Name: three-dimensional inflammatory human tissue equivalents of gingiva
Uploaded: 2018-04-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Inflammatory Human Tissue Equivalents of Gingiva at JoVE.com

Detta arbete stöds delvis av Japan Society för den befordran av vetenskap (JSPS) bidrag för vetenskaplig forskning (26861689-17 K 11813). Författarna vill tacka Mr Nathaniel Green för korrekturläsning.

Detta protokoll syftar till att skapa mänskliga mjukvävnad medel, gingival såret modeller och gingivit modeller. Mänsklig hud epidermala keratinocyter (HaCaT) var vänligen tillhandahållen från Professor Norbert E. Fusenig av Deutsches Krebsforschungszentrum (Heidelberg, Tyskland)7. Humana gingivala fibroblaster (HGFs) isolerades från gingival vävnader enligt den tidigare publicerade protokoll8. Informerat samtycke erhölls i förväg, och studien var godkänd enlig...

<ol>
	<li>Cekici, A., Kantarci, A., Hasturk, H., Van Dyke, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+and+immune+pathways+in+the+pathogenesis+of+periodontal+disease.">Inflammatory and immune pathways in the pathogenesis of periodontal disease.</a> Periodontology 2000. 64 (1), 57-80 (2014).</li><li>Hasturk, H., Kantarci, A., Van Dyke, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+Inflammatory+Diseases+and+Systemic+Inflammation:+Role+of+the+Macrophage.">Oral Inflammatory Diseases and Systemic Inflammation: Role of the Macrophage.</a> Frontiers in Immunology. 3, 118 (2012).</li><li>Koh, T. J., DiPietro, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+wound+healing:+The+role+of+the+macrophage.">Inflammation and wound healing: The role of the macrophage.</a> Expert reviews in molecular medicine. 13, e23 (2011).</li><li>Mescher, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+and+fibroblasts+during+inflammation+and+tissue+repair+in+models+of+organ+regeneration.">Macrophages and fibroblasts during inflammation and tissue repair in models of organ regeneration.</a> Regeneration. 4 (2), 39-53 (2017).</li><li>Struillou, X., Boutigny, H., Soueidan, A., Layrolle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Animal+Models+in+Periodontology:+A+Review.">Experimental Animal Models in Periodontology: A Review.</a> The Open Dentistry Journal. 4, 37-47 (2010).</li><li>Han, Y. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+Periodontal+Bacteria+and+Human+Oral+Epithelial+Cells:+Fusobacterium+nucleatum+Adheres+to+and+Invades+Epithelial+Cells.">Interactions between Periodontal Bacteria and Human Oral Epithelial Cells: Fusobacterium nucleatum Adheres to and Invades Epithelial Cells.</a> Infection and Immunity. 68 (6), 3140-3146 (2000).</li><li>Boukamp, P., Petrussevska, R. T., Breitkreutz, D., Hornung, J., Markham, A., Fusenig, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+keratinization+in+a+spontaneously+immortalized+aneuploid+human+keratinocyte+cell+line.">Normal keratinization in a spontaneously immortalized aneuploid human keratinocyte cell line.</a> J Cell Biol. 106 (3), 761-771 (1988).</li><li>Xiao, L., Miwa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogen-rich+water+achieves+cytoprotection+from+oxidative+stress+injury+in+human+gingival+fibroblasts+in+culture+or+3D-tissue+equivalents,+and+wound-healing+promotion,+together+with+ROS-scavenging+and+relief+from+glutathione+diminishment.">Hydrogen-rich water achieves cytoprotection from oxidative stress injury in human gingival fibroblasts in culture or 3D-tissue equivalents, and wound-healing promotion, together with ROS-scavenging and relief from glutathione diminishment.</a> Hum Cell. 30 (2), 72-87 (2017).</li><li>Tsuchiya, S., Yamabe, M., Yamaguchi, Y., Kobayashi, Y., Konno, T., Tada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+a+human+acute+monocytic+leukemia+cell+line+(THP-1).">Establishment and characterization of a human acute monocytic leukemia cell line (THP-1).</a> Int J Cancer. 26 (2), 171-176 (1980).