocal Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Deconvolution software</td>
			<td style="width:199px;">Media Cybernetics</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:517px;">AutoQuant X22</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fiji image processing software</td>
			<td style="width:199px;"></td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:517px;">free, Open source&#160; software available at https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hematoxylin</td>
			<td style="width:199px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:127px;">3801570</td>
			<td style="width:517px;">Component 1 of SelecTech H&#38;E staining system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alcoholic Eosin</td>
			<td style="width:199px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:127px;">3801615</td>
			<td style="width:517px;">Component 2 of SelecTech H&#38;E staining system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blue Buffer</td>
			<td style="width:199px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:127px;">3802918</td>
			<td style="width:517px;">Component 3 of SelecTech H&#38;E staining system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aqua Define MCX</td>
			<td style="width:199px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:127px;">3803598</td>
			<td style="width:517px;">Component 4 of SelecTech H&#38;E staining system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:435px;">Immunohistochemistry detection system</td>
			<td style="width:199px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:127px;">TL-125-QHD</td>
			<td>UltraVision Quanto Detection System HRP DAB</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional rendering and analysis of immunolabeled, clarified human placental villous vascular networks

تبادل المغذيات والغاز بين الأم والجنين يحدث في الواجهة من الدم إينتيرفيلوس الأمهات والشبكة الشعرية فيلوس الواسعة التي تشكل جزءا كبيرا من حمة المشيمة البشرية. الشبكة الشعرية فيلوس القاصي هو المحطة إمدادات الدم الجنين بعد عدة أجيال من تفريع السفن تمتد خارجاً من الحبل السري. هذه الشبكة قد غمد خلوية متجاورة، طبقة حاجز تروفوبلست المخلوي، مما يمنع اختلاط دم الجنين ودم الأم الذي هو اغتسل بشكل مستمر. الإهانات لسلامة الشبكة الشعرية المشيمة، التي تحدث في اضطرابات مثل الأمهات مرض السكري وارتفاع ضغط الدم والبدانة، عواقب تلك المخاطر الصحية الخطيرة الحالية للجنين، وفيات الرضع، والكبار. لتحديد الآثار الهيكلية لهذه الإهانات بشكل أفضل، تم وضع بروتوكول لهذه الدراسة، أن يلتقط بنية الشبكة الشعرية بناء على أمر من 1-2 مم3 فيه أحد يمكن التحقيق معالمه طوبولوجي بتعقيداتها كاملة. لتحقيق هذا الهدف، يتم تشريح مجموعات من الزوائد الطرفية من المشيمة، وطبقة تروفوبلست والجهاز الشعرية إيمونولابيليد. ثم توضح هذه العينات مع أنسجة جديدة تطهير العملية التي تجعل من الممكن الحصول على رصات الصور [كنفوكل] إلى أعماق z ~ 1 مم. اﻷداءات ثلاثية الأبعاد هذه المكدسات ثم معالجتها وتحليلها لتوليد شبكة الشعرية الأساسية تدابير مثل الحجم وعدد الفروع الشعرية، ونقاط النهاية فرع الشعرية، كالتحقق من مدى ملاءمة هذا النهج وصف الشبكة الشعرية.

اﻷداءات ثلاثية الأبعاد التي تم إنشاؤها من الشعيرات الدموية في مجموعات من الزوائد الطرفية في المشيمة البشرية من العمر الحملي 8 أسابيع للتسليم الأجل كانت تحسب كمجموعات فردية والعظمية لتحليل الشبكة. هي الوحدات الوظيفية للمشيمة (الشكل 1أ) الأشجار ا...

Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks at JoVE.com

Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks

تقدم هذه الدراسة وضع بروتوكول للأنسجة يمكن عكسها المقاصة، إيمونوستينينج، 3D--تقديم وتحليل شبكات الأوعية الدموية في المشيمة البشرية الزوائد عينات تتراوح بين 1-2 مم3.

التقديم ثلاثي الأبعاد وتحليل إيمونولابيليد، أوضح البشري شبكات الأوعية الدموية فيلوس المشيمية

Nutrient and gas exchange between mother and fetus occurs at the interface of the maternal intervillous blood and the vast villous capillary network that ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Differentiation of a Human Neural Stem Cell Line on Three Dimensional Cultures, Analysis of MicroRNA and Putative Target Genes

التمايز من العصبية البشرية خط الخلايا الجذعية على الثقافات الثلاث الأبعاد، تحليل الجينات الرنا الميكروي، واعتبارا الهدف

Neural stem cells (NSCs) are capable of self-renewal and differentiation into neurons, astrocytes and oligodendrocytes under specific local ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

تحليل الزرد اليرقات الهيكل العظمي النزاهة العضلات مع ايفانز الأزرق صبغ

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Three-dimensional Quantification of Dendritic Spines from Pyramidal Neurons Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells

الكمي ثلاثي الأبعاد من شجيري العمود الفقري من الخلايا العصبية الهرمية المستمدة من صنع الإنسان المحفزة الخلايا الجذعية

Dendritic spines are small protrusions that correspond to the post-synaptic compartments of excitatory synapses in the central nervous system. They are ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

تحليل الناجم عن حمض الريتينويك العصبية تمايز الخلايا الجذعية الجنينية الماوس في الهيئات مضغي اثنين وثلاثة الأبعاد

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

أفقي جبل كامل: A معالجة الرواية والتصوير بروتوكول للثدي، ثلاثة-- الأبعاد الأنسجة عبر-- أقسام الجلد

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

استخدام الموجات فوق الصوتية عالية التردد ثلاثي الأبعاد رواية لتوصيف الحمل المبكر في الماوس

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Three-dimensional Inflammatory Human Tissue Equivalents of Gingiva

مكافئات الأنسجة البشرية التحريضية ثلاثية الأبعاد للثة

Periodontal diseases (such as gingivitis and periodontitis) are the leading causes of tooth loss in adults. Inflammation in gingiva is the fundamental ...

Three-dimensional Organotypic Cultures of Vestibular and Auditory Sensory Organs

الثقافات أورجانوتيبيك ثلاثي الأبعاد للأجهزة الحسية السمعية والدهليزيه

The sensory organs of the inner ear are challenging to study in mammals due to their inaccessibility to experimental manipulation and optical observation. ...

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

جيل بانكريتويدس التعبير عن الأنسولين خالية من السقالة، ثلاثي الأبعاد من الماوس المتكفل البنكرياس في المختبر

The pancreas is a complex organ composed of many different cell types that work together to regulate blood glucose homeostasis and digestion. These cell ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

الموجات فوق الصوتية عالية التردد لتحليل وضع الجنين والمشيمة في فيفو

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...