</li><li>Ara, T., Kurata, K., Hirai, K., Uchihashi, T., Uematsu, T., Imamura, Y., Furusawa, K., Kurihara, S., Wang, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+gingival+fibroblasts+are+critical+in+sustaining+inflammation+in+periodontal+disease.">Human gingival fibroblasts are critical in sustaining inflammation in periodontal disease.</a> J Periodontal Res. 44 (1), 21-27 (2009).</li><li>Park, E. K., Jung, H. S., Yang, H. I., Yoo, M. C., Kim, C., Kim, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+THP-1+differentiation+is+required+for+the+detection+of+responses+to+weak+stimuli.">Optimized THP-1 differentiation is required for the detection of responses to weak stimuli.</a> Inflamm Res. 56 (1), 45-50 (2007).</li><li>Sharif, O., Bolshakov, V. N., Raines, S., Newham, P., Perkins, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+profiling+of+the+LPS+induced+NF-kappaB+response+in+macrophages.">Transcriptional profiling of the LPS induced NF-kappaB response in macrophages.</a> BMC Immunol. 8, 1 (2007).</li><li>Shetty, S., Gokul, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratinization+and+its+disorders.">Keratinization and its disorders.</a> Oman Med J. 27 (5), 348-357 (2012).</li><li>Klinge, B., Matsson, L., Attstr&#246;m, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histopathology+of+initial+gingivitis+in+humans.+A+pilot+study.">Histopathology of initial gingivitis in humans. A pilot study.</a> J Clin Periodontol. 10 (4), 364-369 (1983).</li><li>Nagarakanti, S., Ramya, S., Babu, P., Arun, K. V., Sudarsan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression+of+E-cadherin+and+cytokeratin+19+and+net+proliferative+rate+of+gingival+keratinocytes+in+oral+epithelium+in+periodontal+health+and+disease.">Differential expression of E-cadherin and cytokeratin 19 and net proliferative rate of gingival keratinocytes in oral epithelium in periodontal health and disease.</a> J Periodontol. 78 (11), 2197-2202 (2007).</li><li>Goodpaster, T., Legesse-Miller, A., Hameed, M. R., Aisner, S. C., Randolph-Habecker, J., Coller, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+immunohistochemical+method+for+identifying+fibroblasts+in+formalin-fixed,+paraffin-embedded+tissue.">An immunohistochemical method for identifying fibroblasts in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue.</a> J Histochem Cytochem. 56 (4), 347-358 (2008).</li><li>Langeland, K., Rodrigues, H., Dowden, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periodontal+disease,+bacteria,+and+pulpal+histopathology.">Periodontal disease, bacteria, and pulpal histopathology.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 37 (2), 257-270 (1974).</li><li>Holness, C. L., Simmons, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+cloning+of+CD68,+a+human+macrophage+marker+related+to+lysosomal+glycoproteins.">Molecular cloning of CD68, a human macrophage marker related to lysosomal glycoproteins.</a> Blood. 81 (6), 1607-1613 (1993).</li><li>Mor-Vaknin, N., Punturieri, A., Sitwala, K., Markovitz, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vimentin+is+secreted+by+activated+macrophages.">Vimentin is secreted by activated macrophages.</a> Nat Cell Biol. 5 (1), 59-63 (2003).</li><li>Xiao, L., Aoshima, H., Saitoh, Y., Miwa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+squalane-dissolved+on+adipogenesis-accompanied+oxidative+stress+and+macrophage+in+a+preadipocyte-monocyte+co-culture+system.">The effect of squalane-dissolved on adipogenesis-accompanied oxidative stress and macrophage in a preadipocyte-monocyte co-culture system.</a> Biomaterials. 31 (23), 5976-5985 (2010).</li><li>Xiao, L., Aoshima, H., Saitoh, Y., Miwa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+hydroxylated+fullerene+localizes+at+the+cytoskeleton+and+inhibits+oxidative+stress+in+adipocytes+and+a+subcutaneous+adipose-tissue+equivalent.">Highly hydroxylated fullerene localizes at the cytoskeleton and inhibits oxidative stress in adipocytes and a subcutaneous adipose-tissue equivalent.</a> Free Radic Biol Med. 51 (7), 1376-1389 (2011).</li></ol>

Detta protokoll baseras på metoder för att skapa mjukvävnad medel och subkutan fettvävnad medel beskrivs av tidigare rapporter8,21,22. Men detta är en enkel och lätt metod, kräver vissa steg särskild uppmärksamhet. Till exempel ska kollagen blandningen förvaras på is fram till användning för att undvika gel bildas i lösningen. När du lägger till kollagen blandningen in kultur skäret, kontrollera lösningen injic...

Parodontala sjukdomar är den vanligaste orsaken till tandlossning hos vuxna. Gingivit och parodontit är de vanligaste parodontala sjukdomarna. Båda närvarande biofilm-medierad akuta eller kroniska inflammatoriska förändringar i tandköttet. Gingivit kännetecknas av akut inflammation, medan parodontit presenterar vanligtvis som kronisk inflammation. På histologisk nivå utlösa bakteriella komponenter aktivering av immunceller, såsom makrofager, lymfocyter, plasmaceller och mastceller1,2. Dessa immunceller, särskilt makrofager, interagera med lokala celler (inklusive gingival epitelceller, fibroblaster, endotelceller och osteoblaster) vilket resulterar i inflammatoriska lesioner i parodontal vävnad3,4. Experimentella modeller av parodontala sjukdomar har etablerats i olika typer av djur, som råttor, hamstrar, kaniner, illrar, hörntänder och primater. Fysiopatologi av djurmodeller är dock olika från människor, vilket gör det svårt att analysera cellulära och molekylära mekanismer och utvärdera nya läkemedel av parodontala sjukdomar5. Samtidig odling av parodontala bakterier och enskiktslager mänskliga muntliga epitelceller har använts för att undersöka mekanismen av periodontala infektioner6. Dock saknar enskiktslager kulturer av muntliga celler den tredimensionella (3D) cellulära arkitekturen intakt vävnad; de därför inte kan härma in vitro- situationen.
Här, inrättas 3D inflammatoriska mänsklig vävnad motsvarigheter av gingiva (iGTE) för att representera parodontala sjukdomar i vitro. Denna 3D-modell av parodontala sjukdomar intar ett mellanläge mellan enskiktslager cellodlingar och djurmodeller. Tre typer av mänskliga celler, inklusive HaCaT keratinocyter, gingivala fibroblaster och THP-1 makrofager, är samtidig odlas på kollagen gel, och stimuleras av inflammatoriska initiativtagarna att bygga iGTE. IGTE simulerar noga i vivo villkoren för celldifferentiering, cell-cell interaktioner och makrofag aktivering i tandköttet. Denna modell har många möjliga tillämpningar för drug screening och testa nya farmakologiska metoder i parodontala sjukdomar, samt för att analysera cellulära och molekylära mekanismer i läkning av sår, inflammation och vävnadsregeneration.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Collagen type I-A</td>
			<td>Nitta Gelatin Inc</td>
			<td></td>
			<td>For making dermis of GTE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM-alpha</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11900073</td>
			<td>Cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Insert (for 24-well plate), pore size 3.0 &#956;m</td>
			<td>Corning, Inc.</td>
			<td>353096</td>
			<td>For tissue culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>35050061</td>
			<td>Cell culture reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>31600034</td>
			<td>Cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KnockOut Serum Replacement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10828028</td>
			<td>Cell culture reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue puncher</td>
			<td>Shibata system service co., LTD</td>
			<td>SP-703</td>
			<td>For punching holes in GTE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>31800022</td>
			<td>Cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A3294</td>
			<td>For immunostaining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342 (NucBlue Live Cell stain)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>R37605</td>
			<td>For labeling nuclei</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence mount medium</td>
			<td>Dako</td>
			<td></td>
			<td>For mounting samples after immunostaining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Cytokeratin 8+18 antibody [5D3]</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab17139</td>
			<td>For identifying epithelium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scaning electron microscope</td>
			<td>Hitachi, Ltd.</td>
			<td>HITACHI S-4000</td>
			<td>For observing samples&#39; surface topography and composition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal laser scanning microscopy</td>
			<td>LSM 700; Carl Zeiss Microscopy Co., Ltd.</td>
			<td>LSM 700</td>
			<td>For observing samples&#39; immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Cytokeratin 19 antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab52625</td>
			<td>For identifying epithelium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-vimentin antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab92547</td>
			<td>For identifying fibroblasts and activated macrophages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TE-7 antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL271</td>
			<td>For identifying fibroblasts in the dermis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD68 antibody</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SAB2700244</td>
			<td>For identifying macrophages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human CD14 Antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB3832-SP</td>
			<td>For identifying macrophages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594-conjugated secondary goat anti-rabbit antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11012</td>
			<td>For immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488-conjugated secondary goat anti-mouse antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11001</td>
			<td>For immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS FL Cell Imaging System</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>For observing the sample&#39;s immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>THP-1 cells</td>
			<td>Riken BRC cell bank</td>
			<td>RCB1189</td>
			<td>For making iGTE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8139</td>
			<td>For differentiatting THP-1 cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional inflammatory human tissue equivalents of gingiva

Parodontala sjukdomar (såsom gingivit och parodontit) är de främsta orsakerna till tandlossning hos vuxna. Inflammation i tandköttet är den grundläggande Fysiopatologi av parodontala sjukdomar. Aktuella experimentella modeller av parodontala sjukdomar har fastställts i olika typer av djur. Fysiopatologi av djurmodeller är dock olika från människor, vilket gör det svårt att analysera cellulära och molekylära mekanismer och utvärdera nya läkemedel för parodontala sjukdomar. Här presenterar vi ett detaljerat protokoll för att återuppbygga mänsklig inflammatorisk vävnad motsvarigheter av gingiva (iGTE) i vitro. Vi bygger först mänsklig vävnad motsvarigheter av gingiva (GTE) genom att använda två typer av mänskliga celler, inklusive mänskliga gingivala fibroblaster (HGF) och mänsklig hud epidermala keratinocyter (HaCaT), tredimensionell villkor. Vi skapar en såret modell med en vävnad hålslag för att stansa ett hål i GTE. Nästa, mänskliga THP-1 monocyter blandat med kollagen gel injiceras i hålet i GTE. Av adimistration av 10 ng/mL phorbol 12-isopropylmyristat 13-acetat (PMA) för 72 h, THP-1 celler differentieras efter makrofager att bilda inflammatoriska foci i GTE (iGTE) (IGTE kan också stumilated med 2 µg/mL lipopolysackarider (LPS) för 48 h att initiera inflammation ). IGTE är den första i vitro modellen av inflammatoriska gingiva med mänskliga celler med en tredimensionell arkitektur. IGTE speglar stora patologiska förändringar (immunceller activition, intracellulära interaktioner bland fibryoblasts, epitelceller, monocyter och makrofager) i parodontala sjukdomar. GTE, sårade GTE och iGTE kan användas som mångsidiga verktyg att studera sårläkning, vävnadsregenerering, inflammation, cell-cell interaktioner och skärmen potentiella läkemedel för parodontala sjukdomar.

HaCaT celler visas typiska keratinocyter morfologi under faskontrast mikroskopisk observation (figur 2A). Skanner elektron mikroskopisk (SEM) bilder visade att HaCaT cellytan omfattades av många Mikrovilli. Intercellulära anslutningar mellan HaCaT celler var medieras av membran processer (figur 2B). HaCaT celler uttrycks gingival epitel markör K8/1814, vilket indikerar att HaCaT celler är lämplig för...

Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Inflammatory Human Tissue Equivalents of Gingiva at JoVE.com

Three-dimensional Inflammatory Human Tissue Equivalents of Gingiva

Syftet med protokollet är att bygga en inflammatorisk mänskliga gingiva modell in vitro. Denna vävnad modell odlar tillsammans tre typer av mänskliga celler, HaCaT keratinocyter, gingivala fibroblaster och THP-1 makrofager, tredimensionella villkor. Denna modell kan användas till att undersöka parodontala sjukdomar, såsom gingivit och parodontit.

Tredimensionella inflammatoriska mänsklig vävnad motsvarigheter av Gingiva

Periodontal diseases (such as gingivitis and periodontitis) are the leading causes of tooth loss in adults. Inflammation in gingiva is the fundamental ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Differentiation of a Human Neural Stem Cell Line on Three Dimensional Cultures, Analysis of MicroRNA and Putative Target Genes

Differentiering av en mänsklig Neural Stem Cell Line den Tredimensionell kulturer, Analys av MicroRNA och Förmodade målgenerna

Neural stem cells (NSCs) are capable of self-renewal and differentiation into neurons, astrocytes and oligodendrocytes under specific local ...

Three-dimensional Quantification of Dendritic Spines from Pyramidal Neurons Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Tredimensionell Kvantifiering av Dendritutskotten från Pyramidal nervceller Härstammar från Human inducerade pluripotenta stamceller

Dendritic spines are small protrusions that correspond to the post-synaptic compartments of excitatory synapses in the central nervous system. They are ...

Isolation of Perivascular Multipotent Precursor Cell Populations from Human Cardiac Tissue

Isolering av perivaskulär multi Precursor cellpopulationer från Human hjärtvävnad

Multipotent mesenchymal stem/stromal cells (MSC) were conventionally isolated, through their plastic adherence, from primary tissue digests whilst their ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

Analys av retinsyra-inducerade Neural differentiering av Mouse embryonala stamceller i två och tre-dimensionella Embryoid organ

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

Horisontell helmontering: Ett nytt bearbetnings- och bildprotokoll för tjocka, tredimensionella vävnads tvärsnitt av huden

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

En ny användning av tredimensionella högfrekvent ultraljud för tidig graviditet karakterisering i musen

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks

Tredimensionell Rendering och analys av Immunolabeled, klargöras mänskliga placenta villösa vaskulär nätverk

Nutrient and gas exchange between mother and fetus occurs at the interface of the maternal intervillous blood and the vast villous capillary network that ...

Three-dimensional Organotypic Cultures of Vestibular and Auditory Sensory Organs

Tredimensionella Organotypic kulturer av vestibulära och auditiv sinnesorgan

The sensory organs of the inner ear are challenging to study in mammals due to their inaccessibility to experimental manipulation and optical observation. ...

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

Generation av byggnadsställning-fri, tredimensionella Insulin att uttrycka Pancreatoids från mus bukspottskörteln föräldraparets In Vitro

The pancreas is a complex organ composed of many different cell types that work together to regulate blood glucose homeostasis and digestion. These cell ...